胚胎培养

摘要： [裁判摘要]夫妻双方与医疗机构订立“体外受精-胚胎移植”医疗服务合同并已经完成取卵、胚胎培养等合同内容,在胚胎正式移植前丈夫死亡且生前并未向医疗机构表示拒绝履行合同,妻子要求医疗机构继续履行胚胎移植义务,既是当事人真实意思的反映,亦具备可履行的内容,且并不违反法律法规及公序良俗,医疗机构应当继续履行医疗服务合同。

摘要： 目的探讨冻融胚胎经过夜培养后,胚胎卵裂球的生长及融合状况对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2019年1月至2020年4月于郑州大学第一附属医院生殖中心行冻融胚胎移植(FET)助孕治疗的2064例患者(共2064个周期)的临床资料。根据移植胚胎数目不同分为移植1枚胚胎组(单胚组)和移植两枚胚胎组(双胚组);根据过夜培养后胚胎是否分裂生长将单胚组分为单胚生长组(601个周期)和单胚无生长组(185个周期);将双胚组分为双胚生长组(1175个周期)和双胚无生长组(103个周期)。再根据胚胎是否有融合将单胚生长组和双胚生长组分别分为两个亚组:单胚生长融合组(395个周期)和单胚生长无融合组(206个周期),双胚生长融合组(889个周期)和双胚生长无融合组(286个周期)。比较各组患者一般情况和妊娠结局的差异,并应用Logistic回归分析探讨影响临床妊娠率和流产率的因素。结果单胚组中,单胚生长组的临床妊娠率(35.77%vs.16.76%)、活产率(26.96%vs.10.81%)显著高于单胚无生长组(P<0.05);单胚生长融合组的临床妊娠率(42.78%vs.22.33%)、活产率(32.41%vs.16.50%)显著高于单胚生长无融合组(P<0.05)。双胚组中,双胚生长组的临床妊娠率(61.45%vs.26.21%)、活产率(50.21%vs.19.42%)显著高于双胚无生长组(P<0.05);双胚生长融合组的临床妊娠率(64.34%vs.52.45%)、多胎率(37.59%vs.22.67%)、活产率(52.98%vs.41.61%)均显著高于双胚生长无融合组(P<0.05)。双胚生长融合组的临床妊娠率、多胎率及活产率均显著高于单胚生长融合组,异位妊娠率显著低于单胚生长融合组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,胚胎分裂生长[OR=2.599,95%CI(1.829,3.693)]、胚胎融合[OR=1.790,95%CI(1.436,2.231)]及移植胚胎数[OR=2.176,95%CI(1.774,2.671)]与临床妊娠率呈正相关(P<0.05);年龄与临床妊娠率[OR=0.907,95%CI(0.890,0.925)]呈负相关(P<0.05),与流产率[OR=1.134,95%CI(1.092,1.178)]呈正相关(P<0.05)。结论移植过夜培养后继续生长尤其达到融合状态的胚胎可以获得更高的临床妊娠率与活产率,并且推荐选择单枚融合胚胎移植,以降低多胎妊娠风险。

摘要： 目的比较时差成像(TLI)系统培养与常规培养胚胎的发育情况及其新鲜胚胎移植的临床结局,探讨TLI系统应用于辅助生殖技术的临床价值。方法回顾性分析2019年1月至2020年12月在我中心行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)并选择新鲜移植的510个周期的临床资料。按照胚胎培养方式的不同分为TLI组(n=166)和常规组(n=344);常规组通过胚胎形态学评分优选胚胎进行移植,TLI组通过胚胎发育动力学参数及形态学评分优选胚胎进行移植。比较两组的一般资料、胚胎发育情况以及卵裂期胚胎新鲜周期移植的临床妊娠结局。结果(1)两组患者的一般资料比较,TLI组的平均年龄显著小于常规组,获卵数显著高于常规组(P0.05)。两组间受精率、2PN卵裂率、D3可利用胚胎率、卵母细胞利用率、D3优质胚胎率均无显著性差异(P>0.05);TLI组的正常受精率(67.99%vs.62.11%)、囊胚形成率(69.51%vs.65.76%)、可利用囊胚率(43.41%vs.38.86%)及优质囊胚率(28.36%vs.24.36%)均显著高于常规组(P0.05)。(2)因两组间年龄、获卵数存在统计学差异,故对数据进行倾向性匹配分析。匹配后两组患者间基线资料比较均无显著性差异(P>0.05);相关结局与匹配前基本一致,TLI组的正常受精率、囊胚形成率、可利用囊胚率、优质囊胚率均显著优于常规组(P0.05)。结论TLI系统可显著提高卵子的正常受精率,改善囊胚形成和发育,提高囊胚利用率和优质囊胚率,为优选胚胎选择提供了可靠的依据;通过TLI系统选择胚胎,在减少胚胎移植数量的基础上,保证了稳定的临床妊娠结局。因此,认为通过TLI系统可优选出发育潜能较好的胚胎,为单胚胎移植提供有力支持。

