可溶性表达

摘要： 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高致死性传染病,对养猪业危害巨大。为了提供有效的抗原蛋白用于ASFV的临床诊断及免疫预防研究,本试验将ASFV SY18株A151R蛋白的基因序列进行密码子优化,并克隆至pET28a载体,双酶切验证得到大小分别为450 bp和5300 bp的片段,验证重组载体正确。重组载体pET28a-A151R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,添加pG-Tf2载体以提供伴侣分子帮助目的蛋白折叠,并通过摇瓶发酵考察目的蛋白的表达。SDS-PAGE与Image-Pro Plus软件分析结果表明,A151R蛋白可实现65.4%的可溶性表达,蛋白分子量大小为17 kDa,利用亲和层析纯化所得目的蛋白纯度达到97.4%。Western blot结果显示,A151R蛋白可被ASFV阳性血清识别,表明其反应性良好。本研究首次实现A151R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,为ASFV诊断及其疫苗的研究提供了较好的候选抗原蛋白。

摘要： 目的构建大肠杆菌中人过氧化物氧还蛋白6(human peroxiredoxin 6,hPrx6)基因表达载体,并对其进行纯化,分析其酶学性质及结构.方法利用PCR技术调取hPrx6基因片段,与pColdI载体连接,构建重组质粒pColdI-hPrx6,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;经SDS-PAGE检测和Western blot鉴定,表达产物通过Ni-NTA亲和层析进行纯化,并对其酶学性质进行研究;对所表达的hPrx6融合蛋白利用在线软件进行结构分析.结果重组质粒经PCR和酶切法鉴定构建成功;经Ni-NTA亲和层系纯化后得到的融合蛋白纯度可达95%;对其酶学性质的研究表明:其酶活力为(240±18)U/μmol,最适反应温度为30°C,pH为7;hPrx6酸性氨基酸总数多于碱性氨基酸总数,归类为不稳定蛋白.结论本研究成功在大肠杆菌中表达可溶性hPrx6重组蛋白,此结果为研究其生物学功能奠定了基础.

摘要： 旨在克隆到猫ω干扰素和γ干扰素(FeIFN-ω和FeIFN-γ)基因的基础上,分析它们的一些生物学特性,并进行可溶性原核表达和简化纯化工艺,为后期作为抗病毒药物的开发奠定基础。根据GenBank登录的FeIFN-ω和FeIFN-γ基因序列,对其编码氨基酸的信号肽序列进行分析,设计引物用于克隆不包含信号肽的成熟蛋白基因序列,分别插入到原核表达载体pET28a-SUMO,转化入BL21感受态细胞进行表达,并通过不同的诱导时间、温度和控制IPTG浓度优化其表达条件,在纯化阶段摸索简易工艺。结果表明,FeIFN-ω基因编码区长591 bp,共编码196个氨基酸,信号肽序列为前23位氨基酸;FeIFN-γ基因编码区长504 bp,共编码167个氨基酸,信号肽序列为前20位氨基酸。将克隆到的FeIFN-ω和FeIFN-γ基因通过Bam HⅠ和Hin dⅢ酶切位点带入到含SUMO标签的原核表达载体,构建成功的重组质粒分别命名为pET28a-SUMO-FeIFN-ω和pET28a-SUMO-FeIFN-γ。优化条件后表明SUMO-FeIFN-ω融合蛋白在IPTG终浓度为0.6 mmol/L时,16°C诱导6 h表达量最高;SUMO-FeIFN-γ融合蛋白在IPTG终浓度为0.8 mmol/L时,16°C诱导9 h表达量最高。最终表达出均以可溶性形式存在的两种融合蛋白,经镍柱纯化,用SUMO蛋白酶去除标签和经两次截留柱纯化获得不含标签的干扰素,分子质量约18 ku和17 ku,与预期大小相符,表明FeIFN-ω和FeIFN-γ蛋白成功得到表达和纯化。

