诱导条件

摘要： 药用植物愈伤组织诱导率及生长状态会直接影响其增殖及活性成分积累。为有效提高黄芩愈伤组织的诱导率、优化其生长条件,以黄芩组培苗的根、茎段和叶片为材料,经不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D单因素、双因素以及L(933)正交试验处理,以黄芩愈伤组织诱导率和生长状态为评价指标,筛选其最佳外植体和培养基配方。结果发现,在单因素试验中,当6-BA质量浓度为1.0、1.5、2.0 mg/L时,有且只有茎段诱导状态较好,呈淡黄色,分化状态相对较低,最大诱导率可达88%;当NAA质量浓度为0.5、1.0、1.5 mg/L时,同样茎段诱导情况良好,分化较低,增殖快,生物量大,最大诱导率为72%;在2,4-D测试质量浓度范围内,愈伤组织呈乳白色至淡黄色,诱导率大小表现为茎段>根>叶片,且在0.1 mg/L时,茎段有最高诱导率(97%);故选择1.0、1.5、2.0 mg/L的6-BA,0.5、1.0、1.5 mg/L的NAA和0.05、0.15、0.25 mg/L的2,4-D进行双因素和正交试验,并确定茎段为愈伤组织诱导的最佳外植体。在6-BA和NAA组合试验中,发现不同浓度组合均发生分化现象,说明6-BA和NAA组合适合于芽的增殖培养。进一步通过正交试验结果分析,发现适合黄芩茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.25 mg/L 2,4-D,其诱导率高达94.16%,且愈伤组织颜色呈淡黄色,结构疏松,生长状态良好,可用于继代和增殖培养。

摘要： 漆酶是一种多铜氧化酶,在食品、纺织、环境修复和造纸等领域有重要应用。为提高漆酶的发酵水平,该研究将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)来源的漆酶(CotA)表达于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,并分别考察了核糖体结合位点、诱导表达条件及共表达裂解蛋白对其表达效率的影响。结果显示,最优核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)重组菌CotA-RBS5胞内CotA表达水平达到1236 U/L,较优化前提高1.75倍。基于正交实验设计确定了最佳诱导表达条件为:待菌体浓度OD_(600)达到0.8时,加入终浓度为2 mmol/L Cu及0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷后,于30°C诱导。在该条件下,重组菌CotA-RBS5的胞内酶活力提升至7926 U/L,较优化前提升了5.4倍;同时,胞外酶活力达到4984 U/L。共表达裂解蛋白E促进了细胞的裂解。在菌体浓度OD_(600)达到3.5时诱导裂解蛋白E表达,胞外CotA酶活力在发酵30 h达到10283 U/L。研究结果将为漆酶的工业化生产提供了重要的基础数据。

摘要： 针对油气集输系统中金属管线和设备的局部腐蚀进行实验模拟研究。利用工作站的电化学噪声谱实验模拟局部腐蚀行为以及垢层的离子选择性对腐蚀的影响,模拟腐蚀环境中介质的变化,通过拟合的傅里叶曲线分析金属的局部腐蚀特性参数,研究局部腐蚀的诱导条件。实验结果表明,腐蚀介质中高Cl-含量是引发金属局部腐蚀的主要因素和诱导条件。

摘要： 针对油气集输系统中金属管线和设备的局部腐蚀进行实验模拟研究.利用工作站的电化学噪声谱实验模拟局部腐蚀行为以及垢层的离子选择性对腐蚀的影响,模拟腐蚀环境中介质的变化,通过拟合的傅里叶曲线分析金属的局部腐蚀特性参数,研究局部腐蚀的诱导条件.实验结果表明,腐蚀介质中高Cl-含量是引发金属局部腐蚀的主要因素和诱导条件.

