蛋白磷酸酶

摘要： 【目的】为探明苹果属植物响应脱落酸信号的分子机制。【方法】根据拟南芥PP2C A亚家族基因编码区序列进行同源性分析,利用RT-PCR技术,从‘平邑甜茶’cDNA中得到并克隆了3种MhPP2C基因,随后利用生物信息学手段分析其序列特征。【结果】分离得到的3种PP2C A亚家族基因MhABI1、MhABI2和MhHAB分别编码552,552和544个氨基酸的亲水性蛋白,其预测表观相对分子量分别为59.38、59.44、58.26 kDa,理论等电点为4.52~5.03;其中1个稳定蛋白和2个不稳定蛋白。这3个蛋白均含有PP2C超家族保守功能结构域,无跨膜结构及信号肽序列,主要定位于细胞核。【结论】这3种苹果属PP2C A亚家族基因可能在苹果砧木‘平邑甜茶’ABA信号网络中发挥重要作用。

摘要： 植物蛋白磷酸酶2C(PP2C)能够通过影响植物体内多种生物学过程在环境胁迫响应中发挥重要作用。为研究栽培大豆PP2C家族成员在盐胁迫中的功能,通过生物信息学手段结合转录组学分析对栽培大豆PP2C家族进行了系统探究。在栽培大豆中共鉴定出126个PP2C家族成员,并将其在进化树上分为11个亚家族,同一亚家族的成员具有类似的基因和蛋白结构。盐胁迫转录组测序结果显示,大豆126个GmPP2C基因中有9个是差异表达基因,其中,GmPP2C 41、GmPP2C 48、GmPP2C 72、GmPP2C 84、GmPP2C 89、GmPP2C 107和GmPP2C 113在盐处理后表达水平上调,GmPP2C 27和GmPP2C 114在盐处理后表达下调。qRT-PCR结果显示,GmPP2C 89和GmPP2C 113在盐处理6 h表达水平上调最高。GO富集分析发现,9个差异基因主要具有离子结合和磷酸酶活性;Y2H结果显示,GmPP2C113和GmPP2C47能够互作。以上结果将为进一步研究大豆PP2C家族成员在盐胁迫响应中的功能与分子机制提供理论依据,为大豆耐盐性遗传改良提供重要候选基因。

摘要： 目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对阿尔茨海默病(AD)小鼠细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)5、细胞外蛋白调节激酶(MAPK)1、蛋白磷酸酶(PP)1的调控作用。方法淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白(PS)1/Tau三转基因AD雄性小鼠45只,按体重随机分为5组,分别为模型组、阳性对照组(0.150 mg/kg石杉碱甲)、TSG低剂量组(0.033 g/kg TSG)、TSG中剂量组(0.100 g/kg TSG)、TSG高剂量组(0.300 g/kg TSG),再选取C57BL/6J雄性小鼠作为正常对照组,每天灌胃1次,连续给药60 d。采用免疫组织化学(IHC)染色法检测各组大脑皮层、海马P39蛋白表达水平;Western印迹检测各组脑组织CDK5、MAPK1及PP1蛋白表达水平;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组CDK5、MAPK1及PP1 mRNA转录水平。结果与正常对照组比较,其余各组海马区及大脑皮层P39平均光密度值和阳性神经元细胞总数目显著增多、CDK5和MAPK1 mRNA及蛋白表达水平显著增高,PP1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);与模型组比较,TSG各剂量组海马区及大脑皮层P39平均光密度值和阳性神经元细胞总数目显著降低,CDK5、MAPK1 mRNA及蛋白表达水平显著降低,PP1 mRNA及蛋白表达水平显著增高(均P<0.05)。结论TSG对APP/PS1/Tau AD小鼠具备一定的改善作用,其机制可能与下调CDK5、MAPK1转录及表达、上调PP1转录及表达、抑制Tau蛋白磷酸化有关。