摘要： 采用生物信息学方法对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N蛋白)进行亲疏水性、抗原表位预测及多序列对比分析,构建重组质粒pET28a/N,在大肠杆菌原核表达体系下通过调整诱导温度和时间,提升蛋白溶解度和表达量,并对表达出的重组N蛋白进行纯化和鉴定。结果表明:SARS-CoV-2 N蛋白编码419个氨基酸,等电点(PI)为10.10,无跨膜区,无信号肽序列,局部亲水性较强,全长蛋白抗原指数较高,高度保守,与SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白同源性为90.5%;采用大肠杆菌原核表达体系发酵,工程菌BL21(DE3)/pET28a/N在IPTG终浓度为0.2 mmol/L、16°C低温条件下诱导20 h,蛋白呈可溶性表达,且此时蛋白的表达量最高,占总蛋白表达量的70%;通过Ni-NTA亲和层析、凝胶过滤层析纯化后的目的蛋白纯度达90%,分子质量为55 kDa,具有特异性。

摘要： 为高效制备人源内皮抑素(human endostatin,hEDN),解决其在大肠杆菌中的可溶性表达。该研究在大肠杆菌BL21(DE3)中分别构建了hedn单基因、融合标签共表达和融合表达系统,将重组菌在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导下进行摇瓶发酵,通过SDS-PAGE分析及串联飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight/ionization time of flight,MALDI-TOF/TOF)鉴定hEDN的表达情况。结果表明,在构建的重组菌中只有含有谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)促溶标签的重组菌株BL21(DE3)/pGEX-6p-1-hedn能成功实现hEDN融合蛋白的可溶性表达。进一步地,通过改变诱导温度、诱导时间、诱导剂IPTG浓度及加入诱导剂IPTG时间来优化hEDN融合蛋白的表达条件,最终确定hEDN融合蛋白的最佳发酵条件为20°C,8~12 h加入0.3 mmol/L IPTG诱导36 h。通过亲和层析(PrePack GSH Purose 4 Fast Flow预装柱)初步纯化得到hEDN融合蛋白,经重组PreScission蛋白酶(PreScission protease,PPase)酶切后得到分子质量约为22 kDa的目的条带,与hEDN理论分子质量相一致。该研究为人源多肽的可溶性表达与纯化提供了研究思路,同时对微生物发酵制备功能性多肽具有一定的借鉴意义。

摘要： 【目的】实现A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)VP1蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,以建立SVA抗体液相芯片技术检测方法。【方法】根据GenBank收录的SVA VP1基因序列(登录号:KY747514.1),基于大肠杆菌的密码子偏好性优化合成VP1基因,克隆到pCold TF载体,构建重组质粒pCold TF-VP1。将重组质粒pCold TF-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,进行IPTG诱导表达。通过优化诱导时间及IPTG浓度得出最佳诱导表达条件。采用His标签镍柱纯化VP1重组蛋白,将纯化后的SVA VP1蛋白与荧光微球进行偶联,偶联好的微球与阴阳性血清反应,利用Luminex 200系统上机检测背景及阴阳性血清的中值荧光强度(MFI),从而判断阴阳性,以用于猪血清中SVA抗体的检测。【结果】重组质粒pCold TF-VP1成功转入大肠杆菌BL21感受态细胞,并以可溶性蛋白形式表达。经诱导表达在约82 ku处出现阳性条带。当重组菌株诱导条件为16°C、IPTG终浓度为1.2 mmol/L、诱导时间为3 h时,VP1蛋白表达量最高;经Western blotting分析,可在82 ku处出现明显条带。将VP1蛋白与荧光微球偶联,阴性对照(背景)的平均荧光值为17(2000),证明SVA VP1蛋白与微球偶联成功,偶联成功的荧光微球可用于检测猪血清中SVA抗体的检测。【结论】本研究在大肠杆菌中成功表达并纯化了SVA VP1蛋白,初步建立了SVA抗体液相芯片检测方法,为后续研究奠定了基础。

