高致病性猪蓝耳病病毒YA株的分离鉴定及动物回归试验

摘要

广东省某猪场爆发了以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病。采集该猪场濒死猪的肺部样品，经RT-PCR检测含有猪蓝耳病病毒（PRRSV）。病料接种Marc-145细胞后，产生典型的细胞病变，连续传至第6代，细胞病变稳定。抽提病毒培养液中的RNA作为模板，经RT-PCR检测出PRRSV，命名该病毒为PRRSV YA株。设计一对引物对YA株的Nsp2基因的部分序列进行扩增、克隆和核苷酸测序，结果显示该病毒Nsp2基因的1450 bp～1452 bp和1603 bp～1689 bp发生缺失，即推导的第484位和第535～563位氨基酸发生缺失，与报道的高致病性PRRSV的特征序列基本一致。实时荧光RT-PCR试验证明该毒株是Nsp2基因部分缺失变异株。用PRRSV YA株纯化病毒接种4头一月龄健康小猪，猪群第二天发病，发病率为100%，10 d后开始死亡，死亡率为75％（3/4）。实验表明分离到的PRRSV YA株是一株基因缺失型毒株，它可引起猪群高发病率和高死亡率。