中国荷斯坦奶牛

摘要： 研究中国荷斯坦奶牛年龄鉴定技术在于揭示中国荷斯坦奶牛年龄与生产性能和健康程度之间的关系,以便比较容易地选择适龄、生产性能强、健康程度高的牛只。本文主要介绍了通常采用的牛牙齿鉴定方法及牛外貌、牛角轮鉴定。

摘要： 旨在探讨中国荷斯坦奶牛的特异性蛋白1(specificity protein, SP1)基因结构特征及其对奶牛乳脂合成的影响。根据NCBI已经公布的奶牛SP1基因序列(NM_001078027.1),利用生物信息学分析其序列保守性、理化性质、蛋白亲水性、蛋白质结构及互作蛋白;采用PCR技术扩增并克隆SP1基因CDS序列。然后,选取6头健康的中国荷斯坦奶牛,分别取泌乳期和干奶期奶牛乳腺组织,运用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测SP1基因在不同时期奶牛乳腺组织中的表达情况。分离并纯化泌乳期奶牛乳腺上皮细胞,通过SP1过表达及干扰检测其对乳脂合成的影响,分别进行3次独立试验。结果显示,SP1基因序列在不同物种间高度保守,与山羊相似度最高(98.94%)。奶牛SP1基因CDS区序列长2 361 bp,编码786个氨基酸,蛋白分子质量为80 902.17 u,理论等电点为6.94。平均疏水指数为-0.438,为不稳定的亲水性蛋白。SP1序列包含3个锌指结构,SP1蛋白二级结构以无规则卷曲(52.29%)为主。STRING蛋白互作分析结果显示,SP1与转录因子AP-1(JUN)、雌激素受体α(ERα)、MYC原癌基因蛋白(MYC)、TATA盒结合蛋白(TBP)等蛋白存在相互作用。实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,SP1的mRNA和蛋白在泌乳期的表达量显著高于干奶期(P<0.01)。在奶牛乳腺上皮细胞中过表达SP1显著增加细胞甘油三酯的合成(P<0.01),而干扰SP1的表达,甘油三酯合成显著降低(P<0.01)。以上结果提示,SP1正向调控乳脂合成,分析SP1基因结构和功能为深入研究SP1对泌乳奶牛乳脂合成调控机制提供理论依据。

摘要： 【目的】阐明中国荷斯坦奶牛肛殖距的分布规律,探索其与体尺、线性等表型指标及奶牛产奶量的相关性,为中国荷斯坦奶牛的个体选育及奶牛群体品质提高提供理论依据。【方法】收集四川柠刚奶牛场2017—2021年档案记录的782头母牛的表型指标和各胎次产奶量,使用SPSS 27.0对其进行正态分布检验、单因素方差分析及相关性分析。【结果】中国荷斯坦奶牛的肛殖距呈现正态分布规律,且不会随着年龄变化而发生显著变化。中国荷斯坦奶牛肛殖距与胸围呈显著正相关(P<0.05),与各个胎次的产奶量呈负相关关系,且随着肛殖距的增加,第一、三胎次的产奶量显著降低(P<0.05)。【结论】肛殖距与奶牛的产奶性能有相关性,可以作为选育高产奶牛的候选性状。

摘要： 啤酒糟是生产啤酒的副产物,其主要成分为大麦芽的外皮和糖化残渣,含有丰富的维生素,营养价值较高。啤酒糟来源广泛,价格低廉,营养成分丰富,在畜禽养殖、饲料开发等领域被广泛使用。邹阿玲等用9千克啤酒糟代替l千克精料饲喂泌乳中后期中国荷斯坦奶牛,乳脂率、产奶量比对照组分别提高13.8%、23.7%,差异极显著(P<0.01)。张照喜等用啤酒糟和玉米秸秆混贮料饲喂泌乳奶山羊。