摘要： 将来源于Clostridium bolteae ATCCBAA-613的DAEase基因序列经密码子优化合成,以pCold TF为表达载体,冷休克启动子CspA低温诱导DAEase基因在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,得到高效可溶性的重组Cb-DAEase并利用镍柱亲和层析分离纯化。结果表明,Cb-DAEase最适pH和温度为7.0和55°C,Co^(2+)能够显著(P<0.05)增强酶活力。对培养条件进行优化得到,在7 g/L甘油、10 g/L酵母膏、1%接种量、0.25 mmol/L IPTG、诱导前培养5 h的条件下,Cb-DAEase活力达到(10.11±0.02)U/g,比优化前(1.38±0.01)U/g提高了7.33倍;以120 g/L的D-果糖为底物全细胞催化0.5 h后,D-阿洛酮糖产量为(11.47±0.04)g/L,比优化前(1.03±0.02)g/L提高了11.14倍。基于冷休克表达策略构建的重组菌经发酵优化后Cb-DAEase活力显著(P<0.05)提高,为高效制备D-阿洛酮糖提供了理论支持。

摘要： 为获得牛结节性皮肤病病毒(LSDV)p32可溶性蛋白并制备其多克隆抗体,截取了LSDV的P 32基因膜外区序列,并构建了重组表达质粒pColdⅠ-P32,在大肠埃希氏菌BL21(DE3)pLysS细胞中经低温诱导表达,然后用钴离子亲和层析纯化以可溶性形式表达的重组蛋白,使用纯化的p32截短蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,并通过Western blot鉴定。结果表明,成功使用钴离子亲和层析纯化获得LSDV p32可溶性膜外区蛋白,制备的多克隆抗体可以特异性识别LSDV感染的牛组织蛋白。获得的纯度较高的LSDV p32截短蛋白和特异性良好的多克隆抗体,为建立LSDV抗原检测方法及亚单位疫苗的研制奠定了基础。

摘要： 为实现生物法工业化生产乙醛酸,采用基因工程技术对甘氨酸氧化酶(ThiO)进行表达优化,使用SDS-PAGE电泳手段验证ThiO的可溶性表达,通过全细胞转化法检测重组菌体生产乙醛酸的能力,并优化了反应条件,在放大体系中考察其应用性.结果表明:构建的菌株Bacillus subtilis 168(pP43NMK-ThiO)实现了ThiO的可溶性表达,全细胞转化甘氨酸生产乙醛酸的产量超越了当前生物法制备的最高产量.全细胞催化剂的最佳反应条件为温度30°C和pH值8.3,在35°C内保持高热稳定性,保温8 h后仍保持90％以上反应活性.在最佳反应条件下添加终浓度1％的过氧化氢酶使得乙醛酸产量提升,相对产率提高了30％.3 L发酵罐上的结果与摇瓶上一致,显示出全细胞法制备乙醛酸的稳定的转化能力,为其工业化奠定了基础.

摘要： [背景]大肠杆菌作为原核表达系统常用宿主菌株,具有培养成本低、周期短和操作性强等优势,但同时也存在着一些不足.[目的]降低大肠杆菌内毒素合成水平及毒力,同时提高其可溶性表达外源蛋白的能力.[方法]利用CRISPR-Cas技术敲除大肠杆菌BL21(DE3)脂多糖生物合成途径中的lpxM,改变其毒性中心类脂A的侧链结构;在基因组中整合表达tig提供蛋白折叠所需伴侣因子;构建pET-28a-Rcodon重组载体,补充蛋白表达所需稀有密码子对应的tRNA.[结果]lpxM缺失后菌体细胞内毒素合成水平较出发菌株降低90％左右;利用改造后的重组菌株和载体,可显著提高鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的可溶性表达水平;临床安全性试验结果表明,重组菌株BL21(DE3)△lpxM::tig合成内毒素的毒力水平较出发菌株显著降低,表达抗原对应免疫组个体无任何临床免疫副反应出现.[结论]利用重组技术对大肠杆菌原核表达系统进行改造,并用于外源蛋白的低毒力高效可溶性表达,为相关亚单位疫苗的研究奠定了一定的基础.

摘要： 目的:应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,明确其抗原活性. 方法:通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因;构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表达目的蛋白;通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组tN蛋白的表达及其免疫反应原性;用提纯的tN蛋白皮下接种Blab/c小鼠,通过ELISA和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)检测重组tN蛋白的免疫原性. 结果:应用RT-PCR扩增到了预期705bp的tN蛋白基因;在E.coli BL21内,携带tN蛋白基因的重组质粒能够以可溶性表达形式诱导表达重组tN蛋白;该蛋白在体外可以与猪抗PEDV抗体特异性结合,能够诱导小鼠产生特异性抗体. 结论:应用原核表达系统实现了截短猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的可溶性表达,该蛋白具有良好的完全抗原活性.

