间皮细胞

摘要： 目的:探讨联合检测细胞角蛋白19(CK19)、间皮细胞(MC)、甲状腺过氧化物酶(TPO)及神经细胞黏附分子(NCAM-1,又称CD56)在甲状腺乳头状癌病理诊断中的意义。方法:选择2020年1月至2021年11月武警四川省总队医院收治的102例甲状腺乳头状癌患者和98例甲状腺良性病变患者作为研究对象。将其中98例甲状腺良性病变患者纳入对照组,将其中102例甲状腺乳头状癌患者纳入观察组。对比两组患者CK19、MC、TPO、CD56的检测结果,总结CK19、MC、TPO、CD56联合检测诊断甲状腺乳头状癌的效能。结果:观察组CK19、MC的阳性检出率均高于对照组,TPO、CD56的阳性检出率均低于对照组,差异有统计学差异(P<0.05)。观察组CK19、MC、TPO、CD56联合检测的阳性检出率高于对照组,差异有统计学差异(P<0.05)。CK19、MC、TPO、CD56联合检测诊断甲状腺乳头状癌的灵敏度、特异度、准确率均显著高于四项指标单独检测。结论:将CK19、MC、TPO、CD56联合应用到甲状腺乳头状癌患者的病理诊断中,能提升诊断的准确率,值得推广应用。

摘要： 胃肠道癌腹膜转移是目前临床治疗的最大难题,解决该难题的根本之道在于临床医生准确把握胃肠道癌腹膜转移的核心细胞病理学机制,基本掌握分子病理学机制,并融会贯通地运用到每一例患者诊治的临床决策过程中,做到"防""治"并举,积极预防、主动治疗。与临床治疗决策密切相关的胃肠道癌腹膜转移的核心细胞病理学机制有4点:(1)腹腔游离癌细胞或微癌灶定植于腹膜,对腹膜间皮细胞造成不可逆病理性损害;(2)定植的癌细胞进一步侵袭腹膜特定结构乳斑,启动加速侵袭性生长过程;(3)腹膜间质纤维化过程加重腹膜的结构性破坏;(4)癌细胞与乳斑中免疫细胞的相互作用,形成促进腹膜转移癌生长的容受性免疫微环境。这4条核心细胞病理学机制互为因果,相互促进,构成腹膜转移发展的恶性循环。临床医生只要准确把握这4点,就有可能掌握临床诊治决策先机,将应对性被动治疗变为预防性主动治疗,改善胃肠道癌腹膜转移临床诊治现状。

摘要： 目的 探讨肿瘤源性外泌体(tumor-derived exosomes,TDEs)通过miR-106a-Smad7调控间皮细胞间质性转化(mesotheli-al-to-mesenchymal transition,MMT)影响胃癌腹膜转移的机制.方法 人胃癌细胞系AGS分离外泌体,转染miR-106a mimic,与人腹膜间皮细胞HMrSV5共培养,EdU检测HMrSV5细胞增殖活力,Western blot法检测Smad7、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达.给予TGF-β抑制剂GW788388,EdU检测HMrSV5细胞增殖变化,Western blot法检测SMA、Fibronectin表达.给予Smad7过表达质粒,Western blot法检测MMT相关蛋白表达,Transwell实验检测HMrSV5迁移能力.结果 AGS外泌体与HMrSV5共培养后,HMrSV5增殖活力下降,合并miR-106a mimic处理后,HMrSV5增殖活力进一步下降.Western blot显示,外泌体处理后Smad7表达下降,合并miR-106a mimic处理后,Smad7表达进一步下降;与此同时,E-cadherin表达下降,N-cadherin表达升高.TGF-β干预后,EdU检测显示HMrSV5细胞增殖活力下降,但给予GW788388后,HMrSV5细胞增殖活力有所恢复,Western blot显示TGF-β干预后SMA、Fibronectin表达升高,但给予GW788388后,SMA,Fibronectin表达逆转.给予Smad7过表达,Western blot显示SMA、Fibronectin表达下降,Transwell显示HMrSV5迁移能力下降(P<0.001).结论 胃癌细胞外泌体影响腹膜转移的机制可能有间皮细胞MMT转化,而间皮细胞MMT转化可能与外泌体介导的miR-106a转运靶向Smad7激活TGF-β信号通路相关.

