先天性免疫

摘要： 先天性免疫是动物抵抗外界病原微生物入侵的第一道防线。当病原微生物入侵时,机体可通过模式识别受体识别病原体相关分子模式,启动抵抗外源微生物感染的免疫反应。环磷酸鸟苷-腺苷合成酶(cGAS)是一种DNA感受器,可感知外源DNA并激活cGAS-STING信号通路。而cGAS-STING信号通路的激活可诱导产生干扰素,这是先天性免疫反应至关重要的组成部分。论文综述了cGAS-STING信号通路介导先天性免疫的分子机制及病毒通过该信号通路调控机体先天性免疫的策略,以期为研究cGAS-STING信号通路及其与病毒间的相互作用提供参考。

摘要： 基于果蝇极为简单、有效的先天性免疫应答机制,研究果蝇免疫协同优化算法。该算法中,结合黑化作用、细胞免疫及体液免疫的协同免疫应答机制,设计种群的划分及各子群的进化模块。其思想简洁易懂,内外循环的平衡设计以及协同思想的引入,保证了算法的优化效果与效率。大量实验表明,该算法在寻优能力、搜索效率及高维函数优化等方面均具有明显优势。

摘要： C-型凝集素(C-type lectin)是一类能识别并结合多糖的免疫蛋白质超家族,本文首次克隆了一种新型香港牡蛎C-型凝集素基因——甘露聚糖结合凝集素,并获得了该基因的全长序列,命名为ChPerlucin。结果显示,ChPerlucin基因cDNA全长577bp,包括21bp的5′末端非翻译区(untranslated region,UTR)、73bp的3′UTR,以及483bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码160个氨基酸,ChPerlucin蛋白理论分子量为18kD,等电点为5.95。ChPerlucin蛋白含有保守的C-型凝集素样结构域(C-type lectin or carbohydrate-recognition domain,CLECT);邻接法(Neighbor-Joining,NJ)进化树分析表明,ChPerlucin与其他贝类的Perlucin聚为一支,说明该基因是软体动物Perlucin家族的新成员。qRT-PCR结果显示,ChPerlucin在香港牡蛎所检测组织和各个胚胎发育时期中均有表达;病原菌刺激后,ChPerlucin表达量显著升高;利用毕赤酵母真核成功表达了ChPerlucin重组蛋白,发现ChPerlucin重组蛋白具有抑菌效果。以上结果表明ChPerlucin在香港牡蛎的先天性免疫过程中发挥了重要的作用。

摘要： 动物肠道内含有大量的微生物,如细菌、真菌、古菌等[1]。肠道微生物对宿主的健康至关重要,不仅可以改善宿主营养、调节代谢,还可以调控肠道上皮发育、诱导先天性免疫等,其功能相当于机体的一个重要“器官”[2]。肠道菌群失衡可导致许多疾病的发生,如腹泻、胃肠功能紊乱等[3]。粪菌移植(Fecal microbiotal transplantation, FMT)则可通过健康供体粪菌液中的功能菌群恢复患者正常肠道菌群结构达到治疗某种疾病的目的。

摘要： 鲈形目(Perciformes)是鱼类中物种丰富度最高的一个目,分布在多个水域,在渔业经济发展中占据着重要地位.然而,高密度的养殖模式加剧了病原微生物引起的鱼类病害.Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是先天免疫中的重要蛋白质分子,在病毒以及细菌防御中起重要作用.本文以TLR1和LTR9为候选基因,共下载了鲈形目17个代表物种的同源序列,通过进化分析探讨该目物种先天性免疫的分子进化基础.选择压力分析发现TLR1、TLR9基因中分别有16和8个正选择位点被两种方法同时检测到,且86%的位点位于蛋白质富含亮氨酸重复序列(Leucine rich repeat,LRR)结构域.上述结果提示鲈形目物种面临较高的病原微生物感染的挑战,而这些正选择位点可能导致基因进化出重要的功能改变以抵抗病原体的侵袭.另外,Free-ratio以及Branch-site模型检测发现基因的正选择具有物种特异性,如TLR1在鲷科的最近共同祖先支以及鲈科最近共同祖先支等受到显著正选择,TLR9也在鲷科的最近共同祖先支受到显著正选择,且这些谱系被报道经常受到病原体的威胁,因此,鲈形目多个谱系受到正选择可能是在长期抵抗病原微生物侵袭中进化的结果.以上研究结果表明,在长期抵御病原微生物过程中,鲈形目物种的TLR1、TLR9基因可能发生了适应性功能改变.

