羊痘病毒

摘要： 牛结节病又称牛结节疹、牛结节性皮炎或牛皮肤疙瘩病,是由痘病毒科羊痘病毒属的DNA病毒所致。该病以病牛发热、消瘦、淋巴结肿大,皮肤水肿,局部形成坚硬的结节或溃疡为主要特征。该病不会传染人,不是人畜共患病。它能通过蚊蝇等节肢昆虫传播,严重损坏牛的皮肤,影响皮张加工与销售。

摘要： 牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease,LSD)是由羊痘病毒属牛结节性皮肤病病毒(LSDV)引发的一种急性、热性传染病。2019年8月在我国新疆伊梨州首次发现,其临床特征表现为全身皮肤出现结节、肿块,所以又称为牛疙瘩皮肤病,我国暂列为二类动物疫病。本病感染牛,奶牛较易感,未有感染羊的报告,不感染人。

摘要： 目的:调查安徽临泉地区羊群中O型口蹄疫病毒(Type O FMDV)、A型口蹄疫病毒(Type A FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)和羊痘病毒(SGPV)的血清抗体水平。方法:从安徽临泉多个养殖场随机采集113份羊血液样品,分离血清后利用商品化酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒分别对上述几种病毒的抗体水平进行检测。结果:Type O和Type A FMDV抗体总体阳性率分别为66.4%和60.2%,PPRV抗体总体阳性率为69.9%,ORFV抗体总体阳性率为69%,SGPV抗体总体阳性率为37.2%。结论:几种病毒血清抗体总体阳性率均低于70%,未达到国家规定的免疫防控要求,需要加强免疫。

摘要： 为研究锚定蛋白基因(Ankyrin,ANK)对山羊痘病毒的影响,试验采用融合PCR和Overlap PCR技术扩增山羊痘病毒SS株5个ANK基因(ANK010、ANK138、ANK 140、ANK141.2和ANK145)两端侧翼序列和绿色荧光蛋白(GFP)基因,并将其产物连接Trans1-T 1载体构建ANK缺失的转移载体,经过菌液PCR以及质粒双酶切鉴定,阳性重组质粒用Lip 2000转染至已经感染羊痘病毒SS株的羊睾丸原代细胞,依报告基因GFP的表达情况在荧光显微镜下筛选目的基因缺失的重组病毒,同时设立不感染病毒的对照.结果 表明:通过融合PCR方法成功扩增山羊痘病毒SS株ANK基因010和138的两端侧翼序列及GFP基因片段,大小约1 200 bp;通过Overlap PCR方法成功得到ANK基因140、141.2和145基因的侧翼及GFP基因片段,大小约900 bp,与理论相符.研究成功构建了基因缺失转移载体,将其转染感染SS病毒的细胞中,5个ANK基因缺失的表达载体均可见绿色荧光斑点,说明得到各自基因缺失的重组羊痘病毒.

摘要： 报道3例羊痘.与以往报道的病例多发于畜牧人员不同,本文3例患者为同一餐饮店从业人员.3例患者均表现为结节、脓疱伴痒痛,均有病羊接触史,组织病理特点均符合羊痘诊断.经抗病毒及对症治疗后好转.

摘要： 牛结节性皮肤病可对病畜皮肤造成永久性损害,并会导致产奶量下降、生长发育迟缓、公畜不育和孕畜流产等严重后果,对经济生产具有重要影响.目前尚无治疗该病的特效药,使用安全有效的疫苗是防控该病传播的重要手段.牛结节性皮肤病弱毒活疫苗在许多国家已被成功用于该病的防控,除此之外,由于牛结节性皮肤病病毒与山羊痘病毒及绵羊痘病毒在基因组序列上的高度相似性,山羊痘病毒弱毒活疫苗和绵羊痘病毒弱毒活疫苗在许多地区也被用于该病的防控.牛结节性皮肤病病毒编码基因较多,目前尚未发现基因缺失疫苗和亚单位疫苗具有好的保护效果.近年来灭活疫苗在实验室研究中取得了较大进展,但仍需进一步大规模临床试验以证明其有效性.此外,牛结节性皮肤病病毒作为一种痘病毒,已被证明是表达多种病原微生物抗原的有效载体之一.笔者主要总结了当前牛结节性皮肤病疫苗的研究进展,对弱毒疫苗、灭活疫苗、基因缺失疫苗和亚单位疫苗的使用情况、保护效果及研究方向等方面进行了综述,以期为牛结节性皮肤病疫苗的研发和疫病的防控提供新的思路和见解.

