稻瘟病菌

摘要： 已克隆的抗稻瘟病基因Pi9、Pib、Pi5、Pita、Pi2、Pikh、Pikm和Pigm对稻瘟病菌表现广谱抗性,这些基因已广泛应用于水稻抗稻瘟病育种。为了明确长三角地区粳稻的抗稻瘟病基因分布及其抗性表现,利用上述8个抗病基因的功能标记对52份粳稻种质进行抗病基因检测。同时,利用江苏省2019年稻瘟病菌代表菌株2019-746、2019-587、2019-924、2019-16-3、2019-522和2019-863的孢子混合液对供试种质进行抗性鉴定。结果表明,在供试种质中分布频率较高的抗稻瘟病基因是Pib和Pita,分别达到78.85%和50.00%,其余基因分布频率依次为38.46%(Pikh)、34.62%(Pi9)、23.08%(Pikm)、21.15%(Pi2)、5.77%(Pi5),供试种质都不携带基因Pigm。进一步研究结果表明,携带抗病基因Pita、Pi5、Pi2和Pikm的种质表现抗病的比例高;Pita、Pi5、Pi2和Pikm可以作为今后改良粳稻稻瘟病抗性的主要基因。本研究结果为长三角地区抗稻瘟病基因的利用提供了科学依据。

摘要： 【目的】分析侵染广东稻区优质品种美香占2号稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的致病性及无毒基因变异特征,为美香占2号在不同稻区的合理布局提供参考依据。【方法】利用9个抗稻瘟病单基因系,对稻瘟病菌单孢分离菌株进行致病性测定;并利用8个稻瘟病菌已克隆无毒基因的功能性分子标记对2013—2018年不同年份、不同稻区采集的稻瘟病菌单孢分离菌株的DNA进行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳检测分析,选取不同带型和不同年份代表性菌株的相应无毒基因全长或CDS区域的PCR片段进行测序。测序结果与相应无毒基因的参考序列进行碱基序列的比较分析;并利用相应的水稻抗稻瘟病单基因系,对无毒基因不同变异类型的稻瘟病菌菌株进行致病性测定。根据稻瘟病菌两种交配型MAT1-1和MAT1-2型分子标记,检测侵染美香占2号的稻瘟病菌可能存在的交配型。【结果】致病性分析结果显示,2013-2018年采集自美香占2号品种的52个稻瘟病菌菌株对其中的4个单基因系IRBL9-W(Pi9)、IRBLzt-T(Piz-t)、NIL-e1(Pi50)和IRBLkh-K3(Pikh)均表现无毒;然而,侵染单基因系IRBLz-Fu(Piz)、IRBLkp-K60(Pikp)和IRBLi-F5(Pii)的有毒菌株频率维持在57%以上,且侵染单基因系IRBLz-Fu(Piz)的有毒菌株频率在不同年份间呈现显著性差异,表明美香占2号种植区田间稻瘟病菌群体中存在较高频率的avrPiz、avrPikp和avrPii毒性菌株。根据8个已克隆无毒基因的功能性分子标记检测,在52个供试菌株中均可检测到无毒基因AvrPiz-t、AvrPi9和AvrPik-CDE,但扩增不到Avr1-CO39、AvrPia和AvrPii,仅有4个菌株可检测到无毒基因AvrPita,有3个菌株可检测到无毒基因AvrPik-ABF。所测序7个菌株的AvrPi9编码区序列和AvrPiz-t包含启动子及编码区的序列与其各自无毒基因的序列完全一致;所测序7个菌株的AvrPik-CDE包含启动子及编码区的序列中,有4个菌株的序列与AvrPik无毒基因序列完全一致,有3个菌株在编码区存在CTTT连续4个碱基的插入。在来自广东不同稻区美香占2号的分离菌株群体中,共发现了4种不同的AvrPib无毒基因扩增模式(扩增预期大小的条带、有转座子Pot3插入的条带、有转座子Mg-SINE插入的条带和无扩增条带),共呈现5种不同的单倍型(AvrPib-AP1-1、AvrPib-AP1-2、avrPib-AP2、avrPib-AP3和avrPib-AP2+avrPib-AP3),AvrPib-AP1-1和AvrPib-AP1-2是无毒型,而avrPib-AP2和avrPib-AP3则在基因的启动子区域分别存在Pot3或Mg-SINE的插入而呈现毒性型,在1个菌株中检测到avrPib-AP2+avrPib-AP3双单倍型。交配型分子标记分析结果表明,检测的52个稻瘟病菌菌株均为MAT1-2交配型,其中有2个菌株GD18-009和GD18-185采集于广东韶关稻区,同时可检测到MAT1-1交配型,具有双交配型。【结论】在广东美香占2号品种上分离的稻瘟病菌普遍含有无毒基因AvrPiz-t、AvrPi9、AvrPi50和AvrPikh,AvrPib的变异类型丰富多样,该研究结果可为优质品种美香占2号的科学布局及其种植区域其他不同抗病基因型品种的合理选择提供参考。

