基因,p16

摘要： 目的 探讨复方麝香膏治疗外阴硬化性苔癣的临床疗效及对病变组织中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及抑癌基因p16表达的影响.方法 选取2017年6月至2019年6月广西中医药大学附属瑞康医院的90例病人,经病理活检确诊为外阴硬化性苔癣,按随机数字表法分为两组,观察组及对照组各45例,对照组选择常规传统药物治疗,观察组选用复方麝香膏外用,连续用药3个月.治疗前、治疗完成后即刻、治疗后6个月取外阴原病变处组织行病理学检查,并采用免疫组化方法 检测病变组织中cyclin D1与p16的表达水平,于治疗完成后即刻、治疗后6个月判定两组的临床疗效并比较有效率.结果 对照组与观察组治疗完成后即刻两组cyclin D1蛋白阳性表达率分别为31.11％、24.44％,与治疗前(71.11％、68.89％)比较均降低(P0.05).治疗完成后即刻两组cyclin D1及p16蛋白阳性表达率均差异无统计学意义(P>0.05);治疗后6个月,观察组cyclin D1蛋白阳性表达率28.89％低于对照组51.11％(P0.05),治疗后6个月观察组总有效率77.8％高于对照组57.8％(P<0.05).结论 复方麝香膏及糖皮质激素均是治疗外阴硬化性苔癣的有效方法 ,两者均能降低cyclin D1的表达水平,增加p16的表达水平,短期疗效相当,但复方麝香膏疗效稳定,治疗后6个月时复方麝香膏疗效优于糖皮质激素.

摘要： 目的:探究p16INK4a基因在转化生长因子-β1 (TGF-β1)介导的促心肌纤维化中的作用及机制.方法:在人原代心脏成纤维细胞中转染p16INK4a过表达腺病毒,TGF-β1刺激并检测胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨膜蛋白(POSTN)蛋白表达水平.其次,TGF-β1刺激细胞后,分别加入细胞周期蛋白依赖性激酶4和6 (CDK4/6)抑制剂Palbociclib和Ribociclib,模拟p16蛋白细胞周期作用,检测α-SMA和POSTN蛋白表达水平.最后,同以上方法转染p16INK4a过表达腺病毒和TGF-β1刺激,使用Ravoxertinib阻断ERK信号通路,检测其对Collagen Ⅰ、α-SMA和POSTN表达水平的影响.结果:与空载腺病毒处理对照组比较,p16INK4a过表达(p16-OE)组TGF-β1介导的Collagen Ⅰ[(0.33±0.08)比(1.36±0.22)]、α-SMA[(0.62±0.22)比(1.43±0.45)]和POSTN[(0.67±0.04)比(1.69±0.50)]蛋白表达水平均显著升高,P＜0.05或＜0.01.与对照(NC)+二甲亚砜(DMSO)组比较,NC+Palbociclib组和NC+Ribociclib组α-SMA和POSTN蛋白表达水平均无显著变化,P均＞0.05.与p16-OE+ DMSO组比较,p16-OE+ Ravoxertinib组Collagen Ⅰ [(1.38±0.06)比(0.77±0.07)]、α-SMA [(1.09±0.03)比(0.70±0.13)]和POSTN[(1.34±0.11)比(0.69±0.06)]蛋白表达水平均显著降低,P均＜0.01.结论:p16INK4a基因可能通过ERK1磷酸化通路激活而非细胞周期依赖作用,促进心脏成纤维细胞分泌促纤维化蛋白,进而参与心肌纤维化病理过程.