摘要： 目的评价时差成像技术(time-lapse,TL)干式培养与传统湿式培养对不同年龄胚胎发育的影响。方法回顾性分析2020年7月至2021年12月2390个周期体外胚胎培养情况。TL组共培养640个周期,传统湿式培养组(对照组)共培养1750个周期。两组女方年龄、不孕类型、不孕因素、促排卵药物(gonadotropin,Gn)用量、受精方式差异均无统计学意义。比较不同年龄女方中,两组间正常受精率、正常卵裂率、有效胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率和优质囊胚率。结果20~29岁:TL组有效胚胎率(75.39%vs 70.15%)、优质胚胎率(49.79%vs 41.98%)均高于对照组(P<0.01);30~34岁:TL组优质胚胎率(46.70%vs 41.43%)、囊胚形成率(57.14%vs 52.74%)、优质囊胚率(35.82%vs 32.26%)均高于对照组(P<0.05);≥40岁:TL组优质胚胎率(44.05%vs 48.96%)、囊胚形成率(34.9%vs 46.24%)及优质囊胚率(16.11%vs 21.77%)均低于对照组(P<0.05)。结论与常规湿式培养相比,女方20~34岁时,TL培养可显著提高胚胎发育成功率,女方≥40岁时则效果较差。

摘要： 在胚胎培养液中添加适量的发情绵羊血清(ESS)有利于提高胞浆内单精子注射(ICSI)胚胎后期的发育潜力.为了探讨在ICSI胚胎培养液中添加不同浓度的ESS对绵羊ICSI胚胎桑椹胚率的影响及其最优的ESS浓度,本试验采用ICSI技术得到ICSI胚胎,然后在ICSI胚胎培养液中添加不同浓度的ESS(A组0％、B组5％、C组10％、D组15％及E组20％),进行ICSI胚胎的体外培养.结果表明:在ICSI胚胎培养液中添加10％的ESS,ICSI胚胎的桑椹胚率为23.78％,显著高于A组(11.47％)、B组(17.87％)、D组(16.77％)、E组(12.86％)(P<0.05).说明在ICSI胚胎培养液中添加10％ESS能显著提升绵羊ICSI胚胎的桑椹胚率.

摘要： 1病例简介患者,女,31岁,2016年(28岁)曾因左侧卵巢肿瘤行左侧附件切除术,术后病理示:左侧卵巢交界性黏液性肿瘤,伴局部上皮内癌,附壁结节成分为内胚肉瘤,肉瘤成分为非分化肉瘤。2018年患者右侧输卵管异位妊娠破裂,行腹腔镜右侧输卵管切除术+盆腔粘连松解术。患者既往甲亢病史,口服丙硫氧嘧啶治疗中,随访甲状腺功能正常。2019年因不孕就诊于我院。患者平素月经规律,14岁4~5天/28~30天,量中,无痛经。

摘要： IVF实验室有其固定的操作流程，如获得配子、完成授精(IVF/ICSI)、胚胎培养及胚胎选择与移植，但这些操作环节至今都无共识性的标准化操作程序(SOP)，不同实验室在每一环节的具体操作上存在差异.IVF操作技术的差异更多的体现在实施技术的时间以及方法的选择，其次才是操作技术本身可能存在的差异.IVF实验室操作技术的共识需要众多的同行参与总结、贡献智慧和经验。

摘要： 本研究旨在优化HMC胚胎的培养和冷冻系统，并比较HMC与传统核移植方法的胚胎生产效率和胚胎冷冻存活率。以期探讨HMC在实际操作中大批量生产克隆胚胎的可行性，提高HMC囊胚的冷冻存活率，进而推进HMC在核移植和转基因领域的应用。

