小麦籽粒DNA提取方法的比较及SSR反应体系的优化研究

摘要

为了快速获得较高质量的DNA用于SSR分析,并建立一套稳定的SSR反应体系,以小麦单粒干种子为材料,比较了CTAB法和SDS法获得的DNA条带清晰度和RNA残留带的清晰度;同时,研究了模板DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度以及Taq酶用量对SSR结果的影响。结果表明,CTAB法微量提取小麦干种子DNA可获得理想的扩增结果;SSR的最佳反应体系是：模板DNA浓度为4.0～4.8ng·μL^（-1）,Taq酶用量为1U,引物浓度为50～200nmol·L^（-1）,dNTPs浓度为50～500μmol·L^（-1）。