摘要： 随着奶牛集约化养殖程度不断提高，奶牛病毒性疾病的感染率也在逐年上升牛干扰素α(Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏好性对BoIFN-α基因进行子优化.将优化后的BoIFN-α成熟蛋白基因分别克隆到表达载体pET-28a、PET30a和pColdⅡ载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.优化后的BoIFN-α基因在3种载体中均获得可溶性表达,但以在载体pColdⅡ中获得的可溶性表达量最高.对重组菌rBoIFN-α-pColdⅡ/BL21的表达条件进行优化,在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15°C,诱导时间为9h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高,达36 mg/L菌液.重组BoIFN-α在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106 U/mg.

摘要： 干扰素是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能的细胞因子，能通过多种机制抑制病毒生长，促进免疫细胞活性。牛干扰素α(Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏好性对BoIFN-α基因进行子优化.将优化后的BoIFN-α成熟蛋白基因分别克隆到表达载体pET-28a、PET30a和pCold Ⅱ载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.优化后的BoIFN-α基因在3种性表达量最载体均获得可溶性表达,但以在载体pCold Ⅱ中获得的可溶高.对重组菌rBoIFN-α-pCold Ⅱ/BL21的表达条件进行优化,在IPTG浓度为0.64mmol/L,诱导温度为15°C,诱导时间为9h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高,达36mg/L菌液.重组BoIFN-α在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg.

摘要： 人畜共患病一直是危害人类健康和社会发展的重要因素,科学地研究行之有效的防控手段是积极的解决策略.重组蛋白是将目的基因克隆到表达载体上,并转入宿主细胞体内得以表达的蛋白质分子.本文就近年来发展迅猛的重组蛋白技术,讨论了如何提高重组蛋白的可溶性表达量,并对重组蛋白在人畜共患病上的应用进行了简单的介绍.防控人畜共患病是一项长期而艰巨的任务,重组蛋白将会随着研究的深入和技术的成熟具有更广阔的发展前景.

摘要： 目的:通过用改造过的E.clon BL/21工程菌株来实现对融合蛋白TAT-tCNTF的可溶性表达,并对获得的蛋白进行活性鉴定.方法:使用转化入PBV220-TAT-tCNTF的工程菌株对目标蛋白进行表达,产物过阴离子交换柱,并经WESTERN-BLOT和TF-1细胞增殖实验鉴定目的蛋白的活性.结果:目的蛋白在菌株中大量表达,其中约40％左右的蛋白以可溶的形式表达,经纯化后的蛋白产率为2mg.L-1,经WESTERN-BLOT和TF-1细胞增殖实验鉴定显示目的蛋白保留了CNTF的活性,并具有比rhCNTF更好的促TF-1细胞增殖的效应.结论:本方法实现了TAT-tCNTF蛋白的部分可溶性表达,为其扩大生产和进一步开发奠定了基础.

摘要： 淀粉样β蛋白(Amyloid-βprotein,Aβ)聚集沉淀是引起阿尔兹海默症(Alzheimer's disease,AD)的主要原因.目前绝大多数Aβ主要利用固相多肽合成方法获得.虽然该方法获得的多肽价格便宜,但合成的Aβ存在纯度较低,含有大量Aβ片段或残基,这些均大大影响了Aβ聚集特性.利用生物技术表达纯化Aβ可以有效克服以上缺点,但由于高疏水性Aβ具有易聚集沉淀的特性且聚集体具有较强的细胞毒性,因此很难在大肠杆菌中高效表达可溶性Aβ.基于上述问题,本研究报道了一种在大肠杆菌中以麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)为融合蛋白的Aβ42高效可溶表达和纯化方法.为获得Aβ42单体,在MBP和Aβ42之间添加一个烟草蚀纹病毒蛋白酶切位点(TEV).同时为进一步提高酶切效率,在酶切位点和MBP之间添加一段由(NANP)3构成的可溶性连接区.将以上片段连接形成融合蛋白表达,这样既增加了融合蛋白的溶解性,同时又降低了Aβ聚集体对宿主的毒性影响.在大肠杆菌中表达获得可溶性的MBP-Aβ42融合蛋白,首先利用MBP亲和层析柱分离获得融合蛋白MBP-Aβ42;然后利用rTEV蛋白酶切除MBP标签,凝胶过滤层析获得单峰,收集样品并经SDS-PAGE凝胶电泳、蛋白印迹和MALDI-TOF质谱鉴定目标产物为Aβ42.产量约为20mg/L,远高于现有生物表达Aβ42的产量.利用该方法可高效表达MBP-Aβ42融合蛋白,获得高纯度Aβ42,为Aβ42聚集特性研究及抗AD药物的筛选提供支持.