摘要： 为优化并提高卵母细胞的孤雌激活效率，研究了不同浓度离子霉素作用不同时间并联合6-DMAP对猪卵母细胞孤雌激活的影响。结果表明5μm的离子霉素作用4min的卵裂／囊胚率最高(66.7%，13.6%)，比较了不同电激活参数激活对孤雌胚发育的影响，经多次孤雌激活试验表明激活参数120v／mm，60μs，1DC的激活效果最佳。探讨了不同培养基对孤雌胚体外发育的影响，结果表明：NCSU-23和PZM-3培养孤雌胚胎卵裂率无明显差异(55.2％，56.1％)，但在囊胚率上，PZM-3显著高于NCSU-23(13.8％ vs 7.84%，p<0.05)。

摘要： 卵母细胞的体外成熟是模拟体内成熟环境，使从卵巢采集的未成熟卵母细胞达到最后成熟。体外培养成熟的卵子第一极体排出和受精的比率较体内成熟的卵子低得多，这是因为体外培养成熟的卵母细胞核虽成熟而细胞质没有成熟。卵母细胞在成熟过程中涉及到一系列复杂的细胞器和分子上的重构，才能完成胞质成熟和核成熟。细胞因子是细胞间传递信号和信息交流的物质基础，既能促进细胞的生长分裂，又能在某些条件下抑制细胞生长，也能调节细胞的分化。近年来，许多研究者通过在培养液里添加生长因子来提高卵母细胞的体外成熟率及体外成熟卵母细胞的质量。本试验旨在比较不同浓度的EGF对卵母细胞体外成熟和发育的影响，并分析了EGFR在胚胎表面表达。

摘要： 形态学评估从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成，是一个复杂的动态过程，每个发育阶段胚胎都有其专有特征，很难单一瞬间辨别出能发育到植入阶段的胚胎，故不能通过一次观察来完成形态评估，应建立连续胚胎评分系统，将原核评分、早期卵裂及分裂期胚胎评分合计，以选择合适胚胎进行移植。同时标准化评分方法的建立，可评估各胚胎实验室的质量，便于胚胎实验室内部的质量控制。

摘要： 形态学评估从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成，是一个复杂的动态过程，每个发育阶段胚胎都有其专有特征，很难单一瞬间辨别出能发育到植入阶段的胚胎，故不能通过一次观察来完成形态评估，应建立连续胚胎评分系统，将原核评分、早期卵裂及分裂期胚胎评分合计，以选择合适胚胎进行移植。同时标准化评分方法的建立，可评估各胚胎实验室的质量，便于胚胎实验室内部的质量控制。

摘要： 形态学评估从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成，是一个复杂的动态过程，每个发育阶段胚胎都有其专有特征，很难单一瞬间辨别出能发育到植入阶段的胚胎，故不能通过一次观察来完成形态评估，应建立连续胚胎评分系统，将原核评分、早期卵裂及分裂期胚胎评分合计，以选择合适胚胎进行移植。同时标准化评分方法的建立，可评估各胚胎实验室的质量，便于胚胎实验室内部的质量控制。

摘要： 形态学评估从卵母细胞成熟、受精到胚胎分裂、囊胚形成，是一个复杂的动态过程，每个发育阶段胚胎都有其专有特征，很难单一瞬间辨别出能发育到植入阶段的胚胎，故不能通过一次观察来完成形态评估，应建立连续胚胎评分系统，将原核评分、早期卵裂及分裂期胚胎评分合计，以选择合适胚胎进行移植。同时标准化评分方法的建立，可评估各胚胎实验室的质量，便于胚胎实验室内部的质量控制。

摘要： 目的：探讨利用体细胞核移植技术生产转基因兔胚胎的可行性,为今后的研究奠定基础.方法：利用携带绿色荧光蛋白基因(GFP)的选择载体,分别通过脂质体法、磷酸钙法和电穿孔的方法转染兔胎儿成纤维细胞,经过G418筛选后,均获得了阳性细胞株.以非转基因和转基因兔胎儿成纤维细胞做核供体,进行了兔的体细胞核移植.结果：(1)血清饥饿处理3～5d的非转基因兔胎儿成纤维细胞核移植后其重构胚的囊胚率显著高于不处理组和处理6～9d组(33.33％ VS 22.47％和23.61％,P＜0.05);(2)转基因与非转基因兔胎儿成纤维细胞核移植后重构胚的融合率(76.27％ VS 73.12％)和分裂率(82.22％ VS 72.06％)没有显著差异(P＞0.05),但囊胚发育率差异显著(20.59％VS33.33％,P＜0.05);(3)比较3种不同方法转染的胎儿成纤维细胞核移植后重构胚的发育情况,发现用电穿孔法转染的兔胎儿成纤维细胞其重构胚的囊胚发育率显著高于脂质体法和磷酸钙法(44.44％VS 20.59％和20.00％,P＜0.05),且只有该方法转染的供体细胞构建的克隆胚在荧光显微镜下观测到了绿色荧光蛋白的表达,而脂质体和磷酸钙法转染的供体细胞核移植后的融合率以及重构胚分裂率与电穿孔法相比,虽然差异不显著(P＞0.05),但均没有观察到GEP的表达.结论：供体细胞经血清饥饿处理适当的时间有利于兔核移植胚胎的发育;用电穿孔法转染兔胎儿成纤维细胞可以有效的生产兔转基因克隆囊胚,且GFP作为一种标记基因,可用于转基因克隆兔的制备.

