早期胚胎

摘要： 在动物生产中,卵母细胞及早期胚胎的发育质量是影响动物繁殖性能的关键因素。哺乳动物卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中存在活跃的组蛋白修饰变化,其中对组蛋白甲基化和乙酰化研究最多,活跃的组蛋白修饰变化在细胞重编程过程中起到重要的调控作用。本文综述了哺乳动物卵母细胞及受精后早期胚胎的组蛋白甲基化和乙酰化动态修饰变化以及影响因素,为哺乳动物的发育研究提供理论依据。

摘要： 目的观察荆防颗粒浸膏对SD大鼠生育力及早期胚胎发育的影响,为其药用价值的进一步开发提供参考。方法选用SPF级大鼠168只,随机分为4组,即空白对照组,荆防颗粒浸膏1、3、10 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量组,每组42只,雌雄各半。全部动物灌胃给予对应药物,每日1次,给药体积15 mL·kg^(-1)。雌雄大鼠分别给药2周和4周后按照1∶1合笼交配。动物交配期间持续给药,交配成功雌鼠继续给药至妊娠第6天,交配成功雄鼠持续给药直至处死。试验期间检测指标包括一般观察,摄食,体重,雄鼠精子活动度、数量和形态,妊娠雌鼠妊娠情况和着床腺数(活胎、死胎、吸收胎),主要脏器称量和脏器系数计算。结果试验期间,空白对照组及荆防颗粒浸膏1、3、10 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量组动物均未见受试物引起的异常体征。与空白对照组比较,荆防颗粒浸膏1、3、10 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量组雌、雄大鼠交配前体重、雌鼠妊娠期体重和体重增重以及雌、雄鼠交配前摄食量、雌鼠妊娠期摄食量均未见显著改变;动物交配天数、交配率和雌鼠受孕率、雄鼠精子质量和雌鼠妊娠结局均未见异常改变。结论本实验条件下,荆防颗粒浸膏未见潜在的大鼠生育力与早期胚胎发育毒性,无明显损害作用剂量(NOAEL)为10 g·kg^(-1)·d^(-1)。

摘要： 禽早期胚胎发育是指禽卵子受精后在雌性生殖道内发育的过程,一般需要持续24~26 h。根据耶尔基勒迪及柯查夫(Eyal-Giladi and Kochav,EGK)时期分段标准,归纳为卵子-合子、合子-EGK I和EGK I-EGKX3个经典阶段。禽类早期胚胎在母体内发生多次卵裂,产出后细胞数目可达55000个左右。近几年关于禽早期胚胎发育中母源-合子转换(Maternal-Zygotic Transition,MZT)过程,合子基因组激活(Zygotic Genome Activation,ZGA)时间和分子机制有了新的发现,其中NOTCH和WNT等信号通路以及DLX6、ATA2和ZIC4等母源基因在胚胎早期发育阶段率先被激活,合子基因组开始表达并逐步替代母源物质。禽类作为胚胎发育研究的理想动物模型,揭开其相关分子机制对推动养禽业发展、鸟类胚胎发育和转基因技术等具有重要意义。本文主要围绕禽类卵子发育、卵子受精和合子在母体内发育的主要分子机制进行综述,为禽类早期胚胎发育的研究和发展奠定基础。

摘要： 【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量;给成熟卵母细胞分别显微注射0.9%生理盐水(Con组)、miR-449b模拟物对照(NC mimic)与miR-449b模拟物(miR-449b mimic),注射后进行孤雌激活,分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率;将成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎,采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞(P0.05);IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3,且都在细胞核表达。与Con组相比,NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加(P0.05)。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率,且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。