摘要： 胃肠道癌腹膜转移是目前临床治疗的最大难题,解决该难题的根本之道在于临床医生准确把握胃肠道癌腹膜转移的核心细胞病理学机制,基本掌握分子病理学机制,并融会贯通地运用到每一例患者诊治的临床决策过程中,做到“防”“治”并举,积极预防、主动治疗.与临床治疗决策密切相关的胃肠道癌腹膜转移的核心细胞病理学机制有4点:(1)腹腔游离癌细胞或微癌灶定植于腹膜,对腹膜间皮细胞造成不可逆病理性损害;(2)定植的癌细胞进一步侵袭腹膜特定结构乳斑,启动加速侵袭性生长过程;(3)腹膜间质纤维化过程加重腹膜的结构性破坏;(4)癌细胞与乳斑中免疫细胞的相互作用,形成促进腹膜转移癌生长的容受性免疫微环境.这4条核心细胞病理学机制互为因果,相互促进,构成腹膜转移发展的恶性循环.临床医生只要准确把握这4点,就有可能掌握临床诊治决策先机,将应对性被动治疗变为预防性主动治疗,改善胃肠道癌腹膜转移临床诊治现状.

摘要： 间皮瘤是一种源自于覆盖内脏表面的薄层组织(间皮细胞)的癌症,其中,弥漫性恶性胸膜间皮瘤是间皮瘤最常见的类型(81%)。该病最常患病的部位是胸膜;较少见于腹膜;在罕见的情况下会出现在心包膜或睾丸鞘膜。胸膜间皮瘤患者可有因肺中液体潴留造成的呼吸困难、腹部肿胀、胸壁疼痛、咳嗽、疲倦以及体重减轻等症状。这些症状出现的速度一般而言较为缓慢。

摘要： 目的 探讨人胃癌细胞系AGS外泌体及其包裹miR-106a对人腹膜间皮细胞系HMrSV5表型的影响.方法 采用离心法分离AGS细胞来源外泌体,与HMrSV5细胞共培养,并加入外泌体分泌抑制剂GW4869.采用qPCR检测miR-106a表达量;EdU检测HMrSV5细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡.AGS细胞转染miR-106a mimic或inhibitor,共培养后利用Transwell小室法检测HMrSV5细胞迁移;Western blot检测Smad7、TIMP2、MMP2、MMP9、α-SMA蛋白表达.TGF-β处理HMrSV5细胞,共培养后Western blot检测Smad7、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达.结果 AGS细胞高表达外泌体miR-106a(P<0.01);与HMrSV5细胞共培养后明显抑制其增殖,促使早期凋亡率增加(P<0.05).转染miR-106a mimic后,AGS细胞源外泌体促进HMrSV5细胞迁移(P<0.001),同时Smad7、TIMP2表达下降,MMP2、MMP9、α-SMA表达升高,阻断miR-106a传递后这一作用减弱.TGF-β处理后,Smad7表达减弱,Smad2/3、p-Smad2/3表达升高.结论 AGS细胞来源外泌体能够促进HMrSV5细胞凋亡、抑制增殖、增强迁移,可能与转运miR-106a靶向Smad7/TIMP2有关.

摘要： 目的:对间皮细胞的特性、功能和腹膜粘连的形成过程分析归纳,全面探讨间皮细胞在腹膜粘连中发挥的作用。方法:计算机检索Pubmed、中国知网、万方等数据库自2018年1月到2021年10月份收录的与间皮细胞和腹膜粘连有关的文献。对以下检索词任意排列组合,检索词为"间皮细胞,腹膜粘连,术后粘连,间皮间充质转化,巨噬细胞,防粘连,机制",共选取53篇文献进行总结归纳。结果:间皮细胞是分布在腹膜表面的细胞,同时具有间充质细胞和上皮细胞的特点,间皮愈合过程不同于上皮愈合,它遵循一种"双峰机制"。当腹膜损伤,间皮层受损,间皮细胞通过不同的受体识别各种炎性反应并释放多种细胞因子、趋化因子、细胞粘附分子、生长因子等炎症介质,经过自分泌、旁分泌等途径诱导自身以及中性粒细胞、巨噬细胞等其他类型细胞增殖、分化和迁移。此外间皮细胞组织型纤溶酶原激活物的分泌减少,纤溶酶原激活物抑制剂-1的释放增加,同时发生间皮-间充质转化,转变为成纤维细胞,产生大量的纤维蛋白、胶原蛋白,胶原形成而机化最终发生腹膜粘连。结论:间皮细胞在腹膜粘连中具有关键性作用,可以寻找一些能促进间皮细胞生长、抑制其间皮-间充质转化、促进其组织型纤溶酶原激活物分泌或抑制纤溶酶原激活物抑制剂-1释放的材料或药物,提升其在粘连预后中的功效,以降低术后粘连并发症的发生率。