摘要： 目的：探讨利用体细胞核移植技术生产转基因兔胚胎的可行性,为今后的研究奠定基础.方法：利用携带绿色荧光蛋白基因(GFP)的选择载体,分别通过脂质体法、磷酸钙法和电穿孔的方法转染兔胎儿成纤维细胞,经过G418筛选后,均获得了阳性细胞株.以非转基因和转基因兔胎儿成纤维细胞做核供体,进行了兔的体细胞核移植.结果：(1)血清饥饿处理3～5d的非转基因兔胎儿成纤维细胞核移植后其重构胚的囊胚率显著高于不处理组和处理6～9d组(33.33％ VS 22.47％和23.61％,P＜0.05);(2)转基因与非转基因兔胎儿成纤维细胞核移植后重构胚的融合率(76.27％ VS 73.12％)和分裂率(82.22％ VS 72.06％)没有显著差异(P＞0.05),但囊胚发育率差异显著(20.59％VS33.33％,P＜0.05);(3)比较3种不同方法转染的胎儿成纤维细胞核移植后重构胚的发育情况,发现用电穿孔法转染的兔胎儿成纤维细胞其重构胚的囊胚发育率显著高于脂质体法和磷酸钙法(44.44％VS 20.59％和20.00％,P＜0.05),且只有该方法转染的供体细胞构建的克隆胚在荧光显微镜下观测到了绿色荧光蛋白的表达,而脂质体和磷酸钙法转染的供体细胞核移植后的融合率以及重构胚分裂率与电穿孔法相比,虽然差异不显著(P＞0.05),但均没有观察到GEP的表达.结论：供体细胞经血清饥饿处理适当的时间有利于兔核移植胚胎的发育;用电穿孔法转染兔胎儿成纤维细胞可以有效的生产兔转基因克隆囊胚,且GFP作为一种标记基因,可用于转基因克隆兔的制备.

摘要： 本发明公开了一种含输卵管源外泌体的胚胎培养液及胚胎培养方法：从输卵管液中提取输卵管源外泌体，将输卵管源外泌体添加到胚胎基础培养液中，得到含有输卵管源外泌体的胚胎培养液，所述胚胎培养液中输卵管源外泌体浓度为6.0～7.0×108个/mL；将动物(例如，兔子)胚胎移入含有输卵管源外泌体的胚胎培养液中进行培养。本发明通过添加输卵管源外泌体，使得胚胎在体外培养环境中获得了体内输卵管调控因子的作用，有利于胚胎在体外环境中的发育，提高胚胎的体外培养效率。

摘要： 本发明公开了一种胚胎培养液，其中含有200～400nM的如结构式(1)所示的化合物。该胚胎培养液效果明显，其克隆胚胎的囊胚率极显著提高，从而提高了克隆技术的效率。本发明还公开了一种体细胞克隆胚胎的处理方法，该体细胞克隆胚胎的处理方法操作简单，效果明显，可以极显著地提高包括但不局限于猪、牛、羊、鼠、人的克隆胚胎的体细胞核移植胚胎体外发育效率。

摘要： 本发明属于胚胎冷冻保存领域。具体地，本发明涉及一种用于提高胚胎解冻复苏率的体外胚胎培养液，该体外培养液包含Clusterin蛋白。本发明还涉及一种提高提高胚胎抗冻性和解冻复苏率的方法以及一种冷冻胚胎的方法。通过本发明可以显著地提高胚胎的抗冻性和解冻复苏率。

