人胃癌细胞系AGS外泌体miR-106a对腹膜间皮细胞系HMrSV5表型的影响

摘要

目的 探讨人胃癌细胞系AGS外泌体及其包裹miR-106a对人腹膜间皮细胞系HMrSV5表型的影响.方法 采用离心法分离AGS细胞来源外泌体,与HMrSV5细胞共培养,并加入外泌体分泌抑制剂GW4869.采用qPCR检测miR-106a表达量;EdU检测HMrSV5细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡.AGS细胞转染miR-106a mimic或inhibitor,共培养后利用Transwell小室法检测HMrSV5细胞迁移;Western blot检测Smad7、TIMP2、MMP2、MMP9、α-SMA蛋白表达.TGF-β处理HMrSV5细胞,共培养后Western blot检测Smad7、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达.结果 AGS细胞高表达外泌体miR-106a(P<0.01);与HMrSV5细胞共培养后明显抑制其增殖,促使早期凋亡率增加(P<0.05).转染miR-106a mimic后,AGS细胞源外泌体促进HMrSV5细胞迁移(P<0.001),同时Smad7、TIMP2表达下降,MMP2、MMP9、α-SMA表达升高,阻断miR-106a传递后这一作用减弱.TGF-β处理后,Smad7表达减弱,Smad2/3、p-Smad2/3表达升高.结论 AGS细胞来源外泌体能够促进HMrSV5细胞凋亡、抑制增殖、增强迁移,可能与转运miR-106a靶向Smad7/TIMP2有关.