摘要： 稻瘟病菌无毒基因的变异会导致水稻抗病品种丧失抗性,因此,稻瘟病菌无毒基因变异机制的研究对于水稻抗病育种及抗病品种合理布局具有重要指导意义。为了更加全面地了解稻瘟病菌无毒基因AVR-Pik的变异机制,对课题组前期获得的来自全国各地100多株稻瘟病菌田间菌株中AVR-Pik位点的突变进行分析,发现了一个新单倍型AVR-PikG,其编码产物含有一个未见报道的点突变M58I。进一步的功能鉴定结果显示,表达Avr-PikG的稻瘟病菌菌株对所有供试Pik单基因系水稻均有毒,而表达Avr-PikD^(M58I)的菌株则对所有供试Pik单基因系水稻无毒,表明目前所有已知Pik等位基因的编码产物均无法识别新单倍型Avr-PikG,而Avr-PikG所含点突变M58I可能与其成功逃避抗病蛋白识别无关。

摘要： 【目的】明确福建省水稻稻瘟病菌对吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵的敏感性,为稻瘟病菌的抗药性监测及防治提供依据。【方法】以从福建将乐、沙县、宁化、建阳、南靖、上杭6个地区采集分离的116株稻瘟病菌为试验材料,采用菌丝生长速率法测定吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵对供试菌株的有效抑制中浓度(EC_(50)),分析供试菌株对吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵的敏感性及其相关性,建立供试菌株对4种杀菌剂的敏感性频率分布图,确定其敏感基线。【结果】吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵对供试稻瘟病菌菌株的EC_(50)分别为0.0012~0.0128,0.2098~0.6323,0.1968~2.2730和0.2176~0.6161μg/mL,EC_(50)平均值分别为0.0047,0.3619,0.8124和0.4279μg/mL,表明福建省稻瘟病菌对吡唑醚菌酯最敏感,其次为戊唑醇、多菌灵和丙环唑。不同地区稻瘟病菌菌株对同一种杀菌剂的敏感性存在差异,同一地区稻瘟病菌菌株对同一种杀菌剂的敏感性也存在差异;敏感性频率分布的正态性检验结果显示,福建省稻瘟病菌对吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵的敏感性频率分布均为连续性单峰曲线,且未出现敏感性下降的亚群体,因此,可分别将吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑和多菌灵对供试菌株的EC_(50)平均值(0.0047,0.3619,0.8124和0.4279μg/mL)作为其敏感基线,用于田间菌株的抗药性监测。供试稻瘟病菌对吡唑醚菌酯的敏感性与戊唑醇、丙环唑、多菌灵的敏感性之间无显著相关性。【结论】4种杀菌剂对福建稻瘟病菌的敏感性依次为吡唑醚菌酯>戊唑醇>多菌灵>丙环唑;吡唑醚菌酯可作为防治稻瘟病的主要杀菌剂,并与戊唑醇、多菌灵和丙环唑轮换或混合使用,避免或延缓稻瘟病菌对其产生抗药性。

