菌种分离

摘要： 为了提高现有纳豆激酶产量,促进其工业化生产与应用,本文从不同产地的鲜纳豆中分离出枯草芽孢杆菌,先后通过菌落形态初筛与酪蛋白平板复筛,选出水解圈与菌落比值较大的菌株,测定其发酵液中纳豆激酶酶活,选定一株酶活相对较高的菌株X_(3)。通过系统16S rDNA测序鉴定和系统发育树对比,确定X_(3)菌株为枯草芽孢杆菌。在单因素试验的基础上,设计响应面试验,优化纳豆激酶摇瓶液态发酵条件,确定了X_(3)菌株液态发酵的最佳条件为:温度34°C,初始pH6.5,接种量2%,装瓶量20%,发酵时间30 h。在该条件下,发酵生产的纳豆激酶酶活为393.095 U/mL,且与购买的纳豆激酶相比具有更高的酶活。本试验为后续工业化生产奠定了一定基础。

摘要： 本文采用高效液相色谱、组织培养、形态学观测结合真菌核糖体转录间隔区(rDNA-ITS)序列生物学分析等方法,进行了南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)菌根组织解剖学各部位、茎段愈伤组织及其与菌根真菌互作后紫杉醇含量、菌根菌组分离纯化和种属鉴定分析等研究。结果显示,菌根原始根组织中紫杉醇的含量比须根高0.645 mg/g,比其他器官组织高1个数量级,且南方红豆杉茎段愈伤组织与菌根真菌互作可提高愈伤组织紫杉醇的含量。菌根菌组经分离纯化共获得26个菌株,分属3门6纲9目11科14属,分别为曲霉属(Aspergillus)、木霉菌属(Trichoderma)、镰孢霉属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)、Cylindrodendrum、小帚梗柱孢属(Cylindrocladiella)、螺旋聚孢霉属(Clonostachys)、炭角菌属(Xylaria)、枝孢霉属(Cladosporium)、棒孢属(Corynespora)、Paraboeremia、无柄盘菌属(Pezicula)、刺盘孢属(Colletotrichum)、烟管菌属(Bjerkandera),其中前两属为优势菌属,表明南方红豆杉菌根真菌存在种属多样性,且发现与其根、树皮、韧皮、木材、叶等器官组织中的内生真菌菌群的种类多样性间存在较大差异,说明菌根真菌与南方红豆杉未木栓化根共生互作是其具有较高紫杉醇积累的生物学基础。本文为南方红豆杉菌根较高紫杉醇含量与菌根真菌间的相关性研究奠定了基础。

摘要： 马铃薯淀粉生产过程中会产生大量含有蛋白质等有机成分的汁水,如果直接排放,其中的蛋白质会被分解,从而产生如尸胺、腐胺、精胺、吲哚及硫化物等具有臭味的物质,造成空气污染.该研究通过筛选获得1株能够降解马铃薯汁水中蛋白质的菌株,并且降解后产生的臭味小于气味阀值,将其用于还田灌溉,有效的进行废物利用.实验经过初筛、复筛分离获得了能够降解酪蛋白质的菌株,并进行马铃薯汁水发酵,通过测定分析挥发性成分,未检测到吲哚、硫化氢等臭味成分,尸胺、腐胺、亚精胺和精胺等物质含量极少,感官评价臭味极低,并可以在15°C保持较好发酵活力,通过《细菌学手册》及生理生化鉴定和16S rRNA鉴定,确定为粘质沙雷氏菌(Ser-ratia marcescens),命名为NXYS-S.

摘要： 对杨树口蘑菌种进行分离和驯化研究.通过组织分离得到杨树口蘑菌种,并进行室内栽培试验.采用杨树叶、杨树木屑为主要原料制作栽培袋,利用杨树林的土壤和杨树叶为覆盖材料进行出菇试验.在室内栽培过程中,菌丝爬土后扭结变粗,形成类似子实体原基的形状,虽然并未形成真正的子实体,但为子实体形成提供了有益的思路.

