摘要:在分析鸭瘟病毒gB蛋白抗原性的基础上,设计一对引物克隆gB蛋白中部抗原性较好的抗原域编码基因,定向克隆至表达载体pET32a中,构建了原核表达质粒pET-gB2。将pET-gB2转化至感受态E.coli BL21(DE3) 中,经IPTG诱导和SDS-PAGE 分析,可见约54.6kDa的目的蛋白以包涵体形式表达。Western blotting 分析发现,表达产物与抗鸭瘟的鼠阳性血清发生特异性反应。将包涵体溶解于8mol/L的尿素中,利用His×Bind试剂盒获得纯化的蛋白,将纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠,间接ELISA法测得抗体的效价,MTT法检测免疫小鼠的T淋巴细胞增殖反应能力。结果说明该融合蛋白能够诱导机体产生较强的体液免疫和细胞免疫。