摘要： 稻瘟病菌Magnaporthe oryzae可通过种子带菌实现远距离传播,导致病害发生并造成严重经济损失。建立灵敏高效且便于操作的水稻种子携带稻瘟病菌的检测方法,是确保种子健康和控制病害发生的先决条件。本研究选取稻瘟病菌的3-磷酸甘油酰基转移酶基因MoSPC3设计合成3对特异性引物,并对反应体系进行优化,建立了环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。该方法可特异性地检测稻瘟病菌,对稻瘟病菌DNA样品的检测灵敏度可达到0.24拷贝/μL,远高于普通PCR的检测灵敏度。将该方法用于从中国和马来西亚不同水稻种植区收集的92份水稻种子样品携带稻瘟病菌的检测,结果显示,LAMP方法共检测到89份阳性样品,而普通PCR仅显示有2份样品为阳性。综上,本研究建立了一种适用于水稻种子携带稻瘟病菌的LAMP检测方法,具有简便快捷、灵敏度高等特点,丰富了稻瘟病菌的检测体系,可用于大批量水稻种子样品的健康检测。

摘要： 为明确山东省不同年份不同地区稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)群体的交配型分布,本研究以标准菌株S1528(MAT1-1)和P131(MAT1-2)做对照,利用高分辨率熔解曲线法对2016—2020年从山东省分离到的415株稻瘟病菌进行交配型测定。结果表明,山东省稻瘟病菌群体中同时存在MAT1-1和MAT1-2两种交配型,主要以交配型MAT1-2为主,出现频率为79.28%,交配型MAT1-1出现频率为2.89%。不同年份间稻瘟病菌群体交配型的出现频率存在差异,交配型MAT1-2在2016、2017、2018、2019、2020年的出现频率分别为73.33%、82.54%、65.74%、72.53%、99.07%。不同地区稻瘟病菌交配型存在差异,交配型为MAT1-2的菌株在鲁北地区出现频率最高,为87.40%,在鲁中和鲁南出现频率分别为79.67%和72.73%。表明山东省水稻稻瘟病菌株群体交配型存在多样性。

摘要： ‘月亮谷’是云南元阳梯田种植面积最大的地方籼稻品种,种植历史逾百年仍保持对稻瘟菌较稳定的田间抗性,我们猜测其原因与‘月亮谷’-稻瘟菌的群体互作有关。为此,本研究采用群体遗传学研究方法,利用稻瘟菌16对SSR引物,对从‘月亮谷’不同单粒传纯系、‘月亮谷’自然群体、现代品种‘合系22-2’及云南元阳哈尼梯田环境中分离到的稻瘟菌进行遗传多样性分析,以了解不同‘月亮谷’纯系对稻瘟菌群体遗传结构的影响。结果显示,来源于梯田环境的稻瘟菌与不同水稻品种(系)的稻瘟菌群体遗传结构差异明显,梯田环境:Ht=0.1603,I=0.3238;水稻寄主群体:Ht=0.0929,I=0.2009。而且,分离自不同水稻品种(系)的稻瘟菌群体遗传结构差异也较大,Shannon’s遗传多样性指数、Nei基因多样性指数和PIC的总体趋势是:‘月亮谷’感病纯系(L4、L3)>‘月亮谷’自然群体(G5)>‘月亮谷’抗病纯系(L1、L2)>‘合系22-2’(H6)。基于neighbor-joining的聚类分析发现,从环境(Y)中挑选的30株稻瘟菌和6个不同水稻寄主材料上分离到的稻瘟菌群体在相同相似系数下的遗传宗谱的数量变化趋势为:Y>L4>G5>L3>L1>L2>H6,说明现代品种对田间稻瘟菌群体产生的选择压力最大。水稻地方品种的抗病纯系群体对环境中稻瘟菌群体也产生了与现代抗性品种相类似的正向选择作用,而感病纯系和自然群体有利于稻瘟菌群体的稳定性选择。

