猪乙型脑炎病毒胶体金检测方法的建立

摘要

乙型脑炎（JE）是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的一种重要人畜共患传染病。建立快速、准确的抗原检测方法对于该病的快速诊断具有重要意义。本研究在大肠杆菌中表达了JEVE蛋白，并利用纯化的蛋白免疫BalB/c小鼠后筛选获得了两种抗E蛋白的单克隆抗体（2A2和4D1）。在此基础上，以2A2吸附于金颗粒制备胶体金颗粒，以4D1制备检测线，以羊抗小鼠IgG做质控线，建立了检测乙型脑炎病毒的胶体金快速检测方法。特异性试验证实该方法能特异性地检测乙型脑炎病毒抗原，敏感性试验显示：原始病毒1：40稀释时，该方法仍能够检出。用该方法对180份临床送检猪的样品进行检测，并用RT-PCR方法作对照，结果表明，所建立地胶体金方法能从临床病料组织中有效检测出JEV抗原，其与RT-PCR的总符合率为88.9%，说明本研究建立的胶体金的方法可以用于猪的临床JEV抗原快速检测。