摘要： 理解卵母细胞的成熟过程和早期胚胎的发育是解决不孕不育难题的关键。过往的研究发现,在卵母细胞向胚胎的转变(oocyte-to-embryo transition,OET)以及合子基因组的激活(zygotic genome activation,ZGA)过程中,转录调控起到了关键的作用。2022年9月8日,山东大学生殖医学研究中心陈子江院士、赵涵教授团队联手清华大学颉伟教授团队在国际期刊《Science》上发表的一篇研究显示,研究通过开发一种高度敏感的核糖体图谱检测方式(Ribo-lite),结合转录组测序(RNA-seq),以同时得到翻译组和转录组信息;利用该方法对人类卵母细胞和早期胚胎进行检测,并将人胚胎干细胞作为对照组,来研究人胚胎发育过程不同阶段的翻译组和转录组的变化情况,揭示了人类卵母细胞向胚胎转变过程中的翻译调控方式,并识别了合子激活过程中的可能调控因子。

摘要： 【目的】研究乙草胺对小鼠卵母细胞体外成熟的影响,为研究体内乙草胺对卵母细胞质量的影响提供参考。【方法】将收集的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)置于含有不同浓度(0(对照组)、10、50、100、130、200μmol/L)乙草胺的体外成熟培养液中培养14 h,统计卵母细胞第一极体排出率,进行体外受精后,统计体外受精胚胎的囊胚率,筛选出适宜于卵母细胞体外培养的乙草胺浓度。将COCs在对照组和筛选出的适宜浓度的乙草胺组成熟培养液中培养14 h后,利用DCFH-DA检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用CellTracker蓝色染料检测卵母细胞谷胱甘肽(GSH)水平;利用JC-1染色法检测卵母细胞线粒体膜电位水平(mitochondrial membrane potential,MMP);利用实时荧光定量PCR检测卵母细胞内凋亡相关基因的表达水平,利用Hoechst 33342染色检测体外受精胚胎的囊胚细胞总数,用Fluorescein-dUTP染色法检测囊胚细胞凋亡率。【结果】与对照组相比,100、130、200μmol/L乙草胺组卵母细胞的第一极体排出率显著降低(P<0.05),100和130μmol/L乙草胺组体外受精胚胎的囊胚率显著降低(P<0.05),200μmol/L乙草胺组体外受精胚胎未发育到囊胚期,因此选择100和130μmol/L乙草胺进行后续试验。与对照组相比,在100和130μmol/L乙草胺组中,卵母细胞ROS水平显著升高(P<0.05),GSH水平及MMP显著降低(P<0.05),卵母细胞中促凋亡基因Caspase-9的相对表达量显著升高(P<0.05),而抗凋亡基因Bax、Bcl-2的相对表达量显著降低(P<0.05);100和130μmol/L乙草胺组囊胚细胞总数显著降低(P<0.05),囊胚细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。【结论】乙草胺通过提高卵母细胞内ROS及促进卵母细胞凋亡降低卵母细胞的质量,从而影响卵母细胞受精后胚胎的发育潜力。

摘要： 旨在通过构建PLC-γ1真核过表达载体并制备其多克隆抗体,为探索绵羊PLC-γ1基因对卵母细胞激活作用及早期胚胎发育的影响提供基础数据。本研究以实验室保存的Puc57-P2A-Flag-PLC-γ1菌株为模板设计引物并引入HindⅢ、AgeⅠ酶切位点,利用PCR扩增并纯化P2A-Flag-PLC-γ1基因,将其连入pcDNA3.1-EGFP载体,进行转化,通过菌液PCR、双酶切及测序鉴定后提取质粒。随后将构建好的重组质粒转染HEK-293T细胞24 h,分为control组、空载组和PLC-γ1过表达组,通过显微镜观察细胞荧光,实时荧光定量PCR(qPCR)及Western blot(WB)检测转染后细胞中PLC-γ1的表达情况;Anti-Flag免疫磁珠纯化PLC-γ1蛋白;以10月龄的新西兰大白兔(健康状态良好,体重约50 kg,n=2)为对象制备多克隆抗体,间接ELISA法测定多克隆抗体效价,WB鉴定其特异性。通过显微注射重组质粒及离子霉素(Ion)结合6-DMAP孤雌激活卵母细胞,qPCR及WB检测PLC-γ1在卵裂后不同时期(2细胞期、4细胞期、8细胞期、桑椹胚期)的绵羊早期胚胎细胞中的表达情况。结果显示,成功构建真核过表达载体;转染24 h后,与空白对照及阴性对照相比,过表达组PLC-γ1表达量明显升高(P<0.01);WB结果显示成功获得并纯化PLC-γ1蛋白,大小为149 ku;测得PLC-γ1多克隆抗体效价为1∶12 800,并可与PLC-γ1蛋白发生免疫反应。将重组质粒注射到绵羊MⅡ期卵母细胞胞质中,qPCR及WB结果显示PLC-γ1在绵羊早期胚胎发育各时期均有表达。综上所述,本研究成功构建了PLC-γ1真核过表达载体并制备了其多克隆抗体,通过显微注射技术将重组质粒注入卵母细胞并实现表达,证明PLC-γ1在绵羊早期胚胎发育各时期均有表达,且具有作为新的卵母细胞激活因子的潜能。既为探索绵羊PLC-γ1基因对卵母细胞激活作用及早期胚胎发育的影响提供了科学依据,也为进一步提升绵羊的繁殖性能奠定基础。

