单增李斯特菌

摘要： 《临床与病理杂志》编辑部决定对【临床与病理杂志,2021,41(6):1365-1368.】一文作撤稿处理。题目:妊娠合并单增李斯特菌感染56例作者:杨小青单位:北京市通州区妇幼保健院内科DOI:10.3978/j.issn.2095-6959.2021.06.020原因:论文内容有欠妥当之处,作者申请撤稿特此声明!

摘要： 本研究旨在构建波动温度条件下三文鱼中单增李斯特菌的生长预测模型。将3株从三文鱼中分离的单增李斯特菌混合接种至无菌三文鱼样品,开展连续波动温度(1~35°C)条件下的生长试验。采用动态一步法对其中3组生长数据进行分析,构建包含初级模型(Huang模型、Baranyi和Two-compartment模型)与二级模型(HSR模型)的联合模型。结果表明:Huang-HSR模型、Baranyi-HSR模型和Two-compartment-HSR模型具有同等的拟合效果,由其预测的单增李斯特菌最低生长温度分别为0.51,1.21,1.20°C,最大生长浓度分别为9.41,9.35,9.36 lg(CFU/g)。基于模型对迟滞期的定义以及模型表达式的简洁程度,建议选择Huang-HSR模型来描述三文鱼中单增李斯特菌的生长。通过另设的波动温度生长试验及文献报道的恒定温度生长数据对Huang-HSR模型进行验证,波动温度和恒定温度生长数据的均方根误差(RMSE)分别在0.29~0.59 lg(CFU/g)和0.28~0.85 lg(CFU/g)范围,表明该模型适用于描述三文鱼中单增李斯特菌的生长行为。将构建的模型用于正弦波动温度条件下单增李斯特菌的生长模拟,以展示其潜在应用价值。本研究构建的数学模型可用于三文鱼中单增李斯特菌的动态生长预测。

摘要： 选取10种常见的硫醚类香料,通过测量其抑菌圈直径来研究各硫醚类香料对金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的抑制能力,并分析硫醚香料的结构与抑菌能力的关系。筛选出抑菌能力最强的硫醚类香料,利用反转录荧光定量聚合酶链式反应来考察其对金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因表达水平的影响。结果显示:二烯丙基二硫醚(DADS)、甲基糠基二硫醚(MFDS)和二烯丙基硫醚(DAS)对两种革兰氏阳性菌的抑菌效果较好,且抑菌能力为DADS>MFDS>DAS。DADS相较于其它9种硫醚类香料抑菌效果最好,对金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的最低抑制浓度(MIC)分别为312.5 mmol/L和1.25 mol/L。当DADS的浓度为亚抑制浓度时(1/16MIC、1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC),均能显著降低金黄色葡萄球菌nuc基因的表达水平(P<0.01)。以上结果说明:烯丙基和二硫键的存在能够增强硫醚类香料的抑菌能力,并且对抑制金黄色葡萄球菌毒力发挥重要作用。

摘要： 【目的】研究inlK基因对Lm90SB2菌株生物被膜形成能力的影响及其生物被膜与消毒剂抗力的关系,以期为有效防控单增李斯特菌污染提供参考。【方法】以单增李斯特菌Lm90SB2为试验菌,根据GenBank中公布的单增李斯特菌F2365 inlK基因序列(登录号:AE017262),应用Primer Premier 5.0软件设计用于扩增inlK基因上、下游同源臂片段及验证缺失株的特异性引物,以同源重组技术构建inlK基因缺失株,并通过旁外侧引物运用PCR方法进行缺失株检测。将标准菌株Lm90SB2和构建的缺失株分别培养8、12、24、48 h后进行结晶紫染色,在倒置显微镜下观察形态变化,并用酶标仪测定生物被膜形成能力;用含3 g/L卵磷脂+3 g/L吐温80的PBS溶液和含10 g/L卵磷脂+20 g/L吐温80的PBS溶液作为新洁尔灭消毒剂的中和剂,含5 g/L硫代硫酸钠+5 g/L卵磷脂+20 g/L吐温80的PBS溶液和含10 g/L硫代硫酸钠+30 g/L卵磷脂+20 g/L吐温80的PBS溶液84消毒剂的中和剂,设消毒剂+菌悬液、消毒剂+菌悬液+中和剂、中和剂+菌悬液、消毒剂+中和剂+菌悬液、稀释液+菌悬液(阳性对照)、稀释液+中和剂+培养基(阴性对照)6个试验组,进行中和剂的筛选,并检测不同浓度新洁尔灭(1∶15、1∶30)和84消毒剂(1∶50、1∶100)分别作用1、5、10、20 min时对2株菌的灭菌率。【结果】PCR结果表明,成功构建了缺失株Lm90SB2ΔinlK,且inlK基因的缺失导致Lm90SB2菌株生物被膜形成能力显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01);含3 g/L卵磷脂+3 g/L吐温80的PBS溶液构成的中和剂可有效中和新洁尔灭消毒剂,5 g/L硫代硫酸钠+5 g/L卵磷脂+20 g/L吐温80的PBS溶液可有效中和84消毒剂。不同比例的新洁尔灭(1∶15、1∶30)和84消毒剂(1∶50、1∶100)消毒剂在1、5、10 min对Lm90SB2ΔinlK株的灭菌率均显著或极显著高于Lm90SB2株(P<0.05;P<0.01),且在20 min时灭菌率均为100%。【结论】inlK基因的缺失导致Lm90SB2菌株生物被膜形成能力下降,且对消毒剂抗力减弱。

