高尔基体

摘要： NO、CO和H_(2)S是细胞内重要的内源性气体信号分子,他们不仅在血管舒张、神经传递和免疫应答等生理过程中发挥重要作用,还与肿瘤、高血压、糖尿病和阿尔茨海默症等多种疾病密切相关。基于有机小分子荧光探针的荧光成像分析法具有灵敏度高、选择性好、操作简便、时空分辨率强和原位实时等特点,是细胞内气体信号分子检测的重要方法,而细胞器靶向荧光探针的开发有助于在亚细胞水平探究各种气体信号分子在相关生理病理过程中的作用机制。本文系统总结了近年来报道的线粒体、溶酶体、内质网、高尔基体和细胞膜靶向气体信号分子荧光探针,从不同细胞器靶向设计策略、探针的荧光性能及生物应用等方面进行概述,并对其发展前景进行了展望。

摘要： 分泌蛋白究竟在哪种核糖体合成?囊泡又是如何精准定位的?从核糖体、内质网、高尔基体的结构和功能出发,对真核细胞分泌蛋白合成和运输的过程作一简介。

摘要： 碱性亮氨酸拉链核因子1(basic leucine zipper nuclear factor 1,BLZF1)属于b-ZIP核因子家族,编码一个3 kb的mRNA,可被翻译成45 kDa的蛋白质。BLZF1由1个亮氨酸重复序列和几个特定的磷酸化位点组成,其结构中包含亮氨酸拉链和核定位信号。BLZF1在人体正常细胞和肿瘤细胞中是普遍存在的;其在细胞核和细胞质中均有表达,但不在核仁中表达;但在类维生素A(retinoic acid,RA)治疗急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukaemia,APL)引起细胞增殖时,其表达上调。BLZF1可与GRASP55结合,形成的结合体是一种新的高尔基体中池堆叠模型,在维持高尔基体正常结构和转运蛋白质中发挥重要作用。但其在多种疾病和肿瘤中的研究还未明确。本研究从BLZF1的结构、表达及功能方面,探讨其在一些疾病和肿瘤中的作用,为BLZF1在肿瘤中的研究提供理论基础。

摘要： 目的 探讨神经元中特异性敲除运动神经元病致病基因DCTN1编码的p150glued蛋白对于小鼠脊髓运动神经元高尔基体结构的影响。方法 通过免疫荧光染色技术标记高尔基体蛋白RCAS1观察对照组(Dctn1^(LoxP/LoxP))小鼠及p150glued条件性敲除(Dctn1^(LoxP/LoxP);Thy1-Cre)小鼠脊髓前角运动神经元中高尔基体分布和结构的变化情况。结果 与Dctn1^(LoxP/LoxP)小鼠相比,6月龄Dctn1^(LoxP/LoxP);Thy1-Cre小鼠脊髓运动神经元中RCAS1阳性的高尔基体分布明显离散。18个月龄时,Dctn1^(LoxP/LoxP);Thy1-Cre小鼠脊髓运动神经元中RCAS1阳性的高尔基体分布更加离散,且连贯膜结构明显碎裂。结论 神经元中p150glued功能缺失可以引发小鼠脊髓运动神经元中早期高尔基体分散及晚期高尔基体碎裂。

摘要： 丝氨酸整合因子5(SERINC5)是重要的宿主限制因子,通过组装进新生病毒粒子中抑制HIV-1的感染,而这一抗病毒活性能被HIV-1编码的Nef蛋白所拮抗。SERINC5和Nef的活性均起始于细胞膜,从SERINC5组装进病毒粒子到Nef通过内吞途径降解SERINC5均在细胞膜上发生,然而,细胞内合成的SERINC5如何从高尔基体转运到细胞膜,目前尚不清楚。前期研究结果证实泛素分子在Nef降解SERINC5的过程中发挥重要作用。