摘要： 丁香酚合成酶(eugenol synthase,EGS)是北细辛(Asarum heterotropoides)主要活性成分甲基丁香酚体内合成途径中的关键酶之一.该研究根据北细辛转录组数据库中筛选到的序列设计特异引物,以RT-PCR法扩增获得北细辛丁香酚合成酶基因(AhEGS)的开放阅读框(ORF)序列,进行了相应的生物信息学分析.同时运用实时定量PCR法分析AhEGS在不同发育时期(幼叶期、花期、果期)和不同组织部位(叶、根茎、根)中的表达谱,并进行原核表达分析.结果显示:(1)AhEGS基因ORF序列长为951 bp,编码316个氨基酸,理论分子量为34.93 kD,等电点为6.19,AhEGS蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;同源序列比对发现,北细辛AhEGS与月季RcEGS(AFQ98278.1)同源性最高.(2)实时定量PCR分析表明,AhEGS基因在北细辛幼叶期的根中表达量最高.(3)成功构建了原核表达载体pET28a-AhEGS-BL21,经pET28a-AhEGS重组子转化E.coli BL21(DE3),SDS-PAGE检测显示在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中诱导产生了35 kD左右的特异性蛋白,与理论分子量一致;最佳诱导条件为16°C、14 h,IPTG浓度为0.2 mmol/L.该研究首次克隆了北细辛的EGS基因,构建了原核表达载体,筛选出该蛋白最佳诱导条件,研究结果为北细辛甲基丁香酚代谢工程的应用奠定基础.

摘要： 探究鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的免疫原性与抗原性,评价其免疫学功能,以期为嗜水气单胞菌亚单位疫苗的开发提供理论依据.采用生物信息学方法预测TolC蛋白的理化性质,分析其菌属间同源性与进化关系,构建TolC蛋白表达菌株并确定其最佳诱导表达条件,包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化TolC蛋白,免疫小鼠制备TolC抗血清,Western blot检测抗血清特异性与效价,免疫酶联法模拟TolC蛋白抗血清对不同鱼类致病菌的体外识别,探究TolC蛋白的抗原性.结果表明,TolC蛋白为孔道蛋白,在气单胞菌属间进化保守.成功表达、纯化了TolC蛋白,其最佳表达条件:菌液OD600为1.0、IPTG浓度0.1 mmol/L、37°C 诱导8 h.Western blot结果表明,制备获得特异性TolC抗血清,效价达到1:3200;ELISA结果显示,TolC抗血清与嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、溶藻弧菌均存在识别作用.综上,嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC具有较好的免疫原性和抗原性,并可能对不同鱼类致病菌存在交叉免疫保护作用.

摘要： 本研究了不同诱导条件及光发酵罐培养工艺对混养佐夫色绿藻的影响,通过参数优化提高了藻细胞生物量和虾青素积累量.本研究首先系统地比较了在摇瓶系统中不同混合碳源和过氧化氢浓度对佐夫色绿藻的生长和虾青素积累的影响,并在光发酵罐中研究了恒定高光强、低光强-高光强以及低光强-高光强-补加过氧化氢三种不同发酵工艺对佐夫色绿藻积累虾青素的影响.结果表明:采用20 g/L葡萄糖和2.50 g/L醋酸钠作为混合碳源取代单一碳源,可以获得最高6.50 g/L生物量,并且添加107.50 mg/L过氧化氢可以将虾青素含量提高到3.23 mg/g,产量最高为72.47 mg/L,是空白组虾青素产量的1.80倍,有效促进了佐夫色绿藻细胞生长和虾青素积累.在5 L光发酵罐中,以20 g/L葡萄糖和2.50 g/L醋酸钠作为混合碳源培养佐夫色绿藻,通过低光强-高光强-补加过氧化氢的组合方式,可获得较优的虾青素含量(3.82 mg/g)和产量(41.41 mg/L),相较于恒定高光强培养,分别提高了36.92％和92.96％.本研究通过诱导条件和发酵工艺优化有效提高了混养佐夫色绿藻生物量和虾青素产量,为利用光发酵罐培养色绿藻生产虾青素提供基础.