摘要： 目的 探讨P16/Ki-67双染检测技术在宫颈癌及癌前病变筛查中的价值和临床意义.方法 选取2018年9月至2019年5月山东省潍坊市人民医院妇科收治的110例宫颈上皮内瘤变(CIN)2级以下的患者、31例CIN2级患者、27例CIN3级患者和12例宫颈癌患者,分别评估人乳头瘤病毒(HPV)DNA、液基细胞学技术(TCT)和P16/Ki-67双染检测作为宫颈癌及癌前病变初筛方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值,并探讨P16/Kl-67双染检测技术用作高危型HPV阳性患者分流的可行性.结果 HPV DNA,TCT和P16/Ki-67双染检测诊断< CIN2级的敏感性分别为80. 91％、75.45％,81.82％,特异性分别为91.43％,87. 14％ ,97. 14％,阳性预测值分别为93. 68％ ,90. 22％、97.83％,阴性预测值分别为75.29％ ,69.32％ 、77.27％,差异均具有统计学意义(x2= 1.593 ,P = 0.042;HPV DNA及TCT,敏感性及阳性预测值均高于TCT(均P<0.012 5).3种方法诊断CIN2级的敏感性分别为90.32％,83.87％ ,96.77％,差异具有统计学意义(x2 =2.952,P = 0.029);特异性分别为80.91％、异具有统计学意义(x2 =3.175,P =0.013);P16/Ki-67双染检测的敏感性、阴性预测值均高于TCT(均(x2 =0.497 ,P = 0.780);特异性分别为80.91％、75.45％ ,81.82％,差异具有统计学意义(x2 =4. 677,Ki-67双染检测的特异性、阳性预测值均高于TCT(均P<0.012 5).3种方法诊断宫颈癌的敏感性分别为91.67％ 、75.00％ ,100.00％,差异具有统计学意义(x2 =3. 293,P=0.034);特异性分别为80.91％、P16/Ki-67双染检测的敏感性高于TCT(P<0.012 5).针对高危型HPV阳性患者的分流,P16/Ki-67双染检测及TCT诊断的敏感性分别为98.44％、89.06％,特异性分别为85.71％,61.90％,阴性预测值分别为94.70％ ,65.00％,差异均具有统计学意义(x2 =4.800,P = 0.028;x2 =3.079,P=0.039;x2 =5.284,断宫颈癌的敏感性高于TCT.在对高危型HPV阳性患者的分流当中,P16/Ki-67双染检测提供了一种更加灵敏和准确的分流路径.

摘要： 目的探讨晚期胃癌患者血浆RUNT相关转录因子3(human RUNT-related transcription factor 3,RUNX3)和p16基因甲基化与临床病理特征和氟尿嘧啶化疗敏感性的关系。方法收集行一线氟尿嘧啶联合化疗的晚期胃癌患者67例和体检健康42例。应用甲基化特异性PCR法检测血浆中RUNX3和p16基因甲基化,分析基因甲基化和临床病理特征、化疗疗效的关系。结果化疗前胃癌患者p16和RUNX3的甲基化频率均高于对照组[61.2%(41/67)vs 0.0%(0/42),70.1%(47/67)vs 11.9%(5/42);均P<0.01]。化疗后胃癌患者p16和RUNX3的甲基化频率分别降低至47.8%(32/67;χ^2=5.05,P=0.025)和47.8%(38/67;χ^2=2.61,P=0.106)。以胃为主要肿瘤部位的患者血浆标本中p16和RUNX3的甲基化频率均高于以胃食管交界处为主要肿瘤部位的患者(均P<0.05)。p16和RUNX3甲基化阳性患者对氟尿嘧啶化疗的应答率均低于甲基化阴性患者(17.1%vs 42.3%,P=0.023;19.1%vs45.0%,P=0.029)。结论p16和RUNX3的甲基化在胃癌患者血浆中较为常见且特异性强,二者与患者对氟尿嘧啶化疗的反应密切相关。