摘要： 环化肽是一类由植物内源基因编码的短肽,具有杀灭昆虫、线虫和一些软体动物的生物活性,具有广泛的应用价值;此外,将非环化肽进行环化可明显提高产物肽的稳定性,在医药工程中可用来增强抗菌肽的稳定性.从植物体内直接提取环化肽的成本较高,且可直接提取的环化肽种类有限.天冬酰胺内切酶是其中一类能催化合成肽体外环化的蛋白酶，来源于植物，但在植物体内，包括野生宿主和其它转基因植物，其表达量都极低，而且生产周期长，提取方法繁琐。因此，希望能利用大肠杆菌来表达重组AEPs，对其进行大量生产。

摘要： 目的:克隆刚地弓形虫强毒RH株的免疫作图蛋白1(IMP1),并在大肠埃希菌内进行重组表达、纯化和鉴定.rn 方法:以刚地弓形虫RH株的cDNA为模板,PCR(聚合酶链反应)扩增IMP1基因的完整开放阅读框(ORF序列)并进行TA克隆,对突变位点采用重叠PCR法修复,构建重组表达载体pET28b-IMP1并转化大肠埃希菌E.coli BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达IMP1重组蛋白,并通过梯度试验筛选最优表达条件、测定蛋白可溶性,通过镍柱亲和层析纯化IMP1重组蛋白,Westem blot(蛋白质印迹法)验证.rn 结果:成功克隆并修正了免疫作图蛋白IMP1的全长序列,成功构建了原核表达重组质粒pET28b-IMP1,重组蛋白的最佳表达条件为20°C下0.3mMIPTG诱导6h;成功纯化并鉴定了可溶性IMP1全蛋白.rn 结论:新型强毒弓形虫RH株的免疫作图蛋白IMP1可在大肠埃希菌中高效可溶性表达.

摘要： 目的:人弹性蛋白生物相容性好、具有良好物理化学特性,是近年来生物材料研究领域的热点之一.研究通过建立类人弹性蛋白原核表达载体及诱导表达,探讨利用基因工程手段大规模生产类人弹性蛋白、制备支架材料的可行性.rn 方法:全基因合成上游引入NcoI和下游引入XhoI限制性内切酶位点的类人弹性蛋白核心序列[(VAPGVG) 3S]4的编码序列,通过定向递归连接技术构建[(VAPGVG)3S]32基因编码序列.利用NcoI和XhoI双酶切从重组克隆载体中回收[(VAPGVG)3S]32基因编码序列,与NcoI和XhoI双酶切处理的线性化载体DNA分子pET28a(+)重组,重组质粒在大肠杆菌BL21 (DE3)诱导表达,以SDS-PAGE及Western blotting分析表达结果.通过发酵、纯化获得类人弹性蛋白,冻干后获得支架材料.rn 结果:NcoI和XhoI双酶切分析及序列测定结果表明，利用定向递归连接技术成功将[(VAPGVG) 3S]4核心序列拷贝数渐次增加，并分别克隆至相应载体中。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显[(VAPGVG) 3S]32基因编码序列在100Pg/mL IPTG诱导下，可以在宿主细胞BL21 (DE3)中高效表达。类人弹性蛋白冻干后，可以制备获得海绵状支架材料。rn 结论:利用定向递归连接技术可以方便构建任意长度类人弹性蛋白编码序列，构建的基因序列可以在大肠杆菌中高效表达，获得的类人弹性蛋白可被制成海绵状支架材料。

