贲门腺癌

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)FOXD3-AS1在胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其对肿瘤生物学行为的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测FOXD3-AS1在GCA中的表达.应用细胞功能实验检测FOXD3-AS1异常表达与肿瘤生物学特征的关系;qRT-PCR及Western blot法检测FOXD3-AS1异常表达对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA及蛋白表达的影响.结果GCA组织中的FOXD3-AS1表达量明显高于癌旁正常组织(Z =-2.695,P =0.007),FOXD3-AS1的表达水平与临床分期(Z=-2.981,P = 0.003)和淋巴结转移(Z=-3.43,P= 0.001)相关.FOXD3-AS1在胃癌细胞中的表达均高于空白对照组(P＜0.05).细胞增殖实验、平板克隆形成、划痕愈合实验以及Transwell侵袭实验结果显示,FOXD3-AS1敲低明显抑制细胞的体外增殖、迁移、侵袭能力;FOXD3-AS1敲低上调胃癌细胞中E-cadherin mRNA及蛋白的表达,同时下调N-cadherin、β-catenin和vimentin的表达(P＜0.05).结论 FOXD3-AS1在GCA组织和细胞中的表达明显上调,敲低FOXD3-AS1可以抑制胃癌的发生、发展.

摘要： 目的 探讨SMC4基因在贲门腺癌细胞SGC-7901中发挥的作用及内在机制.方法 收集20例贲门腺癌患者的贲门腺癌组织及贲门腺癌癌旁正常组织,送检进行蛋白质谱检测分析,获得差异表达基因SMC4.并经Western blot测定SMC4在贲门腺癌细胞MKN-45、BGC-823、SGC-7901、MGC-803和正常胃上皮细胞GES-1中的蛋白水平.随后选择SMC4表达量适中的SGC-7901细胞构建后续实验对象,实验分为NC组(共转染polybrene和对照shRNA重组慢病毒液)、SMC4-RNAi1组(共转染polybrene和SMC4 shRNA-1重组慢病毒液)和SMC4-RNAi2组(共转染polybrene和SMC4 shRNA-2重组慢病毒液).运用MTT试验和克隆形成试验评估敲除SMC4对细胞增殖活性的影响,通过划痕试验、Transwell试验研究下调SMC4对细胞迁移、侵袭的作用,使用流式细胞术检测SMC4对细胞周期的影响,通过Western blot分析SMC4对凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bcl-2、cleaved Caspase-3、Bax)和周期相关蛋白(CDK6、Cyclin D1、P21、CDK4)的影响,进行Western blot实验以确定SMC4对上皮-间质转化(EMT)关键蛋白(Vimentin、N-cadherin、E-cadherin)和PI3K/AKT信号通路相关蛋白(磷酸化mTOR、磷酸化AKT、磷酸化PI3K)的调控作用.结果 蛋白质谱分析结果显示,贲门腺癌组织中SMC4的蛋白表达量显著高于癌旁组织(P<0.05).与正常胃上皮细胞进行对比,SMC4在贲门腺癌细胞中的蛋白表达水平较高(P<0.05).与NC组比较,SMC4-RNAi1组和SMC4-RNAi2组SMC4蛋白表达量显著减少(P<0.05).与NC组比较,SMC4-RNAi1组和SMC4-RNAi2组SGC-7901细胞的侵袭、增殖、迁移活性降低(P<0.05).与NC组相比,SMC4-RNAi1组和SMC4-RNAi2组G0/G1期细胞显著增加,而S期和G2/M期细胞数则减少(P<0.05).此外,SMC4-RNAi1组和SMC4-RNAi2组的Vimentin、CDK6、Bcl-2、Cyclin D1、N-cadherin及CDK4的蛋白水平相较于NC组降低,而Bax、Caspase-3、cleaved Caspase-3、P21和E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05).与NC组相比,SMC4-RNAi1组和SMC4-RNAi2组磷酸化mTOR、磷酸化AKT和磷酸化PI3K的蛋白水平明显降低(P<0.05),而mTOR、AKT和PI3K的蛋白水平保持不变.结论 敲除SMC4可抑制细胞侵袭、增殖、迁移能力,促使细胞凋亡,抑制细胞周期进程,抑制EMT过程,上述作用可能与PI3K/AKT通路受抑相关.