摘要： 单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种重要的食源性人畜共患病原菌,可抵抗外界多种不利因素的影响,如酸、碱、渗透压和氧化应激。双元调控系统(two-component system,TCS)是细菌适应环境的重要调控系统,为了探明双元调控系统HssS/HssR对单增李斯特菌抗应激能力及毒力的影响,本研究以单增李斯特菌10403S为亲本株,利用同源重组技术构建了hssS/hssR基因缺失株,并对其部分生物学特性进行了研究。生长曲线结果显示,在氧化应激(20 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2))条件下,缺失株ΔhssS/hssR的生长能力减弱;应激存活试验结果显示,在20 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2)条件下应激处理1 h后,缺失株ΔhssS/hssR的生长率显著低于亲本株(P<0.01);小鼠巨噬细胞内吞及增殖试验结果显示,hssS/hssR基因缺失显著增强单增李斯特菌抗巨噬细胞吞噬的能力(P<0.01)并显著增强其在巨噬细胞内的增殖能力(P<0.05);鸡胚毒力试验结果显示,亲本株的LD50为102.2,缺失株的LD50为101.4,且缺失株对鸡胚肝的定殖能力显著高于亲本株(P<0.01),表明hssS/hssR基因缺失能显著增强单增李斯特菌的毒力。综上表明,双元调控系统HssS/HssR介导单增李斯特菌抗氧化应激作用与毒力。

摘要： 为探讨单增李斯特菌(Lisetria monocytogenes,LM)诱导小鼠滋养层细胞炎性体激活在其致小鼠流产中的作用,在体外用LM处理小鼠滋养层细胞,观察LM在细胞内的分布,检测培养基中白细胞介素(interleukin,IL)-1β水平和细胞裂解液中天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase 1)成熟片段水平以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量.结果显示:LM分布在细胞核周围,LM感染组细胞培养基中IL-1β水平、细胞裂解液中caspase 1成熟片段水平以及LDH释放量与对照组相比明显增加,溶血素O(listeriolysin O,LLO)缺陷型LM(Δhly LM)感染组IL-1β水平和caspase 1成熟片段水平明显低于野生型LM感染组.因此推测,LM可通过LLO诱导小鼠滋养层细胞炎性体的激活进而诱导IL-1β的分泌和滋养层细胞焦亡导致流产的发生,这可为临床防治LM诱导的流产提供科学依据.

摘要： 单核细胞增生李斯特菌(Lm)是主要的食源性致病菌之一,也是一种重要的人畜共患病原菌,感染人和动物后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多症等。为建立快速检测Lm的方法,本研究以Lm毒力因子actA作为特异性检测的靶基因,通过条件优化初步建立了快速检测食源性Lm的环介导等温扩增(LAMP)方法。并采用该方法进行了特异性、敏感性及临床样品检测试验。结果显示,利用建立的LAMP方法检测Lm、肠出血性大肠杆菌O157:H7、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森菌、产气荚膜梭菌、空肠弯曲菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、猪丹毒丝菌或支气管败血波氏杆菌基因组DNA,除Lm为阳性外,其他病原菌均为阴性,表明该方法的特异性较强;将Lm菌液10倍倍比稀释为4.7×10^(9)cfu/mL~4.7×10^(0)cfu/mL,再采用该LAMP方法和常规PCR方法进行检测,结果显示,LAMP对Lm的检测下限为4.7×10^(1)cfu/mL,而常规PCR对Lm的检测下限为4.7×10^(3)cfu/mL,即LAMP比普通PCR的敏感性高100倍,表明本研究建立的LAMP方法敏感性较高;采用建立的LAMP方法对118份猪肉临床样品进行检测,结果显示有3份样品为阳性,与常规PCR和国标的检测结果均一致。本研究基于Lm actA基因建立了Lm LAMP检测方法,且该方法具有特异性强、敏感性高、结果可视等优点,适用于实验室和基层食品安全监管部门的现场快速检测。

