锰诱导SH-SY5Y细胞线粒体自噬

摘要

目的:探讨锰能否诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬.方法:以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型,不同剂量的MnCl2处理细胞24h,通过MTT法检测MnCl2对细胞存活率的影响,流式细胞仪检测MnCl2对细胞线粒体膜电位的影响,以Mito-Tracker Green和Lyso-Tracker Red荧光探针分别标记线粒体和溶酶体,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体和溶酶体的共定位,以表征线粒体自噬.Western blot检测MnCl2作用后线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3等分子的表达的变化.结果:MnC12可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞存活率,并降低细胞线粒体膜电位,MnCl2诱导细胞线粒体和溶酶体共定位,并呈剂量依赖性地上调线粒体自噬相关蛋白PINKI、parkin、atg5、p62和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等分子的表达.结论:MnCl2可诱导SH-SY5Y细胞发生线粒体自噬,线粒体自噬可能参与锰神经毒性机制.