摘要： [目的]对野生食用菌进行分子鉴定及生物学特性研究,为其进一步液体深层发酵培养和开发利用奠定基础.[方法]采用rDNA ITS序列分析方法对一野生菌进行分子鉴定,通过单因素和正交试验确定了该菌株的生物学特性.[结果]由新鲜子实体分离得到的纯菌株为Paxillus ammoniavirescens,其菌丝体生长的最适碳源和氮源分别为可溶性淀粉和蛋白胨,最适培养温度为25°C,最适pH为4.5.[结论]卷边网褶菌菌丝体液体培养的最佳配方为:可溶性淀粉20 g,蛋白胨2 g,KH2PO4 3.0 g,MgSO4 4.5 g,水1L.按此配方培养,可获得平均干质量为80 mg的菌丝体,明显高于其他配方.

摘要： 食用菌菌渣发酵微生物分离及应用属于生物产业绿色生产技术,品评《食用菌学实验教程》一书,从中可以挖掘出如何大力培育和发展战略性新兴产业技术,将微生物发酵技术用于医药、食品、化工、环保等核心领域,对提升我国生物发酵产业整体实力、实现节能减排和绿色生产具有重大意义。《食用菌学实验教程》作为微生物学实验教程系列之一,共包括26个实验内容,分别为母种、原种、栽培种的制作,菌种分离技术,液体菌种制作技术,菌种保藏方法,平菇不同菌株的酯酶同工酶凝胶电泳鉴定,RAPD检测平菇菌株间基因组差异,平菇栽培技术.

摘要： 筛选对舞毒蛾有致病性的虫生真菌。野外采集被感染的舞毒蛾蛹,进行菌种分离、纯化,结合形态特征和rDNA ITS序列比对分析对菌种进行鉴定,同时利用喷雾法研究其对舞毒蛾幼虫致病性。从采集的舞毒蛾蛹中分离得到1株虫生真菌,将其命名为HEB-2016,在不同的培养基中菌落特征有所不同,显微观察其与曲霉属特征相符。rDNA ITS序列测序获得片段长度为595 bp的序列,比对结果显示其与Aspergillus ochraceus和A. westerdijkiae等序列相似性达98%～100%,结合系统进化树鉴定分离菌种为A.westerdijkiae。该菌株对舞毒蛾幼虫具有较强的致病性,经浓度为108个/mL的孢子悬浮液处理7天后,校正死亡率为80.69%,10天后肉眼可见菌株的产孢结构。HEB-2016对舞毒蛾具有致病性,菌株可为防治舞毒蛾、开发生物农药提供候选菌种资源。

摘要： [Objective]To find suitable strains of wild edible fungi cultivated under poplar forests. [Method]Wild macrofungus under Populus alba forest collected from Mongolia Autonomous County,Fuxin City,Liaoning Province was isolated and the effects of different separation sites on mycelium growth were studied. The rDNA ITS sequences of mycelium were studied.[Result]The junction between the cap and stipe was the best separation site for the fungus. The rDNA ITS fragment was amplified by PCR, the length of the amplified product was 692 bp. The Blast comparison was performed between NCBI and a known strain in GenBank. The Query cover between sequence and Agaricus bitorquis (Quél.) Sacc was 97% to 100%,the idents were all 99%.[Conclusion]The identified strains belong to mushroom family,mushroom genus and Agaricus bitorquis.The study can provide the preparation of strains for the nest stage of poplar-edible fungus compound management.%[目的]寻找适宜杨树林下栽培的野生食用菌菌种.[方法]对采集自辽宁省阜新市蒙古族自治县银中杨林下的野生大型真菌进行菌种分离,同时研究不同分离部位对菌丝生长的影响,并对获得菌丝进行了rDNA ITS序列分析.[结果]菌盖与菌柄连接处为菌种最佳分离部位.对分离株rDNA ITS片段进行PCR扩增,扩增产物长度为692 bp,登录NCBI与GenBank中已知的菌种进行Blast比对,序列与Agaricus bitorquis(Quél.)Sacc的Query cover为97% ~100%,ident均为99%.[结论]鉴定分离菌种为蘑菇科、蘑菇属、大肥菇.该研究可为下一步开展杨-食用菌复合经营提供菌种准备.

摘要： 从煤化工废水和厌氧污泥中分离出2株高效的硫酸盐还原菌,通过革兰氏染色、扫描电子显微镜观察其形态,通过16S rDNA序列分析法鉴定其种属,并研究其生长特性和硫酸盐还原性能.实验结果表明:菌株SRB-1为革兰氏阴性柠檬酸杆菌;菌株SRB-2为革兰氏阳性丁酸梭菌;两种菌株在最佳条件下培养4 d,菌液菌量均可达到1×106个/mL的水平;在SO2-4质量浓度为1360 mg/L的条件下,两种菌株的SO2-4去除率分别达到93％和95％.