摘要： 目的:探讨C20orf54在贲门腺癌(GCA)组织中的表达和意义.方法:采用RT-PCR、Western blot和免疫组化SP法检测60例GCA组织及癌旁正常黏膜组织中C20orf54的表达.对C20orf54高、低表达的GCA患者进行生存分析比较.结果:GCA组织中C20orf54 mRNA及蛋白的表达低于癌旁正常黏膜组织(P<0.001);GCA和癌旁正常黏膜组织中C20orf54蛋白的高表达率,差异有统计学意义(P<0.001).中、低分化,有淋巴结转移,浸润深度T3、T4和临床分期Ⅲ、Ⅳa期的GCA组织中C20orf54蛋白高表达率低于高分化,无淋巴结转移,浸润深度T1、T2和临床分期Ⅰ、Ⅱ期者(P<0.05).C20orf54高表达和低表达GCA患者Kaplan-Meier生存曲线差异有统计学意义(P<0.001),中位生存期分别是40.2和23.1个月.结论:C20orf54表达下调可能与GCA发生发展、侵袭及不良预后有关.

摘要： 目的通过对比分析食管鳞癌、贲门腺癌和结肠腺癌高频突变基因,确定3种肿瘤间主要变异基因。方法采用全基因组外显子测序方法对98例结肠腺癌检测分析,将结肠腺癌中的高频突变基因在109例食管鳞癌和112例贲门腺癌中进行靶向测序,确定食管鳞癌、贲门腺癌和结肠腺癌三者共同存在或者特异的基因改变。结果黏蛋白16(mucin16,MUC16)、丝聚蛋白(filaggrin,FLG)、SMAD家族4(SMAD family member 4,Smad4)和Ⅵ型胶原蛋白α3(collagen typeⅥalpha 3 chain,COL6A3)在食管鳞癌、贲门腺癌和结肠腺癌组织中均存在不同程度的突变,突变类型均以错义突变为主。其中,MUC16和COL6A3基因在3种肿瘤组织中的突变频率非常相似,MUC16基因突变率分别为21.1%、27.7%和18.4%,COL6A3基因突变率分别为4.6%、10.7%和10.2%。而SMAD4基因在食管鳞癌和贲门腺癌的突变频率低于结肠腺癌(0.9%vs 4.5%vs 14.3%,P<0.05),FLG基因在食管鳞癌中的突变频率高于贲门腺癌和结肠腺癌(22.9%vs 9.8%vs 6.1%,P<0.05)。结论MUC16和COL6A3基因突变可能是食管鳞癌、贲门腺癌和结肠腺癌3种不同组织来源肿瘤共同存在的分子改变,而FLG和SMAD4基因突变则分别与食管鳞癌和结肠腺癌的发生密切相关。

摘要： 目的:探讨肿瘤家族史对贲门腺癌(GCA)患者术后预后的影响.方法:3 088例接受根治术治疗的GCA患者的临床、病理和随访信息取自河南省食管癌重点开放实验室50万例食管癌和贲门癌临床信息数据库.高发区2 315例,低发区773例.结果:在高发区,家族史阴性和阳性患者肿瘤长径、分化程度差异有统计学意义(P＜0.05);在低发区,家族史阴性和阳性患者肿瘤长径差异有统计学意义(P＜0.05).Cox回归分析结果显示,肿瘤家族史阳性是低发区GCA患者术后预后的独立保护因素[HR(95％ CI)=1.338(1.084～1.651)].结论:低发区肿瘤家族史可能是GCA患者术后预后的独立影响因素.