摘要： 目的:人弹性蛋白生物相容性好、具有良好物理化学特性,是近年来生物材料研究领域的热点之一.研究通过建立类人弹性蛋白原核表达载体及诱导表达,探讨利用基因工程手段大规模生产类人弹性蛋白、制备支架材料的可行性.rn 方法:全基因合成上游引入NcoI和下游引入XhoI限制性内切酶位点的类人弹性蛋白核心序列[(VAPGVG) 3S]4的编码序列,通过定向递归连接技术构建[(VAPGVG)3S]32基因编码序列.利用NcoI和XhoI双酶切从重组克隆载体中回收[(VAPGVG)3S]32基因编码序列,与NcoI和XhoI双酶切处理的线性化载体DNA分子pET28a(+)重组,重组质粒在大肠杆菌BL21 (DE3)诱导表达,以SDS-PAGE及Western blotting分析表达结果.通过发酵、纯化获得类人弹性蛋白,冻干后获得支架材料.rn 结果:NcoI和XhoI双酶切分析及序列测定结果表明，利用定向递归连接技术成功将[(VAPGVG) 3S]4核心序列拷贝数渐次增加，并分别克隆至相应载体中。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显[(VAPGVG) 3S]32基因编码序列在100Pg/mL IPTG诱导下，可以在宿主细胞BL21 (DE3)中高效表达。类人弹性蛋白冻干后，可以制备获得海绵状支架材料。rn 结论:利用定向递归连接技术可以方便构建任意长度类人弹性蛋白编码序列，构建的基因序列可以在大肠杆菌中高效表达，获得的类人弹性蛋白可被制成海绵状支架材料。

摘要： 本发明属于次磷酸盐生产技术领域，具体涉及利用磷化氢、双氧水和氨(或可溶性金属氢氧化物)连续制备次磷酸盐的生产系统及方法。系统包括：磷化氢稳压罐、反应塔、双氧水进料罐、减脉冲罐、次磷酸盐接收罐、循环泵、双氧水计量泵、次磷酸盐输料泵、换热器、氨气分配台或碱溶液分配台。本发明实现了以利用磷化氢，双氧水和氨(或可溶性金属氢氧化物)连续制备次磷酸盐。该方法PH

摘要： 本发明涉及水及物体表面微生物处理领域，具体为可溶性银锌复合物及制备方法、可溶性银锌抗菌剂、片剂及制备方法。本发明提供的可溶性银锌复合物，主要由螯合剂，银盐和可溶性锌盐制成。首先在银盐中加入螯合剂和水，制成溶液后再加入可溶性锌盐混合，得到可溶性银锌复合物。本发明提供的可溶性银锌抗菌剂包括上述的可溶性银锌复合物和任选的辅料；按照片剂的制备方法可得到可溶性银锌抗菌片剂。本发明提供的可溶性银锌抗菌片剂制成的溶液，具有见光不变色，遇Cl‑不形成AgCl、遇OH‑不形成AgOH及Ag2O的沉淀，性能稳定，抗菌效果显著。而且便于运输，携带方便，使用浓度可根据需要随意配比，可应用在生活，社会和工业的方方面面。

摘要： 本发明提供了一种可溶性杀菌玻璃和可溶性杀菌玻璃的制备方法。可溶性杀菌玻璃的材料包括：氧化银，0.1质量份至5质量份；氧化硼，1质量份至20质量份；氧化钙，10质量份至30质量份；氧化磷，30质量份至70质量份。本发明能够提高可溶性杀菌玻璃中作为杀菌剂的银粒子的缓释性能，使得银粒子以合理的速率缓释，由此提高可溶性杀菌玻璃的杀菌效率和杀菌效果。

摘要： 本发明提供了一种可溶性杀菌玻璃和可溶性杀菌玻璃的制备方法。可溶性杀菌玻璃的材料包括：氧化锌，0.2质量份至10质量份；氧化硼，1质量份至20质量份；氧化钙，10质量份至30质量份；氧化磷，30质量份至70质量份。本发明能够提高可溶性杀菌玻璃中作为杀菌剂的锌离子的缓释性能，使得锌离子以合理的速率缓释，由此提高可溶性杀菌玻璃的杀菌效率和杀菌效果。