摘要： 【目的】克隆澳洲坚果丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PP1)家族基因(MiSTPP6),并分析其不同组织及低温胁迫下的表达模式,为澳洲坚果PP1家族基因的抗寒分子机制提供理论依据。【方法】基于澳洲坚果转录组测序结果,利用RT-PCR技术克隆MiSTPP6基因,对其序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR检测其在不同组织及低温胁迫下的表达情况。【结果】从澳洲坚果中克隆获得MiSTPP6基因(GenBank登录号为MT374553),其cDNA全长2129 bp,最大的阅读框(ORF)长度为948 bp,编码315个氨基酸残基,含有PP1蛋白家族的典型结构域(MPP_PP1_PPKL)和特征性序列(LRGNHE)。MiSTPP6蛋白为稳定的亲水性蛋白,以丝氨酸磷酸化为主,可能定位于细胞质,属于非分泌型蛋白或膜蛋白,与已知植物PP1蛋白的氨基酸序列具有很高的相似性。MiSTPP6蛋白的二级结构由α-螺旋(占40.00%)、无规则卷曲(占32.38%)、延伸链(占18.41%)和β-转角(占9.21%),其三级结构与模板蛋白4v0u.1.A的结构相似度为80.60%,GMQE值为0.89。MiSTPP6基因在根、茎、叶、刚开放的小花和谢花后30~45 d的小果中均有表达,其中,MiSTPP6基因在刚开放的小花中的相对表达量最高。4°C低温胁迫后0.5~24.0 h,MiSTPP6基因在澳洲坚果苗期叶片中的相对表达量较对照明显下调,整体上呈持续下降的趋势。【结论】MiSTPP6属于PP1家族基因,具有组织表达特异性,可能在澳洲坚果抗寒分子机制中发挥重要的调控作用。

摘要： 目的 克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)基因DoPP2C2并进行生物信息学和表达模式分析.方法 采用RACE和RT-PCR获基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 7.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助定量PCR检测基因表达模式.结果 分离到DoPP2C2基因(GenBank注册号KT957553),cDNA全长1 624 bp,编码一条由387个氨基酸组成的多肽,相对分子质量42.76×103,等电点7.03;DoPP2C2蛋白具有植物PP2Cs蛋白家族保守的2个蛋白磷酸酶结构域(91～152、216～376);该蛋白无信号肽或跨膜域,定位在细胞核,系亲水性蛋白;DoPP2C2蛋白与多种植物PP2C蛋白一致性较高(47.8％～73.4％);DoPP2C2隶属于拟南芥和水稻PP2C蛋白家族进化树的A亚族,与OsPP2C30亲缘关系较近;DoPP2C2基因表达有器官差异,根和茎中相对表达量为叶的0.76和0.59倍.结论 获得一个A亚族铁皮石斛蛋白磷酸酶DoPP2C2基因全长及分子特征,为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育中的分子作用奠定基础.

摘要： 为了明确GsSnRK1.1蛋白激酶在野生大豆生长发育中的具体调控机制,该研究利用酵母二元杂交技术发现了蛋白激酶GsSnRK1.1的互作蛋白GsPP2CA和GsPKA,利用原核表达系统对GsSnRK1.1、GsPP2CA和GsPKA进行了表达和纯化用于Pull-down和体外磷酸化分析,并在酵母中研究了GsPP2CA和GsPKA对GsSnRK1.1蛋白活性的调控功能.结果 表明:(1)GsSnRK1.1与GsPP2CA和GsPKA具有物理互作关系,Phos-Tag和pPKDsub特异性磷酸化抗体检测发现,GsSnRK1.1的Thr176磷酸化可以被蛋白磷酸酶GsPP2CA去磷酸化,GsPKA可能会磷酸化GsSnRK1.1的其他潜在磷酸化位点,进而竞争性抑制GsSnRK1.1的Thr176位点的磷酸化水平.(2)将这些基因回补进入酵母ARY330 (-snf1/-reg1/-sit4)突变株系中,发现共转化GsSnRK1.1和GsPP2CA或GsPKA的转化子可在非葡萄糖碳源和高葡萄糖碳源的选择培养基上正常生长,GsPP2CA、GsPKA可以替代Reg1和Sit4降低GsSnRK1.1过度磷酸化对酵母细胞产生的毒害作用,进而调控GsSnRK1.1对非发酵型碳源的利用.

摘要： 蛋白磷酸酶是一类以蛋白质为底物使其去磷酸化的酶,与蛋白激酶的磷酸化作用刚好相反,二者共同调节生物体内各种蛋白质的磷酸化水平,在生物信号传递中发挥着重要的作用.最近的研究表明,一些蛋白磷酸酶的功能异常与肿瘤、糖尿病和自身免疫性疾病等都有着密切的关联.不同于蛋白激酶的研究,目前对于蛋白磷酸酶在体内调控机制的理解尚浅,且缺乏高活性和特异性的小分子蛋白磷酸酶抑制剂作为化学探针,因此以蛋白磷酸酶为靶标开发治疗药物的研究一直进展缓慢.近年来,一系列作用于蛋白磷酸酶催化位点以外的小分子变构抑制剂逐渐被发现,为蛋白磷酸酶的研究带来新的进展,综述这些新的蛋白磷酸酶变构抑制剂的研究进展,重点介绍与疾病相关且作用位点明确的小分子抑制剂,简要介绍其发现过程,以期为更多的蛋白磷酸酶变构抑制剂的研究工作带来启发.

