青枯病菌

摘要： 在口岸送检的鲜食马铃薯上分离到一株细菌分离物0297,对该分离物在薯块上的为害症状和菌落形态特征进行观察,并经特异引物PCR检测、多位点序列分析、致病性测定.结果表明:患病薯块切面维管束变褐,按压分泌乳白色菌脓,分离物菌落在NA培养基上呈有光泽的乳白色;青枯病菌特异引物RS32/RS37扩增分离物0297得到预期583 bp的条带,与GenBank中青枯病菌(JQ323519)的序列相似性为100％;选择gyrB、gapA、adk和gdhA 4个看家基因进行多位点序列分析,系统发育树显示分离物0297与青枯病菌株Ralstonia solanacearum Phylotype Ⅱ race3(UW448、BR113、UW504、UW224、BS025、UW551)聚集在同一分支上;该分离物人工接种马铃薯与番茄茎能引起茎叶褐变、萎蔫等典型病害症状.根据上述试验结果,将分离物0297鉴定为青枯病菌(Ralstonia solanacearum Phylotype Ⅱ race3).

摘要： 为了有效筛选出对作物青枯病具有防治效果的生防细菌,本研究采用群体感应淬灭基因aiiA的简并引物进行PCR扩增与室内盆栽防治效果测定相结合的方法进行生防细菌的筛选,并通过传统的细菌学鉴定方法和分子生物学手段明确其分类地位。结果表明,从253株生防菌株中获得了12株含有aiiA基因的生防菌株;进一步盆钵防效测定,获得了一株对烟草青枯病具有较好防治效果的生防菌株B15。该菌株接种处理后,烟草青枯病可推迟2 d发生,在接种处理14 d后其对烟草青枯病防治效果为68.33%。B15菌株在NA平板培养基上菌落呈圆形、白色、表面有光泽且粗糙,菌体杆状,革兰氏染色阳性,耐盐性为7%;生理生化测定、16S rDNA和gyrB基因序列分析表明,菌株B15为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。本研究获得的含有群体感应淬灭基因aiiA的蜡样芽胞杆菌B15菌株,为作物青枯病生物防治提供了新的生防菌株资源。

摘要： 噬菌体可用于防治植物青枯病,但不易保存.本文对青枯病菌短尾噬菌体P1、P2、P3和P4株系的保存方法和条件进行了研究;将各噬菌体原液、噬菌体原液∶青枯菌液=1∶1、噬菌体原液∶青枯菌液∶40％甘油=1∶1∶2、噬菌体原液∶青枯菌液∶80％甘油=1∶1∶2的处理分别置于-75、-25、4°C、室温下保存,再分别于90、180、270、365 d后取样测定噬菌体的效价.结果表明,-75°C和-25°C下,噬菌体原液∶青枯菌液∶40％或80％甘油=1∶1∶2保存的效果最好,365 d后效价仅下降0～2个数量级;噬菌体原液∶青枯菌液=1∶1在4°C和室温下保存效果也较好,4°C保存365 d后效价仅下降1～3个数量级;此处理在室温条件下保存也可达270 d.因此,以资源长期保存为目的可采用噬菌体原液∶青枯菌液∶40％或80％甘油=1∶1∶2保存于-75°C或-25°C下;短期保存可采用噬菌体原液∶青枯菌液=1∶1保存于室温下.

摘要： 作物青枯病是一种土传细菌性维管束病害,由于作物病害的发生和严重度与土壤中的病原菌数量呈正相关,因而快速准确测定土壤中的病原菌数量是病害预测及有效防控的前提。本文对筛选获得的一株具有生防潜力的噬菌体P3株系进行了生物学特性测定,并探讨其在检测烟草根际土壤中青枯病菌数量的可行性,为烟草根际土壤青枯病菌的检测提供一种新方法。研究结果表明,噬菌体P3株系由一个二十面体的头部和非常短的尾部构成;裂解谱广,可裂解烟草、番茄、辣椒、马铃薯和甘薯的青枯病菌;最佳感染复数为0.0001;潜伏期60min,裂解期80min,裂解量179;对1%氯仿不敏感;55°C以下及pH 4~12的环境中保持稳定;对紫外线敏感,照射18 min失活;20°C~28°C存放一个月效价稳定。同等条件下,检测烟草根际土壤中青枯病菌数量,平板检测法的实测值仅为1.79×10~4CFU/g,而噬菌体检测法实测值为2.83×10~5 CFU/g,说明噬菌体检测法的灵敏度较平板检测法高10倍。本研究通过噬菌体检测法检测了烟草根际土壤的青枯病菌数量,可为今后烟草青枯病的预测预报提供技术支持。

