SH-SY5Y细胞

摘要： 目的:探讨玉米黄素对衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的SH-SY5Y细胞活性、细胞周期、自噬及凋亡的影响。方法:分别设置空白对照组(不作处理)、玉米黄素组(5μmol/L玉米黄素)、TM损伤组(5μg/mL TM)和损伤加保护组(5μmol/L玉米黄素预处理+5μg/mL TM进一步共处理),采用噻唑蓝法检测各处理对SH-SY5Y细胞存活率的影响,从而筛选药物共处理时间;采用流式细胞术测定细胞周期的变化;通过Western blot法测定自噬相关蛋白Beclin1、Beclin1-C和微管结合蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)B以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma 2,BCL2)的表达量。结果:玉米黄素(5μmol/L)能减轻TM对SHSY5Y细胞存活率的抑制作用,与TM损伤组相比,损伤加保护组在处理时间为36 h时差异极显著(P<0.01),48 h时差异显著(P<0.05);而TM损伤组相较于空白对照组在处理24、36、48 h时均表现出极显著差异(P<0.01)。与空白对照组相比,TM处理可以极显著增加细胞周期中G0/G1期细胞数量(P<0.01),显著或极显著增加LC3B(P<0.01)、Beclin1(P<0.05)及Beclin1-C(P<0.05)表达水平,极显著降低G2/M期细胞数量(P<0.01)、抗凋亡蛋白BCL2表达水平(P<0.01)。而玉米黄素联合TM处理与TM损伤组比较,均能减轻TM引起的改变,其中BCL2蛋白水平显著提高(P<0.05)。结论:玉米黄素可减轻TM处理引起的SH-SY5Y细胞周期G1期阻滞、促细胞自噬与促凋亡作用,其作用机制与玉米黄素对细胞存活率、细胞周期分布和自噬、凋亡相关蛋白表达的调节有关。

摘要： 目的研究天麻素(GAS)对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞突触相关蛋白表达的影响及其神经保护作用。方法采用CCK8法筛选GAS安全浓度,GAS单独或联合Aβ_(1-42)处理SH-SY5Y细胞后,采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法(Western blot)分别测定突触相关蛋白突触素(SYN)、发动蛋白1(DYN1)、突触后致密蛋白95(PSD95)mRNA及蛋白表达水平。结果CCK8结果显示在0~150μmol/L GAS时细胞活力无明显变化,可作为GAS处理细胞的安全浓度;0~120μmol/L GAS处理SH-SY5Y细胞后,SYN、DYN1及PSD95 mRNA及蛋白水平均上调、并随着GAS浓度的升高而升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,Aβ_(1-42)组细胞SYN、DYN1、PSD95 mRNA及蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与Aβ组比较,Aβ+GAS组细胞SYN、DYN1、PSD95 mRNA及蛋白表达水平明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论GAS可能通过上调细胞突触相关蛋白表达来发挥神经保护作用。