摘要： 为了探明双元调控系统Lmo1060/Lmo1061是否影响单增李斯特菌(LM)的抗应激作用及致病性,本研究以LM 10403S为亲本株,通过同源重组技术构建了Δlmo1060/lmo1061缺失株。应激存活试验结果表明,lmo1060/lmo1061缺失显著增强LM在酸应激(pH=2.5)条件下的存活率,但不影响该菌在10%NaCl和10 mmol/L H;O;中的存活能力。绿色荧光蛋白(GFP)报告基因筛选显示,lmo1060/lmo1061缺失不影响谷氨酸脱羧酶系统gadD1/gadT1和gadD3报告基因的表达,但显著上调gadT2/gadD2报告基因的表达。Western blot结果证实,缺失株Δlmo1060/lmo1061中GadD2蛋白水平显著高于亲本株,回补株CΔlmo1060/lmo1061中GadD2蛋白水平与亲本株则无显著性差异。小鼠毒力试验显示,缺失株Δlmo1060/lmo1061与亲本株感染24 h后在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量并无显著差异。研究表明,双元调控系统Lmo1060/Lmo1061可能感应环境pH值变化,并通过调控gadT2/gadD2表达影响LM的抗酸应激作用。

摘要： 【目的】试验旨在阐明双元调控系统LisRK在单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)抵抗不利环境应激以及感染过程中的作用。【方法】以参考菌株10403S为亲本株,利用穿梭质粒pKSV7通过同源重组方法构建lisRK基因缺失株,并基于表达质粒pIMK2构建了lisRK回补株;比较了亲本株10403S、缺失株ΔlisRK与回补株CΔlisRK在酸(pH 4.5)、渗透压(5%NaCl)和氧化(10 mmol/L H_(2)O_(2))应激条件下的生长与存活能力及其对胃腺癌细胞MGC803和肠上皮细胞Caco-2的侵袭率,进一步比较了亲本株10403S、缺失株ΔlisRK与回补株CΔlisRK经腹腔注射感染的小鼠肝脏和脾脏中的细菌载量。【结果】应激试验结果显示,lisRK基因缺失显著降低单增李斯特菌在酸应激(pH 4.5)条件下的生长能力,但不影响该菌在5%NaCl和10 mmol/L H_(2)O_(2)中的生长能力;缺失株ΔlisRK在强酸应激条件下(pH 2.5)的存活率(0.57%)极显著低于亲本株(2.07%)与回补株(1.97%)(P0.05)。【结论】双元调控系统LisRK缺失减弱单增李斯特菌的抗酸应激能力和对宿主细胞的侵袭能力。

摘要： 采用非靶标代谢组学方法,研究单增李斯特菌复方新诺明耐药株和敏感株的代谢组学差异。以复方新诺明(SXT)耐药株和敏感株为研究对象,使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF-MS)获得菌株胞内代谢轮廓信息,建立OPLS-DA判别模型,并对差异化合物的数量、种类及其在代谢通路中的调控表达进行分析。结果表明:耐药株和敏感株的代谢特征存在显著差异,共鉴定出21种对分类有显著贡献的化合物,主要以氨基酸和核苷酸为主。差异代谢物主要参与氨基酸代谢、碳水化合物代谢和核苷酸代谢等通路。腺苷、色氨酸和亮氨酸在2条显著性差异代谢途径中的表达变化表明:菌株受复方新诺明作用后,细胞内的肽、蛋白质合成受阻,细胞氧化应激提高。甘油磷脂代谢表明:细胞调控转运、蛋白功能和信号转导受复方新诺明严重影响。本研究阐明了菌株受复方新诺明作用的耐药性形成原因,为药物作用靶点的寻找和干预菌株防控提供帮助。