摘要： 总结了辽宁省水稻穗颈瘟的发生特点与综合防治技术,为指导农民防治水稻穗颈瘟,为提高辽宁省水稻穗颈瘟防控水平提供参考。

摘要： 【目的】为明确江西不同生态地区稻瘟病自然病圃菌群的无毒基因与致病基因分布以及遗传结构。【方法】利用已克隆的8个稻瘟病菌无毒基因与8个致病基因特异性引物对来源于江西5个不同地区稻瘟病自然病圃的189个单孢菌株的基因组DNA进行PCR扩增检测,计算检测基因在不同地区菌株中的分布频率,并根据扩增结果进行聚类,分析稻瘟病菌群体遗传结构。【结果】8个无毒基因Avr-pia、Avr-pizt、ACE1、Avr-pit、Avr-pita、Avr-co39、Avr-pik、PRE1在江西5个稻瘟病自然病圃稻瘟病菌的检测频率存在较大差异,其中都昌菌株中Avr-pik检测频率最高,井冈山、丰城、万安菌株中Avr-pizt检测频率均最高,婺源菌株中Avr-pik、Avr-co39、PRE1检测频率最高均为100%,而Avr-pit在所有地区菌株中检出频率都是最低。8个致病基因MNH1、MgATG5、MPG1、MgYCA1、MgS11、MagB、MPS1、CPKA在江西5个地区稻瘟病自然病圃菌株中只检测到7个,MNH1未检测到,且存在较大的分布差异。MPG1在5个地区病圃稻瘟病菌的检测频率均为最高在90%以上。此外,江西5个稻瘟病病圃菌株被划分为11个遗传宗谱,3个优势宗谱JX1、JX2、JX3占总菌株数的75.66%,其他8个小宗谱或稀有宗谱只占总菌株数的24.34%。【结论】对不同地区稻瘟病菌致病基因和无毒基因动态监测,是指导当地水稻抗瘟品种合理布局与防控稻瘟病流行的有效手段。

摘要： 【目的】对从水稻cDNA文库中筛选出的一个候选互作蛋白OsDjA9与Avr-PikD的互作关系进行鉴定,以期获得稻瘟病菌无毒效应因子Avr-PikD的水稻靶标。【方法】通过酵母双杂交、pull-down、Co-IP、荧光素酶互补成像试验及水稻原生质体中的共定位分析来验证Avr-PikD与OsDjA9的互作关系,并进一步借助酵母双杂交鉴定OsDjA9中参与互作的关键结构域。【结果】Avr-PikD在体外及体内条件下均能与OsDjA9发生相互作用,且OsDjA9所含DnaJ结构域是其与Avr-PikD互作所必需的。【结论】在稻瘟病菌侵染水稻的过程中,水稻OsDjA9蛋白是稻瘟病菌无毒效应因子Avr-PikD的一个作用靶标。

摘要： 稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是生产上一种最具破坏性的真菌病害,严重威胁中国的水稻安全生产;不同致病力的稻瘟病菌共存于田间,是水稻抗性丧失的主要原因之一;稻瘟病菌致病力差异的分子机制仍不清楚.为了对不同致病力稻瘟病菌的致病分子机制进行深入分析,采用转录组测序对致病力强(#248)、中(#235)和弱(#162)的孢子、菌丝和侵染阶段(8h、24h、48h、72h和96h)进行分析.差异表达基因分析表明3个菌株在侵染阶段48h的差异表达基因数量达到最多，强致病力菌株248各个阶段的差异表达基因数量均最多。同时，已知的致病相关基因在248各个阶段的差异表达基因中也是出现最多的。对上述各个阶段的差异表达基因进行聚类分析可以分为11个类别，其中3个菌株的抱子和菌丝阶段分别聚为2组，而中间类型235和弱致病力菌株162的侵染早期(8h和24h)聚为1组，3个菌株的侵染后期共同聚为3组，上述结论表明强致病力菌株的差异基因表达模式和其余两种致病力存在较大差异，但在侵染后期，这种差异逐步缩小。

摘要： 植物病原真菌形成一系列复杂的侵染结构,如附着胞,侵染定殖在植物组织中.附着胞细胞内甘油的大量累积使其形成巨大膨压,进而侵染钉穿透叶片表皮.细胞自噬过程在真核细胞生物中广泛存在,大分子和细胞器通过该途径大量降解,使细胞即使在逆境中也能保持正常的生理代谢.当前对细胞自噬途径的研究已经从模式生物酵母如酿酒酵母延伸到病原真菌稻瘟病菌,研究发现部分稻瘟病菌自噬同源基因敲除突变体丧失了侵染寄主植物的致病能力,阐明稻瘟病菌自噬基因的功能以及蛋白互作网络将有助于更好地理解细胞自噬在真菌致病性中的作用.rn 泛素蛋白酶体途径是真核生物细胞内存在的另外一条降解错误折叠蛋白、损伤蛋白或者衰老蛋白的途径，与细胞自噬相比，该途径只降解蛋白，同时底物选择性更加严格。底物蛋白的泛素化由泛素激活酶，泛素结合酶及泛素连接酶依次催化完成，多泛素化的底物最终由蛋白酶体降解。研究发现蛋白除了被降解外，蛋白的单泛素化调控生物的细胞生长和细胞分化。泛素蛋白酶体系统在酵母和哺乳动物中研究较多，但在植物病原真菌中的功能研究较少。E3泛素连接酶在该系统中决定了降解底物的选择性，数量最多，通过基因敲除，找到与稻瘟病菌致病性相关的泛素连接酶，并对这些泛素连接酶的功能展开分析，进而试图揭示细胞自噬途径和泛素蛋白酶体途径之间调控和联系。