摘要： 外泌体(exosomes, EXOs),直径30~150nm,指从细胞膜上脱落或由细胞分泌的脂质双分子层结构的囊泡状小体。EXOs包含复杂的RNAs和蛋白质,且具有生物学功能。绝大多数细胞都能分泌EXOs,而间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)来源的EXOs具有产量多、稳定性好和无免疫原性等优势。间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EXOs)可以修复组织损伤、抑制炎性反应、调节免疫系统,已被广泛探索作为一种基于再生细胞治疗眼科疾病的药物。本文重点综述了来自骨髓、脂肪组织和脐带MSC-EXOs在眼免疫性疾病中的研究进展,包括干燥综合征干眼、同种移植角膜移植排斥反应和自身免疫性葡萄膜炎,以期为眼免疫性疾病的治疗提供新的研究方向。

摘要： 两栖类处于脊椎动物由水生向陆生进化的过渡阶段,进化地位重要。近年来因疾病的爆发、生境破碎化、环境污染、紫外辐射增加、人为过度捕捉和生物入侵等诸多因素引起的全球范围内两栖类种群数量锐减已引起人们的广泛关注。Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)家族是一类从线虫到哺乳动物普遍存在的高度保守的模式识别受体(PRRs),可以识别侵入机体病原体的病原相关分子模式(PAMPs),是两栖类先天性免疫防御系统的重要组成部分。本文结合近些年国内外对两栖类TLRs的研究对两栖类TLRs结构特征、进化特点、在两栖类发育早期的差异表达特征和两栖类TLRs信号通路中相关分子的表达研究进行概述。目前对于两栖类TLRs的研究发现两栖类TLRs兼具鱼类和哺乳类TLRs的特征,并在从鱼类到两栖类到哺乳类的进化过程中,TLRs家族部分成员如TLR2的配体识别功能可能发生了一定程度的特化;在两栖类早期发育阶段,获得性免疫不够完善,以TLRs为主的先天免疫防御系统在抵御病原体的侵袭方面发挥了重要作用;在特定病原菌和病毒的胁迫下,可能激活了TLRs下游不同的途径参与两栖类对病原体的免疫应答反应。

摘要： 线粒体是细胞内重要的细胞器,具有多种功能,是细胞的能量工厂.线粒体含有自己的遗传物质线粒体DNA,线粒体DNA因其在氧化磷酸化中的作用而广为人知.近年来,越来越多的研究表明线粒体DNA可作为先天性免疫系统的激动剂,并在病原体感染和炎性疾病的病理发展中起重要作用.线粒体DNA在进入细胞质或细胞外环境后,可以激活多种先天性免疫系统的模式识别受体,从而触发促炎细胞因子分泌和Ⅰ型干扰素反应.因此,本文就线粒体DNA激活先天性免疫的机制以及其在病原体感染和相关疾病发生发展中的作用进行讨论、总结,以期为进一步深入开展线粒体DNA在病原体感染及相关疾病中的作用及其机制研究提供理论依据.