摘要： 本研究通过对3种生猪肉流通模式进行简化,根据生猪肉中单增李斯特菌初始污染水平抽检数据及调研环境参数,评估对比了3种流通方式下单增李斯特菌在生猪肉中的最终暴露量.结果显示,基于全程非冷链的热鲜猪肉最终阳性检出率约为42.12％,超过风险阈值概率约为21.05％;基于部分冷链的冷鲜猪肉最终阳性检出率约为12.07％,超过风险阈值概率约为1.61％;基于全程冷链的冷鲜猪肉最终阳性检出率约为6.50％,超过风险阈值概率约为0％.相关性分析表明,初始污染水平与最终暴露量Person相关系数均为0.70以上,影响最大.因此,冷鲜猪肉较热鲜猪肉更有利于避免食源性疾病的发生,基于全程冷链的冷鲜猪肉应被积极推广.同时在生猪肉供应链中,更应注重源头控制,对各流通环节的环境条件严格设置并控制.

摘要： 本文研究了南京地区超市和农贸市场628份即食肉制品中单增李斯特菌的污染情况.所有的分离株都进一步进行了血清型、基因型和耐药性的检测.在628份样本中,单增李斯特菌的污染率为5.3％(33/628),,其中酱卤制品比例最高,为7.2％(17/236),其次是熏烤制品5.6％(5/90)和腌腊制品4.2％(11/260).33个分离株属于3个血清组,其中15株(45.5％)属于1/2a,3a型,16株(48.5％)属于1/2b,3b型,2株属于1/2c,3c型.所有的分离株使用多位点序列分型(MLST)分为11个ST型.耐药性结果表明单增李斯特菌分离株对多数抗生素敏感,对复方新诺明、氯霉素、环丙沙星和四环素的耐药性分别为100％,33.3％,30.3％和12.1％.本研究发现单增李斯特菌在酱卤制品和农贸市场中有较高的污染率,高致病性的1/2a和1/2b血清型的出现对公众健康有一定的危险.另外多重耐药性也是对消费者健康的一个潜在危害.

摘要： 对进口食品和国内食品中的单增李斯特菌进行血清学分型和分子分型研究,探讨不同来源菌株之间的遗传相关性及不同分型方法之间的联系.对分离的单增李斯特菌进行血清学分型和脉冲场凝胶电泳分型.69株单增李斯特菌分为4种血清型,主要血清型为1/2a(3a)型,PFGE分型分为55种带型,主要型别为GX6A12.CN0018.食品中的单增李斯特菌分子型别呈现多态性,进口食品分离株和国内食品分离株之间无相关性.

摘要： 本研究建立了一种快速检测单增李斯特菌的聚合酶链式反应-核酸层析(PCR-NALF)方法，该方法通过一对标记生物素和地高辛的引物，对提取自样品中的DNA进行扩增，然后用包被亲和素和抗地高辛抗体的层析试纸条对扩增产物进行检测，并通过肉眼可见的红色条带进行结果判读，从而替代电泳实现便捷检测。在特异性试验中，其他李斯特菌和常见致病菌均呈现阴性反应，与电泳结果一致。与传统微生物检测法(GB/T 4789.30-2008)相比无显著性差异(x2=0 P＞0.05)。因此该方法在食品、卫生行业具有很好的应用、开发前景。

摘要： 本研究建立了一种快速检测单增李斯特菌的聚合酶链式反应-核酸层析(PCR-NALF)方法，该方法通过一对标记生物素和地高辛的引物，对提取自样品中的DNA进行扩增，然后用包被亲和素和抗地高辛抗体的层析试纸条对扩增产物进行检测，并通过肉眼可见的红色条带进行结果判读，从而替代电泳实现便捷检测。在特异性试验中，其他李斯特菌和常见致病菌均呈现阴性反应，与电泳结果一致。与传统微生物检测法(GB/T 4789.30-2008)相比无显著性差异(x2=0 P＞0.05)。因此该方法在食品卫生行业具有很好的应用、开发前景。