摘要： 目的:缺血性脑卒中的发病率和致残率均极高,缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)是治疗的关键。UbiA类异戊烯转移酶结构域1蛋白(UbiA prenyltransferase domain containing 1 protein,UBIAD1)是一类具有多种生物学功能的酶,参与线粒体呼吸链电子传递、脂代谢、氧化应激等,这些过程均与IRI有关。本研究探讨UBIAD1在脑IRI中的作用及其作用机制。方法:以小鼠成神经细胞瘤(mouse neuroblastoma Neuro2a,N2a)细胞为研究对象,构建氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型,以过表达UBIAD1的慢病毒载体转染N2a细胞,构建稳定过表达UBIAD1的细胞模型。第1部分实验将N2a细胞分为5组:未经OGD处理(non-OGD)组、经OGD处理4 h后分别再灌注0、4、12、24 h组;第2部分实验将N2a细胞分为6组:正常细胞(Con)+non-OGD组、转染空载体细胞(EV)+non-OGD组、UBIAD1过表达细胞(OE)+non-OGD组、Con+OGD处理(OGD/R)组、EV+OGD/R组、OE+OGD/R组;第3部分将N2a细胞分为8组:Con+non-OGD组、OE+non-OGD组、Con+non-OGD+NOS特异性抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)组、OE+non-OGD+7-NI组、Con+OGD/R组、OE+OGD/R组、Con+OGD/R+7-NI组、OE+OGD/R+7-NI组。使用激光共聚焦扫描显微镜观察高尔基体形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞活力,Griess试剂盒检测NO的释放,分别通过real-time PCR和蛋白质印迹法检测细胞UBIAD1、分泌途径衍生钙离子转运ATP酶1(secretory pathway Ca2+-ATPase isoform 1,SPCA1)、NOS的mRNA和蛋白质表达水平。结果:与non-OGD组相比,经OGD处理4 h后再灌注0、4、12及24 h的各组N2a细胞中UBIAD1 mRNA和蛋白质表达水平均明显下调(P<0.05或P<0.01),且再灌注时间越长,UBIAD1表达水平下调越显著。与Con+OGD/R组、EV+OGD/R组相比,OE+OGD/R组UBIAD1 mRNA和蛋白质表达水平均明显上调(均P<0.01),细胞凋亡率均下降(均P<0.01),细胞活力均增高(均P<0.01),高尔基体碎裂较少,形态保存较完整,SPCA1 mRNA和蛋白质表达水平均明显上调(均P<0.05)。OE+non-OGD组与Con+non-OGD组相比,OE+OGD/R组与Con+OGD/R组相比,内皮型NOS(endothelial NOS,eNOS)及神经元型NOS(neuronal NOS,nNOS)的mRNA和蛋白质表达均下调(P<0.05或P<0.01),NO含量均减少(均P<0.01);Con+OGD/R+7-NI组与Con+OGD/R组相比,OE+OGD/R+7-NI组与OE+OGD/R组相比,NO含量均减少(均P<0.01),N2a细胞凋亡率均下降(均P<0.01)。结论:UBIAD1可减轻神经细胞OGD/R损伤,改善OGD/R后高尔基体功能,其机制可能与抑制nNOS/NO途径有关。