摘要： 本试验旨在研究凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)感染PK-15细胞的影响.以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK-15)A SC基因稳定敲除细胞系,通过T7核酸酶检测靶基因的敲除效率;CCK-8试剂盒检测PK-15敲除ASC基因对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测PK-15以及PK15-ASC-/-细胞感染PRV-GFP 病毒的增殖差异;RT-PCR 检测PRV-gB 及 IFN-β、ISG15、IL-1βmRNA表达水平;Western blot检测PRV gE蛋白的表达;TCID50检测子代病毒感染力的滴定.结果表明:两对特异性sgRNA均能对ASC进行基因编辑,但经过T7核酸酶酶切检测进行基因编辑效率分析,结果表明,sgRNA2的基因编辑效率最高;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明,PK-15以及PK15-4SC-/-细胞活力无影响;流式细胞仪检测结果表明PRV-GFP在PK15-ASC-细胞中的增殖显著低于PK-15细胞;定量RT-PCR结果表明,PRV-gB基因在PK15-ASC-/-细胞中的转录水平显著低于PK-15细胞,而IFN-β、ISG15基因在PK15-ASC/-细胞中的转录水平显著高于PK-15细胞;Western blot结果表明,PRV的gE蛋白在PK15-A SC-/-细胞中的表达显著低于PK-15细胞;滴度测定结果表明敲除ASC基因能够显著抑制子代病毒的增殖能力.本研究成功构建了PK15-ASC/-细胞系,并通过PRV感染试验证实敲除4SC基因可以抑制PRV在PK-15细胞中的增殖.

摘要： 免疫稳态失衡在T2DM发病机制方面作用逐渐受到关注.肥胖和IR诱发的慢性亚临床炎症不仅导致Ins作用障碍,还造成胰岛β细胞功能缺陷.这种代谢性炎症引发的巨噬细胞、T细胞、B细胞及NK细胞等免疫功能紊乱,提示先天性免疫和获得性免疫功能参与T2DM发生发展.本文对T2DM免疫发病机制的研究进展进行综述,探讨其免疫标志物及其免疫疗法调控人体稳态可能成为临床诊治T2DM的新思路.

摘要： 理解乳腺组织的免疫防御对制定控制乳腺炎的措施非常重要。乳腺的先天性免疫是一个非常广泛的研究领域，尽管经过了多年的研究，但对乳腺的先天性防御的知识仍旧非常缺乏。迄今为止，关于乳腺先天性免疫的知识主要通过研究乳腺组织对病原菌的识别，及几种对乳腺局部诱导的防御功能获得。本文综述了近年来关于奶牛乳腺组织的体液防御在其先天性免疫中的功能和作用机制的研究结果。

摘要： 集约化场条件下,不同的环境影响也许会对猪场猪的福利产生负面影响,这也许会是现代畜牧业技术的慢性应激因素而不是急性应激因素.事实上这些也许超过猪的应对能力,迫使它们转为长期的稳态控制作用.本文在冬天对丹麦两个育肥猪场的猪先天性免疫和管理进行研究.结果表明猪的健康和福利可以结合临床、环境和先天免疫性调查来监测，将这3种调查作为研究动物环境适应性的多准则途径。最重要的是，评估福利条件的免疫学参数的重要作用证实了感染和未感染应激因子其免疫反应中的效应机理非常相似。

摘要： 松鼠葡萄球菌(S.sciuri)是引起猪渗出性皮炎(Exudativeepidermitis，EE)和人外伤感染的重要病原。脱皮毒素是该病原主要的致病因子之一。为了进一步了解松鼠葡萄球菌的致病机理，本研究根据猪葡萄球菌脱皮毒素C(Exhc)基因序列设计引物，从松鼠葡萄球菌基因组中克隆到全长的Exhc并在大肠杆菌中进行了表达。我们以BHK、L-929、RAW264.7以及乳鼠为模型研究ExhC对哺乳动物细胞和皮肤的毒性作用。流式细胞仪、细胞形态学和组织学检查分析表明，ExhC作用于体外培养的BHK和L-929细胞后，能使细胞的Annexin-V/PI双染细胞比例显著增加，随后使细胞崩解;ExhC引起乳鼠真皮细胞坏死;ExhC显著降低巨噬细胞的吞噬功能。这些实验证据说明ExhC不仅具有较强的细胞杀伤活性，也具有抑制先天性免疫的作用。

