稻曲病菌

摘要： 研究了稻曲病菌厚垣孢子在水中的萌发、菌丝在不同培养基中的生长与产孢、菌核形成条件及厚垣孢子的致病性。结果发现,少数黄色与黑色稻曲球上的厚垣孢子在田间存在萌发现象;黄色球厚垣孢子在清水中2 h即有孢子萌发产生分生孢子,4 h可见部分分生孢子产生次生分生孢子,12 h分生孢子中60%以上产生次生分生孢子。黑色稻曲球上的厚垣孢子萌发与黄色球上的厚垣孢子类似,但萌发起始时间较后者一般晚2 h以上,萌发率和萌发速率也稍低。稻曲病菌培养以PSA培养基生长最好。病菌培养25 d可产生厚垣孢子。江西稻区稻曲球上可产生菌核,但一般年份不常见。结果表明,田间采集的厚垣孢子是诱发稻曲病的有效接种体,推测其应是田间诱发稻曲病的重要初侵染来源和再侵染要素。

摘要： 【目的】由稻曲病菌引起的稻曲病不仅造成水稻减产,而且还会产生对动物和植物有毒的真菌毒素。探明水稻幼穗对稻曲病菌毒素胁迫响应的分子机制,可为发掘水稻抗稻曲病基因以及抗病分子育种开辟新的思路。【方法】用稻曲病菌毒素处理水稻幼穗,采用转录组测序技术对水稻幼穗进行转录组测序,以水稻9311基因组作为参考基因组进行对比,利用TPM法计算基因表达量,设定参数(差异倍数的绝对值不小于2,且q值不大于0.05)筛选差异表达基因。结合基因差异表达分析、富集功能分析,鉴定水稻响应胁迫的关键基因,并利用实时荧光定量PCR技术对差异表达基因进行验证。【结果】在稻曲病菌毒素胁迫12 h后,水稻幼穗出现2526个差异表达基因(DEG);通过GO富集、KEGG代谢途经和KOG功能分析,将差异基因划分为GO功能下的64个条目、32个代谢途径和KOG功能下23个类别,包括淀粉和蔗糖代谢、苯丙类生物合成、碳代谢、糖酵解/糖异生、氨基糖和核苷酸糖代谢等生物学过程。DEG中有66个植物转录因子,分属7种植物转录因子家族,包括WRKY和Myb两大转录因子。分析二萜类生物合成与淀粉和蔗糖代谢途径相关基因发现,OsCPS2、OsKSL4和细胞色素P450等基因表达量上调,而淀粉酶、β-呋喃果糖苷酶和UDP-焦磷酸化酶等基因表达量下调,推测这些基因在水稻响应稻曲病菌毒素胁迫时发挥重要的作用。【结论】稻曲病菌毒素作为非生物胁迫因素对水稻幼穗具有毒性;通过干扰淀粉和蔗糖代谢等途径而影响种子营养物质的合成,降低水稻抵抗病原菌侵染水稻的能力。

摘要： 为明确采自辽宁省12个稻区稻曲病菌Ustilaginoidea virens的生物学特性、群体遗传多样性与地理区域的关系.本研究采用生物学方法测定稻曲病菌菌株的生长速率和产孢能力,并采用SPSS 20.0分析软件对稻曲病菌菌株的菌丝生长速率和产孢能力进行相关性分析.提取稻曲病菌基因组DNA,采用特异性引物US、交配型引物MAT、遗传多样性引物ERIC对其进行PCR扩增,通过聚类分析进行群体遗传多样性研究.结果 显示:157个稻曲病菌菌株的菌丝生长速率与产孢能力相关系数为0.19.采用稻曲病菌特异性引物US进行扩增,157个菌株均为稻曲病菌株;采用交配型引物MAT进行扩增,53个菌株为MAT工型,104个菌株为MATⅡ型.采用ERIC引物可扩增出2～7条不等的条带,157个稻曲病菌株被划分为10个基因类群,其中第1类群为优势类型,有44个菌株,占总数的28.0％;第2类群有20个菌株,占总数的12.7％;第3类群1个菌株,占总数的0.6％;第4类群1个菌株,占总数的0.6％;第5类群有21个菌株,占总数的13.4％;第6类群有17个菌株,占总数的10.8％;第7类群有2个菌株,占总数的1.2％;第8类群有5个菌株,占总数的3.2％;第9类群有30个菌株,占总数的19.1％;第10类群有16个菌株,占总数的10.2％.来自辽宁省12个稻区的157个稻曲病菌株菌丝生长速率与菌株产孢量之间没有相关性,产孢量与地域之间有相关性.基于ERIC-PCR扩增的稻曲病菌株基因组DNA指纹图谱的多态性进行划分的基因类群与地理区域之间有相关性,基因类群与生物学特性之间没有相关性.