摘要： 目的 研究喉基底样鳞状细胞癌(basaloid squamous cell carcinoma,BSCC)中人乳头状瘤病毒(HPV)及细胞周期相关蛋白的表达及意义.方法 收集北京同仁医院2005年1月至2011年12月332例喉鳞状细胞癌(SCC)病理资料,包括303例普通型SCC及29例喉BSCC,回顾性分析其中29例喉BSCC(8.7％)临床病理学特点,采用聚合酶链反应(PCR)反向点杂交方法检测HPV DNA,免疫组织化学SP法染色观察细胞周期相关蛋白p53、Ki-67、p16、p21、cyclin D1的表达,比较分析以上指标与肿瘤大小、分期、部位、淋巴结转移等主要病理学特点的关系,初步探讨HPV与细胞周期相关蛋白之间的相关性.结果 (1)29例喉BSCC男性27例,女性2例,年龄46～82岁(中位年龄62岁),与普通型SCC相比,发病年龄、淋巴结转移个数、淋巴结转移率及声门上肿瘤的发生率略高,但差异无统计学意义(P>0.05).(2)喉BSCC中27.6％(8/29)检测到HPV DNA,且均为HPV16,HPV的表达与年龄、是否饮酒及分期、肿瘤大小等无关(P>0.05).(3)31.0％(9/29)的喉BSCC表达p53,且p53阳性病例更容易发生于声门上并伴有淋巴结转移(P0.05).(4)8例HPV阳性的BSCC只有3例p16阳性,HPV阳性组p21及Ki-67阳性指数比HPV阴性组增高(P0. 05). HPV DNA was detected in 27. 6％ (8/29) of the laryngeal BSCC, and all were HPV16. The expression of HPV was not related to age, alcohol consumption, tumor stage and tumor size. p53 was expressed in 31. 0％( 9/29) of laryngeal BSCC, and these cases were more likely supraglottic and had lymph node metastases (P<0. 05). p16 staining was seen in 24. 1％ (7/29) of laryngeal BSCC, and these cases showed slightly higher rate of lymph node metastasis compared to p16 negative cases. The expression rates of p21 and cyclinD1 were 27. 6％ (8/29) and 69. 0％(20/29), respectively, which were not related to age, tumor size, stage, lymph node metastasis, smoking and drinking. There were only 3 p16+/HPV+ cases, which showed higher p21 and Ki-67 index compared to the HPV negative group (P<0. 05). Conclusion Some laryngeal BSCC expresses HPV DNA, possibly indicating an association with HPV;but p16 expression is not a reliable indicator for HPV infection.

摘要： Hematologic malignancies are clonal hematologic disorders characterized by uncontrolled proliferation of mutational stem or progenitor cells,and the process of normal hematopoiesis is always disturbed.Normal cell cycle is tightly regulated by cyclin dependent kinases (CDK).CDK not only plays an important role in cell cycle,but also in the self-renewal of stem cells,epigenetic regulation and DNA repair.Studies of CDK gene knockout mouse models have demonstrated that CDK also is involved in the pathogenesis of cancers.Meanwhile the abnormal expression of CDK caused by chromosomal translocation or genetic mutations has been described in many tumors.That is why more and more attention is played on pharmacological inhibition targeted CDK.Cyclin D can form a CDK4/6-cyclin D complex with CDK,and participate in the regulation the cell cycle of hematopoietic stem cell.This article reviews roles of CDK,cyclin D and CDK4/6-cyclin D in hematopoiesis and hematologic malignancies,and the application of cell cycle inhibitors targeted CDK4/6-cyclin D in hematologic malignancies.%血液系统恶性肿瘤系突变的造血干细胞或前体祖细胞过度增殖,而正常造血系统被破坏的一组恶性肿瘤.正常细胞增殖受细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)严格调控,这些激酶不仅在细胞周期中发挥重要作用,还参与造血干细胞的自我更新与分化、表观遗传调节及DNA损伤修复等细胞活动.对于CDK基因敲除小鼠的研究发现,CDK表达缺失与肿瘤发生相关,而其染色体易位、基因突变引起的CDK表达改变均在肿瘤发生、发展中起作用,这也使更多的肿瘤研究聚焦在CDK及其靶向药物抑制剂的研究方面.细胞周期蛋白(cyclin)D可以与CDK形成CDK4/6-cyclin D复合体,参与造血干细胞细胞周期的调控.笔者拟就CDK、cyclin D及CDK4/6-cyclin D复合体在正常造血及血液系统恶性肿瘤的作用机制,以及CDK4/6靶向抑制剂在血液系统恶性肿瘤治疗中的应用的最新研究进展进行综述.