摘要： 作物青枯病是一种土传细菌性维管束病害,由于作物病害的发生和严重度与土壤中的病原菌数量呈正相关,因而快速准确测定土壤中的病原菌数量是病害预测及有效防控的前提.本文对筛选获得的一株具有生防潜力的噬菌体P3株系进行了生物学特性测定,并探讨其在检测烟草根际土壤中青枯病菌数量的可行性,为烟草根际土壤青枯病菌的检测提供一种新方法.研究结果表明,噬菌体P3株系由一个二十面体的头部和非常短的尾部构成;裂解谱广,可裂解烟草、番茄、辣椒、马铃薯和甘薯的青枯病菌;最佳感染复数为0.0001;潜伏期60 min,裂解期80 min,裂解量179;对1％氯仿不敏感;55°C以下及pH 4～12的环境中保持稳定;对紫外线敏感,照射18 min失活;20°C～28°C存放一个月效价稳定.同等条件下,检测烟草根际土壤中青枯病菌数量,平板检测法的实测值仅为1.79×104CFU/g,而噬菌体检测法实测值为2.83×105 CFU/g,说明噬菌体检测法的灵敏度较平板检测法高10倍.本研究通过噬菌体检测法检测了烟草根际土壤的青枯病菌数量,可为今后烟草青枯病的预测预报提供技术支持.

摘要： 为了解短枝木麻黄(Casuarina equisetifolia)抗青枯病的机理,对接种青枯病菌(Ralstonia solanacearum)后短枝木麻黄的单宁和黄酮含量变化进行了分析.结果表明,不同抗性短枝木麻黄种源小枝的总酚和单宁含量呈现不同的变化趋势,高抗、中抗种源均呈现先升高后降低的变化趋势,峰值均约为126 mg g-1,但中抗种源的峰值出现时间较晚,而易感种源则呈逐渐升高趋势.抗、感种源木麻黄接种青枯菌后,小枝中缩合单宁含量均呈现逐渐升高的趋势,但高抗种源的缩合单宁含量均显著高于易感种源,增加70.33％.抗性种源黄酮含量呈S型上升趋势,易感种源则持续缓慢升高.这表明接种青枯病菌后,抗、感短枝木麻黄种源表现出不同的防御特征,次生物质含量增幅越大,抑菌抗氧化能力越强,短枝木麻黄表现出的抗性越强.

摘要： 在番茄产地,土壤中的青枯病菌引起的青枯病成为急需解决的问题。感染这种病菌后,整个植株会迅速枯萎,造成产量锐减。目前针对土壤传染病青枯病菌的有效药物只有三氯硝基甲烷,但三氯硝基甲烷为剧毒物,因此需要开发一种环保而且农户负担轻的土壤消毒法。

摘要： 为探索光能变价离子钛(TIVL)对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用,本研究采用平板抑菌法、 最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)以及生长曲线测定等方法分析了TIVL对烟草青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑菌活性.结果表明,在平板上TIVL对青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用具有显著的浓度效应,即随着琼脂平板中添加药剂浓度的升高,对青枯雷尔氏菌和野火病菌的抑制作用也随之增强.同时,TIVL对青枯雷尔氏菌的MIC和MBC分别为32 mg·L-1和36 mg·L-1,对野火病菌的MIC和MBC均为36 mg·L-1,且2种病菌在含有32 mg·L-1 TIVL的液体培养基中生长基本受到抑制,说明光能变价离子钛对烟草青枯病菌和野火病菌均有较好抑菌效果.实验结果为探索离子钛防治烟草青枯病和野火病提供理论依据.