摘要： 通过对水稻稻曲病进行室内毒力测定与田间药效试验,筛选出防治效果较好的杀菌剂。采用菌丝生长速率法测定9种杀菌剂对水稻稻曲病菌的室内毒力,并进行7种杀菌剂的田间药效试验。氟环唑、吡唑醚菌酯、丙硫菌唑、嘧菌酯、丙环唑、咪鲜胺、戊唑醇的EC50值小于0.20μg/mL,抑菌效果较好。田间药效试验中,430 g/L戊唑醇SC 96.75 g a.i./hm^(2)、125 g/L氟环唑SC 84.4 g a.i./hm^(2)、250 g/L嘧菌酯SC 225.0 g a.i./hm^(2)的防效最好,防效分别为83.59%、82.77%、81.13%。戊唑醇、氟环唑和嘧菌酯对水稻稻曲病具有良好的防效,可作为该病的有效防治药剂。

摘要： 近40年来,稻曲病在世界各主要水稻栽培区均表现出发生规模不断扩大、严重程度不断增加的趋势。研究人员前期对低温诱导初期的稻曲球进行切片,发现稻曲球内含有大量隐含菌核,并利用高通量测序技术,对低温诱导处理的稻曲球进行了转录组测序,鉴定了稻曲病菌菌核形成关键基因,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对其表达量进行了验证。

摘要： 通过对水稻稻曲病进行室内毒力测定与田间药效试验,筛选出防治效果较好的杀菌剂.采用菌丝生长速率法测定9种杀菌剂对水稻稻曲病菌的室内毒力,并进行7种杀菌剂的田间药效试验.氟环唑、吡唑醚菌酯、丙硫菌唑、嘧菌酯、丙环唑、咪鲜胺、戊唑醇的EC50值小于0.20μg/mL,抑菌效果较好.田间药效试验中,430 g/L戊唑醇SC 96.75 g a.i./hm2、125 g/L氟环唑SC 84.4 g a.i./hm2、250 g/L嘧菌酯SC 225.0 g a.i./hm2的防效最好,防效分别为83.59％、82.77％、81.13％.戊唑醇、氟环唑和嘧菌酯对水稻稻曲病具有良好的防效,可作为该病的有效防治药剂.

摘要： 稻曲病是水稻生产的重要病害之一,至今对该病害的侵染循环及病原菌生活史的认识仍然有限.本文于2020年在南宁市青秀区刘圩镇调查晚稻稻曲病的发生情况,在病害标样中首次发现该地稻曲病菌能形成菌核,随后对该地稻曲病菌的菌核形成情况开展了观察调查.调查发现该地稻田都有稻曲病发生,但调查区域总体发病较轻,平均穗发病率为1.37％,病情指数为0.72.抽样调查的稻田都发现有稻曲病菌菌核,总体平均每穗有菌核0.62个,有2.60％的稻曲球产生菌核,单个稻曲球上可见菌核数多达3个,单个稻穗上可见菌核数多达20个.结果明确了南宁市郊稻田的稻曲病菌生活史存在有性生殖过程,可以认为低纬度及低海拔的华南稻区也是稻曲病菌菌核形成的适宜地理生态.