摘要： 目的：鉴定和分析调节宿主细胞IFN的病毒蛋白，探讨其对IFN抑制性调节作用，及其感染期间宿主先天应答。方法：分别克隆PRRSV北美株VR2332编码Nspl、Nsplα、Nsplβ、Nspl1和N基因，插入pXJ41表达载体。在MARC-145、猪肺泡巨噬细胞和HeLa细胞中分别表达这些基因，在荧光素酶报告基因下游分别构建pIFN-β-Luc、p4xIRF3-Luc、pLuc-(PRDⅡ)2、和表达IFN-β、IRF3、NF-κB的pTATA-Luc和基本水平的启动子活力。对IFN基因进行生物活性试验，并采用荧光显微镜检查绿色荧光蛋白的表达。结果：Nsplα是调节IFN产生作用最强的，N是NF-κB的刺激物，Nsplα、Nsplβ和N蛋白在感染期间起重要的辅助作用。

摘要： 对ISG15在不同几种病毒中的研究进行综述，希望鉴此能为科研工作者了解当前ISG15抗病毒研究状况提供一些帮助。指出ISG15作为先天性免疫中的一种重要分子，在抗病毒免疫中发挥着重要作用，ISGIS及ISG化在发挥抗病毒功能时都涉及着复杂的反应和作用机制，尽管对ISG15及ISG化的研究现在己经有大量报道，但是对于ISG15发挥抗病毒作用的详细机制还有待于进一步深入研究。

摘要： 生物体在长期发展演化过程中逐渐形成了识别异己和自身的免疫能力，包括先天性免疫和获得性免疫，其中先天性免疫对异己无特异区别能力，但可以识别异物并启动非特异性免疫反应，成为机体的第一道防线，这种特异性识别信号即为Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)。本文介绍了TLR的发现、结构和分布，阐述了TLR识别的特异性配体和TLR介导的信号传导机制，浅谈了TLR的研究方向及应用。

摘要： 据GenBank中已发表的鸡β-防御素6(Gallinacin-6,Gal-6)序列设计引物,构建pMD 18-T-Gal-6重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡组织器官中Gal-6mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、重复性、特异性试验.结果显示,此方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,并运用建立的方法对不同日龄SPF鸡16个组织器官动态表达规律研究,发现随着日龄的增长Gal-6呈现"M"型波动规律,而且骨髓组织含量极其丰富.本方法为进一步定量研究Gal-6mRNA表达及其与机体机能的关系奠定了技术基础.

摘要： 据GenBank中已发表的鸡β-防御素6(Gallinacin-6,Gal-6)序列设计引物,构建pMD 18-T-Gal-6重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡组织器官中Gal-6mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、重复性、特异性试验.结果显示,此方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,并运用建立的方法对不同日龄SPF鸡16个组织器官动态表达规律研究,发现随着日龄的增长Gal-6呈现"M"型波动规律,而且骨髓组织含量极其丰富.本方法为进一步定量研究Gal-6mRNA表达及其与机体机能的关系奠定了技术基础.

摘要： 据GenBank中已发表的鸡β-防御素6(Gallinacin-6,Gal-6)序列设计引物,构建pMD 18-T-Gal-6重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡组织器官中Gal-6mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、重复性、特异性试验.结果显示,此方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,并运用建立的方法对不同日龄SPF鸡16个组织器官动态表达规律研究,发现随着日龄的增长Gal-6呈现"M"型波动规律,而且骨髓组织含量极其丰富.本方法为进一步定量研究Gal-6mRNA表达及其与机体机能的关系奠定了技术基础.