摘要： 本发明提供了一种胚胎培养检测装置及胚胎培养检测方法。本发明的胚胎培养检测装置包括微流控芯片、液体供给模组、气液混合模组、第一检测模组和第二检测模组，微流控芯片具有微流通道、培养室和生化反应室，培养室位于生化反应室的上游，液体供给模组为微流通道供给试剂，气液混合模组为微流通道供给培养基，第一检测模组用于收集所述胚胎的图像，第二检测模组用于观测反应结果。本发明的胚胎培养检测方法，对胚胎进行培养后，收集培养室中的胚胎图像和观测生化反应室中的反应结果。本发明提供的胚胎培养检测装置及胚胎培养检测方法，可以实现胚胎长期培养、胚胎形貌分析和胚胎代谢物无创检测等功能。

摘要： 本发明提供了一种卵裂期胚胎培养组合物及卵裂期胚胎培养液，所述卵裂期胚胎培养组合物包含以下组分：褪黑素0.01‑100nmol/L；辅酶Q10 0.5‑2.0mg/L；IGF‑2 0.1‑300nmol/L。所述卵裂期胚胎培养液包含基础培养液、上述卵裂期胚胎培养组合物和人血清白蛋白。含有所述卵裂期胚胎培养组合物的卵裂期胚胎培养液具有很好的保护细胞、清除自由基、促进有丝分裂及细胞发育的效果。

摘要： 本发明公开了一种含输卵管源外泌体的胚胎培养液及胚胎培养方法：从输卵管液中提取输卵管源外泌体，将输卵管源外泌体添加到胚胎基础培养液中，得到含有输卵管源外泌体的胚胎培养液，所述胚胎培养液中输卵管源外泌体浓度为6.0～7.0×108个/mL；将动物(例如，兔子)胚胎移入含有输卵管源外泌体的胚胎培养液中进行培养。本发明通过添加输卵管源外泌体，使得胚胎在体外培养环境中获得了体内输卵管调控因子的作用，有利于胚胎在体外环境中的发育，提高胚胎的体外培养效率。

摘要： 本发明公开了一种胚胎培养液的卵裂球期的胚胎染色体检测方法，本发明通过对卵子进行ICSI方式受精采集胚胎培养液，不会对胚胎造成任何损伤,有效避免PGS过程中可能出现的样本活检创伤问题,操作简便，易于开展，该检测方法适用于人群胚胎染色体异常高发人群:高龄、反复流产、反复植入失败、重度少弱精症、染色体异常等情况。该发明可在胚胎培养早期，先于囊胚期进行染色体检测，将检测时间提前了两天。

摘要： 本发明公开了一种胚胎培养液，其中含有200～400nM的如结构式(1)所示的化合物。该胚胎培养液效果明显，其克隆胚胎的囊胚率极显著提高，从而提高了克隆技术的效率。本发明还公开了一种体细胞克隆胚胎的处理方法，该体细胞克隆胚胎的处理方法操作简单，效果明显，可以极显著地提高包括但不局限于猪、牛、羊、鼠、人的克隆胚胎的体细胞核移植胚胎体外发育效率。

摘要： 本实用新型公开了一种用于提高胚胎发育潜能的胚胎培养液试剂盒，包括试剂盒体，所述试剂盒体内部设置有试管固定机构；所述试管固定机构包括方形槽、弧形槽、电动伸缩缸、固定条板和试管插槽；所述试剂盒体顶部等距开设有多个方形槽，所述方形槽内壁左右两侧均等距开设有多个弧形槽，所述方形槽内部底端螺栓连接有电动伸缩缸，所述电动伸缩缸顶部螺栓连接有固定条板，所述固定条板顶部等距开设有多个试管插槽。本实用新型通过在方形槽内部设置电动伸缩缸以及电动伸缩缸上的固定条板，可以在固定条板上插入多个试管，并根据试管的不同长度，利用电动伸缩缸调节，使不同方形槽内的试管处于同一高度，便于试管的取出和取样。

摘要： 本实用新型属于生物医药领域，尤其为一种用于提高胚胎发育潜能的胚胎培养液试剂盒，所述盒体的内部安装有海绵支撑垫，所述海绵支撑垫的下端粘合有橡胶底板，所述盒体下端以及橡胶底板的内部均设置有磁块，且上下两个磁块的磁极反向，所述海绵支撑垫的上表面开设有试剂存放槽，所述试剂存放槽的内表面一体成型有支撑板，所述盒盖的下表面安装有端部限位组件；通过试剂存放槽内表面一体成型的支撑板，便于支撑板对放置在试剂存放槽内部的试剂管进行限位，从而增加了对试剂管进行定位的便捷性，同时橡胶底板通过磁块与盒体固定连接，同时磁块分别设置在盒体和橡胶底板的内部，从而便于对海绵支撑垫进行定位。