摘要： 为研究羊痘病毒宿主范围基因(Hrg)063的特性及生物学功能,采用overlap PCR技术将绿色荧光蛋白(GFP)基因与063基因两侧的同源臂连接起来,把扩增的目的基因插入到PEASY-T1克隆载体中,构建以GFP基因为报告基因的063基因缺失表达载体,并测序鉴定;用脂质体Lipofectamine 2000转染表达载体到羊痘病毒感染的羊睾丸原代细胞中,挑取荧光显微镜下表达为绿色荧光的063基因缺失的羊痘重组病毒,并传代纯化.成功的构建了Hrg 063缺失的表达载体(PEASY-Δ063-GFP),测序结果表明063基因的上下游同源臂与GFP报告基因大小约900 bp,与理论相符.转染后表达载体与羊痘病毒重组,得到了063基因缺失的山羊病毒SS株、TS株和疫苗株3个毒株重组病毒,但纯化时重组病毒不能正常传代.该研究中063基因缺失表达载体的构建为其生物学特性及功能的研究奠定了基础.

摘要： 羊痘是一种急性传染病.山羊、绵羊都易感染,羔羊感病后死亡率较高,对肉羊产业危害很大,有效预防羊痘病对畜牧业生产至关重要.文章从发病原因、临床症状、预防措施、治疗方法、注意事项等几个方面进行详细介绍,供养殖户参考借鉴.

摘要： 羊痘病毒引起的羊痘病会使绵羊、山羊皮肤及黏膜上出现大量丘疹的急性传染病.通过对羊痘病毒的流行病学、病原学、临床症状、分子生物学特性、诊断方法以及免疫方面进行综述,将近年来羊痘病毒的研究做了汇总,为羊痘病毒的研究及防疫工作提供参考.

摘要： 羊痘病毒是主要感染羊的病毒性传染病,可分为绵羊痘病毒和山羊痘病毒,是危害养羊业健康发展的主要病毒性传染病.羊痘病毒主要通过接触传播和呼吸道传播,羊群营养不良及环境应激都会增加发病机会,发病羊表现为体温升高和出现水疱和丘疹,严重时发生继发感染会导致死亡,造成严重的经济损失.2019年3月,某羊场的绵羊感染羊痘病毒,经笔者积极诊治,病情得到了有效控制.

摘要： 本文复习了羊痘病毒在易感动物体内宿主细胞的病理学变化和体外培养时的致细胞病变研究概况。根据近年来对羊痘病毒易感动物体内宿主细胞的新认识，讨论了进一步研究某些体外试验的必要性及可能性。

摘要： 对羊痘病毒(Capripoxvirus CaPV)的基本特征、基因组结构、CaPV各种间关系、CaPV的分子生物学诊断方法及CaPV毒力相关的蛋白及其功能的研究进展进行综述，为羊痘病毒的进一步提供帮助。

摘要： 本文以羊痘病毒P32重组蛋白为抗原包被ELISA板,建立了间接ELISA检测羊痘抗体的诊断方法。结果表明，抗原的最佳包被浓度为5μg/mL,被检血清最佳稀释倍数为1:320。判定标准定为:被检样品OD值≥0.320为阳性，被检样品OD值＜0.267为阴性,0.267≤被检样品OD值＜0.320为可疑,可疑样品要重新进行测定或跟踪检测。该试验与病毒中和试验及琼脂免疫扩散试验进行了比较,其敏感性高于病毒中和试验,且重合率为90.5％，因而该方法可用于羊痘抗体检测。

摘要： 从羊痘病毒基因组中寻找并扩增羊白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)基因.将该基因克隆到表达载体PGEX-5X-3,在大肠杆菌BL21中实现了高效表达.目的蛋白以包涵体形式存在.表达产物经过变性、复性和层析纯化后,具有体外拮抗羊IL-18刺激外周血单核细胞产生IFN-γ的活性.

摘要： 为获得羊痘病毒(Capripoxvirus,CaPV)膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列(DNA)设计合成了1对特异性引物,对CaPVP32基因进行PCR扩增,产物大小约为969bp,回收纯化后,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化TOP10E.coli感受态细胞,经核苷酸序列分析,与已报道的多株CaPV编码膜蛋白P32的DNA基因比较后发现,所测定毒株的核苷酸序列与GPV毒株的同源性高达99﹪,氨基酸序列同源性为98﹪,证实为CaPV的P32基因.成功构建了CaPVP32基因重组表达载体.经L-Araboinose诱导表达,可稳定、高效地表达CaPVP32抗原.表达蛋白为融合蛋白,分子量约51.53KDa。

摘要： 羊痘病毒在分子生物学研究进展方面做一综述.羊痘病毒的基因组较大,山羊痘和绵羊痘的基因组非常相似,对其基囚组及编码蛋白功能的深入研究,发现了病毒的感染、复制和与宿主细胞间的相互作用的机制,也有助于设计更有效的羊痘病毒疫苗.基于分子生物学的目的基因的克隆、测序、表达及快速检测方法的建立等方面发展迅速,其中对P32基因的研究已成为目前国际上羊痘研究的热点.以羊痘病毒基因组作为其他反刍动物病原基因的载体,生产新一代羊痘病毒基因工程疫苗,具很大潜力.