摘要： 目的：单增李斯特菌是重要的食源性人兽共患病原菌，抵抗酸性环境是其建立感染的前提。rn 方法：本文综合运用病原生物学、生物信息学、分子生物学、生物化学及细胞生物学等方法，系统研究lm00036-lmo0043基因岛对致病力的影响及其分子机制。rn 结果：lm00036-lmo0043基因岛含有arcABCD与lmo0041，在酸性条件的转录水平显著高于中性条件。arcA、arcB与arcD缺失株住亚致死酸性环境中的生长力与在致死酸性胃液中的存活力均显著低于亲本株。lm00043(arcA)编码精氨酸脱亚胺酶(ADI)系统，催化精氨酸发生脱亚胺反应，生成瓜氨酸与氨。lmo0036(arcB)编码鸟氨酸氨甲酰转移酶(OTC)，催化可逆的鸟氨酸转氨甲酰反应，但在酸性环境(如胃液)中主要催化异化反应，即推动ADI通路的进行。异化OTC催化瓜氨酸的脱氨甲酰反应，生成鸟氨酸与氨甲酰磷酸盐。氨甲酰磷酸盐在氨甲酰激酶CK(lm00039，arcC)的作用下，生成二氧化碳与氨。而鸟氨酸通过跨膜转运因了AP(lm0003 7，ancD)，与胞外的精氨酸进行等量交换，启动新一轮ADI代谢循环。每个循环中，1 mol精氨酸生成2 mol氨。氨与细胞质中的H+结合为NH4+，升高细胞质的pH，以减轻酸应激对细胞的伤害，从而增强细菌在酸性环境(如胃液)中的存活力，进而保证细菌的致病力。lmo0041编码可能的转录调控冈子，在胃液中负调控ADI系统;并可能受更高一级的调控因子所调控，如应激调控因子SigB与毒力调控因子PrfA，共同介导细菌的抗酸能力及致病力。rn 结论：ADI系统是单增李斯特菌重要的抗酸应激系统。

摘要： 单核细胞增生性李斯特菌是重要的食源性人兽共患病原,具有较强的环境抗性,易污染各类食品和青贮饲料,引发人和动物的李斯特菌病.本文结合本实验室的工作和国内外研究现状,概要叙述单增李斯特菌在食品中的污染、分子多样性与致病力以及抗酸应激机制等方面的研究进展.

摘要： 目的：了解广州市市售熟肉制品LM污染状况,观察LM“前增菌法”的运用效果.方法：随机分层采集广州市八城区24家单位(大中型超市、烧腊店、菜市场各8家)自制散装熟肉制品112份,分别采用LM国标法和“前增菌法”进行检验,同时运用了科玛嘉李斯特菌显色培养基、API Listeria生化试剂盒进行分离鉴定.结果：熟肉制品LM污染率为8.04％(9/112),其中,菜市场熟肉制品LM污染率为18.75％,显著高于超市(5％)和烧腊店(2.5％)的污染率(X2=6.96,P＜0.01).“前增菌法”LM检出率为8.04％,显著高于国标法LM检出率(1.79％)(X2=4.68,P＜0.05),而且“前增菌法”较国标法缩短了检验时间;API Listeria、李斯特菌显色培养基平板鉴定结果与国标法吻合.结论：广州市市售熟肉制品有不同程度的LM污染.LM“前增菌法”检出率较高,而且材料廉价、操作简单,比较适合基层单位采用;与LM国标分离鉴定方法相比李斯特菌显色培养基平板、API生化试验准确性、时效性均较好.

摘要： 近年来采用免疫磁珠富集细菌的研究非常热门，本研究以高分子细丝材料做成刷状富集固相载体，原理与效果与免疫磁珠富集细菌相同，并具有可以同时富集不同菌检项目，容易标记、富集后与样液更容易分离、洗涤、处理的优势，建立了一种新型、快速的检测沙门氏菌、大肠杆菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌的方法;在固相载体材料的选择上比较了聚乙烯、尼龙和锦纶作为富集刷的性能，优化确定了富集刷的材料及制作工艺。抗四种病原菌的IgG分别与富集刷表面偶联，通过偶联抗体量及偶联时间的优化，最终建立起可同时检测四种病原菌的免疫富集刷快速检测方法。该方法与国家标准检测方法、3MPetrifilmTM Plates微生物快速检测法进行分离培养鉴定实验比较，结果显示免疫富集刷法与国家标准方法和3M PetrifilmTMPlates微生物快速检测法的检测结果无显著差异，但可节省一半时间及人力和试剂的成本消耗。对检测添加菌的最低检出线敏感性实验结果表明免疫富集刷法比国家标准检测方法低，但优于3M PetrifilmTM Plates微生物快速检测法。因此，所建立的病原菌快速检测方法具有快速、敏感、易操作等特点，相关检测技术方法已经获得专利支持。

