摘要:
本文旨在检测解冻后在泛凋亡抑制剂(Z-VAD-FMK)中孵育1h对冷冻猪卵母细胞体外发育的影响.本实验利用OPS冷冻法冷冻MΠ期猪卵母细胞,冷冻2-3个月进行解冻,处理组解冻后在Z-VAD-FMK中孵育1h.实验首先用活性caspasse3,8,9和总caspase荧光染液检测Z-VAD-FMK对caspase3,8,9的抑制作用,其次用FDA检测冷冻猪卵母细胞的冷冻存活率,最后测定孤雌激活后胚胎的卵裂率和囊赔率以检测卵母细胞发育能力.实验结果显示,MΠ期猪卵母细胞冷冻后caspase3,8,9和总caspase水平显著增加,在Z-VAD-FMK中孵育1h后,除caspase8外(P>0.05),caspase3,9和总caspase水平均显著降低(P<0.05),但仍显现高于其在新鲜卵母细胞中的水平;经OPS法冷冻后,猪卵母细胞冷冻存活率、孤雌激活后卵裂率和囊胚率显著降低(分别为98.97%vs.61.97%,89.41%vs.13.18%,和41.10%vs.3.10%;P<0.05),但在Z-VAD-FMK中孵育1h,猪卵母细胞冷冻存活率、孤雌激活后卵裂率和囊胚率显著升高(分别为61.45%vs.73.21%,13.18%vs.39.83%,和3.10%vs.10.79%;P<0.05).总之,在解冻后Z-VAD-FMK中孵育1h提高猪冷冻卵母细胞外发育能力.