摘要： 目的:创建发生腹膜转移早期时结直肠癌对人腹膜间皮细胞HMrSV5的损伤模型,探讨结直肠癌细胞对腹膜间皮细胞的影响及凋亡相关蛋白的表达.方法:将人结直肠癌细胞培养液上清加入到人腹膜间皮细胞系HMrSV5.共培养后,光镜下观察间皮细胞的形态变化、CCK-8检测增殖改变、流式细胞仪判断凋亡比例、Western-blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax、Transwell小室检测受损间皮细胞对结直肠癌细胞的影响.结果:结直肠癌细胞培养液上清接触间皮细胞后,发生了形态改变,细胞的增殖受到了抑制,凋亡蛋白Bcl-2与Bax表达失调.同时,受损间皮能够促进结直肠癌细胞的迁移.结论:结直肠癌细胞在发生腹膜转移的早期时候,就可以通过其分泌物促使间皮细胞发生凋亡,凋亡的发生与Bcl-2和Bax的失调有关;同时受损间皮能够反作用于结直肠癌细胞,促进其迁移.我们从中意识到,保护间皮细胞免受损伤,在预防和治疗结直肠癌腹膜转移中或许能起到一定的作用.

摘要： 目的:癌细胞分泌的多种细胞因子的影响而被破坏.目前的研究发现，在癌细胞粘附到间皮细胞之前间皮细胞就已经发生了改变:间皮细胞变圆或半圆形，进而细胞脱落导致间皮下结构暴露，形成裸区，癌细胞进而粘附种植。胃癌细胞诱导闻莫间皮细胞的损伤改变很可能与细胞凋亡相关。材料与方法:腹膜间皮细胞与胃癌细胞共培养，分别在光镜、电镜下观察间皮细胞形态，流式细胞仪检侧间皮细胞调亡情况，western检测人间皮细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、促凋亡蛋白Bax的表达情况。结果:(1)对间皮细胞进行光镜和荧光染色发现正常间皮细胞呈多边形，胞质丰富，细胞排列致密，细胞之间密不可分呈现典型的鹅卵石样外观。而接触胃癌细胞后的间皮细胞变细，胞质减少，细胞扫咧松散，细胞间连接打开，有的细胞受损脱落，脱落后出现大片裸区。(2)进一步研究发现对照组的间皮细胞核形态规则核染色质均匀分布细胞核内。经胃癌细胞处理后细胞膨胀变圆，染色质高度凝聚，核膜皱缩，但完整.内质网膨胀。边缘化浓缩呈境界分明的细小团块状沿核膜内侧排列;核倡肖失，胞膜下陷;形成由质膜包裹内含完整的细胞器、核碎片等细胞内容物的凋亡小体。(3)流式细胞仪检测胃癌细胞上清处理组间皮细胞生长抑制，并出现凋亡，其程度与时间成正相关。(4)与对照组相比，胃癌细胞能明显抑制间皮细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;并育目僧加促凋亡蛋白Bax的表达。结论:明确了在胃癌细胜衅占附到间皮细胞之前所释放的细胞因子对腹膜间皮细胞的损伤模型发现在腹膜转移早期胃癌细胞可以通过诱导间皮细胞凋亡对腹膜间皮细胞构成损伤和破坏，证明间皮细胞凋亡在胃癌腹膜转移中发挥了重要作用。

摘要： 本发明公开一种副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型的构建方法，涉及细胞感染模型技术领域。所述副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型的构建方法包括以下步骤：取副猪嗜血杆菌SH0165型标准菌株进行培养，制得细菌悬液；向猪腹膜间皮细胞中加入所述细菌悬液，感染6～12h后，即得副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型，所述细菌悬液中副猪嗜血杆菌感染所述猪腹膜间皮细胞的感染比为(90～110)：1。本发明旨在构建一种副猪嗜血杆菌SH0165型感染猪腹膜间皮细胞的体外感染模型。