摘要： N6-甲基腺苷(m6 A)修饰是广泛存在的一种表观修饰,在有性生殖卵子的发育与早期胚胎成熟中发挥重要作用.m6 A修饰呈现出动态变化,m6 A及相关甲基化酶、去甲基化酶和甲基化识别酶的表达参与各种生理活动,主要在调节转录、调控相关蛋白质翻译、影响mRNA稳定性及降解等方面发挥作用.围绕m6 A修饰在生殖领域的研究大多围绕配子减数分裂和胚胎早期阶段的发育.m6 A修饰关键基因影响某些相关信号通路,调控卵母细胞的减数分裂及受精后细胞增殖过程,异常m6 A修饰和相关酶表达则引起卵泡发育受阻、早期胚胎发育停滞.而m6 A修饰作为一种可逆的调控方式,或将为生殖医学领域疾病的研究提供新的科学思路.文章主要从卵母细胞及早期胚胎发育与m6 A、m6 A相关酶的缺乏对卵泡发育及早期胚胎发育的影响以及m6 A及相关酶与女性卵巢衰老的关系进行综述.

摘要： 在哺乳动物中,早期胚胎发育阻滞一般发生在胚胎由输卵管向子宫角转移的时期,此时输卵管液中的物质对早期胚胎发育尤为重要,如葡萄糖、乳糖、丙酮酸.丙酮酸是大多数能量物质在代谢过程中的中间产物,在抗氧化、间接调节信号等过程中都发挥着重要作用,并且是卵母细胞和合子能够直接利用的主要能量底物.此外,早期胚胎发育阻滞时期恰好是母源-合子基因过渡时期,此时发生的基因组重编程也离不开丙酮酸的参与.本文综述了丙酮酸对哺乳动物早期胚胎发育的影响,推测了丙酮酸在猪早期胚胎合子基因组激活中的作用.

摘要： METTL23是一种精氨酸甲基转移酶,通过表观遗传机制调控基因表达,在早期胚胎和器官生长发育方面发挥重要的调控作用.本实验借助在线数据库和基因分析软件对猪METTL23进行生物信息学分析,得知METTL23序列包含5个外显子,定位于12号染色体上,长度4874 bp,mRNA全长2501 bp,CDs全长573 bp,编码190个氨基酸.猪和羊之间METTL23同源性最高、亲缘关系最近.同时通过qRT-PCR技术,探究了METTL23在猪卵母细胞、早期胚胎以及心、肝、脾、肺、肾、睾丸和卵巢7种组织器官中的相对表达量.结果发现:MTEEL23在猪卵母细胞和早期胚胎中均有表达,其中生发泡期(Germinal Vesicle,GV)卵母细胞表达量最高,第二次减数分裂中期(Metaphase II,MII)卵母细胞和1-细胞胚胎时期表达量相似,但从1-细胞时期开始表达量逐渐下降,8-细胞时期降至最低,桑葚胚时期开始上升并持续到囊胚;METL23在猪各组织器官中的表达比较稳定,其中肝的表达量最高,其次依次为睾丸>肾>心>卵巢>脾>肺,且差异显著.本研究表明,METTL23在物种间的保守性较高,且在猪卵母细胞、早期胚胎和主要器官均有表达,METTL23可能在猪早期胚胎及组织器官发育过程中发挥重要作用.