摘要： 目的:探讨肿瘤最长直径(MTD)判断贲门腺癌(GCA)患者术后预后的价值.方法:4 347例GCA患者基本信息、随访记录均来自河南省食管癌重点开放实验室50万例食管癌和贲门癌临床信息数据库,MTD与TNM分期等临床病理资料来自医院病历记录.结果:低发区、TNM晚期GCA患者MTD大于高发区或TNM早期患者(P＜0.05).Cox回归分析结果显示,MTD较大是GCA患者术后预后的独立危险因素,HR(95％ CI)=1.163(1.084 ～1.248).结论:MTD可为GCA的预后评估提供参考.

摘要： 目的:研究术前预后营养指数(PNI)对贲门腺癌(GCA)术后预后的评价价值.方法:回顾性分析河南省安阳市肿瘤医院接受根治术治疗的GCA患者627例的临床资料.根据术前1周内检查的血清白蛋白水平和淋巴细胞数计算PNI.结果:PNI判定术后5 a生存的ROC曲线下面积为0.650,最佳截断值为45.5;PNI≥45.5者375例,＜45.5者252例.Cox回归结果显示,PNI＜ 45.5是GCA患者术后预后的独立危险因素,HR(95％CI)为2.645(2.183 ～3.205).结论:术前PNI可用于GCA患者术后预后的判定,PNI≥45.5的患者预后相对较好.

摘要： Objective To characterize the RASSF1A gene promoter hypermethylation and protein expression in gastric cardia adenocarci-noma (GCA). Methods Thirty - three GCA patients were enrolled from Yaocun Esophageal Cancer Hospital and Linzhou City Center Hospital. Surgically resected specimens were soon stored in the liquid nitrogen and then transferred to-80°C refrigerator. Cancer tissue and paired normal tissue were selected in each patient. Methylation-specific polymerase chain reaction (MSP)was used to investigate the methylation changes. Im-munohisto-chemistry was used to detect protein expression. Results For GCA patients,RASSF1A promotor methylation frequency in cancer tis-sue and paired normal tissue was 63.6％,4.2％,respectively. RASSF1A positive protein expression in tumor tissue and paired normal tissue was 45.5％,87. 5％,respectively. In 21 cases of RASSF1A gene methylation (+)cardiac cancer tissues,15 cases (71.4％)had negative protein expression;in 12 cases of RASSF1A gene methylation (-)cardiac cancer tissues,9 cases (75％)were positive for protein expression. 3 cases (25％)were negative for protein expression. Spearman correlations correlation analysis found that there was negative correlations between promotor methylation and expression in RASSF1A (P5cm)组织各一块.采用甲基化特异性PCR检测RASSF1A基因的甲基化情况,采用免疫组织化学检测RASSF1A蛋白表达.结果 33例大体标本中共选取57块组织,其中癌组织33块,癌旁正常组织24块.贲门腺癌癌组织中RASSF1A基因甲基化的发生率为63.6％,明显高于贲门腺癌癌旁正常组织中RASSF1A基因甲基化的发生率(4.2％),两组比较差异有统计学意义(P<0.05).贲门腺癌癌组织中RASSF1A蛋白阳性表达率为45.5％,明显低于贲门腺癌癌旁正常组织中RASSF1A蛋白阳性表达率(87.5％),两组比较差异有统计学意义(P<0.01).21例RASSF1A基因甲基化阳性贲门癌组织中,15例(71.4％)蛋白表达阴性;12例RASSF1A基因甲基化阴性贲门癌组织中,9例(75％)蛋白表达阳性,3例(25％)蛋白表达阴性;经Spearmancorre-lations相关分析发现:在贲门腺癌癌组织中RASSF1A基因甲基化与蛋白表达呈显著负相关(P<0.01).结论 RASSF1A基因可能通过启动子区甲基化导致的表达失活参与了贲门腺癌的发生发展过程.