摘要： 研究矿质营养元素硼、钙、镁、铁对番茄青枯菌在马铃薯液体培养基中生长的影响,同时研究硼、钙、镁、铁分别对青枯菌胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响,最后采用盆栽接种法研究复合矿质元素组合对番茄青枯病发病率的影响.结果表明,矿质元素硼、钙、镁、铁对青枯菌在马铃薯液体培养基中的生长有显著的抑制作用;经钙、镁、铁处理过的青枯菌胞内SOD、POD、CAT活性均显著升高,而经硼处理过的青枯菌胞内SOD、POD、CAT活性显著低于对照组;土壤中添加复合矿质元素组合后,盆栽试验结果表明,随着时间的增长,添加矿质元素的处理中青枯病菌的数量减少,番茄青枯病的发病时间推迟,并且发病率减缓.

摘要： 目的：从粤、闽、贵3地烟草青枯病株中分离青枯病菌,测定其致病力并探讨判断致病力的方法.rn 方法：采用氯化三苯基四氮唑(简称TTC)培养基和蛋白质电泳相结合对青枯病菌致病力进行测定,并分析菌株生化型.rn 结果：已分离出烟草青枯病菌59株,依据致病力进行划分,无致病力菌株5株,有致病力菌株54株.不同致病力菌株蛋白电泳特定条带存在差异.粤、闽、贵3地烟草青枯病菌有致病力菌株均占主导地位,广东有致病力菌株比例略大,福建次之,贵州最小.按生化型划分,59株青枯病菌中1株属于生化型Ⅳ外,其他58株属于生化型Ⅲ或其亚型生化型Ⅲ-1.rn 结论：烟草青枯病菌致病力存在差异,SDS-PAGE蛋白指纹中的特定条带可作为判定青枯病菌有无致病力的依据.

摘要： 采用移块法和液体比浊法研究了7株红树林微生物对桉树青枯病菌青枯劳尔氏菌[Ralstonia solanacearum(smith)Yabuuchi et al]的抑制作用.结果表明只有5个菌株及其发酵上清液对青枯菌Ra均有不同程度的抑制作用,淡紫灰链霉菌RL9以其33.33mm的抑菌圈直径和0.546的抑菌能力显著高于其它菌株.WFT苗木接菌试验表明,RL9处理组4d后的青枯病情指数为0.252,显著低于对照组,与其相比防治效果为55％.RL9发酵上清液粗分离试验中,(NH4)2SO4和乙醇都不能使拮抗成分沉淀,初步排除拮抗成分为大分子蛋白类物质.有机溶剂乙酸乙酯可以把拮抗成分从发酵上清液中萃取出来,达到粗分离的目的.淡紫灰链霉菌RL9在试验中展现了对桉树青枯病菌Ra优异的生长抑制能力,对青枯病菌生防菌株及药剂的开发有一定的应用价值.

摘要： 在实验室测定了大蒜乙醇和水提取物对烟草青枯病菌的抑菌效果.结果表明:大蒜提取物均对烟草青枯病菌有明显的抑制作用,且随大蒜提取物浓度的增大而增强;大蒜乙醇提取物对烟草青枯菌的抑制作用优于大蒜水提取物.0.2、0.3和0.4g·mL-1浓度的大蒜乙醇提取物对烟草青枯病菌的抑制率分别为65.56％、69.26％、75.93％;0.3和0.4g·mL-1浓度的大蒜水提取物的抑制率分别为61.85％和72.59％;大蒜水与乙醇提取物的有效抑制中浓度分别为0.14g·mL-1和0.08g·mL-1.因此,可尝试以大蒜为原料研制植物保护剂来防治烟草青枯病.