摘要： 为探讨冲胚方法对小鼠超数排卵效果的影响,分别采用子宫切碎法与子宫冲胚法对超排小鼠进行了冲胚.结果表明:子宫冲胚法的平均采卵数和平均获胚数极显著高于子宫切碎法(p＜0.01),而平均可用胚数显著高于子宫切碎法(p＜0.05),两种方法的平均未受精卵数则差异不显著(p＞0.05),说明冲胚方法对小鼠超数排卵效果的影响显著,且子宫冲胚法明显优于子宫切碎法.小鼠早期胚胎发育观察结果表明:超排处理后,在公母鼠合笼后76～79.5h采胚,胚胎大多处于桑椹胚期,而在公母鼠合笼后88～91.5h采胚,胚胎大多处于致密桑椹胚期与囊胚期;采用TCM199+15％胎牛血清培养液对小鼠胚胎进行体外培养是可行的.

摘要： 目的:通过研究绵羊体外早期胚胎单独或协同孕激素诱导前后子宫内膜细胞MUC-1基因的表达差异,建立体外模型,为探讨胚胎与子宫源MUC-1基因的相互作用机制提供参考,同时为进一步判断MUC-1能否作为绵羊子宫容受态的分子标记物奠定基础.rn 方法:将绵羊子宫内膜上皮细胞在不同浓度孕酮(0、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)下培养48h后检测细胞中MUC-1的表达情况,并筛选出孕酮的最适浓度.然后用绵羊体外囊胚单独或协同孕酮与 子宫内膜上皮细胞进行共培养,检测诱导前后细胞中MUC-1的表达差异.rn 预期结果:利用绵羊早期胚胎与子宫内膜上皮细胞共培养的方法,构建出绵羊子宫内膜细胞MUC-1基因表达诱导模型,并鉴定其在诱导前后的表达差异.rn 创新点:首次利用体外模型检测绵羊早期胚胎诱导子宫内膜细胞MUC-1的表达,并为进一步探讨MUC-1参与绵羊子宫容受态的调节机制提供新的试验基础.

摘要： 胚胎是动物发育历程的最早期,绝大多数器官和组织都在该时期发育形成和逐步完善功能.斑马鱼、鸡、小鼠等模式动物的早期胚胎分离和形态学观察已经完成,并建立起早期胚胎发育形态图谱.鸭在畜牧业中有重要地位,且拥有特有基因资源和自身生理代谢特点,使得鸭在当前科学研究中受到重视.然而,由于目前没有鸭早期胚胎发育各阶段图谱的相关信息,一定程度上限制了基于鸭胚胎为模型的相关研究工作进一步深入.本研究拟建立一套快速分离鸭早期胚胎的方法,并观察鸭早期胚胎发育过程,完善鸭早期胚胎发育特点的相关资料.鸭作为鸟类，与鹌鹑、鸡等早期胚胎发育过程相似。由于孵化周期不同而导致组织、器官在形成和分化上具有差异性，但这些差异性并不总是与孵化时间的长短紧密相关。鸭和鸡胚胎发育早期，都形成了类似于鱼类的两室心，再形成四室心，与李云龙（2011）对心脏发育过程中心室数量变化的描述一致，也体现了物种进化过程中先有鱼类，再有鸟类的物种进化理论。另外，鸭的早期胚胎发育中前神经孔闭合相对时间和鸡、人一样，均在体节形成之后，但是唐鱼、牙鲆等鱼类则是前神经孔先闭合，随后才开始出现体节。实验分离胚胎方法以Chapman 等（2001）分离鸡胚方法为基础并进一步改进而形成，与前人分离禽类胚胎的各种方法比较，更能保证取出的鸭蛋卵黄成整体，避免卵黄膜破裂，从而使分离出的早期胚胎保持完整性与洁净.