摘要： 本文探讨了川渝7个地区76个稻曲病菌Ustilaginoidea virens菌株的生物学特性,包括从四川南充分离获得的12个菌株、宣汉分离获得的16个菌株、双流分离获得的14个菌株、重庆涪陵分离获得的9个菌株、永川分离获得的12个菌株、璧山分离获得的5个菌株、万盛分离获得的8个菌株.采用生物学方法对菌株的色泽、产孢能力和生长速率进行测定,并对这些菌株的生物学特性进行显著性和相关性分析.结果发现,76个菌株包含白色、黄色、黄绿色和深绿色4种色泽,其中黄色为菌株主要色泽,占52.63％;不同地区稻曲病菌在生长速率和产孢能力上存在显著性差异,不同色泽的菌株在生长速率上存在显著性差异;此外,菌株的产孢能力和生长速率之间呈负相关.研究结果为川渝地区防治稻曲病提供科学依据.

摘要： 稻曲病为我国水稻生产上严重影响稻米品质与产量的重要病害,研究稻曲病菌侵染行为可为稻曲病抗性品种选育、防控药剂特异性靶标选择以及防控策略制定等提供理论参考.从稻曲病接种体系、初侵染源、侵染关键期、侵染位点、侵染过程、侵染机制等方面进行系统阐述.当前研究表明,稻曲病菌通过菌核或厚垣孢子越冬后形成分生孢子作为初侵染源,在水稻幼穗形成后通过人工注射将稻曲病菌分生孢子液注入水稻穗苞,病菌通过颖壳间隙进入颖内后,首先攻击水稻花丝,阻止水稻花粉成熟,阻断子房受精,劫持水稻营养库进而形成稻曲球.稻曲病菌与水稻花丝的分子识别机制、稻曲病菌如何激发水稻相关灌浆基因的表达进而获取营养物质形成稻曲球可能是将来的研究方向.

摘要： 稻曲病已上升为中国的三大水稻病害之一,其病原菌特异侵染水稻花丝形成球状病原体,即稻曲球.该病害不仅影响水稻产量和稻米品质,而且稻曲球含有稻曲毒素严重威胁人畜健康.然而,目前对稻曲病菌的致病机制仍不明确.利用转录组学分析获得稻曲病菌侵染水稻后高度诱导表达的基因信息,从中筛选到一个在侵染过程中诱导表达的编码分泌蛋白的基因Uv2169.该基因在本氏烟和水稻中表达，均能引起本氏烟叶片和水稻原生质体的细胞死亡。有趣的是，只有带有信号肤的全长Uv2169蛋白能引起本氏烟叶片细胞死亡，而不带信号肤的成熟蛋白不能引起叶片细胞死亡。同时，Uv2169能抑制本氏烟和拟南芥的免疫反应，包括活性氧爆发、脐服质积累和防御相关基因表达。这些结果说明，Uv2169可能具有激发或抑制植物免疫反应的双重功能，而是否激发或抑制免疫可能与Uv2169的表达量相关。

摘要： 水稻稻曲病是由稻曲病菌侵染引起的一种世界性水稻穗部真菌病害.近年来,随着水稻杂交品种的大面积推广、农田氮肥施用量增加等因素,水稻稻曲病在中国各稻区已从次要病害逐渐成为主要病害.稻曲病菌的发生对水稻产量和质量均有严重影响,危害中国粮食安全.因此研究稻曲病菌的致病机制,为稻曲病防止提供策略至关重要.本研究克隆了Uth1基因在稻曲病菌中的同源基因UvUth1，拟研究该基因在稻曲病菌中的功能。首先利用基因沉默的方法，获得17个基因沉默突变体。通过对突变体进行表型和致病力分析显示，在氧胁迫或者雷帕霉素处理条件下，突变体的生存能力增强;对SDS、刚果红的耐受性也增强;与致病性也相关。下一步将对该基因进行亚细胞定位，在稻曲病菌侵染过程中的表达模式进行分析;同时还将采用酵母双杂交等方法来研究该基因的互作因子，从而为解析稻曲病菌的致病机制为防治提供理论依据。