摘要： 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes，LM)是重要的食源性人兽共患病原菌，LM的致病性与毒力因子密切相关，研究其毒力因子对于充分了解李斯特菌病的致病机制及有效地防治该病有着重要意义。文章对LM的毒力因子(如李斯特溶血素、肌动蛋白聚合蛋白、C型磷脂酶、内化素、细胞壁水解酶、酰胺酶以及毒力调节因子如转录活化因子和应答调控因子等)和致病机理进行了简要综述。

摘要： 本发明公开了一种快速区分单增李斯特菌与斯氏李斯特菌的检测方法，利用顶空气相色谱‑质谱联用技术检测单增李斯特菌与斯氏李斯特菌液态发酵代谢的挥发性产物，根据两种细菌产生的代谢挥发性产物种类不同，区分单增李斯特菌与斯氏李斯特菌。本发明采用的方法比现有的传统生化实验鉴定时间缩短1‑2天，可以快速区分平板上的单增李斯特菌与斯氏李斯特菌，实现当天筛选。该方法自动化程度高，有效降低一线检测人员接触食源致病菌的几率，减少食源致病菌对人和环境污染的风险。

摘要： 本发明涉及致病菌的检测技术领域，公开了一种沙门氏菌、单增李斯特菌和副溶血弧菌复合增菌的选择性培养基，包括：胰蛋白胨，蛋白胨，氯化钠，磷酸二氢钠，葡萄糖，甘露醇，七叶苷，柠檬酸钠，脱脂奶粉，灭菌蒸馏水，亚碲酸钾溶液，吖啶黄溶液，萘啶酮酸溶液。该培养基的制备方法包括：亚碲酸钾溶液的配制；吖啶黄溶液的配制；萘啶酮酸溶液的配制；半成品培养基的配制；样品的添加；培养基中亚碲酸钾溶液、吖啶黄溶液、萘啶酮酸溶液的添加。本发明的培养基能够同时对目标菌进行复合增菌并抑制非目标菌，且对处于亚致死状态的目标菌抑制作用小，使其也能够有效增菌；本发明的培养基制备方法操作简单，效率高。

摘要： 本发明公开了用于沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌复合增菌的培养基及制备方法，该培养基包括胰蛋白胨15-19份、蛋白胨2-4份、磷酸二氢钠2-3份、葡萄糖2-3份、七叶苷0.5-1.5份、蒸馏水1000份、丙酮酸钠1-2.5份、甘露醇3-10.0份、氯化钠1.0-25.0份、氯化锂1-2.5份、亚碲酸钾0.0001-0.0002份、萘啶酮酸0.005-0.015份，pH值为7.1-7.5。本培养基在使得三种目标致病菌同时增菌的同时，抑制其它的致病微生物生长，可直接做目标菌的分离培养及生物鉴定实验，也可以直接用于多重PCR等基于一个检测平台的多个致病菌的检测技术中，作出诊断报告。

摘要： 本发明公开了同时检测单增李斯特菌和伊氏利斯特菌的双重PCR方法。属于食源性致病菌检测技术领域。本发明针对新发掘的单增李斯特菌特异性基因LMOf2365_0970和伊氏利斯特菌特异性基因AX25_00730设计引物和探针，该检测方法能够有效地检测出食品中的单增李斯特菌和伊氏利斯特菌，对两种目标菌的检测限为N×102CFU/mL，荧光定量PCR检测时间小于40min，具有检测灵敏度高、特异性好、抗干扰能力强的特点，可实现对食品中单增李斯特菌和伊氏利斯特菌快速定性和准确定量检测，达到快速筛查污染食品样本的目的。

摘要： 本发明公开了一种快速区分单增李斯特菌与斯氏李斯特菌的检测方法，利用顶空气相色谱‑质谱联用技术检测单增李斯特菌与斯氏李斯特菌液态发酵代谢的挥发性产物，根据两种细菌产生的代谢挥发性产物种类不同，区分单增李斯特菌与斯氏李斯特菌。本发明采用的方法比现有的传统生化实验鉴定时间缩短1‑2天，可以快速区分平板上的单增李斯特菌与斯氏李斯特菌，实现当天筛选。该方法自动化程度高，有效降低一线检测人员接触食源致病菌的几率，减少食源致病菌对人和环境污染的风险。