摘要： [目的]狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)是一种主要由核蛋白(N)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、糖蛋白(G)、依赖RNA的RNA聚合酶蛋白(L)5种结构蛋白组成的高度嗜神经性病毒.RABV基因组RNA与N蛋白、P蛋白和L蛋白组成核糖核蛋白复合体(RNP),M蛋白在调控RABV病毒结构蛋白的合成和装配过程中起重要作用.但RABV不同毒株M蛋白胞内合成、分布场所及其是否存在差异尚不清楚.研究不同RABV毒株M蛋白与内质网、高尔基体以及M蛋白与G蛋白、M蛋白与RNP在N2A和BHK细胞内的共定位,以期确定RABV M蛋白的胞内合成途径和分布场所.[方法]测定RABV不同毒株(CVS-11、SRV-9、PB4)在N2A或BHK细胞的TCID50,以相同的MOI接毒,通过免疫荧光研究M蛋白与内质网、高尔基体的共定位,以及M蛋白与G蛋白、M蛋白与RNP(为N蛋白代表)的共定位.[结果]RABV不同毒株效价存在一定差异.在N2A和BHK细胞中,不同RABV毒株的M蛋白与内质网、高尔基体均存在共定位;M蛋白与G蛋白、M蛋白与N蛋白也存在共定位,但M蛋白与G蛋白主要共定位于内质网、高尔基体上,而M蛋白与N蛋白主要共定位在胞浆中.[结论]RABV M蛋白在胞内主要通过内质网-高尔基体途径合成加工.研究结果明确了RABV M蛋白胞内合成分布部位,为进一步研究RABV病毒粒子的装配和出芽过程丰富了数据.

摘要： 目的 探讨老年肺炎患者外周血单个核细胞端粒酶活性与气道脱落细胞高尔基体应激水平的相关性.方法 回顾性纳入2018年6月至2021年6月在空军第九八六医院住院治疗的60例肺炎患者,根据年龄将患者分为老年组(≥65岁,n=37)和非老年组(0.05).端粒酶在PHA-M刺激后,老年组较非老年组和对照组端粒酶活性降低,非老年组较对照组端粒酶活性降低,差异均有统计学意义(P0.05).活化24 h和48 h后,老年组和非老年组较对照组的增殖活性降低,老年组较非老年组增殖活性降低,差异均有统计学意义(P<0.05).老年组和非老年组较对照组中MPO和ROS活性升高,非老年组较对照组MPO和ROS活性升高,差异均有统计学意义(P<0.05).老年肺炎患者外周血单个核细胞端粒酶活性与气道脱落细胞高尔基体MPO水平负相关(r=-0.654,P<0.05).老年组和非老年组较对照组血浆TNF-α、IL-6和IL-5水平升高,老年组较非老年组TNF-α、IL-6和IL-5水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 老年肺炎患者外周血单个核细胞端粒酶活性与气道脱落细胞高尔基体应激水平呈负相关,维持端粒酶的正常活性可提高老年肺炎患者的免疫系统,降低气道细胞高尔基体应激反应,改善病情.

摘要： 目的:探讨钌络合物通过诱发高尔基体应激在Walker-256荷瘤大鼠中发挥抗肿瘤作用的机制.方法:以30只雄性Wistar大鼠为研究对象,通过Walker-256细胞右骨盆肢体皮下注射建立荷瘤大鼠模型,然后根据实验目的将大鼠分为3组,对照组(正常大鼠,PBS干预),肿瘤模型组(荷瘤模型大鼠,PBS干预)和钌络合物组[荷瘤模型大鼠,管饲法给予5mg/kg钌络合物溶液(由含2％ Tween的PBS溶解)],各10只.通过测厚仪和电子秤分别计算大鼠肿瘤体积及重量;酶联免疫吸附试验试剂盒检测大鼠刚脏组织匀浆中氧化应激水平;蛋白印迹和荧光探针DCFH-DA试剂盒分析LC3 Ⅱ/Ⅰ表达和ROS活性;蛋白印迹分析高尔基应激相关蛋白GOLPH3、GRASP65的表达;实时定量PCR分析Bax、Bcl-2和Caspase-3的mRNA表达.结果:钌络合物组较肿瘤模型组肿瘤重量降低(P＜0.05),肿瘤模型组较对照组体重增加降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组体重增加(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组SOD活性和LPO升高(P＜0.05),CAT、GST和GSH活性降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组LPO降低(P＜0.05),CAT、GST和GSH活性升高(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达和ROS活性升高(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达和ROS活性降低(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组GOLPH3、GRASP65的蛋白表达升高(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组GOLPH3、GRASP65的蛋白表达降低(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组Bax和Caspase-3的mRNA表达升高(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组Bax和Caspase-3的mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达升高(P＜0.05).结论:钌络合物通过调节高尔基应激反应,削弱氧化磷酸化从而促进Walker-256细胞死亡发挥抗肿瘤活性.