摘要： 报道了稻曲病菌分生孢子的产生条件及人工接种方法.结果表明,采用固体培养、液体培养和固液双层培养交替进行的培养方式,可以有效刺激稻曲病菌分生孢子的产生,提高产孢量,缩短产孢时间.其中,液体培养使用PS培养基,产生的分生孢子浓度最高,达4.8×108个/mL.以分生孢子为接种体,采用注射和喷雾两种方式进行接种,接种发病率为8.2％～28.7％,表明稻曲病菌对水稻具有致病性.其中注射接种效果优于喷雾接种,接种后低温诱导处理对病害的发生具有促进作用.

摘要： 本文以人工培养产生的稻曲病菌新鲜的厚垣孢子作为侵染源，在高感的甫优6号杂交种的萌发期进行侵染接种，对接种后1～lOd的幼苗组织整体透明染色，并利用光学显微镜、激光共聚焦显微镜和扫描电子显微镜对病原菌的侵染和扩散情况进行了系统的观察分析。研究结果表明，人工培养产生的稻曲病菌新鲜厚垣孢子可以高比例的萌发;但病原菌的侵染能力较弱，不能直接穿透植物细胞。接种后3d，可观察到病原菌侵染进入水稻表皮细胞的角质层下并主要沿叶片长轴方向扩展。接种后5d，大量病原菌菌丝进入水稻皮层细胞的胞间隙中进行扩展。接种后10d，菌丝贯穿胚芽鞘、叶片组织:在菌丝分布的位置，多数水稻细胞己经完全被菌丝所包围，但只发现有极少数菌丝侵入到水稻的薄壁细胞内，并且未见侵入细胞内的菌丝有进一步的伸长扩展。病原菌对胚根的侵染和扩展相对较慢。以上结果表明，稻曲病菌的厚垣孢子可以通过种子带菌进行水稻苗期侵染，并在水稻各个组织的细胞间隙内扩展。该结果为稻曲病的系统性侵染提供了直接的细胞学证据。

摘要： 对2005年采自湖北省6个地区的40个稻曲病菌株进行RAPD分子标记,从60条随机引物中筛选的11条引物对40个稻曲病菌株共扩增出87条谱带,多态性分析结果表明源于蕲春的稻曲病菌的遗传多态性最高,而源于武穴与鄂州的菌株多态性最低。相似性分析表明不同地区不同品种上的稻曲病菌菌株在遗传多样性方面没有明显的区域化特征。

摘要： 本文利用根癌农杆菌介导转化系统,对稻曲病菌分生孢子进行转化,通过潮霉素抗性筛选转化子.农杆菌经乙酰丁香酮预先诱导,转化效率大约在390-450个转化子/106个孢子.PCR检测HPH基因表达盒,结果显示被测转化子基因组中均成功整合了目的片段.同时,在488nm下这些转化子都具有荧光.利用根癌农杆菌成功转化稻曲病菌,这为进一步研究稻曲病菌致病分子机制的有力工具.

摘要： 本文利用农杆菌介导的丝状真菌遗传转化方法获得了2500余个稻曲病菌随机插入突变体.对随机挑取的突变体的生长速度、产孢能力和致病力等生物学性状进行了测定,结果显示除生长速度差异较小外,产孢能力和致病力有了明显的改变.该突变体库建立为进一步研究稻曲病菌的分子遗传机制提供了良好的材料.