摘要： 目的:观察聚羟基丙烯酸(环保固定液)与10％中性缓冲福尔马林(传统固定液)在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达的结果,探讨其替代10％中性缓冲福尔马林的可行性.方法:收集2015年3月—2017年11月于南方医科大学附属中山博爱医院门诊及妇科住院部送检的宫颈组织标本245例,其中包括正常及慢性宫颈炎组52例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组87例,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组61例,宫颈癌组45例.同一病变部位取材2块,随机分2组,命名为A、B组.A组采用10％中性缓冲福尔马林固定制作切片245张;B组采用聚羟基丙烯酸固定制作切片245张.采用免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达情况.结果:①生物显微镜下,A、B组切片均背景清晰、阳性着色定位准确、阳性强度可靠、呈色鲜明,无非特异性染色产生、阴性和阳性对照染色结果可靠.②慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的A组P16蛋白阳性率分别为5.77％、35.63％、80.33％和100.00％,慢性宫颈炎组、LSIL组、HSIL组及宫颈癌组的B组P16蛋白阳性率分别为5.77％、33.33％、81.97％和100.00％.A、B组间对应的各级宫颈病变,P16蛋白表达阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:用聚羟基丙烯酸替代10％中性缓冲福尔马林对免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达阳性率无明显影响,聚羟基丙烯酸作为固定液在免疫组化法检测宫颈组织P16蛋白表达中有一定的使用价值.

摘要： 目的 探讨p16、Ki-67表达及人乳头瘤病毒(HPV)型别在子宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)治疗分流中的作用.方法 收集2014年1月至2016年10月在内蒙古医科大学附属医院妇产科门诊就诊、伴子宫颈高危HPV 感染、经阴道镜活组织病理检查证实为CINⅡ级的337例患者存档蜡块及于该院行子宫颈环形切除术(LEEP)的病理结果.对其切片行p16、Ki-67免疫组织化学检测,并对活组织检查组织中p16、Ki-67的表达与LEEP术后的病理结果进行比较分析.对HPV型别与LEEP术后的病理结果进行比较分析.结果 在337例患者中,LEEP术后病理级别分为

摘要： 目的:探讨免疫组织化学法检测子宫颈组织中p16蛋白表达时的石蜡切片厚度.方法:收集2014年1月至2018年3月中山市博爱医院病理检查结果为慢性宫颈炎(150例)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL,126例)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL,96例)及宫颈癌(78例)患者的子宫颈组织标本进行p16免疫组织化学染色,并采用条件Logistic回归分析石蜡切片厚度为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μm的标本p16蛋白表达的差异.结果:随着切片厚度增加,病变部位所在细胞核p16蛋白染色逐渐加深.慢性宫颈炎和宫颈癌患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异无统计学意义(χ2=7.817和1.332,均P>0.05);而LSIL和HSIL患者标本不同切片厚度的p16蛋白阳性率差异有统计学意义(χ2=17.688和10.182,P<0.05或P<0.01),当标本切片厚度为3.0～5.0μm时可获得较为稳定而可靠的检测结果.结论:免疫组织化学法行子宫颈组织p16蛋白检测推荐的标本切片厚度为3.0～5.0μm.