摘要： 荧光假单孢杆菌是一类重要的生防菌.本试验对实验室保存的荧光假单孢杆菌P-71-2菌株使用紫外及微波诱变的方法,对其进行诱变改良,获得了24株遗传性状相对稳定的诱变菌株.其中有2株对青枯病菌和黑胫病菌均有拮抗作用。

摘要： 从我国重庆、贵州、云南、河南、陕西、山东几个主要产烟区共采集烟草根围土壤样品57份,经分离纯化后获得415株放线菌.以烟草黑胫病菌和青枯病菌为指示菌,采用平板对峙法和平板喷雾法来筛选有抑菌活性的拮抗菌株.分别筛选出对烟草黑胫病菌其有拮抗作用的放线菌134株,其中抑菌带宽度大于10mm的18株;对烟草青枯病菌有拮抗活性的放线菌63株,抑菌圈半径大于10mm的15株.

摘要： 2001～2002年，从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等地采集病株及健株共分离到青枯菌菌株19株、内生细菌菌株160株，经鉴定青枯菌菌株2316为强致病力菌株，32株内生菌菌株在室内对烟青枯病菌株有拮抗作用。根据形态特征和生理生化性状，初步鉴定了001、009、011三个内生菌株的分类，其田间初步防效试验证明：这3株内生拮抗细菌对烟草青枯病都有很好的防治效果。

摘要： 本发明涉及农业生物技术领域，公开了烟草青枯病致病菌茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)的保存方法，包括烟草无菌苗获得和培养、烟草青枯病致病菌茄科雷尔氏菌的发酵培养、茄科雷尔氏菌接种和发病植株的保存以及茄科雷尔氏菌的再培养与纯化。本发明的制备和保存方法简便易行，在本发明的保存条件下可保存60‑120天，且在此期限内茄科雷尔氏菌的侵染效率和致病性与自然茄科雷尔氏菌相同，在需要时及时培养可获得高致病性的茄科雷尔氏菌培养物；本发明通过寄主活体培养和高温处理，保证了带菌植物的生长，同时也使得菌株的致病性性状稳定，目标菌纯度有保证。

摘要： 本发明属于植物病害防治技术领域，尤其涉及一种防治烟草青枯病的方法及NaHS在防治烟草青枯病菌中的应用。本发明通过平板和摇瓶实验对烟草青枯雷尔氏菌生长效果进行测定，发现NaHS对青枯病病原菌的生长具有抑制效果；检测不同浓度NaHS对烟草青枯病发病率的影响，结果也说明了NaHS对烟草抗青枯病具有良好作用。本发明还从青枯菌在烟草根部定殖情况、烟草抗青枯病相关基因表达以及土壤微生态的研究各个方面证实了NaHS对烟草青枯病菌的抑菌效果。本发明首次发现并证明了NaHS是抗青枯病原菌的有效抑菌物质，为烟草青枯病的防治提供了新方法，为H2S开发利用及推进烟草青枯病的防治提供理论和实践依据。

摘要： 本发明涉及一株能有效抑制烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)和玉米纹枯病菌(Rrizoctonia solani)的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)的分离及应用，属于微生物技术领域。多粘类芽孢杆菌(P.polymyxa)C2c分离自泰安小麦根际，能有效抑制烟草青枯病菌和玉米纹枯病菌的生长，尤其是对烟草青枯病菌的室内抑菌效果超过化学药剂80％福美双水分散粒剂。C2c对玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)和烟草炭疽病菌(Colletotrichum nicotianae)等也有很好的抑制作用。

摘要： 本发明提供了一种利用青枯病菌噬菌体快速鉴定青枯病菌的方法及试剂盒，属于青枯病菌鉴定技术领域。所述方法包括以下步骤：1)将待检菌种涂布于LB琼脂平板上，静置15～20min，获得待检平板；2)将青枯病菌噬菌体滴加至所述待检平板上，获得鉴定体系；3)将所述步骤2)中获得的鉴定体系在25～32°C下静置培养24～48h，如果有噬菌斑出现，则待检菌种为青枯病菌。本发明所述的方法能够快速准确的鉴定大量青枯病菌，具有效率高，成本低廉，省时省力的特点，准确率达到100％，适于大量青枯病菌的初步筛选和鉴定。