摘要： 据GenBank中已发表的鸡β-防御素6(Gallinacin-6,Gal-6)序列设计引物,构建pMD 18-T-Gal-6重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡组织器官中Gal-6mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、重复性、特异性试验.结果显示,此方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,并运用建立的方法对不同日龄SPF鸡16个组织器官动态表达规律研究,发现随着日龄的增长Gal-6呈现"M"型波动规律,而且骨髓组织含量极其丰富.本方法为进一步定量研究Gal-6mRNA表达及其与机体机能的关系奠定了技术基础.

摘要： 本发明公开了用于诱导对抗感染或疾病的免疫应答的组合物、试剂盒和方法。所述组合物通常包括平均有效直径为0.5‑20μm的可生物降解的粒子，并且任选地所述组合物包括佐剂、凋亡抑制剂和抗原中的一种或多种。所述组合物、试剂盒和方法可用于诱导对抗病原体或疾病的细胞介导的应答例如辅助性T细胞应答和/或体液应答。在某些实施方式中，相对于其他类型的免疫应答例如Th2应答，所述组合物、试剂盒和方法可用于优先诱导Th1应答。

摘要： 本发明涉及一种表达IL2RG基因的重组慢病毒载体及其制备。其中，该载体是自身失活的第三代慢病毒载体SIN，所述的IL2RG基因的序列如SEQ ID NO﹕1所示。本发明还提供了该载体的制备方法，以及该载体在制备治疗原发性免疫缺陷病药物中的用途。

摘要： 本发明公开了一种GDH抑制剂在制备治疗先天性高胰岛素血症药物中的应用和治疗先天性高胰岛素血症药物。本发明的微摩尔浓度的DEM在GDH的酶动力学试验中表现出一定的针对GDH活性的抑制效果，拓展了化合物DEM的新用途以及其在治疗先天性高胰岛素血症方面的作用，具有非常广阔的应用空间和重要意义。

摘要： 本发明涉及水不溶性控释模式识别受体激动剂(“PRRA”)或其药学上可接受的盐或包含这类水不溶性控释PRRA或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗细胞增殖性疾病，其中水不溶性控释PRRA、其药学上可接受的盐或药物组合物通过组织内施用来施用，且其中在施用后3天至少25％的用量的PRRA保留在这类组织中；且还涉及相关方面。

摘要： 本发明涉及一种表达IL2RG基因的重组慢病毒载体及其制备。其中，该载体是自身失活的第三代慢病毒载体SIN，所述的IL2RG基因的序列如SEQ ID NO﹕1所示。本发明还提供了该载体的制备方法，以及该载体在制备治疗原发性免疫缺陷病药物中的用途。

摘要： 本发明公开了一种增强病毒增殖的方法，并构建了先天性免疫系统重构的BHK21细胞群，用于增殖病毒。本发明公开的方法为病毒增殖打开了新思路，扩大了BHK21细胞的应用范围，为能够防治病毒的疫苗的研制打下了坚实的基础。

摘要： 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用，该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制，从而提高疫苗的免疫效力，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白；或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现，缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN‑I的产生，从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。

摘要： 本发明提供了治疗组合物，其呈现哺乳动物模式识别受体(PRR)激动剂的人工库，以便PRR激动剂的模式概括了哺乳动物病原体的PRR激动剂特征的独特部分。所述PRR激动剂的人工库可在治疗媒介物中一起配制以用于组合呈现给驻留在哺乳动物宿主的靶组织中的先天性免疫细胞，并且所述媒介物适于将所述PRR激动剂递送给所述靶组织，以便调节免疫应答。

摘要： 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用，该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制，从而提高疫苗的免疫效力，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白；或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现，缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN‑I的产生，从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。

摘要： 本发明公开了一种增强病毒增殖的方法，并构建了先天性免疫系统重构的BHK21细胞群，用于增殖病毒。本发明公开的方法为病毒增殖打开了新思路，扩大了BHK21细胞的应用范围，为能够防治病毒的疫苗的研制打下了坚实的基础。