摘要： 实验探究了重组Monellin菌株的最佳培养条件,并对其进行了甜味阈值确认和血糖值影响实验.实验所用菌种为实验室构建保存的BL21(DE3)-pET28a Monellin菌种,利用不同浓度的乳糖和IPTG诱导该菌种生成目的蛋白,探究其最佳诱导条件,利用镍柱亲和层析纯化目的蛋白后进行相对甜度和甜味阈值实验,随后设置甜度梯度,对小鼠进行灌胃比较蔗糖和Monellin的升血糖作用及不同浓度Monellin对血糖的影响.实验结果表明,0.9 mmol/L IPTG诱导5 h的Monellin表达量最多,其甜味阈值为100μg/mL,相对甜度为蔗糖的800倍.灌胃结果表明,Monellin升血糖作用不显著,并且在一定范围内对血糖的影响不随其浓度的改变而发生变化.该实验为Monellin在糖尿病等代糖食品市场上的应用提供了科学的理论依据.

摘要： Beige细胞是一类特殊的具有产热活性的脂肪细胞,在特定的诱导条件下才能产生,散在分布于白色脂肪之间。近几年,Beige细胞在肥胖和糖尿病研究领域中的作用引起研究者的关注。但是,Beige细胞是否能够独立发挥与棕色脂肪同样的功能,仍不确定。本研究选择C57BL雄性小鼠,实施去除棕色脂肪神经的手术从而抑制棕色脂肪的功能,然后用冷刺激(4°C)和腹腔注射β3受体激动剂CL316243(1mg/kg)的方法诱导小鼠产生Beige细胞,研究Beige细胞在棕色脂肪去神经小鼠模型中的作用。

摘要： 以玉米自交系7922的幼胚为外植体,探讨了4°C保存时间、激素种类及浓度、培养基成分、AgNO等因素对玉米愈伤组织诱导的影响.结果表明:取4°C保存时间不超过7d的幼胚,以8114、MB、MS、N6为基本培养,选用40g/L的蔗糖浓度或20g/L的蔗糖+10g/L的葡萄糖作碳源,加入1-2mg/L的2,4-D,是较适宜的诱导条件.AgNO对于愈伤组织的诱导也有一定的促进作用.

摘要： 以非洲茉莉(Fagraea ceilanica)幼嫩叶片为外植体寻求诱导愈伤组织的最佳培养条件.分别对外植体最佳消毒时间,最佳激素组合,最佳接种方式,最佳暗处理时间等方面进行了研究.结果表明:外植体经70％的酒精消毒40s后再用0.1％的氯化汞溶液消毒8min较为适宜,污染率与褐化率相对而言都处于较低水平;最适合的生长调节物质组合6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,对于3种不同的放置方式的选择,实验发现更适合选取叶片远轴面朝下放置;最佳暗处理的时间为6d,可使诱导率达53.3％.

摘要： 植物花期、植物激素浓度、品种差异等都是影响茶树花药愈伤组织诱导的重要因素.本试验通过对影响茶树花药愈伤组织诱导因素的研究,初步探索影响茶树花药愈伤组织诱导条件.结果表明,采用时期一即茶树花苞即将开放时的花药作为愈伤组织诱导的外植体,愈伤组织出愈率相对较高; 培养基MS+0.5mg/L2,4-D+0.5mg/LKT,出愈率最高,达34.4％;不同茶树品种花药诱导愈伤组织的能力有所不同,在同一诱导条件下,不同品种茶树花药愈伤诱导能力为:渝茶一号＞福选9号＞早白尖5号.试验初步对花药愈伤组织进行根的分化诱导,采用MS培养基直接附加1.0mg/LNNA、4％的蔗糖及6g卡拉胶可较好实现根的分化，为茶树育种提供参考依据。