摘要： 高尔基体在参与蛋白合成、物质转运过程当中起着重要的作用,这些作用与许多疾病的发病机制相关联,如前列腺癌,肝细胞癌和神经退行性疾病等.然而,目前很少有人注意到高尔基体在眼部疾病的发生发展中的作用.本文就高尔基体的结构功能,高尔基体相关蛋白在眼部表达情况及其在部分眼部疾病的发生发展中所起的作用进行总结,以期在理论上为高尔基体相关眼部疾病的研究提供参考.

摘要： 本发明公开了一种内质网高尔基体靶向小分子，其结构式如式I所示。本发明还提供了一种内质网高尔基体靶向小分子偶联物，其结构式如式III所示。本发明还提供了所述内质网高尔基体靶向小分子及偶联物用于制备STING蛋白激动剂、或用于提升抗原交叉递呈水平、或用于提升增强抗原靶向内质网高尔基体、或用于制备诱导CD8+T免疫反应的药物、或用于制备免疫治疗药物的应用。本发明提供的内质网高尔基体靶向小分子及偶联物可以实现内质网高尔基体靶向小分子与抗原的良好连接，保持双苯并嘧啶骨架对STING蛋白的结合力，减少STING激动剂diABZI过分扩散导致系统性炎症反应，增强抗原在亚细胞层面靶向内质网高尔基体，提升抗原交叉递呈水平，还可促进DC细胞成熟，高效诱导CD8+T免疫反应。

摘要： 本发明公开了一种高尔基体蛋白GP73测定试剂盒及化学发光测定方法，包括盒身、存放筒，所述盒身连接有用于密封盒身的盒盖，所述存放筒连接有用于驱动存放筒旋转的驱动机构，且存放筒外侧连接有摩擦环，所述盒盖连接有用于存放筒定位的止动机构，所述止动机构包括相对设置的推拉杆、止动块，所述推拉杆用于驱动止动块的升降，所述驱动机构包括电机及控制电机开关的点动按钮，所述盒盖用于控制点动按钮开启及关闭。本发明既能实现存放筒旋转，使试剂瓶处于存储环境的同时同步进行摇匀工作，为后续的检测作业提供良好基础，缩短作业时间，同时也能实现对存放筒的定位，提高存放筒的稳定性，便于医护人员对试剂瓶拿取，操作灵活便利。

摘要： 本发明公开了一种高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒及其检测方法，包括盒身及连接于盒身内的存储仓，所述存储仓内均匀安装有用于存放试剂瓶的存放筒，所述存放筒连接有用于顶起试剂瓶的顶起机构，所述存储仓连接有用于驱动顶杆上升的驱动机构，所述驱动机构包括推杆一及连接于推杆一一端的顶块，所述存放筒连接有用于瓶身压紧的压紧机构，所述顶块与设置于顶杆的顶起孔相脱离，所述存放筒开设有通孔，所述防滑压块穿过通孔压紧于瓶身；当试剂瓶处于顶起状态时，所述顶块与设置于顶杆的顶起孔相连，所述防滑压块与瓶身相分离。本发明可提高试剂瓶的稳定性，不易松动，便于对试剂盒的转运，同时便于将试剂瓶从存放筒内取出，操作灵活方便。

摘要： 本发明涉及一种基于环氧合酶‑2靶点快速定位高尔基体的橙光碳点，是以对苯二胺和苯磺酰胺溶于溶剂甲醇中密闭下进行溶剂热反应，反应产物提纯后得到的碳点固体粉末。本发明橙光碳点可通过表面磺酰胺基团与环氧合酶‑2结合，作为高尔基体靶向型荧光探针，应用于肿瘤细胞中环氧合酶‑2高度表达的高尔基体的靶向成像，不仅选择性高，还具有超快的成像速度。