摘要： 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体(Exo)诱导自噬对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活的影响,阐明其作用机制。方法:将人神经细胞肿瘤SH-SY5Y细胞分别给予不同浓度(0、0.25、0.50、1.00和2.00 mmol·L^(-1))MMP+作用24和48 h后检测各组细胞存活率。实验分为对照组[给予磷酸盐缓冲液(PBS)]、MPP^(+)组(给予0.50 mmol·L^(-1) MPP^(+))、MPP^(+)+BMSCs的上清液(BMSCs-Sup)组(给予0.50 mmol·L^(-1) MPP^(+)和BMSCs Sup)、MPP^(+)+BMSCs-Exo组(给予0.50 mmol·L^(-1) MPP^(+)和100 mg·L^(-1) BMSCs Exo)、MPP^(+)+雷帕霉素(Rap)组(给予0.50 mmol·L^(-1) MPP^(+)和2 mmol·L^(-1) Rap)和MPP^(+)+BMSCs-Exo+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(给予0.50 mmol·L^(-1) MPP^(+)、100 mg·L^(-1) BMSCs-Exo和1 mmol·L^(-1)3-MA)。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率,共聚焦显微镜下观察吖啶橙染色后各组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度,Western blotting法检测各组细胞中CD63、TGS101和Calnexin蛋白表达情况。结果:MTT检测,SH-SY5Y细胞存活率随着MPP^(+)浓度的升高或处理时间的延长逐渐降低(P<0.05),且呈浓度和时间依赖性。与MPP^(+)组比较,MPP^(+)+BMSCs-Sup组、MPP^(+)+BMSCs-Exo组和MPP^(+)+Rap组SH-SY5Y细胞存活率升高(P<0.05);与MPP^(+)+BMSCs-Exo组比较,MPP^(+)+BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞存活率降低(P<0.05)。细胞吖啶橙染色,与MPP^(+)组比较,MPP^(+)+BMSCs-Sup组、MPP^(+)+BMSCs-Exo组和MPP^(+)+Rap组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度增加(P<0.05);与MPP^(+)+BMSCs-Exo组比较,MPP^(+)+BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度降低(P<0.05)。Western blotting法检测,各组细胞中外泌体标志蛋白CD63和TGS101蛋白高表达,内质网标志蛋白Calnexin低表达。结论:BMSCs-Exo通过激活细胞自噬抵抗MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞存活率下降。

摘要： 目的筛选绿萼梅水提物抗β淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)致阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)细胞模型的活性部位,并对活性较好的部位进行化学成分辨识。方法采用水和不同浓度乙醇提取绿萼梅活性部位,再用AB-8型大孔吸附树脂富集并制备绿萼梅4个不同洗脱部位样品,采用Aβ诱导的SH-SY5Y细胞AD模型筛选绿萼梅不同部位样品活性,借助超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱对活性较好的部位进行成分鉴定。结果不同浓度乙醇洗脱物对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞毒性均有较好的抑制作用(P<0.05),药效呈现出浓度依赖性,其中60%、90%乙醇洗脱物作用极为显著(P<0.05);从两个活性部位共鉴定出24个化合物,包括16个黄酮类成分,4个苯丙素类成分和4个其他类成分;两个活性组分中共有成分14个,其中主要为黄酮类成分。结论60%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位是抗Aβ毒性的活性部位,黄酮类成分为该活性部位的主要物质基础。

摘要： 目的:通过肠吸收液-体外药理活性结合拆方研究蛭蛇通络胶囊抗氧化和抗凝的主要组分。方法:根据制备工艺路线将蛭蛇通络胶囊进行拆方,得到全方和3个组分,分别制备相应的肠吸收液。通过DPPH自由基清除实验观察抗氧化作用,通过凝血四项和ADP诱导血小板凝集实验观察抗凝作用。构建氧糖剥夺SH-SY5Y细胞模型,验证蛭蛇通络胶囊全方及拆方组分通过抑制氧化应激发挥神经保护作用。结果:蛭蛇通络胶囊能清除DPPH自由基,最强的成分为含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分1;降低纤维蛋白原(FIB)水平、延长凝血酶时间(TT)并抑制ADP诱导的血小板凝集最强的成分为含水蛭、乌梢蛇和红花的组分2。蛭蛇通络胶囊全方和含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分1均能抑制氧糖剥夺SH-SY5Y细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)水平,抑制神经细胞损伤,提高细胞生存率。结论:通过制备工艺路线将蛭蛇通络胶囊进行快速拆解,寻找并定位全方中发挥抗氧化和抗凝的主要组分。结果证实蛭蛇通络胶囊清除DPPH自由基,发挥抗氧化作用以含人参、黄芪、天麻、丹参和葛根的组分为最佳;抗凝血作用以含水蛭、乌梢蛇和红花的组分最佳。本研究为中药复方的功效物质基础提供了实验证据,但其有效成分和具体机制仍需深入研究。