摘要： 为了探讨小鼠早期胚胎诱导子宫内膜容受性改变的空间结构,确定胚胎各个部分能否引起子宫内膜容受性中白血病抑制因子(LIF)、整合素β3改变.本文选用6-8周昆明雌鼠,促排卵后合笼收集2细胞胚胎,分别采用机械方法、消化法获取透明带和卵裂球。结果表明，完整胚胎可显著提升小鼠孕早期子宫内膜容受性因子整合β3、LIF的表达，然而单纯透明带或卵裂球则不能明显增加整合素β3、LIF的表达，早期胚胎诱导子宫内膜容受性可能需要完整胚胎结构的存在。

摘要： 研究目的：将单核苷酸多态序列分析技术(single nucleotide polymorphism,SNP)应用于植入前遗传学筛查(Preimplantation Genetic Screening,PGS),建立技术平台.材料与方法：选用10例已知特殊核型的人类胚胎干细胞系分别挑取单个细胞,包括5例21三体、3例16三体,以及2例XXYY核型细胞系;63例发育较好的淘汰囊胚,激光活检滋养层细胞.对上述单个细胞以及少数滋养层细胞样本进行全基因组扩增,再应用SNP芯片(NSP250k,Affymetrix)对产物进行操作分析.剩余囊胚滋养层细胞玻片固定,针对分析结果进行FISH验证.结果与结论：成功建立了SNP芯片对早期胚胎进行植入前遗传学筛查的技术平台，FISH验证确保了平台的稳定可靠，该技术可在一次杂交基础上筛查全套23对染色体的非整倍体异常，还能精确判定染色体断裂区域，应用前景广泛。此外，因全程序系统分析，排除了人为干扰以及人为判定杂交信号的不确定性，避免了因杂交信号不清晰或背景较高而产生FISH误判的情况，对于植入前遗传学筛查应用前景广阔。

摘要： 本实验三周龄母鼠超排后取GV期卵母细胞和MII期卵母细胞或进行体外受精(IVF)和体外培养(IVC)采集一细胞，二细胞等各时期的早期胚胎，多聚甲醛固定后用于免疫荧光染色。用3T3细胞作为阳性对照检测EZH2和H3K27me3两种抗体，免疫荧光染色结果显示两种抗体均定位于细胞核内，这表示两种抗体均有效。同时也说明EZH2在GV期和MII期卵母细胞表达量较一细胞期胚胎中少及受精机制促进了EZH2的表达，使EZH2的表达在受精后的一细胞胚胎期明显较高使用蛋白合成抑制剂Cycloheximide处理后，EZH2的合成明显受到抑制。

摘要： 在表观遗传学研究中，组蛋白3第9位赖氨酸残基(H3K9)是一个重要的表观修饰调控位点。其甲基化在转录调控、异染色质形成、X染色体沉默以及DNA甲基化等方面有重要作用。作用于该位点的甲基转移酶主要有SUV39H1、SUV39H2、G9A、Eu-HMTase/GLP、ESET/SETDB1和RIZ1等。其中G9A主要发挥催化H3K9二甲基化的活性，可以引起常染色质区的基因表达抑制。小鼠中G9a的缺失可致早期胚胎死亡，表明G9a介导的H3K9甲基化对早期胚胎发生有重要意义。

摘要： 以团头鲂灭活精子为诱导,采用热休克染色体加倍处理方法进行锦鲤雌核发育.锦鲤卵为粘性卵,放(20±1)°C室内平皿孵化,50min后开始卵裂,6h后出现囊胚期,18.67h后出现原肠胚期,30h后出现神经胚期,39h后器官开始开成,约3天后可以脱膜孵化,孵化率化68.5％.