摘要： 水稻是世界范围内重要的粮食作物,每年约有55％的人口依赖其解决温饱问题.在水稻生育期内,稻瘟病是威胁水稻产量和品质的重要因素,平均每年由该病害引发的稻谷产量损失达20％左右(Valent and Chumley,1991).研究表明,稻瘟病的发生及流行程度取决于田间分生孢子的数量,因此,深入解析稻瘟病菌分生孢子发育的分子机制对有效控制该病害的发生及提高稻米品质具有重要的理论与实践意义.

摘要： 稻瘟病菌能够侵染以水稻为主的重要农作物,同时也是研究丝状真菌的重要模式生物.Rab GTPase是Ras超家族的成员之一,它作为分子开关在囊泡的形成、运输、融合等过程中发挥着至关重要的作用.酿酒酵母有三类Rab5家族蛋白,分别为Ypt51,Ypt52,Ypt53,它们参与早期内吞途径.在稻瘟病菌中,MoRab5A和MoRab5B是酿酒酵母中Ypt51和Ypt52的两个同源蛋白.我们的前期研究表明MoRabSA和MoRabSB是稻瘟病菌的生长发育及致病性所必须的，并与稻瘟病病的胞吞作用相关。为初步筛选其下游效应蛋白，本研究对MoRab5组成型激活的菌株MoRab5A-CA, MoRab5B-CA进行了转绿组测序(RNA-seq),结果表明只在MoRab5A-CA状态下上调表达的基因有1351个，而只在MoRab5B-CA状态下上调表达有317个，对其中的一些基因进行了荧光定量PCR验证，其结果与RNA-seq中的上调是相一致的，对其中已在稻瘟病菌数据库注释的基因利用GO(gene ontology)分类进行分析，发现大部分基因与细胞的发育，新陈代谢，细胞内组分运输等过程相关。进一步将结合其他生物信息学分析和同源比对，筛选假定效应蛋白，并利用基因敲除、酵母双杂交及Pull down等方法研究这些基因的功能及验证他们与MoRab5A和MoRab5B的互作关系，从而寻找出调控MoRab5蛋白通路中下游效应因子，为深入了解该病菌的致病机制提供依据。

摘要： 为探明山苍子油及其主要成分对稻瘟病菌的生物活性,本文采用菌丝生长和孢子萌发抑制法测定了山苍子油及其11种主要成分对水稻稻瘟病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性.结果表明,山苍子油及其主要的组分柠檬醛、香茅醛、α-蒎烯等对稻瘟病菌具有良好的生物活性,其中柠檬醛和山苍子油对稻瘟病菌菌丝生长的EC50值分别为40.71μg/mL和44.59μg/mL,对孢子萌发的EC,值分别为38.81μg/mL和41.01μg/mL,且柠檬醛对孢子萌发的抑菌活性高于春雷霉素.11种主要成分中只有柠檬醛对菌丝生长和孢子萌发的毒力高于山苍子油.其次香茅醛的活性也较好,其对菌丝生长和孢子萌发的EC50值分别为54.58μg/mL和41.69μg/mL,而其他主要成分对菌丝生长和孢子萌发的毒力均低于山苍子油.

摘要： SYP-9069是我国沈阳化工研究院最新创制研发的结构新颖的化合物,目前正在申请发明专利,其作用机制尚不明确.已有的田间试验结果表明,SYP-9069兼具保护与治疗活性,可有效防治黄瓜霜霉病、马铃薯晚疫病和黄瓜白粉病等多种卵菌、真菌病害,同时对蚜虫、红蜘蛛等也有较好的活性.本研究测定了SYP-9069的抑菌谱,明确了其对荔枝霜疫霉和稻瘟病菌不同发育阶段的影响,为该药剂的商品化登记和作用机制的研究提供参考.