摘要： 目的:探讨贲门腺癌(GCA)和非贲门胃癌(Gnon-CA)中体重指数(BMI)的差异.方法:分析94例诊断为胃腺癌的临床资料,分为贲门腺癌组(GCA group)和非贲门胃癌组(Gnon-CA group).分析在两组患者患病的危险因素.结果:在GCA组和Gnon-CA组的体重指数均数分别是24.8±3.4kg/m2和24.1±3.7kg/m2(P=0.004),超重(24kg/m2≤BMI≤28kg/m2)的比例分别是42.70％和33.71％,相对危险度(odds ratio,OR)为2.21(95％CI,1.12～4.35;p=0.021),肥胖(BMI>28kg/m2)的比例分别是13.14％和5.81％,OR为3.17(95％CI,2.60～4.83;p=0.007).结论:与Gnon-CA患者相比,GCA患者存在更多的超重和肥胖患者,并且BMI是GCA患病的独立危险因素.

摘要： 本研究检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)及相应癌旁非肿瘤组织中Caveolin-1基因的甲基化状态,并探讨该基因甲基化对其mRNA、蛋白表达及Wnt通路中心因子β-catenin异质表达的影响及与临床病理特征之间的相关性.应用甲基化特异性PCR(methylation sPecificPCR,MSP)、RT-PCR分别检测138例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中Caveolin-1基因的甲基化状态及mRNA表达情况;应用免疫组织化学(IHC)分别检测Caveolin-1及β-catenin蛋白的表达.结果表明，基因CPG岛甲基化是Caveolin-1基因表达下调的机制之一，并可能通过Wnt/β-catenin信号传导通路的激活在贲门腺癌的发生中扮演着重要的角色。

摘要： 与一组基因相关的贲门腺癌辅助诊断试剂盒，属于生物医学和分子生物学技术领域，具体是指一种用于辅助诊断贲门腺癌的ELISA试剂盒，包括固相载体和6种被分别包被于固相载体上的抗体，6种抗体分别为：BCL2L1抗体、DLC1抗体、CDKN2A抗体、CDKN2B抗体、NRG1抗体、Erb B4抗体。实验证实，这组相关基因表达产物在贲门腺癌患者的血清中高表达，通过ELISA试剂盒检测人体血清中相关基因的表达水平，其检测结果可用于贲门腺癌的早起筛查、预后评估等辅助诊断，有具有深远的临床意义和重要的推广应用前景。