摘要： 分别用薄荷和泽漆的植物提取液对稻曲病菌进行了抑菌活性的研究.孢子萌发抑制试验的结果表明,薄荷和泽漆的提取液对稻曲病菌的厚垣孢子和分生孢子的萌发均有抑制作用:与对照厚垣孢子13.05％的萌发率相比,10.00％浓度的薄荷提取液处理的萌发率为0.00％,20.00％的泽漆为8.75％;与对照分生孢子23.11％的萌发率相比,10.00％浓度的薄荷提取液处理的萌发率为0.00％,20.00％的泽漆为18.96％.在抑制效果上,薄荷提取液显著优于泽漆提取液.此外还发现,薄荷提取液对菌丝的抑制作用表现在两个方面,一是菌丝生长比对照减缓54.26％,二是使菌丝形态发生变异,分枝增多.本研究为开发防治稻曲病的植物源农药奠定了基础.

摘要： 随着水稻品种和杂交组合的变化,稻曲病菌已经成为威胁我国水稻生产的重要的真菌病害之一.本文介绍了初步研究稻曲病菌原生质体的分离技术.

摘要： 1%申嗪霉素(枯草芽孢杆茵)SC对水稻稻曲病防治试验表明，在水稻抽穗扬花期连续使用1～2次该药剂，对稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)有很好的控制效果，防效达80%以上，增产效果明显，能改善稻谷质量。在稻曲病常发区能替代化学制剂的使用，特别是在稻曲病菌对井冈霉素等产生抗性的水稻产区，是一种理想、安全、环保的生物杀菌剂。

摘要： 本发明涉及一种稻曲病菌产五种稻曲病菌毒素的方法，取培养15d的大米培养基进行毒素提取。所述稻曲病菌为稻绿核菌（Ustilaginoidea virens）YY7850，保藏号为CCTCC NO：M2016229，已于2016年4月26日送交湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，上述稻曲病菌可以高产五种稻曲病菌毒素。

摘要： 本发明涉及一种稻绿核菌产五种稻曲病菌毒素的方法，包括取培养15d的大米培养基进行提取毒素提取。所述稻绿核菌为稻绿核菌(Ustilaginoidea virens）ZZY‑2，通过采集源的分离和纯化后获得，已于2016年4月26日送交湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保存中心(CCTCC)保藏，保藏号为CCTCC NO：M2016230。

摘要： 本发明公开了一种稻曲病菌的分离方法。该方法采用一种特别的孢子分散丝与孢子分散板配合，直接从稻曲病病稻粒中将单个厚垣孢子分离出来，培养形成一个遗传组成单一的稻曲病菌菌株。分离培养的实施操作步骤如下：1)稻曲病标样的采备；2)孢子分散丝的制备；3)孢子分散板的制备；4)厚垣孢子的滑散；5)离散单厚垣孢子的切出；6)单孢子的培养与单孢子菌株的形成。本发明具有如下优点：1)分离孢子用的关键器具简单易制，分离操作简单易行；2)分离与取得单孢菌株能一次到位；3)分离工作耗工少耗时短；4)能显著提高稻曲病菌分离的工作效率及分离结果的可靠性。

摘要： 一种稻曲病菌薄壁分生孢子的转移和分散方法，直接从产孢菌落上拾取孢子并转移分散到观测平板上，按如下步骤操作：1)材料及器具的准备；2)孢子源的准备；3)孢子观测板的制备；4)孢子的拾取与密集孢子的稀释；5)孢子的转移与释放；6)孢子的培养观测。本发明具有如下优点：1)不需要将关键的工作材料(薄壁分生孢子)配备成孢子悬浮液，减少污染风险；2)可以在长条状的培养平板上散布与观测薄壁分生孢子的萌发与生长，提高观测孢子萌发活动的效率与效果，有利于开展孢子萌发生物学研究中的多因素作用设计与批量测试比较。

摘要： 本发明涉及一种产稻曲病菌毒素的稻曲病菌的鉴定方法，尤其是一种同时产五种稻曲病菌毒素A、B、C、D和F的稻曲病菌的鉴定方法。通过菌落形态观察、孢子形态鉴定、分子生物学鉴定三部分对稻曲病菌进行鉴定。上述方法，对目标菌种有效的鉴定，确定分离方法的有效性，通过三部分鉴定，鉴定的准确性非常高。