摘要： 目的:探讨新型方酰胺化合物双过氧(吡啶-2-方酰胺)氧代钒酸钾[bpV(pis)]对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpyridinium iodide,MPP^(+)iodide)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的作用及可能机制。方法:将SH-SY5Y细胞分别给予20、200、2000 nmol/L低中高3个浓度的bpV(pis)预处理12 h,然后与神经毒性药物MPP^(+)(1 mmol/L)共处理24 h复制帕金森病(Parkinson′s disease,PD)细胞损伤模型,最后用CCK-8法检测各组细胞存活率,Western blotting检测各组细胞p-PKB(Ser^(473))表达水平变化。选择最适bpV(pis)浓度进一步进行作用机制研究,并用1μmol/L的LY294002阻断PI3K/PKB信号通路,然后用CCK-8法检测各组细胞存活率变化,Western blotting检测各组细胞p-PKB(Ser^(473))、Bcl-2及Bax水平变化。结果:与模型组相比,中、高浓度bpV(pis)组细胞存活率显著提高(P<0.05),p-PKB(Ser^(473))水平升高(P<0.05)。使用LY294002将PI3K/PKB阻断后,bpV(pis)对细胞存活率的提高和对Bax/Bcl-2表达比值的升高作用均被抑制(P<0.05)。结论:bpV(pis)可通过激活PKB活性来提高MPP^(+)诱导损伤的SH-SY5Y细胞的存活率,并减少细胞凋亡。

摘要： 目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流。方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白。将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348。慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系。诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析。Western blot检测目的蛋白表达情况。结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确。在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体。无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001)。Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带。结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础。

摘要： 目的:探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)对由氧化应激损伤引起的线粒体功能障碍以及细胞凋亡的作用及机制。方法:体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,用过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)诱导建立氧化应激模型,分为PBS组、模型组(HO组)和HO+AST Ⅳ组。应用ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平;用线粒体膜电位检测试剂盒JC-1检测细胞线粒体膜电位变化;应用Western blot法检测线粒体呼吸链上的complex Ⅰ~Ⅴ,分别为NADH:泛醌氧化还原酶亚基B8(NADH:ubiquinone oxidoreductase subunit B8,NDUFB8;complex Ⅰ)、琥珀酸脱氢酶B(succinate dehydrogenase B,SDHB;complex Ⅱ)、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白2(ubiquinol-cytochrome C reductase core protein 2,UQCRC2;complex Ⅲ)、细胞色素C氧化酶Ⅰ(mitochondrially encoded cytochrome C oxidase Ⅰ,MTCO1;complex Ⅳ)和ATP合酶F1亚基α(ATP synthase F1 subunit alpha,ATP5A;complex Ⅴ),检测线粒体动力学分裂蛋白——磷酸化发动蛋白相关蛋白1(phosporylated dynamin-related protein 1,p-Drp1)和线粒体分裂蛋白1(mitochondrial fission protein 1,Fis1),以及融合蛋白——线粒体融合蛋白1(mitofusin 1,Mfn1)、Mfn2和视神经萎缩症蛋白1(optic atrophy protein 1,OPA1),检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3;采用免疫荧光染色法检测NDUFB8和MTCO1表达;采用TUNEL染色检测细胞凋亡。结果:在200μmol/L H_(2)O_(2)诱导的SY5Y细胞氧化应激模型中,线粒体膜电位(P<0.01)和ATP水平(P<0.05)显著下调,呼吸链氧化磷酸化过程中NDUFB8、SDHB、ATP5A和MTCO1的表达均显著减少(P<0.05或P<0.01),线粒体分裂蛋白Fis1(P<0.05)和p-Drp1(P<0.01)蛋白水平显著升高,融合蛋白Mfn1、Mfn2和OPA1表达则显著降低(P<0.05或P<0.01),促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达量显著降低(P<0.01)。AST Ⅳ能够显著提高细胞线粒体膜电位(P<0.01)和ATP水平(P<0.01),显著促进呼吸链氧化磷酸化过程中NDUFB8、SDHB、MTCO1、ATP5A及UQCRC2的表达(P<0.05或P<0.01),显著降低p-Drp1和Fis1蛋白水平(P<0.01),显著增加OPA1、Mfn1和Mfn2的表达(P<0.05或P<0.01),显著增加Bcl-2表达(P<0.05),显著降低Bax和cleaved caspase-3蛋白水平(P<0.01)。结论:AST Ⅳ能够保护神经元,其可能的机制是通过改善线粒体功能,调控线粒体动力学分裂/融合平衡,从而减轻氧化应激损伤导致的神经元凋亡。