摘要： 前期研究通过荷斯坦公牛全基因组重测序鉴定到17个奶牛产奶性状候选功能基因,其中,肽基脯氨酸顺反异构酶基因(PIN1)参与甘油三酯代谢、甘油磷脂代谢以及mTOR信号通路,且位于产奶量和乳蛋白量性状QTL区间.为进一步系统分析PIN1基因是否对奶牛产奶性状具有遗传效应,本实验基于40头公牛的基因组DNA混池,采用PCR产物直接测序法对PIN1基因的全部编码区以及上下游调控区2000 bp进行扫描,在内含子2检测到1个SNP位点7:g.14432394G>A,A、G等位基因频率分别为0.4797和0.5203.采用靶向测序基因型技术对北京地区987头中国荷斯坦母牛进行个体基因型检测,对SNP位点7:g.14432394G>A与5个产奶性状进行关联分析.结果 表明:在第1泌乳期,SNP 7:g.14432394G>A与产奶量、乳脂量、乳蛋白量和乳蛋白率呈显著或极显著关联(P=0.0001～0.0493);在第2泌乳期,SNP与产奶量、乳脂量、乳脂率和乳蛋白量呈显著或极显著关联(P=0.0001～0.0104);SNP位点7:g.14432394G>A对产奶量、乳脂量、乳蛋白量和乳蛋白率的加性效应或等位基因替代效应均达到显著或极显著.综上,PIN1基因对中国荷斯坦牛的产奶量和乳蛋白、乳脂性状具有显著遗传效应,可作为遗传标记用于基因组选择,以加快遗传进展.

摘要： 以奶牛乳腺组织cDNA为模板,采用PCR技术扩增奶牛Klf4基因CDS区和3'UTR,同时构建PMIR-Klf4-3'UTR表达质粒;应用生物信息学方法对Klf4基因CDS区及其编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、翻译后的修饰结构和蛋白结构进行生物信息学分析.结果表明:奶牛Klf4基因CDS区长度为1 434 bp,可编码477个氨基酸,分子质量为50 759.17 u,理论等电点为8.76,属于亲水性蛋白.Klf4基因3'UTR长度为366 bp,酶切重组PMIR-Klf4-3'UTR表达质粒得到长度分别为366和6 470 bp的两条带,表明成功构建了重组质粒.同源性和遗传进化分析可知,牛Klf4基因与山羊、绵羊的亲缘性最近,达到98％以上,与斑马鱼的亲缘关系最远.KLF4蛋白有56个磷酸化位点,包含16个苏氨酸磷酸化位点、37个丝氨酸磷酸化位点和3个酪氨酸磷酸化位点.在二级结构和三级结构中,KLF4蛋白α-螺旋占18.03％,无规则卷曲占68.76％,存在3个锌指结构域.本研究为进一步探讨Klf4基因在奶牛乳腺炎表观遗传学调控过程中的作用提供数据支撑.

摘要： 利用酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌发酵淫羊藿、肉苁蓉、阳起石等9种中草药,制备中草药复合物,选用24头健康的荷斯坦青年奶牛,随机分为3组(8头/组),分别为对照组(饲喂基础日粮)、1％试验组(饲喂基础日粮+1％中草药复合物)和2％试验组(饲喂基础日粮+2％中草药复合物),测定和记录各组奶牛的采食量、血清相关指标及繁殖功能指标,分析中草药复合物对奶牛采食量、抗氧化能力和繁殖性能的影响.结果表明:除产前第14～7天的2％试验组外,基础日粮中添加中草药复合物可极显著提高奶牛干物质采食量(P<0.01);抗氧化能力方面,与对照组相比,1％试验组奶牛血清过氧化氢酶活力在产前第14天、产后第21天显著下降(P<0.05),1％试验组奶牛血清丙二醛含量在产前第7天、产犊当天极显著下降(P<0.01),产后第14天显著下降(P<0.05),2％试验组奶牛血清丙二醛含量在产前第7天显著下降(P<0.05),在产犊当天、产后第14天极显著下降(P<0.01);生殖激素方面,与对照组相比,2％试验组奶牛血清雌二醇含量在产前第21天显著下降(P<0.05)、产前第14天极显著下降(P<0.01)、产前第7天极显著上升(P<0.01);奶牛繁殖方面,与对照组相比,2％试验组奶牛的子宫内膜炎、胎衣不下发生率低且无乳房炎发生,产后首次配种时间提前15 d.可见,在基础日粮中添加益生菌发酵中草药复合物能明显提高奶牛采食量,降低产后疾病发生率,促进母牛产后发情,从而使首次配种时间提前.以基础日粮中添加2％中草药复合物的效果较好.