摘要： 绵羊痘(Sheep pox)和山羊痘(Goat pox)分别是由痘病毒科羊痘病毒属的绵羊痘病毒、山羊痘病毒引起的绵羊和山羊的急性热性接触性传染病，是我国一类动物疫病,对养羊业危害严重,为了解其流行病学特征,探讨其控制和消灭的可能性，对农三师牧区和农区羊痘疫情进行了流行病学调查。阐述了该病症状潜伏期2-12天，平均6-8天，发痘前，可见病羊体温升高到41-42°C，食欲减少，结膜潮红，从鼻孔流出粘性或脓性鼻漏，呼吸和脉搏增快.约经1-4天后开始发痘。一般典型病程需3-4周，冬季较春季为长。该病的预防，一般以免疫为主，采取“扑杀与免疫相结合”的综合性防制措施。控制、消灭传染源，加强羊群的饲养管理，增强羊群机体的抗病力。

摘要： 羊痘病是由羊痘病毒引起的绵羊和山羊的一种急性、热性、接触性传染病，其主要特征是在皮肤和黏膜上发生特异性的丘疹和疱疹，患羊体温升高且致死率较高；另外，可导致妊娠母羊流产，多数患羊在病后丧失生产能力，给养羊业造成巨大危害。

摘要： 口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物的一种急性热性高度接触性传染病：羊痘(capripox,CP)是由绵羊痘病毒和山羊痘病毒引起的绵羊和山羊的一种急性、热性、接触性传染病。口蹄疫和羊痘均因危害严重而被世界动物卫生组织列为A类重大传染病。

摘要： 本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒LSDV、山羊痘病毒GTPV和绵羊痘病毒SPPV的快速检测方法，以及应用于检测方法的Taqman‑MGB探针三重荧光PCR引物对和探针组。其中用于羊痘病毒属CaPV检测的正向引物，其序列为SEQ ID NO：1、用于羊痘病毒属CaPV检测的反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；用于检测牛结节性皮肤病病毒LSDV的探针，其序列为SEQ ID NO：3；用于检测山羊痘病毒GTPV的探针，其序列为SEQ ID NO：4；用于检测绵羊痘病毒SPPV的探针，其序列为SEQ ID NO：5。本发明的方法检测的灵敏度高、特异性好、快速高通量；且检测方法操作简便。

摘要： 本发明公开一种用于鉴别检测绵羊痘病毒和山羊痘病毒的试剂盒。本发明的鉴别绵羊痘病毒和山羊痘病毒检测盒内包括有三组引物：SEQID№1、SEQID№2、SEQID№3、SEQID№4、SEQID№5、SEQID№6、SEQID№7、SEQID№8、SEQID№9、SEQID№10、SEQID№11和SEQID№12。本发明可快速鉴别绵羊痘病毒和山羊痘病毒，并在羊痘病毒流行病学研究中应用。

摘要： 本发明公开了一种用于山羊痘病毒和绵羊痘病毒双重PCR检测试剂盒和用于山羊痘病毒和绵羊痘病毒快速鉴别检测的双重PCR方法。根据山羊痘病毒和绵羊痘病毒的基因组序列各设计一对PCR引物，可以扩增出相对应的特异性片段，实现对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测与鉴别。本发明利用双重PCR技术，单管同步检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒，降低了对山羊痘和绵羊痘的检测成本和工作量，实现了对山羊痘和绵羊痘的鉴别检测。本发明建立了一种特异性强、灵敏度高、节时省力并且易于观察结果的双重PCR方法，操作简便，特异性强、灵敏度高、可重复性高，且没有复杂的后处理。

摘要： 本发明提供了一种山羊痘病毒的增殖方法、山羊痘活疫苗及其制备方法和应用，涉及疫苗制备技术领域。本发明提供的山羊痘病毒的增殖方法，包括以下步骤：将山羊痘病毒在悬浮培养细胞系上传代驯化，得到驯化病毒；将细胞系进行悬浮扩大培养；将驯化后病毒接种至扩大培养的细胞系上，经培养得到增殖病毒。本发明的病毒增殖方法实现了细胞系的大规模悬浮培养，提高了病毒对细胞的适应性，能够获得毒价高而稳定的山羊痘病毒。本发明提供的山羊痘病毒活疫苗的制备方法，工艺简单，成本低，缓解了疫苗制备过程中损伤病毒，疫苗稳定性差，保存时间短的技术问题。本发明提供的山羊痘活疫苗安全有效，能够应用于山羊痘的防控。