摘要： 抗生素发酵是微生物等生物细胞进行酶促转化，本文介绍了菌种分离方法和影响种子质量的因素，分析了发酵过程湿度变化和控制、PH的控制，发酵过程中泡沫的产生和控制，并阐述了发酵过程中染菌及预防措施。

摘要： 本文结合山东省的实际情况，在发酵床养殖的各个环节，如菌种分离、垫料制作、发酵床管理、垫料再生等进行了系列创新性研究。

摘要： 多氯联苯(PCBs)是一类典型卤代持久性有机污染物(POPs),主要分布在湿地沉积物、土壤、地下水等厌(兼)氧环境,并对生态及人类健康造成危害.微生物还原脱卤(Microbial Reductive Dehalogenation)技术是利用自然环境存在的高效脱卤菌,实现氢素代替卤代有机物分子上的卤素,从而达到脱除卤素、降低毒性和持久性的目的.该技术是实现卤代有机物污染场地原位修复的主流技术之一,已在四氯乙烯(PCE)、氯酚等卤代有机物污染的地下水、土壤等原位修复工程中获得广泛、成功应用.

摘要： 多氯联苯(PCBs)是一类典型卤代持久性有机污染物(POPs),主要分布在湿地沉积物、土壤、地下水等厌(兼)氧环境,并对生态及人类健康造成危害.微生物还原脱卤(Microbial Reductive Dehalogenation)技术是利用自然环境存在的高效脱卤菌,实现氢素代替卤代有机物分子上的卤素,从而达到脱除卤素、降低毒性和持久性的目的.该技术是实现卤代有机物污染场地原位修复的主流技术之一,已在四氯乙烯(PCE)、氯酚等卤代有机物污染的地下水、土壤等原位修复工程中获得广泛、成功应用.

摘要： 多氯联苯(PCBs)是一类典型卤代持久性有机污染物(POPs),主要分布在湿地沉积物、土壤、地下水等厌(兼)氧环境,并对生态及人类健康造成危害.微生物还原脱卤(Microbial Reductive Dehalogenation)技术是利用自然环境存在的高效脱卤菌,实现氢素代替卤代有机物分子上的卤素,从而达到脱除卤素、降低毒性和持久性的目的.该技术是实现卤代有机物污染场地原位修复的主流技术之一,已在四氯乙烯(PCE)、氯酚等卤代有机物污染的地下水、土壤等原位修复工程中获得广泛、成功应用.

摘要： 多氯联苯(PCBs)是一类典型卤代持久性有机污染物(POPs),主要分布在湿地沉积物、土壤、地下水等厌(兼)氧环境,并对生态及人类健康造成危害.微生物还原脱卤(Microbial Reductive Dehalogenation)技术是利用自然环境存在的高效脱卤菌,实现氢素代替卤代有机物分子上的卤素,从而达到脱除卤素、降低毒性和持久性的目的.该技术是实现卤代有机物污染场地原位修复的主流技术之一,已在四氯乙烯(PCE)、氯酚等卤代有机物污染的地下水、土壤等原位修复工程中获得广泛、成功应用.

摘要： 首次系统分析栽培羊肚菌的形态学特征和形态发育循环过程,包括菌丝和菌丝体、子实体形态和数量性状、组织解剖形态、菌核形成过程、无性繁殖体、子实体发育过程、栽培过程的生活循环、孢子萌发方式等,讨论形态特征与子实体产量的关系.

摘要： 首次系统分析栽培羊肚菌的形态学特征和形态发育循环过程,包括菌丝和菌丝体、子实体形态和数量性状、组织解剖形态、菌核形成过程、无性繁殖体、子实体发育过程、栽培过程的生活循环、孢子萌发方式等,讨论形态特征与子实体产量的关系.

摘要： 首次系统分析栽培羊肚菌的形态学特征和形态发育循环过程,包括菌丝和菌丝体、子实体形态和数量性状、组织解剖形态、菌核形成过程、无性繁殖体、子实体发育过程、栽培过程的生活循环、孢子萌发方式等,讨论形态特征与子实体产量的关系.

