摘要:
目的观察大黄牡丹汤对急性胰腺炎大鼠肺组织细胞凋亡及炎症反应的影响,基于PI3K/AKT信号通路探讨其作用机制。方法96只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、奥曲肽组和大黄牡丹汤高、中、低剂量组,每组16只。除空白组外,其余各组采用经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液造模。各组造模前1 h及造模后12、24 h各给药1次,奥曲肽组予0.01 mg/kg奥曲肽皮下注射,大黄牡丹汤高、中、低剂量组分别予14、7、3.5 g/kg大黄牡丹汤灌胃,空白组和模型组予等体积蒸馏水灌胃。观察大鼠一般状态;生化分析仪测定大鼠血清淀粉酶(AMS)、C反应蛋白(CRP)含量;HE染色观察胰腺和肺组织病理变化;ELISA检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;RT-PCR检测肺组织PI3K、AKT、Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA表达;Westernblot检测肺组织PI3K、p-AKT、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠一般生存状态不佳,血清AMS、CRP含量显著增加(P<0.01),HE染色可见胰腺、肺组织坏死、充血、结构不完整,肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.01),PI3K、Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达显著升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著降低,AKT mRNA和p-AKT蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠一般生存状态有不同程度改善,血清AMS、CRP含量有不同程度降低,胰腺、肺组织水肿、坏死程度明显改善,奥曲肽组和大黄牡丹汤高、中剂量组大鼠肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著减少(P<0.01,P<0.05),奥曲肽组和大黄牡丹汤高剂量组大鼠肺组织PI3K、Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达显著降低,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著升高,AKT mRNA和p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论大黄牡丹汤对急性胰腺炎大鼠有较好改善作用,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,减轻肺组织病理损伤,抑制细胞凋亡及炎症反应有关。