摘要： 本发明提供一种可同时检测羊痘病毒属牛结节性皮肤病、山羊痘与绵羊痘的Cycleave荧光PCR引物对、探针及应用该引物对和探针的检测方法。本发明所提供的引物对和探针组，其正向引物的序列为SEQID NO：1；反向引物的序列为SEQ ID NO：2；探针的序列为SEQ ID NO：3，且探针的第8位为RNA碱基。本发明所提供的Cycleave荧光PCR检测羊痘病毒属病毒的引物、探针及方法具有检测灵敏度高、特异性好、高通量和操作简便的优点。

摘要： 本发明公开了一种狂犬病毒G蛋白‑羊痘病毒重组疫苗的构建方法，包括以下步骤：步骤1、重组病毒疫苗构建模型设计；步骤2、各基因的扩增及各组合基因的融合扩增；步骤3、各种组合重组转移载体的构建；步骤4、狂犬病毒G蛋白‑羊痘病毒的重组及病毒纯化；步骤5、狂犬病毒G蛋白表达检测；步骤6、狂犬病毒G蛋白‑山羊痘重组病毒疫苗株免疫效果检测。本发明的方法构建的疫苗可有效预防羊狂犬病，并且具有生产高效、简便、实用的特点，适合推广应用。

摘要： 本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒LSDV、山羊痘病毒GTPV和绵羊痘病毒SPPV的快速检测方法，以及应用于检测方法的Taqman‑MGB探针三重荧光PCR引物对和探针组。其中用于羊痘病毒属CaPV检测的正向引物，其序列为SEQ ID NO：1、用于羊痘病毒属CaPV检测的反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；用于检测牛结节性皮肤病病毒LSDV的探针，其序列为SEQ ID NO：3；用于检测山羊痘病毒GTPV的探针，其序列为SEQ ID NO：4；用于检测绵羊痘病毒SPPV的探针，其序列为SEQ ID NO：5。本发明的方法检测的灵敏度高、特异性好、快速高通量；且检测方法操作简便。

摘要： 本发明公开一种用于鉴别检测绵羊痘病毒和山羊痘病毒的试剂盒。本发明的鉴别绵羊痘病毒和山羊痘病毒检测盒内包括有三组引物：SEQID№1、SEQID№2、SEQID№3、SEQID№4、SEQID№5、SEQID№6、SEQID№7、SEQID№8、SEQID№9、SEQID№10、SEQID№11和SEQID№12。本发明可快速鉴别绵羊痘病毒和山羊痘病毒，并在羊痘病毒流行病学研究中应用。

摘要： 本发明公开了一种用于山羊痘病毒和绵羊痘病毒双重PCR检测试剂盒和用于山羊痘病毒和绵羊痘病毒快速鉴别检测的双重PCR方法。根据山羊痘病毒和绵羊痘病毒的基因组序列各设计一对PCR引物，可以扩增出相对应的特异性片段，实现对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测与鉴别。本发明利用双重PCR技术，单管同步检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒，降低了对山羊痘和绵羊痘的检测成本和工作量，实现了对山羊痘和绵羊痘的鉴别检测。本发明建立了一种特异性强、灵敏度高、节时省力并且易于观察结果的双重PCR方法，操作简便，特异性强、灵敏度高、可重复性高，且没有复杂的后处理。

摘要： 本发明提供了一种山羊痘病毒的增殖方法、山羊痘活疫苗及其制备方法和应用，涉及疫苗制备技术领域。本发明提供的山羊痘病毒的增殖方法，包括以下步骤：将山羊痘病毒在悬浮培养细胞系上传代驯化，得到驯化病毒；将细胞系进行悬浮扩大培养；将驯化后病毒接种至扩大培养的细胞系上，经培养得到增殖病毒。本发明的病毒增殖方法实现了细胞系的大规模悬浮培养，提高了病毒对细胞的适应性，能够获得毒价高而稳定的山羊痘病毒。本发明提供的山羊痘病毒活疫苗的制备方法，工艺简单，成本低，缓解了疫苗制备过程中损伤病毒，疫苗稳定性差，保存时间短的技术问题。本发明提供的山羊痘活疫苗安全有效，能够应用于山羊痘的防控。