摘要： 动物的性别控制一直是性别研究领域的热点，尤其是对具有较高经济价值的牛的性别控制的研究。目前通过牛早期胚胎的性别鉴定来控制出生牛性别的技术应用最为广泛。本文综述了近年来应用于牛早期胚胎性别鉴定的各种基因及DNA序列，主要包括SRY基因、ZFY/ZFX基因、AMEL基因、Y染色体重复序列，并对各种性别鉴定方法的原理和特点作了进一步的说明，力图为将要从事牛性别鉴定的研究人员和基层工作者提供技术参考。

摘要： 本实验利用牛性别决定基因(SRY)和酪蛋白αs1基因(CSN1S1)分别设计雄性特异性引物和内标引物,两对引物均各设计一对嵌套式引物建立多重巢式PCR体系,SRY基因和CSN1S1基因外、内引物扩增片断长度分别为357bp、232bp、528bp和367bp.实验结果表明,该巢式PCR体系灵敏度可达到5pg,约相当于1个细胞,准确率可达到100,故可以很好的满足胚胎性别鉴定的需要.

摘要： 本发明涉及调控胚胎干细胞及早期胚胎的胚层分化的方法和试剂。首次揭示激活Calcinuerin-NFAT信号通路与胚胎干细胞(ES)的分化或自我更新密切相关，激活该通路可以促发ES细胞进行胚层分化，而抑制这条信号通路可以长期维持ES细胞自我更新。

摘要： 本发明公开一种调节猪早期胚胎发育的营养物质的高通量筛选细胞模型，所述高通量筛选细胞模型的构建方法为：(1)pGF‑promoter载体构建：将猪PCNA基因启动子克隆至pGF‑mCMV‑EF1‑Neo慢病毒载体中，获得pGF‑promoter载体；(2)转染HEK‑293T细胞：将pGF‑promoter载体和pMD2.g、psPAX2共转染HEK‑293T细胞，孵育，收集慢病毒上清液；(3)感染pTr细胞：用慢病毒感染pTr细胞；(4)G418筛选稳转株：用G418筛选培养基培养pTr细胞，最终获得pTr‑PCNA promoter‑Luciferase稳转细胞株，其命名为pTr‑luc。本发明所建立的营养物质调节猪早期胚胎发育的细胞模型可用于调节猪早期胚胎发育的营养物质的高通量筛选，对于快速筛选促进猪早期胚胎发育的营养物质具有重要意义。

摘要： 本发明公开了早期胚胎停育程度相关的早期胚胎停育绒毛组织miRNAs生物标志物，包括hsa‑miR‑136‑5p、hsa‑miR‑1301‑3p、hsa‑miR‑135b‑5p、hsa‑141‑3p、hsa‑miR‑19b‑3p以及hsa‑iR‑486‑5p。据此，发明人还以上述miRNAs生物标志物为目标设计了相应逆转录或实时荧光PCR引物。它们可以作为绒毛样本检测早期胚胎停育的生物标志物，或者用于制备诊断试剂或生物芯片等工具，对早期胚胎停育的诊断和治疗有重要潜在价值和应用前景，能够为以后从分子水平诊断人早期胚胎停育、组织及血清miRNAs的研究提供了理论依据，具有重大的理论意义和潜在的实用价值。

摘要： 本发明涉及水产育种技术领域，具体为中华鳖显微注射早期胚胎定位器及胚胎定位方法。中华鳖显微注射早期胚胎定位器包括下固定盘、固定柱、转动柱、用于固定鳖蛋的固定装置、驱动固定装置夹紧不同规格鳖蛋的驱动装置以及上挡光盖；转动柱的一端和下固定盘相固定，另一端和固定柱转动连接；驱动装置包括第一滑动座、滑动块、传动齿块、主动轮、第一从动轮、第一传动带、第二传动带、第二从动轮以及第二滑动座。本发明具有装夹效果好以及随时挪动鳖蛋位置方便的优点。