摘要： 本发明属于肿瘤医学技术领域，具体公开了一种用于贲门腺癌早期筛查的自身抗体联合检测ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由Dock10、IVL、CDH1和P53组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测贲门腺癌，尤其是早期贲门腺癌，其检测灵敏度高达87.5%，特异性达到了75%，可用于贲门腺癌高发区无症状人群的大规模筛查，有利于无症状高危人群贲门腺癌筛查和早期发现。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，具体公开了一种用于早期贲门腺癌筛查的自身抗体联合检测ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被于固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由P53、CDH1、NRG1、MDM2、RHOA和IVL组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测贲门腺癌，尤其是早期贲门腺癌，其检测灵敏度高达86%，特异度也高达到88%，可用于贲门腺癌高发区无症状人群的大规模筛查，有利于无症状高危人群筛查和早期发现。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，具体公开了用于贲门腺癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。本发明提供的用于贲门腺癌诊断的生物标志物为TP53自身抗体、BLOC1S4自身抗体、MAGEA1自身抗体、CTAG1A自身抗体、IGHM自身抗体中的至少一种，该标志物在贲门腺癌患者血清中的表达水平高于正常人，差异具有统计学意义。本发明还提供了一种用于贲门腺癌诊断的试剂盒，该试剂盒含有用于检测上述生物标志物的试剂，该试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。本发明通过检测人血清中上述生物标志物的表达水平，可以有效区分贲门腺癌患者和健康人，可用于贲门腺癌的辅助诊断。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，具体公开了一种预测贲门腺癌预后的标志物——SSH3蛋白以及SSH3蛋白的检测试剂在制备预测贲门腺癌预后中的应用。SSH3蛋白在贲门腺癌癌旁正常上皮组织中为阴性表达，在贲门腺癌癌组织中有不同程度的阳性表达，SSH3蛋白阳性表达的贲门腺癌患者，其生存期短。通过检测组织样品中SSH3蛋白的表达，可以有效区分贲门腺癌患者的生存期，从而为贲门腺癌预后预测的判断提供了新途径，为临床医生对于贲门腺癌病情分析提供了参考依据。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，公开了一种用于高危人群贲门腺癌早期筛查的试纸条，试纸条包括结合垫和层析垫，结合垫上包被有捕获抗体，捕获抗体为GAGE12B抗体A、AGPAT4抗体A、P2RX4抗体A的混合物，GAGE12B抗体A、AGPAT4抗体A、P2RX4抗体A均带有可检测的标记物；层析垫上设有三条检测线和一条质控线，三条检测线固定的检测抗体分别为GAGE12B抗体B、AGPAT4抗体B、P2RX4抗体B；质控线上固定有兔抗鼠IgG。本发明试纸条能快速检测人血清中的GAGE12B、AGPAT4、P2RX4，实现三种肿瘤标志物的联合检测，根据检测结果可以有效检测贲门腺癌，极大地提高了早期贲门腺癌的检出率。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及贲门腺癌预后预测技术，具体涉及一组贲门腺癌预后预测标志物及其应用。即能够特异性检测ZBED5、CUL5、AVIL和USP15或该组基因表达产物的检测试剂在贲门腺癌预后预测试剂盒中的应用，本发明试剂盒的检测对象为贲门腺癌手术切除组织样品或内镜活检组织样品。本发明试剂盒用于贲门腺癌的预后预测，使得贲门腺癌的预后预测更加方便易行；并且，本发明联合利用四种标志物组合对贲门腺癌患者三年生存期的预测灵敏度为89.1%，特异度为70.2%。

摘要： 本发明属于医药生物技术领域，具体公开了一种用于早期贲门腺癌筛查的自身抗体联合检测ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被于固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由P53、CDH1、NRG1、MDM2、RHOA和IVL组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测贲门腺癌，尤其是早期贲门腺癌，其检测灵敏度高达86%，特异度也高达到88%，可用于贲门腺癌高发区无症状人群的大规模筛查，有利于无症状高危人群筛查和早期发现。

摘要： 本发明属于肿瘤医学技术领域，具体公开了一种用于贲门腺癌早期筛查的自身抗体联合检测ELISA试剂盒，该试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的肿瘤相关抗原，所述肿瘤相关抗原由Dock10、IVL、CDH1和P53组成。进一步地，所述试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、阳性对照血清、阴性对照血清、显色液、终止液和洗涤液。本发明的ELISA试剂盒可以有效检测贲门腺癌，尤其是早期贲门腺癌，其检测灵敏度高达87.5%，特异性达到了75%，可用于贲门腺癌高发区无症状人群的大规模筛查，有利于无症状高危人群贲门腺癌筛查和早期发现。

摘要： 与一组基因相关的贲门腺癌辅助诊断试剂盒，属于生物医学和分子生物学技术领域，具体是指一种用于辅助诊断贲门腺癌的ELISA试剂盒，包括固相载体和6种被分别包被于固相载体上的抗体，6种抗体分别为：BCL2L1抗体、DLC1抗体、CDKN2A抗体、CDKN2B抗体、NRG1抗体、Erb B4抗体。实验证实，这组相关基因表达产物在贲门腺癌患者的血清中高表达，通过ELISA试剂盒检测人体血清中相关基因的表达水平，其检测结果可用于贲门腺癌的早起筛查、预后评估等辅助诊断，有具有深远的临床意义和重要的推广应用前景。