摘要： 目的 探讨P16和Ki-67在不同级别宫颈鳞状上皮内病变中的表达情况及临床病理意义.方法 收集2016年1月至2017年11月该院收治的214例患者的宫颈活检或LEEP术锥切标本作为研究对象,其中慢性宫颈炎42例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)103例,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)69例.采用SP法分别进行P16、Ki-67的免疫组织化学染色,检测其在不同宫颈组织中的表达情况.结果 P16和Ki-67在慢性宫颈炎 、LSIL、HSIL患者中阳性表达率均逐渐升高,两两比较,差异均有统计学意义(χ2=23.11、54.15、36.82、30.49,P<0.05);P16和Ki-67阳性表达与宫颈上皮内病变级别呈正相关(r=0.79、0.87,P<0.05);P16和Ki-67在慢性宫颈炎及各级别宫颈上皮内病变中的阳性表达具有关联性(χ2=27.56,P<0.05).结论 联合检测P16和Ki-67在宫颈上皮内病变的分级诊断 、临床评估及治疗中具有重要意义.

摘要： 本发明涉及重组修饰的安卡拉痘苗病毒，其包含插入所述MVA基因组的基因间区内的异源DNA序列，其中，所述的IGR位于该MVA基因组的两个相邻开放阅读框之间或所述的IGR位于该MVA基因组的两个相邻开放阅读框的侧面，并且其中所述ORF对应于保守基因，并且其中所述的两个相邻ORF以示例性方式或其相应方式选自由（使用CDC/阿卡姆贝斯的命名法则）其它痘苗病毒毒株中的044-045、049-050、050-051、058-059、064-065、065-066、069-070、070-071、071-072、072-073、073-074、074-075、075-076、076-077、077-078、078-079、081-082、085-086、086-087、089-090、092-093、093-094、095-096、097-098、100-101、101-102、102-103、104-105、108-109、113-114、114-115、118-119、121-122、122-123、123-124、127-128、128-129、129-130、130-131、131-132、132-133、133-134、134-135、135-136、141-142和142-143所组成的组。

摘要： 本发明属于基因表达分析技术领域，公开了CmEF1α基因和CmRAN基因在分析甜瓜果实的基因表达时作为内参基因的应用，所述CmEF1α基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述CmRAN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种采用实时荧光定量PCR分析甜瓜果实基因表达的方法，它是将CmEF1α基因和CmRAN基因组合的几何平均数作为甜瓜果实基因表达分析中的内参基因。CmEF1α基因和CmRAN基因在不同坐果方式的甜瓜果实的不同发育阶段均能稳定表达，是甜瓜果实发育过程中利用实时荧光定量PCR技术检测基因表达分析的可靠内参基因组合。

摘要： 本发明涉及转基因植物检测领域，具体涉及同时鉴定转甘露聚糖酶基因、葡聚糖酶基因、木聚糖酶基因和半乳糖苷酶基因植物的方法。本发明中设计的针对转入的半乳糖苷酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶及木聚糖酶的外源基因的引物可以同时鉴定转基因玉米饲料中的该四种外源基因，这为今后饲用酶转基因玉米原料成分的快速鉴定检测提供了方法。

摘要： 本发明涉及用于整合外源序列至痘苗病毒基因组的基因间区(IGR)内的新插入位点，其中所述的IGR位于该痘苗病毒基因组的两个相邻开放阅读框(ORF)之间或所述的IGR位于该痘苗病毒基因组的两个相邻开放阅读框的侧面，并且其中所述ORF对应于保守基因，并涉及用来插入外源DNA至痘苗病基因组内的相关质粒载体，并且还涉及作为药物或疫苗的含有插入所述新插入位点内的外源序列的重组痘苗病毒。

摘要： 本发明的目的在于能够在加密的状态下进行基因信息的检索。加密装置(200)对存储装置存储的基因信息即对象基因进行加密来生成加密基因，并将作为预定的基因信息的基准基因与对象基因进行比较，生成差异信息，生成嵌入了所生成的差异信息并加密而得到的加密标签。数据中心(400)使加密基因和加密标签相关联地存储在存储装置中。检索装置(300)将差异信息作为检索关键字，生成嵌入差异信息并进行加密而得到的检索查询，将所生成的检索查询发送到数据中心(400)。数据中心(400)确定包含检索查询中指定的差异信息的加密标签，提取相关联的加密基因并发送到检索装置(300)。