摘要： 基于Amplex Red荧光分析法,构建新型乙酰胆碱酯酶抑制剂(acetylcholinesterase inhibitor,AChEI)高通量筛选模型并对其进行评价,检测97个灵芝(Ganoderma lucidum)子实体醇提物对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的抑制活性,再通过细胞模型进行验证。结果表明:构建的新型高通量AChEI筛选模型具有准确度、灵敏度高,不受测试样品溶液颜色干扰等优点;筛选出3个对乙酰胆碱酯酶具有较强抑制活性的灵芝子实体醇提物,研究结果可为后续灵芝来源AChEI的开发提供参考。

摘要： 以SH-SY5Y和PC12细胞为实验模型,深入探讨了代森锰(Maneb)及其代谢产物对多巴胺能神经细胞的毒性影响与机制.结果表明,Maneb的有机部分和金属离子成分单独暴露不具有明显的毒性作用,联合暴露具有协同效应,且对细胞活性的抑制程度与同一浓度水平的Maneb相当,其原因与诱导活性氧自由基生成、细胞凋亡相关.此外,蛋白免疫印迹法发现,Maneb下调Bcl-2的表达、上调Bax、细胞色素C的水平,同时激活Caspase-3,提示线粒体凋亡途径在Maneb诱导多巴胺能神经细胞凋亡过程中的重要作用.

摘要： 目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.

摘要： 目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.

摘要： 目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.

摘要： 目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.

摘要： 目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.

摘要： 目的：探讨TDP-43(A315T)突变蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制.rn 方法：采用真核细胞转染技术将Flag-TDP-43(wt)及Flag-TDP-43(A315T)质粒转入SH-SY5Y细胞,通过Western blot检测TDP-43截短型表达及自噬水平的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化.rn 结果：与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)细胞截短型片段Flag-TDP-35及Flag-TDP-25表达明显上调,下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)诱导SH-SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少.与转染Flag-TDP-43 (wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)后SH-SY5Y细胞凋亡率增加.rn 结论：TDP-43(A315T)突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH-SY5Y细胞凋亡.

摘要： 目的：探讨TDP-43(A315T)突变蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制.rn 方法：采用真核细胞转染技术将Flag-TDP-43(wt)及Flag-TDP-43(A315T)质粒转入SH-SY5Y细胞,通过Western blot检测TDP-43截短型表达及自噬水平的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化.rn 结果：与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)细胞截短型片段Flag-TDP-35及Flag-TDP-25表达明显上调,下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)诱导SH-SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少.与转染Flag-TDP-43 (wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)后SH-SY5Y细胞凋亡率增加.rn 结论：TDP-43(A315T)突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH-SY5Y细胞凋亡.

摘要： 目的：探讨TDP-43(A315T)突变蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制.rn 方法：采用真核细胞转染技术将Flag-TDP-43(wt)及Flag-TDP-43(A315T)质粒转入SH-SY5Y细胞,通过Western blot检测TDP-43截短型表达及自噬水平的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化.rn 结果：与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)细胞截短型片段Flag-TDP-35及Flag-TDP-25表达明显上调,下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)诱导SH-SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少.与转染Flag-TDP-43 (wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)后SH-SY5Y细胞凋亡率增加.rn 结论：TDP-43(A315T)突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH-SY5Y细胞凋亡.