摘要： 本发明的目的在于提供一种青枯病菌培养基及青枯病菌电激感受态细胞的制备方法，以便获得具备较高电激转化效率的青枯病菌感受态细胞。本发明的解决方案是基于细菌细胞通过特殊培养及理化方法进行处理后使细胞处于容易吸收外源DNA的状态，本发明通过培养基配方调整及在细胞培养过程中通过物理方法进行特殊处理使制备的感受态细胞具备较高的转化效率。

摘要： 本发明属于植物病害防治技术领域，尤其涉及一种防治烟草青枯病的方法及NaHS在防治烟草青枯病菌中的应用。本发明通过平板和摇瓶实验对烟草青枯雷尔氏菌生长效果进行测定，发现NaHS对青枯病病原菌的生长具有抑制效果；检测不同浓度NaHS对烟草青枯病发病率的影响，结果也说明了NaHS对烟草抗青枯病具有良好作用。本发明还从青枯菌在烟草根部定殖情况、烟草抗青枯病相关基因表达以及土壤微生态的研究各个方面证实了NaHS对烟草青枯病菌的抑菌效果。本发明首次发现并证明了NaHS是抗青枯病原菌的有效抑菌物质，为烟草青枯病的防治提供了新方法，为H2S开发利用及推进烟草青枯病的防治提供理论和实践依据。

摘要： 本发明公开了β‑石竹烯及β‑石竹烯合成酶基因在防治青枯病菌和/或野火病菌中的应用。β‑石竹烯在制备防治青枯病菌和/或野火病菌的制剂中的应用。烟草中β‑石竹烯合成基因NtTPS21在调控植物青枯病菌和/或野火病菌抗性中的应用，所述的基因NtTPS21核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。NtTPS21能够以法尼基焦磷酸为底物，催化合成倍半萜类化合物β‑石竹烯。NtTPS21代谢产物对青枯病菌和/或野火病菌生长具有显著抑制效果。化合物β‑石竹烯对烟草青枯病菌和或野火病菌的生长也具有显著抑制效果。

摘要： 本发明涉及一株能有效抑制烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)和玉米纹枯病菌(Rrizoctonia solani)的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)的分离及应用，属于微生物技术领域。多粘类芽孢杆菌(P.polymyxa)C2c分离自泰安小麦根际，能有效抑制烟草青枯病菌和玉米纹枯病菌的生长，尤其是对烟草青枯病菌的室内抑菌效果超过化学药剂80％福美双水分散粒剂。C2c对玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)和烟草炭疽病菌(Colletotrichum nicotianae)等也有很好的抑制作用。

摘要： 本发明公开了一种番茄青枯病菌鉴定的特异性引物及其应用。本发明提供了一种用于鉴定或辅助鉴定青枯菌的引物对，由引物epsD‑F和引物epsD‑R组成；所述引物epsD‑F的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述引物epsD‑R的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示。利用本发明所提供的引物对进行荧光定量PCR检测青枯菌，该方法快速、特异性强、灵敏度高等优点，为番茄青枯病早期诊断和防治提供理论基础，对保障番茄产业稳产持续发展具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一株高效拮抗青枯病菌的贝莱斯芽孢杆菌LGT‑1及其应用。所述贝莱斯芽孢杆菌LGT‑1分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis，保藏编号为CGMCC No.24342，其16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。所述贝莱斯芽孢杆菌LGT‑1具有较强的青枯病拮抗能力，对烟草青枯病病原菌的抑菌圈直径达到47.9 mm，能够直接阻止青枯菌的定植；同时该菌株活力高，培养方法简单，可直接用于烟草青枯病的防治，也可制备成多种剂型的菌剂用于制备土壤病原菌防治剂，并且能够降低烟草对致病菌抗药性。因此，所述贝莱斯芽孢杆菌LGT‑1具有广阔的应用前景。