摘要： 首次系统分析栽培羊肚菌的形态学特征和形态发育循环过程,包括菌丝和菌丝体、子实体形态和数量性状、组织解剖形态、菌核形成过程、无性繁殖体、子实体发育过程、栽培过程的生活循环、孢子萌发方式等,讨论形态特征与子实体产量的关系.

摘要： 鼠笼式食用菌种植包料袋破碎分离装置，包括机架，在机架上设置有破碎装置和分离装置，所述的破碎装置包括上料斗，上料斗下部设置有旋转轴，旋转轴上连接有刀片，旋转轴上连接有驱动装置，破碎装置上还设置有物料出口，物料从物料出口中直接进入鼠笼式转动分离筛的进料口或者通过输送设备进入鼠笼式转动分离筛的进料口，所述的鼠笼式转动分离筛外壁为格栅状，在机架上设置有鼠笼式转动分离筛转动驱动装置。本发明能够自动实现废料与塑料薄膜的分离。

摘要： 本发明公开了一种莫干山野生红托竹荪菌种的分离和纯化方法，该方法包括：采集莫干山竹林中的野生红托竹荪蛋进行清洗和消毒；将红托竹荪蛋纵向剖开，取出中间第二层的菌裙组织，接种至分离培养基上，进行分离培养；挑取菌落尖端菌丝接种到新的分离培养基上，继续培养，获得莫干山野生红托竹荪纯菌种。本发明方法通过分离野生红托竹荪的白色菌群，并采用竹林土、柠檬酸铵和马铃薯用量减半的PDA综合培养基作为分离培养基组分进行配合使用，不仅能够分离纯化获得到莫干山野生红托竹荪菌种，而且能够有效缩短菌种的萌发时间，提高萌发率，促进菌种菌丝的生长，以及抑制菌丝的老化。

摘要： 本发明涉及一种从多菌种孢子中分离出鸡油菌种的方法，农业技术领域，其特征是按下面的步骤进行：一、菌种准备；二、培养基准备：甘蔗渣40～50份、稻草21～31份、干燥粘土20～30份、细砂15～20份；三、培养基调制：将干燥甘蔗渣和稻草粉碎分装入聚乙烯薄膜袋，每袋0.3kg～0.4kg；四、培养基灭杂菌；五、将孢子粉植入灭菌后的培养料；六、覆膜保湿保温培养；七、纯种菌体分离：保持大棚温度25°C～30°C20～30天，各菌体基本长出，将各杂菌体仔细挑选拔出，生长7～8天后又进行一次挑选清除杂菌，达到将相似杂菌完全清除的目的；八、将剩下的鸡油菌继续培养至成熟，提取孢子粉为纯情种鸡油菌孢子菌种。

摘要： 本发明公开了一种松茸子实体分离培育菌种和菌丝体的方法，包括以下步骤：首先在符合培育要求的松茸子实体上切取菌肉进行培育得到母种，在将培育好的母种接种到一级二级摇床培育，在适当条件下培育得到原种菌丝体种，可用于松茸栽培，同时将原种菌丝体种经发酵技术扩大培养，培养结束后将菌丝体经提取和浓缩，可得到松茸菌丝体粉及松茸浓缩液。有益效果在于：打破传统野生松茸依赖，实现人工分离菌种培育，营养丰富的松茸可以在人工技术培育下大量产出松茸菌丝体粉和松茸浓缩液，并为一年四季产出松茸提供了基础菌种保障。

摘要： 本实用新型公开了一种食用菌种植包料袋破碎分离机，涉及农业生产技术领域，包括分离箱，所述分离箱上表面的中部固定连通有漏斗，所述分离箱的内部放置有第一压辊和第二压辊，所述分离箱左侧面的上部固定连接有第一电机，所述第一电机的输出端延伸至分离箱的内部，所述第一压辊的右端与分离箱的右侧壁转动连接。本实用新型设计结构合理，它能够通过活塞、压簧、方筒、立板、第一单向阀、通气管、第二单向阀和风扇之间的配合设置，起到减小粉尘的效果，减小装置工作时对周边空气环境的污染，通过直筒、伸缩弹簧、直杆、过滤网华为压簧之间的配合设置，起到缓冲的作用，延长了装置的使用寿命。