摘要： 提供作为副作用的细胞毒性少且MEX3B基因的表达抑制能力提高的核酸、含有上述核酸的MEX3B基因表达抑制剂、抑制MEX3B基因表达的方法及起因于MEX3B基因表达的疾病的预防或治疗剂。核酸为下述(1)～(3)中的任一者：(1)由序列表的序列号1或2中记载的碱基序列组成的寡核苷酸；(2)由在序列表的序列号1或2中记载的碱基序列中缺失、取代及/或添加1个或2个碱基而得的碱基序列组成、且抑制MEX3B基因的表达的反义寡核苷酸；(3)包含序列表的序列号3中记载的碱基序列、且抑制MEX3B基因的表达的反义寡核苷酸。

摘要： 本发明提供作为副作用的细胞毒性低且能够抑制MEX3B基因的表达的核酸、包含上述核酸的MEX3B基因表达抑制试剂、抑制MEX3B基因表达的方法及由MEX3B基因表达所引起的疾病的预防或治疗剂。抑制MEX3B基因的表达的核酸，所述核酸为：反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸具有与MEX3B基因的外显子中的非翻译区中的包含至少10个连续核苷酸的寡核苷酸互补的序列；或者双链RNA或编码上述双链RNA的DNA，所述双链RNA包含上述非翻译区中的至少20个连续核苷酸。

摘要： 本发明属于基因表达分析技术领域，具体涉及ClCAC基因和ClSAND基因在西瓜果实发育过程中用作为基因表达分析的内参基因的应用。本发明为ClCAC和ClSAND基因设计了特异引物，该引物跨基因上相邻的2个外显子的接头位点，以基因组DNA为模板时无扩增产物，以cDNA为模板是可以扩增出目标片段，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-4所示。通过实时荧光定量PCR技术检测表明，ClCAC基因和ClSAND基因在不同基因型、不同坐果方式的西瓜果实的不同发育阶段均能稳定表达，是西瓜果实发育过程中利用实时荧光定量PCR技术检测基因表达分析的可靠内参基因组合。该内参基因组合具有表达稳定性好、不受cDNA样品中是否存在基因组DNA污染影响等优点。

摘要： 本发明属于基因表达分析技术领域，公开了CmEF1α基因和CmRAN基因在分析甜瓜果实的基因表达时作为内参基因的应用，所述CmEF1α基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述CmRAN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种采用实时荧光定量PCR分析甜瓜果实基因表达的方法，它是将CmEF1α基因和CmRAN基因组合的几何平均数作为甜瓜果实基因表达分析中的内参基因。CmEF1α基因和CmRAN基因在不同坐果方式的甜瓜果实的不同发育阶段均能稳定表达，是甜瓜果实发育过程中利用实时荧光定量PCR技术检测基因表达分析的可靠内参基因组合。

摘要： 本发明的目的在于，提供一种在癌症中鉴定能够成为预测药剂的治疗有效性的指标的基因、以该基因为目标预测药剂的治疗有效性的新型的方法，并进行了肺腺癌的全转录组测序。其结果，鉴定了KIF5B基因和RET基因的框内融合转录产物。另外，该KIF5B-RET基因融合在日本人肺腺癌的6/319（2%）、美国人肺腺癌的1/80（1%）中被检测出。而且发现，该7例均不显示EGFR、KRAS、ALK癌基因这样的公知的活化突变，因此，判明该基因融合为癌化中的责任突变（驱动突变）。该基因融合被认为是导致RET酪氨酸激酶蛋白的稳定活化的因素，因此，对于检测出该基因融合的患者，以RET酪氨酸激酶抑制剂进行的治疗是有效的。