小麦基因组SSR体系及反应条件优化研究

摘要

以小麦叶锈病抗病亲本TcLr45和感病亲本Thatcher为材料,探索影响SSR扩增结果的各因素(模板DNA、dNTP、引物、Taq酶)的最佳用量及不同引物的退火温度.结果表明:dNTP对扩增影响较大,Taq酶浓度在聚丙烯酰胺凝胶电泳检测时表现对扩增有一定影响,每对引物都有其扩增适合的退火温度.确立了适合小麦SSR分子标记研究的优化体系.最终确定总反应体系为25 μL,其中模板DNA 20～50 ng、dNTP 240 μmol/L、引物各0.2 μmol/L、Taq酶1.5 U.