摘要： 本发明涉及牛早期胚胎性别鉴定和胚胎分割的方法，还涉及用于牛早期胚胎性别鉴定的PBS液即磷酸盐缓冲液，该缓冲液的pH值为6.8~7.2且是照如下方式配制的：取磷酸氢二钾9.39g与磷酸二氢钾3.5g，加水使成1000ml，滤过，在115°C灭菌30分钟。本发明方法包括如下步骤：使卵母细胞和精子进行体外受精得到桑椹胚；将桑椹胚在分割液滴内用分割刀割取胚胎组织作为性别鉴定的样品；环介导等温扩增法性别鉴定试剂盒制作样品并配制Master Mix；待样品混合后使反应管置环介导等温扩增实时浊度检测系统中反应，根据结果确定样品为雄性、雌性、不确定需要重做三类情形之一。本发明方法呈现如说明书所述优异技术效果。

摘要： 本发明公开了一种早期胚胎组织的免疫组化中保持胚胎完整性的方法，属于动物生物技术领域。该方法采用聚乙烯吡咯烷酮溶液添加于早期胚胎免疫组化所用磷酸盐缓冲液、多聚甲醛、Triton X‑100、双氧水中，防止胚胎贴壁，在整个免疫组化过程中可保持胚胎完整性，提高免疫组化效果。本发明所采用的技术方案主要针对体外胚胎，在常规免疫组化步骤基础上进行了调整，调整了组织处理部分试剂成分，有效提高了免疫组化效果。本发明针对免疫组化技术存在的不足，扩大了应用范围，具有操作简便，生产成本低等优点。

摘要： 本发明涉及调控胚胎干细胞及早期胚胎的胚层分化的方法和试剂。首次揭示激活Calcinuerin-NFAT信号通路与胚胎干细胞(ES)的分化或自我更新密切相关，激活该通路可以促发ES细胞进行胚层分化，而抑制这条信号通路可以长期维持ES细胞自我更新。

摘要： 本发明提供建立和维持哺乳动物早期胚胎样细胞的培养基和方法。本发明的培养基用于培养哺乳动物多能干细胞(PSC)，化学成分确定，含有用于培养干细胞的基础培养基，并补充了S‑腺苷高半胱氨酸水解酶(SAH)/多梳抑制复合体(PRC)/EZH2抑制剂和HDAC抑制剂。利用本发明的培养基能够将灵长类(人和非人)动物PSC转化成着床前内细胞团样细胞(ICLC)或8细胞胚胎样细胞(8CLC)。

摘要： 本实用新型提供了一种用于早期胚胎装入胚胎细管的组件，包括与胚胎细管吸入端可密封连接的一次性吸取头和与胚胎细管含棉栓的尾部相连且能够产生负压进而将胚胎吸入胚胎细管内的负压装置，其特征在于：所述的负压装置通过柔性材质的连通管与胚胎细管密封连接，所述的吸取头包括吸取段和连接段，所述的吸取段相对连接段弯曲一定夹角，所述的连接段与胚胎细管密封连接。本实用新型操作更方便、快速，能够防止胚胎受到污染，装胚时更加精准，并且可避免胚胎受到损伤和丢失。

摘要： 本实用新型公开了一种新型人体胚胎早期培养装置，包括培养存放箱、设在培养存放箱内部的放置斗和培养皿，放置斗的内部设有用于易取出培养皿的抬升机构，抬升机构包括设在放置斗内部的固定块，固定块上开设有多个等距分布且与培养皿相匹配用于放置培养皿的第一放置槽和经连接管与第一放置槽底部连通的储油室，第一放置槽的内部设有用于撑起培养皿的第二橡胶活塞，储油室的内部设有第一橡胶活塞，第一橡胶活塞上设有竖直向上的推杆；本实用新型便于将放置到第一放置槽内部的培养皿取出，从而便于医护人员对培养皿内部的人体早期胚胎进行观察。