摘要： 牙齿是一种多胚层起源的器官，它的发生发育是由一系列上皮和间充质的相互作用完成的。实验已证明牙源性上皮与间充质的相互作用在牙齿发育和形成中的重要性，在这个连续而复杂的过程中起主导作用的是信号分子组成的信号网络调控。在牙齿发育的不同阶段，信号分子以叠加、协同或者拮抗的调控方式反复出现，构成了组成成分和浓度持续变化的牙齿发育微环境。本研究分别将SD大鼠不同发育时期(帽状期、钟状末期)牙胚各部分碎组织、原代培养的SD大鼠牙胚离散细胞、牙间充质离散细胞以细胞团的形式植入肾被膜下发育。通过比较不同发育时期牙胚各部分的发育能力从而间接获取上皮一间充质信号网络所构成的成牙微环境的存在和变化的信息，从而为组织工程牙齿种子细胞的分化探寻最适宜的成牙微环境和可靠的诱导条件。

摘要： 本文旨在进行体外分离、培养、鉴定人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)并对其生物学特性进行观察，并就体外诱导人脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化,探索其诱导条件,为组织工程学种子细胞的来源及其临床应用提供实验基础。

摘要： 本文将探讨异丙基硫代-β-D-半乳糖苷的诱导及培养基的不同对我们构建的极端耐热木聚糖酶工程菌EcoliDB1682表达目的产物的影响.

摘要： 本发明属于化合物合成技术领域，具体涉及一种可见光诱导光敏剂催化条件下合成喹喔啉类化合物的方法。该方法包括以下步骤：以非活化脂肪胺和邻苯二胺为原料，在光敏剂作用下，经可见光光照，在室温和氧气条件下于溶剂中反应生成喹喔啉类化合物。该方法具有较好的底物普适性和相对温和的反应条件，不仅首次实现了喹喔啉类化合物的合成，而且还拓宽了有机合成领域。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种敲除小鼠Tet3基因的SgRNA导向序列、条件性诱导小鼠精原细胞Tet3基因敲除细胞系及其构建方法及其应用，基因编辑脱靶效应是困扰基因编辑技术应用的一个重要方面，本专利筛选获得的Tet3基因靶点是以整个小鼠基因组筛选出唯一靶向序列的靶点，基因组内无其他类似序列，所以理论上不存在脱靶效应，同时采用诱导型敲除的方法，及时关闭Cas9蛋白表达，也可以有效防止脱靶产生，当添加Dox 24h后小鼠精原细胞基因组得到97％以上敲除，Dox诱导前后作为很好的试验组和对照组，本发明所建立的细胞系和方法可以广泛应用于Tet3和其他基因功能研究。

摘要： 本发明公开了一种定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的HS5条件培养基。本发明方法包括分阶段培养所述hiPSC诱导其神经分化，所述阶段包括：阶段a.共培养所述hiPSC与骨髓基质细胞HS5于诱导培养基；阶段b.用HS5条件培养基连续培养所述hiPSC；阶段c.用培养神经元细胞的基础培养基继续培养所述hiPSC。本发明的方法诱导人类hiPSC细胞定向分化为神经系统细胞，同时抑制非神经系统细胞的生成，从而获得成熟、广谱的神经细胞群。该神经细胞群不仅经过体外验证为具有电冲动发放的成熟神经元，而且这类神经细胞群在小鼠体内实验中也被证实，具有有效的治疗神经系统疾病(如脑卒中、脑损伤)的作用。

摘要： 本发明公开了槟榔碱协同薄荷醇诱导形成条件性位置偏爱动物模型的方法和应用，属于动物模型构建技术领域。本发明基于目前尚缺乏理想的槟榔碱协同薄荷醇的CPP依赖模型的技术问题，从槟榔的多种有效成分中筛选得到了可构建CPP动物模型的槟榔碱，并将其与薄荷醇配合，进一步调节二者的给药量使其发挥协同增效作用，成功构建得到了一种稳定且重现性好的CPP动物模型，其不仅可用于评价槟榔碱协同薄荷醇的依赖性，也更有利于进一步探索槟榔碱协同薄荷醇诱导依赖的神经生物学机制，为开展早期干预及治疗提供理论依据。本发明所述的方法操作简单方便、省时省力，适合实验室大规模广泛应用。