摘要： 本发明属于新材料技术领域，涉及荧光材料技术，具体涉及一种纳米探针与其在检测高尔基体中超氧阴离子的应用，该纳米探针由荧光探针与牛血清蛋白结合形成，所述荧光探针的化学结构式为本发明提供的纳米探针表现出优异的靶向定位高尔基体的能力，且能对O2·‑进行成像，具有灵敏度高、选择性高等的优点。

摘要： 本发明涉及一种靶向高尔基体的谷胱甘肽比率荧光探针，具体地，本发明的探针为一种4‑三氟甲基‑7‑氨基喹啉类化合物，其可作为谷胱甘肽比率荧光探针用于高尔基体内谷胱甘肽的检测且对癌细胞表现出选择性毒性。这类探针可实现如下的技术效果中的至少一个：高选择性地识别谷胱甘肽；可以快速对谷胱甘肽实现响应；可以实现对谷胱甘肽的超灵敏分析；可以实现谷胱甘肽的比率定量分析；可以靶向高尔基体；可以对癌细胞表现出选择性毒性；性质稳定，可以长期保存使用。

摘要： 本发明公开一种高尔基体靶向超氧阴离子荧光探针及其制备方法和应用，属于超氧阴离子探针制备技术领域。探针分子式如下：C26H36F3NO6S，具有如下结构式：本发明探针与超氧阴离子响应后，460nm处荧光强度增强，且在便携式紫外灯365nm光源照射下荧光颜色发生变化。本发明探针还可以通过共聚焦荧光显微镜检测活细胞中高尔基体内的超氧阴离子，并进行荧光成像。本发明荧光探针合成简单，并且产率较高，实现了水溶液和离体活细胞高尔基体中超氧阴离子的特异性和快速检测。

摘要： 本发明公开一种高尔基体靶向亚铁离子荧光探针及其制备方法和应用，属于亚铁离子探针技术领域。本发明探针分子式为：C27H42N2O4，具有如下结构式：本发明提供了一种准确性较高的能检测水环境和离体活细胞环境中高尔基体内亚铁离子的荧光分析法。探针与亚铁离子响应后，460nm处荧光强度增强。探针还可以通过共聚焦荧光显微镜检测离体活细胞中高尔基体内的亚铁离子，并进行荧光成像。本发明探针合成简单，并且产率较高，具有一定的潜在实用价值。

摘要： 本发明涉及一种靶向高尔基体的红光发射荧光碳点，是以尼罗蓝和苯磺酰胺溶于乙醇和水的混合溶剂中密闭下进行溶剂热反应，反应产物提纯后得到的碳点固体粉末。本发明红光发射荧光碳点在水溶液状态下能够发射645nm的荧光，属于红光发射，以其作为荧光探针，应用于细胞中环氧合酶‑2高度表达的高尔基体的靶向成像，避免了生物体自体发射短波长荧光的干扰，选择性高，具有准确的高尔基体靶向定位效果，适用于组织和活体成像。

摘要： 本实用新型公开了一种便携式高尔基体蛋白GP73测定试剂盒，包括检测盒身及连接于检测盒身一侧的存放盒身，所述检测盒身内设置有从上到下依次导通的检测槽、排污通道、收集槽，所述收集槽内连接有顶起机构，所述顶起机构包括活动柱，所述活动柱连接有密封凸起，且活动柱连接有用于驱动密封凸起向检测槽方向移动的弹簧，当检测检测槽内试剂时，所述密封凸起与排污通道相连。本实用新型当试剂检测完毕后，可利用工具按压密封凸起，使密封凸起与排污通道存在间隙，废液顺着排污通道流入到收集槽内暂存，操作灵活便利；在对检测槽内试剂检测时，顶起机构顶起密封凸起，使密封凸起与排污通道相连，起到密封效果，防止试剂的泄漏。