摘要： 蛋白磷酸化修饰是植物细胞信号调控的普遍机制.植物-病原微生物互作过程中,关键调控蛋白的磷酸化状态影响免疫信号的激活.多种病原微生物通过干扰宿主蛋白的磷酸化状态攻击免疫系统,以提高致病性.该文对植物免疫调控过程中关键元件的磷酸化修饰及其在免疫信号中的调控作用进行了综述.研究植物-病原菌互作过程中关键蛋白的磷酸化修饰,有助于深入探讨植物-病原微生物互作的分子机理.该文将为寻找广谱抗病的新途径提供理论依据.

摘要： 目的:探讨蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)是否参与豚鼠心肌L-型钙通道的run-down 过程及其可能的作用机制.rn 方法:通过采用胶原酶法分离豚鼠心肌细胞、膜片钳单通道记录手段和蛋白纯化技术,在膜片钳内面向外记录模式下,分别给予PP1 inhibitor-2(PP1组)、fostriecin(PP2A组)和cyclosporinA+cyclophilinA(PP2B组)预处理10分钟后,再给予钙调蛋白(CaM)和三磷酸腺苷(ATP),观察其对L-型钙通道活性和开关动力学的影响.rn 结果:PP1组、PP2A组和PP2B组分别使L-型钙通道的活性恢复到原来的193.94%, 183.41%和7.78%，统计学上均有显著性差异(P＜0.05).PP1组L-型钙通道的快/慢开放时间常数从0.89ms/11.55ms明显延长到2.21ms/21.71ms(P＜0.05)，而快/慢关闭时间常数则从1.19ms/28.17ms缩短到0.81ms/21.67ms;PP2A组L-型钙通道的快馒开放时间常数基本没有改变，即0.81ms/12.22ms到0.92ms/12.04ms，而通道的快/慢关闭时间常数则从2.13ms/24.45ms明显缩短到1.16ms/17.98ms(P＜0.05);PP2B组L-型钙通道的快/慢开放时间常数从1.03ms/10.04ms缩短到0.94ms/3.58ms，且快/慢关闭时间常数也从1.39ms117.40ms缩短到1.30ms112.07ms.rn 结论:PP1和PP2A参与豚鼠心肌L一型钙通道的run-down过程，且因两者对通道开关动力学的影响不同，提示PP1和PP2A在L一型钙通道上可能具有不同的去磷酸化位点。

摘要： 由特异蛋白激酶和蛋白磷酸酶共同参与的蛋白质可逆性磷酸化是许多细胞生物学过程中极其重要的调节机制,通过改变信号通路中许多关键蛋白质的性质和功能,如酶活性、细胞内定位等,调节细胞的增殖、分化和凋亡等重要的生理过程.机体存在多种蛋白激酶,分别有各自的特异调控机制,但相应的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶数量有限,这些蛋白磷酸酶的底物特异性调控是目前研究的热点。蛋白磷酸酶2A(Proteinphosphatase 2A,PP2A)是真核生物主要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,参与细胞的各种调节机制,包括信号转导途径、细胞周期进程、DNA复制、基因转录和蛋白翻译等.PP2A由核心酶和调节亚基组成.核心酶(PP2AD)由一个36kDa的催化亚基(C亚基,PPP2C)和一个65kDa的结构亚基(PR65,PPP2R1或A亚基)组成.PP2A核心酶通过结构亚基结合调节亚基形成全酶-三聚体复合物.

摘要： 前期研究证实蛋白磷酸酶(PP2A)可促进肾间质纤维化,而PP2A全酶的主要生物学功能是通过PP2Ac底物的去磷酸化而实现.Wnt/β-catenin是介导肾间质纤维化的一条重要途径,β-catenin的磷酸化下降在此途径中起促进作用.本次课题拟探讨PP2Ac对肾小管上皮细胞β-catenin的去磷酸化作用.

摘要： 蛋白磷酶2A(PP2A)是哺乳动物体内重要的Ser/Thr蛋白磷酸酶,参与了体内众多信号通路和生理过程的调节。本文采用实时定量PCR方法研究微囊藻毒素(MC)LR对正常人羊膜细胞FL(huMan amnioticcells)的PP2A各亚基在转录水平的影响。结果显示,在100、500、1000nM MCLR作用24h后,C亚基mRNA表达上升,A亚基下降,调节亚基B家族各亚基变化多样。

摘要： 砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用，它涉及一种砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用。其目的在于提供一种砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用。砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C的序列如序列表Seq ID No：1所示，氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示，该基因应用在提高植物抗旱性上。RcPP2C基因是与细胞信号转导通路中抗旱相关基因，将其转入植株中可提高其抗旱性，为培育耐旱的植物新品种，增强植物的抗逆性奠定基础，具有重要意义。本发明应用于分子育种领域。