摘要： 本实用新型公开了水质净化菌种的分离筛选装置，涉及菌种筛选技术领域，具体为水质净化菌种的分离筛选装置，包括分离筒，所述分离筒的内壁固定连接有放置框，所述放置框的内部固定连接有第一弹簧，所述第一弹簧的一端固定连接有支撑块，所述支撑块的外表面抵接有分离框，所述分离框的内部固定连接有倒拱形筛板。该水质净化菌种的分离筛选装置，通过倒拱形筛板、支撑块、第一弹簧和研磨轮的配合设置，在使用的过程中可以通过伺服电机的转动，带动研磨轮转动，进而使研磨轮挤压分离框，使分离框下移，挤压第一弹簧，同时研磨轮对结块部分进行研磨，从而起到了分离和研磨一步到位的作用，达到了节约分离筛选时间的目的。

摘要： 本发明提供了冬虫夏草菌菌种的分离方法，包括：1)在无菌条件下培养冬虫夏草鲜草并收集弹射的冬虫夏草子囊孢子；2)将步骤1)收集的冬虫夏草子囊孢子在无菌条件下用无菌水洗涤后稀释得到子囊孢子稀释液；3)将适量步骤2)所述子囊孢子稀释液在水琼脂平板上涂布展开、培养并萌发形成菌丝团；4)挑取单个子囊孢子萌发形成的菌丝团转移至液体培养基继续培养，所述菌丝团在所述液体培养基中产生一定数量芽生孢子后，接种至新的液体培养基或者固体培养基扩大培养，得到冬虫夏草菌。本发明还提供了冬虫夏草的人工培植方法和液体培养基在分离培养冬虫夏草菌中的用途。本发明的冬虫夏草菌菌种分离的方法具有分离周期短、效率高等显著优点。

摘要： 真菌菌种分离器及利用其进行真菌菌种分离的方法，涉及一种菌种分离器和利用该分离器对真菌菌种进行分离的方法。为了克服野外工作分离纯化大型真菌成功率低、外业接种工序繁琐等不足，本发明分离器的内部填充有PDA培养基(1)和木屑培养基(2)，其中PDA培养基(1)和木屑培养基(2)各自分段填充并且相连。利用上述真菌菌种分离器进行分离真菌菌种的方法为：a.真菌组织切块分解木屑培养基(2)，扩散到PDA培养基(1)中；b.在超净工作台中，在PDA培养基(1)中挑取生长旺盛的菌丝于斜面PDA培养基中，25°C培养。本发明可以便捷、快速、准确地获得大型真菌的纯培养，受霉菌污染少，分离纯化成功率达到90％左右。

摘要： 本发明公开一种多菌种孢子中分离出刺芹侧耳菌种的方法，农业技术领域，是按下面的步骤进行：一、菌种准备；二、培养基原料：甘蔗渣40～50公斤、干燥粘土20～30公斤、细砂15～20公斤；三、培养基调制：将干燥甘蔗渣粉碎成直径≤0.1cm的碎粒，再混入粘土、细砂，混合均匀成为混合培养料；四、培养基灭杂菌：将混合培养料加热至70°C～80°C一分钟后自然降低温度至20°C～30°C；五、培养基成形与菌种种植；六、覆膜保湿保温培养；七、纯种菌体分离：保持大棚温度25°C～30°C31～41天，进行菌种分离，将各杂菌体仔细挑选拔出清除；八、菌体继续生长成熟，提取得纯种刺芹侧耳菌孢子。

摘要： 本发明公开了一种快速分离鉴定益生菌种属和益生功能的筛选方法，筛选步骤分为益生菌分离鉴定和体外抑菌效果试验，所述益生菌分离鉴定步骤如下：S1：培养基准备，采用LB固体和液体培养基、乳酸细菌培养基MRS固体和液体培养基；S2：菌液制备，无菌采集盲肠内容物和黏膜，置于无菌生理盐水中，混匀；S3：菌种分离，分别对乳酸菌类分离和芽孢杆菌分离；S4：培养；S5：初筛纯化，进行乳酸菌纯化和枯草芽孢杆菌纯化；S6：鉴定。本发明以鸡盲肠黏膜和粪便为原料，接种在LB和MRS培养基，37摄氏度厌氧培养24‑48h，扩增产物送检生工测序，测序结果通过NCBI网站Blast分析，快速鉴别细菌种属，可实现对批量益生菌鉴定和能力筛查，提高产能品研发环节的开发效率。