摘要： 本发明提供了一种形成可溶性膜的组合物、可溶性膜及其制备方法。该组合物至少包括乙烯丁烯共聚物和其它聚烯烃弹性体，其中，基于100重量份的组合物，乙烯丁烯共聚物的用量为60～95份，其它聚烯烃弹性体的用量为5～40份，其它聚烯烃弹性体为α‑烯烃与乙烯形成的共聚物，且其它聚烯烃弹性体与乙烯丁烯共聚物不同。以其为原料制得的可溶性包装膜表现出了优异的力学性能、室温以及低温下的储存稳定性，并且在将该薄膜浸入油溶液后均可以良好的溶解且不会有可见的薄膜碎片。

摘要： 本发明提供了改善的可溶性固体制品。此类可溶性制品包括柔性可溶性多孔片材的多个层，其中包含固体颗粒的涂料组合物存在于所述固体制品中的至少一个片材的至少一个内部表面上。本发明还提供了一种用于制备此类固体制品的方法。

摘要： 本发明公开了一种不可溶性和可溶性纤维改善便秘的配方及制备方法，包括可溶性纤维、不可溶性纤维、甜味剂以及植物油，所述可溶性纤维包括芸豆膳食纤维素、黑豆膳食纤维素、红豆膳食纤维素、燕麦膳食纤维素和荞麦膳食纤维素，所述不可溶纤维包括芹菜纤维、竹笋纤维、柠檬、胡萝卜纤维。本发明通过将不可溶性纤维和可溶性纤维结合在一起，这样即可较好的改善食用者的便秘程度，其中由于添加了少量的可溶性纤维和大量的不可溶性纤维，其中的可溶性纤维能够在消化道里溶解并形成凝胶，可保持大便柔软，达到了润肠通便的效果，同时其中的不溶性纤维在消化系统中不会分解，吸收肠道内部的水分，可以增加粪便体积，从而促进结肠蠕动。

摘要： 本发明提供了一种可溶性铝镁合金及其制备方法、可溶性铝镁合金管材及其制备方法和应用，涉及合金材料技术领域。本发明提供的可溶性铝镁合金，以质量百分比计，化学成分包括：Si 0.1～0.3％，Fe 0.3～0.7％，Cu 0.1～0.3％，Mn 0.5～0.8％，Mg 6.0～15.0％，Cr 0.03～0.12％，Ni 0.03～0.1％，Zn 0.1～0.25％，Ti 0.15～0.25％，Zr 0～0.05％，稀土元素≤0.15％，余量为Al。本发明提供的合金在强酸或强碱中快速溶解，也可以在自然环境下缓慢溶解，溶解后的产物在液体中呈悬浮颗粒存在，不影响油气的产出，不会堵塞油管及附着在油管壁上。

摘要： 本发明属于次磷酸盐生产技术领域，具体涉及利用磷化氢、双氧水和氨(或可溶性金属氢氧化物)连续制备次磷酸盐的生产系统及方法。系统包括：磷化氢稳压罐、反应塔、双氧水进料罐、减脉冲罐、次磷酸盐接收罐、循环泵、双氧水计量泵、次磷酸盐输料泵、换热器、氨气分配台或碱溶液分配台。本发明实现了以利用磷化氢，双氧水和氨(或可溶性金属氢氧化物)连续制备次磷酸盐。该方法PH3转化率高，生产安全，可制备得到98％以上的次磷酸盐。

摘要： 本发明公开了一种可溶性表达系统及其在蛋白可溶性表达中的应用。本发明人筛选不同来源的蛋白质二硫键异构酶，并将其与巯基氧化酶构建到同一个启动子控制下。通过添加氮末端标签策略优化这两种蛋白的表达，构建可溶性表达系统。在大肠杆菌中，该系统与目的蛋白重组猪羧肽酶原B共表达后，可实现猪羧肽酶原B的可溶性表达，大大减少了包涵体的形成。该可溶性表达系统也可用于其它目的蛋白，例如胰蛋白酶原的可溶性表达，具有促进目的蛋白可溶性表达的通用性。本发明内容在重组蛋白生产和新酶原件筛选等领域具有应用前景。