摘要： 稻瘟病也称稻热病、火烧瘟、叩头瘟等,是水稻的一种常发性病害,该病在水稻的整个生育阶段皆可发生,由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)感染所致,以分生孢子作为初侵染与再侵染的接种体,从寄主表皮直接侵入致病.为此,研究与开发抑制和杀灭稻瘟病菌的生物农药是水稻生产中亟待解决的问题.本实验室在以棉花枯萎病为靶标筛选农用抗生素产生菌的过程中，从棉花土壤中分离筛选到了一株链霉菌(编号为702)，鉴定为稠李链霉菌JXAU4324(Stneptomyces padanus4324)其抗真菌组分为多烯大环内酯类抗生素，命名为农抗702(Ag-antibiotic 702)，该物质对多种植物病原真菌有抑制活性。

摘要： 背景:作为Rho族GTP酶最主要成员之一的Rac1蛋白，在许多生物中参与调控肌动蛋白细胞骨架重组和极性生长过程。水稻病原真菌—稻瘟病菌是研究植物与病原菌互作的重要模式生物。然而该菌的致病机制仍尚未深入阐明。我们先前的研究表明稻瘟病菌中的Rac1同源蛋白MoRac1，是该菌产孢和致病所必需的关键调控蛋白。而Rac1是如何通过其互作蛋白，特别是效应蛋白，有效地调控致病过程，则还需要深入研究阐明。方法:通过酵母双杂交、分子遗传和生化手段对 MoRac1的互作蛋白NADPH氧化酶Nox以及调控因子MoNoxR进行功能分析及过氧化物含量鉴定，并通过双杂交cDNA文库筛选Nox2下游的假定底物。结果:酵母双杂交和NBT染色实验证实了稻瘟病菌中两个NADPH氧化酶Nox1和Nox2均是MoRac1的效应蛋白，MoRac1突变体细胞内过氧化物含量明显改变。此外，MoRac1的另一个效应蛋白MoNoxR，是 NADPH氧化酶调控因子的同源物。表型分析发现，MoNoxR的失活突变体虽然菌丝，孢子和侵染结构附着胞形态正常，但其完全丧失了对水稻的致病力。最后为了鉴定MoRac1-Nox下游作用靶标，我们通过双杂交cDNA文库的筛选，获到若干 Nox2下游的假定底物。结论与意义:MoRac1有可能通过与MoNoxR、Nox1和Nox2形成复合体，调节NADPH氧化酶的活性，影响稻瘟病菌菌丝和孢子细胞中过氧化物的含量，进而介导侵染相关的信号途径。因此进一步分析Nox底物蛋白的功能及活性，将为完美阐释MoRac1-Nox信号途径对稻瘟病菌侵染及致病的调控机理奠定基础。

摘要： 抗药性问题的产生并非最敏感菌株与最不敏感菌株的简单比较，而是在所检测的菌株群体中分析EC50值的变化特点，从而判断菌株是否有抗药性问题的产生。本研究从辽宁省7个稻区尤其是反映三环唑防效下降的区域采集稻瘟病标样，分离菌株并采用离体叶段法开展稻瘟病菌对三环唑敏感性的群体监测。试验结果表明，在所检测的53个稻瘟菌株中并未发现药剂敏感性显著降低的菌株，可以认为这些菌株均为三环唑的敏感菌株，因此采用这些菌株的EC50平均值0.4259μg/ml作为稻瘟病菌对三环唑的敏感基线。说明在自然条件下稻瘟菌对三环唑不容易产生抗药性，生产上可以继续安全使用三环唑来防治水稻稻瘟病。

摘要： 光热纳米粒子材料在生物医学方面的应用引起了广泛关注,本文主要研究了普鲁士蓝纳米粒子的光热性能对白纹伊蚊幼虫、稻瘟病菌的光热效应.普鲁士蓝纳米粒子具有优良的光热效应和生物相容性,合成了普鲁士蓝纳米粒子并测试了普鲁士蓝纳米粒子的光物理化学性质:紫外-可见光吸收谱图、光热转化效率、纳米粒径的分布状况、光热转化的可重复性、普鲁士蓝纳米粒子的稳定性,结果表明普鲁士蓝纳米粒子具有良好的粒径大小分布,具有优良的稳定性和优良的光热转化效率,研究了对白纹伊蚊幼虫和稻瘟病菌的热杀效果,并探究了光热效应对白纹伊蚊幼虫的形态影响,普鲁士蓝纳米粒子的光热效应能够有效的杀死白纹伊蚊幼虫和稻瘟病菌.