摘要： 目的：探讨TDP-43(A315T)突变蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制.rn 方法：采用真核细胞转染技术将Flag-TDP-43(wt)及Flag-TDP-43(A315T)质粒转入SH-SY5Y细胞,通过Western blot检测TDP-43截短型表达及自噬水平的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化.rn 结果：与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)细胞截短型片段Flag-TDP-35及Flag-TDP-25表达明显上调,下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)诱导SH-SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少.与转染Flag-TDP-43 (wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)后SH-SY5Y细胞凋亡率增加.rn 结论：TDP-43(A315T)突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH-SY5Y细胞凋亡.

摘要： 目的：探讨TDP-43(A315T)突变蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制.rn 方法：采用真核细胞转染技术将Flag-TDP-43(wt)及Flag-TDP-43(A315T)质粒转入SH-SY5Y细胞,通过Western blot检测TDP-43截短型表达及自噬水平的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)染色检测细胞自噬空泡的变化.rn 结果：与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)细胞截短型片段Flag-TDP-35及Flag-TDP-25表达明显上调,下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.与转染Flag-TDP-43(wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)诱导SH-SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少.与转染Flag-TDP-43 (wt)组相比,过表达Flag-TDP-43(A315T)后SH-SY5Y细胞凋亡率增加.rn 结论：TDP-43(A315T)突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH-SY5Y细胞凋亡.

摘要： 本申请公开一种体外诱导人胎盘间充质干细胞分化为肝细胞的方法，通过在类肝细胞化诱导阶段起加入五味子乙素，能有效提高人胎盘间充质干细胞诱导分化为具有功能性的肝细胞的效果，且使用的干细胞为人胎盘间充质干细胞，其来源丰富、提取方便，诱导组合物成分明确、诱导操作简单，具有工业化和商业化的前景。

摘要： 本发明公开了一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，属于细胞检测技术领域。本发明对白细胞、嗜碱性粒细胞进行染色，而红细胞和脂肪滴不会被染色，去除了不良影响，比现有其他技术测定人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数更加准确。溶血剂为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～20g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～30g/L，缓冲溶液的pH值为2.0～5.0；染色液为含有聚次甲基染料、乙二醇的溶液，其中，聚次甲基染料浓度为0.005％，乙二醇99.9％。为本发明简化了溶血剂的组分，加入了染色液，反应时间仅需10‑20s，即可完成对嗜碱性粒细胞和白细胞进行分类计数的测定，具有高度的准确性。

摘要： 本发明公开了一种可兼容白细胞五分类和白细胞三分群的血细胞分析仪，其特征在于，包括采样针、采样针清洗装置、至少一个白细胞反应池、分配系统、白细胞测量系统、废液排放系统、至少一种溶血剂和稀释液，所述采样针用于吸取待检测的血液样本，所述血液样本以及至少一种溶血剂通过分配系统分配到相应的反应池进行反应；所述白细胞测量系统用于对所述反应池中反应后的样本进行测量。采用本发明可在一台血细胞分析仪上可兼容白细胞五分类和白细胞三分群功能。

摘要： 本申请公开一种体外诱导人胎盘间充质干细胞分化为肝细胞的方法，通过在类肝细胞化诱导阶段起加入五味子乙素，能有效提高人胎盘间充质干细胞诱导分化为具有功能性的肝细胞的效果，且使用的干细胞为人胎盘间充质干细胞，其来源丰富、提取方便，诱导组合物成分明确、诱导操作简单，具有工业化和商业化的前景。