摘要： 本发明公开了一种温石棉诱导的人胸膜间皮细胞恶性转化株及其应用，所述人胸膜间皮细胞恶性转化株分类命名为：人胸膜间皮细胞，株号为：AS‑T，保藏号为：CCTCC NO.C201923。本发明人胸膜间皮细胞恶性转化株由人胸膜间皮细胞(MeT‑5A)经温石棉多阶段多次染毒处理后，发生恶性转化获得，在作为致癌物致癌机制研究的细胞模型等多个方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种多壁碳纳米管诱导的人胸膜间皮细胞恶性转化株及其应用，所述人胸膜间皮细胞恶性转化株分类命名为：人胸膜间皮细胞，株号为：MCN‑MeT‑5A，保藏号为：C2018124。本发明人胸膜间皮细胞恶性转化株由人胸膜间皮细胞(MeT‑5A)经MWCNT多阶段多次染毒处理后，发生恶性转化获得，在作为致癌物致癌机制研究的细胞模型等多个方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明涉及辅助诊断领域，具体涉及一种用于区分恶性浆膜腔积液中间皮细胞与癌细胞的酸性磷酸酶染色法、相关试剂及其应用。本发明的染色方法能够去除样品中的红细胞，消除背景影响，同时，能够将间皮细胞和恶性肿瘤细胞明显区分，帮助医生迅速准确的找到恶性肿瘤细胞，并借此进一步作出诊断，极大提高了诊断的准确性。

摘要： 本发明公开了一种大鼠腹膜间皮细胞的提取与培养方法，包括以下步骤：（1）配制培养液，所述培养液包括基础培养基、胎牛血清及碳酸氢钠；（2）肠系膜提取：将肠系膜平摊在大鼠肝脏表面，提起肠系膜中间部分，剪下小块肠系膜的中央部分放入缓冲液清洗；将清理后的小块肠系膜移至消化液中进行消化，得原代细胞悬液；（3）细胞接种培养。本发明提取与培养方法不仅可以低成本并稳定地获得性状均一、细胞的获得率高、杂细胞含量少且活性较强的腹膜间皮细胞，而且获得的腹膜间皮细胞在使用显微镜明场观察时可以看到呈现经典的铺路石状，且形态稳定、一致性高，培养稳定，在用于后续的相关研究有利于增加实验的准确性和可重复性。

摘要： 本发明公开了一种多壁碳纳米管诱导的人胸膜间皮细胞恶性转化株及其应用，所述人胸膜间皮细胞恶性转化株分类命名为：人胸膜间皮细胞，株号为：MCN‑MeT‑5A，保藏号为：C2018124。本发明人胸膜间皮细胞恶性转化株由人胸膜间皮细胞(MeT‑5A)经MWCNT多阶段多次染毒处理后，发生恶性转化获得，在作为致癌物致癌机制研究的细胞模型等多个方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种温石棉诱导的人胸膜间皮细胞恶性转化株及其应用，所述人胸膜间皮细胞恶性转化株分类命名为：人胸膜间皮细胞，株号为：AS‑T，保藏号为：CCTCC NO.C201923。本发明人胸膜间皮细胞恶性转化株由人胸膜间皮细胞(MeT‑5A)经温石棉多阶段多次染毒处理后，发生恶性转化获得，在作为致癌物致癌机制研究的细胞模型等多个方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开一种猪腹膜间皮细胞的培养方法，涉及细胞培养技术领域。所述猪腹膜间皮细胞的培养方法包括以下步骤：将清理后的腹膜平铺于培养皿中进行酶解消化，得原代细胞悬液；将所述原代细胞悬液离心，保留沉淀物，并将所述沉淀物用原代培养液重悬，筛选得原代细胞；其中，所述原代培养液包含15％～20％(v/v)胎牛血清、79％～85％(v/v)DMEM/F‑12基础培养基、0.8％～1.1％(v/v)青链霉素混合液、0.03～0.05％(v/v)EGF以及0.05％～0.12％(v/v)ITS。本发明旨在提供一种适用于猪腹膜间皮细胞的培养方法。

摘要： 本发明公开一种副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型的构建方法，涉及细胞感染模型技术领域。所述副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型的构建方法包括以下步骤：取副猪嗜血杆菌SH0165型标准菌株进行培养，制得细菌悬液；向猪腹膜间皮细胞中加入所述细菌悬液，感染6～12h后，即得副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞模型，所述细菌悬液中副猪嗜血杆菌感染所述猪腹膜间皮细胞的感染比为(90～110)：1。本发明旨在构建一种副猪嗜血杆菌SH0165型感染猪腹膜间皮细胞的体外感染模型。

摘要： 本发明涉及一种原代腹膜间皮细胞的分离方法及分离所得PMCs。本发明所述方法从腹膜透析置管术后2周内的患者的透析液中分离原代PMCs。所述方法步骤简单、无创且易于重复，所得原代PMCs具有纯度高、贴壁性好、传代次数多、融合性好，能直接反映PD患者PMCs在PDS中的生理变化等优点。