摘要： 本发明提供携带稻瘟病菌的大麦粒在稻瘟病杀菌剂筛选中的应用方法，包括以下应用步骤：（1）携带稻瘟病菌的大麦粒的制备：将蒸过或煮过的大麦粒装瓶，接着向装有大麦粒的瓶中接种稻瘟病菌，培养，得到携带稻瘟病菌的大麦粒；（2）含杀菌剂平板培养基的制备：向灭菌后的、熔融态的适合稻瘟病菌生长的培养基中加入待筛选的杀菌剂，制得含有杀菌剂的平板培养基；（3）接菌：在含有杀菌剂的平板培养基上接种携带稻瘟病菌的大麦粒，培养，最后测量平板培养基上以大麦粒为中心的菌落的直径，直径越小，待筛选的杀菌剂对该稻瘟病菌的杀菌效果越好；直径越大，待筛选的杀菌剂对该稻瘟病菌的杀菌效果越差。本发明利于大批量快速筛选稻瘟病杀菌剂。

摘要： 一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法，属于植物真菌分子生物学检测技术领域，包括以下步骤：A、DNA提取：分别提取谷瘟病菌和稻瘟病菌的DNA；B、引物设计：利用谷瘟病菌无毒基因PWL3编码区插入849bp的反转录转座子的两端设计一对特异性引物Mol3‑F/Mol3‑F；C、PCR：以提取的谷瘟病菌与稻瘟病菌的总DNA为模板进行PCR扩增，得到扩增产物；D、结果判定：将扩增产物进行电泳检测，若检测到1771bp的目标条带，则判定为谷瘟病菌；若检测到922bp的条带，则判定为稻瘟病菌。通过本发明方法可以将难以区分的谷瘟病菌和稻瘟病菌进行快速、准确的区分，对研究梨孢菌在自然条件下田间传播、繁殖与进化具有重要意义。

摘要： 本发明提供携带稻瘟病菌的大麦粒在稻瘟病杀菌剂筛选中的应用方法，包括以下应用步骤：（1）携带稻瘟病菌的大麦粒的制备：将蒸过或煮过的大麦粒装瓶，接着向装有大麦粒的瓶中接种稻瘟病菌，培养，得到携带稻瘟病菌的大麦粒；（2）含杀菌剂平板培养基的制备：向灭菌后的、熔融态的适合稻瘟病菌生长的培养基中加入待筛选的杀菌剂，制得含有杀菌剂的平板培养基；（3）接菌：在含有杀菌剂的平板培养基上接种携带稻瘟病菌的大麦粒，培养，最后测量平板培养基上以大麦粒为中心的菌落的直径，直径越小，待筛选的杀菌剂对该稻瘟病菌的杀菌效果越好；直径越大，待筛选的杀菌剂对该稻瘟病菌的杀菌效果越差。本发明利于大批量快速筛选稻瘟病杀菌剂。

摘要： 一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法，属于植物真菌分子生物学检测技术领域，包括以下步骤：A、DNA提取：分别提取谷瘟病菌和稻瘟病菌的DNA；B、引物设计：利用谷瘟病菌无毒基因PWL3编码区插入849bp的反转录转座子的两端设计一对特异性引物Mol3‑F/Mol3‑F；C、PCR：以提取的谷瘟病菌与稻瘟病菌的总DNA为模板进行PCR扩增，得到扩增产物；D、结果判定：将扩增产物进行电泳检测，若检测到1771bp的目标条带，则判定为谷瘟病菌；若检测到922bp的条带，则判定为稻瘟病菌。通过本发明方法可以将难以区分的谷瘟病菌和稻瘟病菌进行快速、准确的区分，对研究梨孢菌在自然条件下田间传播、繁殖与进化具有重要意义。