摘要： 本发明涉及一种稻绿核菌，尤其是一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌及其获取方法。通过采集源的分离和纯化后获得。采用上述方法获得的稻绿核菌可以产五种毒素，该稻曲病菌(稻绿核菌)ZZY‑2(Ustilaginoidea virens ZZY‑2)已于2016年4月26日送交湖北省武汉市武汉大学内的中国典型培养物保存中心(CCTCC)保藏，其保藏号为CCTCC NO：M2016230。

摘要： 本发明涉及一种稻绿核菌的分离方法，尤其是一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌的有效分离方法。通过稻曲球样本的采集，菌株分离：将采集的稻曲球病粒先用75％酒精浸泡10秒钟，然后放于酒精灯上自燃5秒钟，用无菌滤纸吸干其表面的水分，将表层的组织在无菌操作状态下清理干净，然后用无菌手术刀将稻曲球切开，夹取中间层，接种到浓度为0.05g/L的氯霉素的无菌PSA平板培养基上，接种后的培养皿于28°C恒温培养箱培养，菌株纯化后进行菌株的保存。利用该方法对新鲜采集的单粒黄色、黄绿色或绿色稻曲球的分离成功率约为100％；4°C冰箱保存，保存时间不超过4个月或‑70°C冰箱保存，保存时间不超过1个月的稻曲球的分离成功率达90％以上和80％以上。

摘要： 本发明公开了一种稻曲病菌基因UvGHF1及其在水稻抗病中的应用，该基因编码区为1020bp，由340个氨基酸组成，用InterPro和Pfam网站对UvGHF1的结构域进行预测发现，UvGHF1包含N端信号肽(SignalPeptide)和糖苷水解酶GH42结构域。本发明通过Phyre2在线同源建模预测分析，以嗜热栖热菌(Thermusthermophilus)β‑半乳糖苷酶晶体结构1KWG为模板，构建了UvGHF1蛋白同源三维结构模型。本发明通过构建异源表达稻曲病菌UvGHF1基因的转基因水稻植株，发现转基因水稻能够显著提高对稻曲病、稻瘟病和白叶枯病的抗性，首次阐明了该基因具有正向调控水稻抗病性的功能。本发明提供的UvGHF1基因是一种适用于创制高抗稻曲病、稻瘟病和白叶枯病的水稻新材料的新基因资源，可以用于改良水稻抗病性，对于水稻抗病新种质的创制和新品种的选育具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种稻曲病菌人工接种方法，包含以下步骤：1)采集发病稻田稻曲球，分离纯化并通过液体培养得到菌丝+分生孢子混合液作为接种体备用；2)将水稻按常规播种时间往后推迟15天播种，移栽至水泥槽中；3)接种时间选择破口前3‑5天的傍晚进行，用手持喷雾器将接种混体进行喷雾接种，保证喷雾均匀，连续喷2天；4)接种后的植株用黑布遮阴2天，接种当晚不进行喷水保湿，次日开始定时喷雾保湿，2天后取下黑布正常光照，继续保持90％相对湿度直至破口后3天。本发明通过调节水稻播种时间，稳定诱发稻曲病，使发病率达80％以上；成本低、工作量较小、操作简便、结果可靠，对水稻发育影响小，适合批量的水稻品种稻曲病抗性鉴定。

摘要： 本发明涉及植物保护技术领域，特别是涉及一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组、试剂或试剂盒及其应用和方法。本发明提供了一组用于检测稻曲病菌交配型的引物组，所述引物组包括第一引物组和第二引物组；所述第一引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示的引物；所述第二引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5～8所示的引物。利用本发明所述引物组能够快速检测稻曲病菌交配型基因的分子生物学方法，具有灵敏度高、特异性强等优势。