摘要： 基于单克隆抗体的检测食品中李斯特菌属或单增李斯特菌的胶体金试纸条及其应用，属于免疫分析技术领域。在PVC底板上依次设置样品垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；当基于单克隆抗体的检测食品中李斯特菌属时，所述金标抗体为抗体2H8的胶体金溶液；当基于单克隆抗体的检测食品中单增李斯特菌时，金标抗体为抗体A号的胶体金溶液。本发明开发了基于单克隆抗体的检测食品中李斯特菌属或单增李斯特菌的胶体金试纸条。适用于食品中李斯特菌属或单增李斯特菌的高特异性、高准确性、较高灵敏度、简便快速分析。

摘要： 本发明公开了一种用于金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及单增李斯特菌复合增菌的培养基及制备方法，属于致病菌的前增菌培养基技术领域，以质量份数计，其配方组成为：胰蛋白胨15.0‑19.0份、蛋白胨2.7‑3.3份、酵母浸膏5.4‑6.6份、磷酸氢二钾2.25‑2.75份、磷酸氢二钠8.6‑10.6份、磷酸二氢钾1.22‑1.48份、蛋白胨13.0‑17.0份、牛肉粉18.0‑21.0份、大豆蛋白胨8.0‑12.0份、放线菌酮0.2‑0.4份、甘露醇2.0‑4.0份、丙酮酸钠4.0‑5.0份、磷霉素钠0.00078‑0.00156份、氯化锂0.75‑1.1份、蒸馏水1000份，pH值为6.8‑7.4。本发明中的复合增菌培养基的单增菌效果优于其各自的选择性增菌液，且能够较好地抑制非目标菌的生长。在有非目标菌存在的情况下，该培养基也能实现三种目标菌的等速、快速增殖。

摘要： 本发明公开了大肠杆菌、沙门氏菌和单增李斯特菌复合增菌培养基及制备方法，该培养基的配方包括：胰胨16.0‑18.0份、蛋白胨2.0‑4.0份、酵母浸膏5.0‑7.0份、氯化钠10.0‑20.0份、磷酸氢二钾2.4‑2.6份、磷酸氢二钠9.5‑9.7份、磷酸二氢钾1.34‑1.36份、吖啶黄0.005‑0.020份，氯化镁2.0‑8.0份，葡萄糖1.0‑4.0份，丙酮酸钠1.0‑4.0份、蒸馏水1000份，pH值为6.8‑7.4。本发明中的复合增菌培养基能使三种目标致病菌等速、快速增殖。增菌16‑24小时，即可利用多重PCR、多通道SPR生物传感器、多通道BLI生物传感器等高通量检测设备实施三种目标致病菌的快速检测，做出诊断报告。

摘要： 本发明涉及致病菌的检测技术领域，公开了一种沙门氏菌、单增李斯特菌和副溶血弧菌复合增菌的选择性培养基，包括：胰蛋白胨，蛋白胨，氯化钠，磷酸二氢钠，葡萄糖，甘露醇，七叶苷，柠檬酸钠，脱脂奶粉，灭菌蒸馏水，亚碲酸钾溶液，吖啶黄溶液，萘啶酮酸溶液。该培养基的制备方法包括：亚碲酸钾溶液的配制；吖啶黄溶液的配制；萘啶酮酸溶液的配制；半成品培养基的配制；样品的添加；培养基中亚碲酸钾溶液、吖啶黄溶液、萘啶酮酸溶液的添加。本发明的培养基能够同时对目标菌进行复合增菌并抑制非目标菌，且对处于亚致死状态的目标菌抑制作用小，使其也能够有效增菌；本发明的培养基制备方法操作简单，效率高。

摘要： 本发明公开了用于沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌复合增菌的培养基及制备方法，该培养基包括胰蛋白胨15－19份、蛋白胨2－4份、磷酸二氢钠2－3份、葡萄糖2－3份、七叶苷0.5－1.5份、蒸馏水1000份、丙酮酸钠1－2.5份、甘露醇3－10.0份、氯化钠1.0－25.0份、氯化锂1－2.5份、亚碲酸钾0.0001－0.0002份、萘啶酮酸0.005－0.015份，pH值为7.1－7.5。本培养基在使得三种目标致病菌同时增菌的同时，抑制其它的致病微生物生长，可直接做目标菌的分离培养及生物鉴定实验，也可以直接用于多重PCR等基于一个检测平台的多个致病菌的检测技术中，作出诊断报告。