摘要： 本发明公开了水稻OsSTE24基因在提高水稻对稻瘟病菌抗性中的应用。水稻OsSTE24基因CDS区的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明研究发现水稻OsSTE24基因与水稻对稻瘟病防卫相关，OsSTE24基因突变降低了水稻对稻瘟病菌的基础防卫能力，而过表达OsSTE24基因能够提高水稻对稻瘟病菌的抗病能力。所以水稻OsSTE24基因能够用于提高水稻对稻瘟病菌抗性。

摘要： 本发明提供了一种大量产生稻瘟病菌有性世代的分生孢子涂布法，包括1)制备稻瘟病菌不同交配型的分生孢子悬浮液；2)在燕麦培养基上按1∶1的比例涂布不同交配型的分生孢子悬浮液；3)在培养温度为12°C‑27°C、光照为5000lux‑15000lux的培养条件下培养5‑15天，获得大量稻瘟病菌子囊和子囊孢子。本发明解决了传统现有技术对峙培养法产生有性世代子囊壳和子囊孢子的总量少、不稳定、样品间差异大、有性后代成熟度不一致等缺点，可以在短时间内获得大量的稻瘟病菌有性世代，子囊壳和子囊孢子形成速度快，成熟度一致，得到的子囊壳和子囊孢子能够用于菌株有性生殖能力的量化比较、有性结构观察、核酸提取和基因表达定量分析。

摘要： 本发明提供一种大量产生稻瘟病菌有性世代的菌丝涂布法，包括1)制备稻瘟病菌不同交配型的菌丝悬浮；2)在燕麦培养基上按比例涂布不同交配型的菌丝悬浮液；3)在培养温度为12°C‑27°C的条件下培养5‑15天，获得大量稻瘟病菌子囊和子囊孢子。本发明解决了传统现有技术对峙培养法产生有性世代子囊壳和子囊孢子的总量少、不稳定、样品间差异大、有性后代成熟度不一致等缺点，可以在短时间内获得大量的稻瘟病菌有性世代，子囊壳和子囊孢子形成速度快，成熟度一致，得到的子囊壳和子囊孢子能够用于菌株有性生殖能力的量化比较、有性结构观察、核酸提取和基因表达定量分析。

摘要： 本发明公开了一种抑制稻瘟病菌关键基因、dsRNA及其制备和应用，所述关键基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、ID NO.7、ID NO.9任一所示，还公开了抑制稻瘟病菌关键基因dsRNA为含有T7启动子的MoCytb基因的dsRNA、MoRic8基因的dsRNA、MoTrx2基因的dsRNA、MoMBF1基因的dsRNA或MoEnd3基因的dsRNA中的任意一种，本发明合成的dsRNA稳定性强，能够抑制水稻稻瘟病菌孢子萌发、附着胞和芽管形成，进而有效防治水稻稻瘟病。本发明还公开dsRNA在用于制备生物杀菌剂抗菌中的应用，效果明显且绿色环保。

摘要： 本发明属于作物分子遗传育种学领域，公开了水稻种子中稻瘟病菌的RPA快速检测方法及应用，包括如下步骤：(1)取水稻种子样品，提取水稻种子样品基因组DNA。(2)利用一组引物，对水稻种子样品基因组DNA进行重组酶聚合酶扩增。通过琼脂糖凝胶电泳观察是否有扩增的目标条带来判断样品中是否含有稻瘟病菌。通过本发明提供的方法可以快速准确的诊断出水稻种子中是否含有稻瘟病菌，有利于防治稻瘟病，减少经济损失。

摘要： 本发明提供了一种逆向调控水稻对稻瘟病菌抗性的遗传位点及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明所述的遗传位点核苷酸序列如SEQID NO:1所示。本发明构建了含有该遗传位点XLOC_047603全序列的过表达载体和菌株，转化到水稻抗病品种中获得过表达突变株系，接种稻瘟病菌株，病害调查结果表明过表达突变株系降低了水稻对稻瘟病菌的抗性；构建敲减载体转化苗接种稻瘟病菌多个菌株，病害调查结果证明敲减转化苗，抑制了XLOC_047603的表达，可以显著提高水稻对稻瘟病菌不同菌株的抗性。实验表明遗传位点XLOC_047603在水稻对稻瘟菌的防卫响应中发挥着逆向调控作用。本发明为培育广谱抗稻瘟病水稻新品种提供了一种新的策略和遗传资源，有十分重要的理论意义和应用价值。