摘要： 本发明公开了一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，属于细胞检测技术领域。本发明对白细胞、嗜碱性粒细胞进行染色，而红细胞和脂肪滴不会被染色，去除了不良影响，比现有其他技术测定人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数更加准确。溶血剂为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～20g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～30g/L，缓冲溶液的pH值为2.0～5.0；染色液为含有聚次甲基染料、乙二醇的溶液，其中，聚次甲基染料浓度为0.005％，乙二醇99.9％。为本发明简化了溶血剂的组分，加入了染色液，反应时间仅需10‑20s，即可完成对嗜碱性粒细胞和白细胞进行分类计数的测定，具有高度的准确性。

摘要： 本发明公开了一种五分类血细胞分析仪用白细胞分类试剂盒，属于细胞检测技术领域。本发明的试剂盒由溶血剂和染色液组成，溶血剂包括：能够迅速溶解红细胞，且使白细胞的细胞膜部分损伤的表面活性剂；能够与白细胞内阴离子结合，使白细胞产生形态差异的一种阳离子有机物；能够将溶血剂pH值调整在6.5～8.5范围内的缓冲剂；染色液包括聚次甲基染料、甲醇和乙二醇。本发明的五分类血细胞分析仪用白细胞分类试剂套装容易加工生产，检测结果准确，性能稳定，成本比原装进口试剂更加低廉，改变了国内进口仪器只能使用昂贵进口试剂的现状，降低对进口试剂的依赖。

摘要： 本发明提供了一种刺五加苷处理人间充质干细胞得到少突胶质前体细胞及其增殖的分化培养基，所述分化培养基包括液体基础培养基，其中，以所述液体基础培养基的体积为基准，所述分化培养基还含有1-500ug/mL的刺五加苷、1-20体积％的胎牛血清、5-300ng/mL人表皮生长因子(EGF)和5-300ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)；还提供了使用前述分化培养基的制备该刺五加苷处理试剂盒的方法；还提供了包括前述的方法获得的少突胶质前体细胞的用于治疗神经系统疾病的药物组合物。使用本发明的分化培养基的本发明的方法能够高效分化间充质干细胞，得到少突胶质前体细胞。本发明用于治疗创伤性脊髓损伤与多发性硬化症等疾病的药物组合物能在体内修复损伤的神经细胞，并消除神经系统病变。

摘要： 本发明提供了五羟色胺或其受体激动剂在治疗ILC2细胞介导的免疫性疾病中的应用，具体地，本发明提供了一种物质的用途，所述用于制备组合物或制剂，所述组合物或制剂用于预防和/或治疗ILC2细胞介导的免疫性疾病，其中，所述物质选自下组：五羟色胺、五羟色胺受体激动剂、或其组合。

摘要： 本发明属于医学显微图像分类领域，提供了一种基于改进的注意力卷积神经网络白细胞五分类方法，使用深度学习对血液细胞图像进行识别。本发明以ResNeXt‑50为骨干网络，残差模块使用分组卷积来减少模型参数量，在网络每个阶段末并行加入一种独立的注意力模块结构，针对不同阶段卷积神经网络输出的白细胞特征图，利用注意力模块的注意头部分提取白细胞关键区域，通过注意力模块输出头部分输出预测类别和置信度分数，再通过预测类别与置信度加权平均得到最终网络模型的输出，基于原始ResNeXt‑50网络框架下的改进，实现白细胞五分类。本发明利用并行的注意力模块在网络不同阶段输出类预测和置信度分数，提高了白细胞分类的准确率。

摘要： 本实用新型公开了一种可兼容白细胞五分类和白细胞三分群的血细胞分析仪，其特征在于，包括采样针、采样针清洗装置、至少一个白细胞反应池、分配系统、白细胞测量系统、废液排放系统、至少一种溶血剂和稀释液，所述采样针用于吸取待检测的血液样本，所述血液样本以及至少一种溶血剂通过分配系统分配到相应的反应池进行反应；所述白细胞测量系统用于对所述反应池中反应后的样本进行测量。采用本实用新型可在一台血细胞分析仪上可兼容白细胞五分类和白细胞三分群功能。