摘要： 本发明公开了一种玉米酪氨酸蛋白磷酸酶基因及其编码蛋白与应用，目的是提供一种参与调控ABA生物合成的玉米酪氨酸蛋白磷酸酶及其编码基因与应用。本发明所提供的玉米酪氨酸蛋白磷酸酶编码基因ZmRSPTP1，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中的SEQ ID №：1；2)编码SEQ ID №：2蛋白质序列的核苷酸序列。本发明还提供了该基因的编码蛋白即玉米酪氨酸蛋白磷酸酶ZmRSPTP1。本发明的酪氨酸蛋白磷酸酶基因ZmRSPTP1在植物抗旱领域具有广阔的应用前景，可用于培育抗旱植物特别是抗旱玉米，其经济效益潜力巨大。

摘要： 本发明公开如式I所示基于蛋白磷酸酶5的磷酸酶募集嵌合体(PHORCs)化合物、其制备方法和医药用途。本发明的化合物可不同程度的去磷酸化胃癌MKN45细胞中的p‑ASK1，可以在体外、体内显著抑制ASK1活性，从而选择性地下调周期相关蛋白，具有细胞增殖抑制作用。其中化合物DDO‑3711的细胞增殖抑制作用明显优于ASK1小分子抑制剂TCASK10组及ASK1小分子抑制剂TCASK10和PP5小分子激活剂P5SA‑1联合给药组，可用于制备胃癌、结肠癌等相关疾病的治疗药物。

摘要： 砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用，它涉及一种砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用。其目的在于提供一种砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C及其编码蛋白和应用。砂藓蛋白磷酸酶2C基因RcPP2C的序列如序列表Seq ID No：1所示，氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示，该基因应用在提高植物抗旱性上。RcPP2C基因是与细胞信号转导通路中抗旱相关基因，将其转入植株中可提高其抗旱性，为培育耐旱的植物新品种，增强植物的抗逆性奠定基础，具有重要意义。本发明应用于分子育种领域。

摘要： 本发明涉及一种人的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶突变蛋白及其应用，将大量肿瘤患者作为研究病例，对病例进行基因检测并进行分析，确定出人的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶的突变蛋白，根据该人的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为人体肿瘤的基因诊断提供的指引作用，实现肿瘤的早诊断、早发现和相关治疗。

摘要： 本发明涉及人参皂苷在制药领域的应用。具体涉及在其作为蛋白磷酸酶2A抑制蛋白‑2的拮抗剂，更进一步公开了其作为蛋白磷酸酶2A抑制蛋白‑2的拮抗剂在制备消化系统癌症治疗药物中的应用。在试验中发现，该化合物在试验剂量下具有较高的安全性和对蛋白磷酸酶2A抑制蛋白‑2有良好的抑制作用，可用于消化系统癌症的治疗。

摘要： 本发明涉及一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白及其应用，将大量2型糖尿病患者和白血病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6的突变蛋白，根据该人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为2型糖尿病和白血病的基因诊断提供指引作用，实现2型糖尿病和白血病的诊断和治疗。

摘要： 本发明涉及受体型酪氨酸蛋白磷酸酶O亚型b前体突变蛋白及其应用，通过将大量癌症患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的受体型酪氨酸蛋白磷酸酶O亚型b前体的突变蛋白，根据该人的受体型酪氨酸蛋白磷酸酶O亚型b前体突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为癌症的基因诊断提供指引作用，为实现癌症的诊断和治疗提供理论基础。

摘要： 本发明公开了一种玉米酪氨酸蛋白磷酸酶基因及其编码蛋白与应用。其目的是提供一种参与调控ABA生物合成的玉米酪氨酸蛋白磷酸酶及其编码基因与应用。本发明所提供的玉米酪氨酸蛋白磷酸酶编码基因ZmRSPTP1，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中的SEQ ID №：1；2)编码SEQ ID №：2蛋白质序列的核苷酸序列；3)与序列表中的SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性的DNA序列。本发明还提供了该基因的编码蛋白即玉米酪氨酸蛋白磷酸酶ZmRSPTP1。本发明的酪氨酸蛋白磷酸酶基因ZmRSPTP1在植物抗旱领域具有广阔的应用前景，可用于培育抗旱植物特别是抗旱玉米，其经济效益潜力巨大。

摘要： 本发明公开了一种新的多肽——人蛋白磷酸酶1调控蛋白14.19,编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法,如恶性肿瘤,血液病,HIV感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种新的人蛋白磷酸酶1调控蛋白14.19的多核苷酸的用途。