摘要： 本发明涉及用于诱导从体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基及利用其的脱分化诱导方法。当使用本发明的用于诱导脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基时，仅使用由来源于人的产物构成的培养基便可稳定确立个性化定制的脱分化干细胞，并通过提供来源于人胎盘的环境来再现成类似生物环境，从而可制备适用于临床的细胞治疗剂。

摘要： 本发明公开了一种用于悬浮培养条件下诱导肝细胞分化成熟的诱导培养基以及方法，涉及细胞培养技术领域。本发明是在悬浮培养条件下，通过在肝细胞培养基中添加Notch信号通路阻断剂、TGF‑β信号通路阻断剂、地塞米松和抑瘤素M，并通过该培养基对肝祖细胞进行诱导分化，能够稳定高效地获得功能成熟的肝细胞。本发明建立了一种稳定高效的规模化制备功能成熟肝细胞的方法，为临床生物人工肝和肝细胞移植治疗提供了可靠的细胞来源，为肝细胞在肝病机理研究和药物研发等领域的应用开拓了新思路和途径。

摘要： 用于治疗正在经历化疗的受试者的高血糖症和高血糖症依赖性副作用的方法包括鉴别正在经历化疗和给予高血糖症诱导剂的受试者的步骤。在第一时间段将短期饥饿或禁食模仿膳食给予受试者以预防高血糖症以及对与葡萄糖水平提高相关的化疗的敏感。在STS/FMD周期之间给予STS‑模拟药物二甲双胍来保持再喂食期间的STS样/FMD样条件。

摘要： 本发明属于微生物技术领域，公开了一种在宿主细胞存在条件下诱导形成活的不可培养状态细菌的方法及其应用，该方法是将处于3～20代的细胞转移孔板中，得到诱导细胞；将处于对数增长期的细菌经缓冲液洗涤，改性细胞培养液重悬，得到细菌悬液。将细菌悬液加入诱导细胞中，在恒温培养箱中孵育1～5h后，后加入含10～500mg/L庆大霉素改性细胞培养液，经细胞处理3～10d后，加入细胞裂解液收集胞内的细菌再洗涤、离心、重悬，得到活的不可培养状态的细菌。本发明在宿主细胞存在条件下可以诱导细菌进入活的不可培养状态，不仅拓展了对活的不可培养状态细菌的认识，也为临床中的复发性、慢性感染疾病提供理论与技术支持。

摘要： 本发明涉及一种不同限速条件下城市地下通道线性视线诱导系统，包括对于限速20km/h路段区域的一级视线诱导系统、限速40km/h路段区域的二级视线诱导系统、限速60km/h路段区域的三级视线诱导系统，所述视线诱导系统包括隔离墙体，所述隔离墙体端头处设置高杆警示柱，所述高杆警示柱表面设置有设置警示型线形诱导标，在所述地下通道前上下坡段道路中部设置有路中隔离栏。本发明对驾驶人形成多层线形诱导与多层轮廓诱导，分解驾驶任务，分层、分级引导驾驶人采取安全合理的驾驶行为决策增强驾驶人对进入通道感知能力，有效地警示驾驶人在接近通道、进入通道和驶出通道前做出驾驶决策。

摘要： 本发明公开了一种条件性诱导神经干细胞增殖的墨西哥钝口螈动物模型的构建方法及其应用。该构建方法包括如下步骤：将Yap1S96A/S352A突变体(SEQID NO.1)片段连接到CAGGs:LP‑EGFP‑LP‑Cherry质粒骨架上，得到重组质粒；然后将其与Tol2转座酶mRNA显微注射到墨西哥钝口螈受精卵中，经常规饲养后，再电转Cre重组酶表达质粒，利用Cre重组酶激活Yap1S96AS352A突变体表达，进而诱导神经细胞转分化为神经干细胞并增殖。本发明方法为研究其体内神经干细胞的功能，特别是再生过程中的功能提供了强有力的工具。