摘要： 本课题组前期通过转录组测序发现,中国荷斯坦母牛(Bos taurus)干奶期肝脏组织中类胰岛素生长因子Ⅰ型(insulin-like growth factorⅠ,IGF1)受体基因(IGF1 receptor,IGF1R)表达量显著高于泌乳初期和高峰期.IGF1R是一种受体酪氨酸激酶,在IGF的信号传导中起着至关重要的作用.为验证IGF1R基因是否对产奶性状具有显著遗传效应,本研究利用40头荷斯坦公牛的混池基因组DNA,采用PCR产物直接测序法扫描IGF1R基因的全部编码区以及上下游调控区各2000 bp区段以鉴定潜在多态位点,在947头中国荷斯坦母牛实验群体中,对鉴定到的SNP位点通过靶向测序基因型分型方法测定基因型,采用动物模型与5个产奶性状进行关联分析.结果共检测到7个SNP位点,1个位于外显子、5个位于内含子区、1个位于3'调控区;单标记关联分析结果表明:6个SNP位点与产奶量、乳脂量、乳蛋白量和乳蛋白率性状显著关联(P=0.0146～0.05),单倍型块2和3与产奶量、乳脂量和乳蛋白量性状呈现极显著关联(P=0.0003～<0.0001),单倍型1和单倍型2为优势单倍型,可分别提高产奶量、乳脂量和乳蛋白量.由此,IGF1R基因对中国荷斯坦牛产奶性状产奶量、乳脂量和乳蛋白量性状遗传效应显著,可望向奶牛基因组选择提供分子标记.

摘要： 试验旨在克隆中国荷斯坦奶牛CC趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)基因,对其进行生物信息学分析,并探究CCR5基因在奶牛炎性和健康组织中的表达水平.采用PCR技术扩增并克隆荷斯坦奶牛CCR5基因CDS区全长序列,连接pMD18-T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,通过蓝白斑方法筛选阳性克隆并测序,对序列进行相似性比对及系统进化树构建;应用多种在线生物信息学软件对其编码蛋白进行分析,并利用实时荧光定量PCR方法检测CCR5基因在健康和炎症奶牛乳腺组织中的表达情况.结果 显示,中国荷斯坦奶牛CCR5基因CDS区全长1059 bp,编码352个氨基酸.相似性和遗传进化分析结果显示,奶牛CCR5基因与绵羊的遗传距离最近,高达96.0％,与鸡遗传关系最远,为61.0％,且在不同物种之间CCR5基因高度保守.中国荷斯坦奶牛CCR5蛋白分子质量为40.235 ku,理论等电点(pI)为9.30,为疏水性蛋白但不是分泌蛋白,主要存在于细胞质内;在CCR5蛋白二级结构中α-螺旋和无规则卷曲分别占51.14％和32.95％,三级结构模型预测结果与二级结构一致.实时荧光定量PCR结果显示,CCR5基因在健康奶牛乳腺组织中的表达量极显著低于炎性奶牛乳腺组织(P＜0.01),提示其可能参与奶牛乳腺炎的发生过程.本试验结果为进一步研究奶牛CCR5蛋白的功能提供了理论依据,对探究奶牛CCR5基因在奶牛乳腺炎中的调控功能等具有重要意义.

摘要： 旨在探究叶酸补饲对隐性乳房炎奶牛免疫及产奶相关性状的影响和相关分子机制,为隐性乳房炎奶牛补充叶酸奠定理论依据和实践基础.本试验基于北京郊区某牧场的中国荷斯坦奶牛群体,根据胎次、体重以及体细胞数(连续2个月SCC>500×103个·mL-1)选择29头泌乳牛作为研究对象,分为补饲组(n=18)和对照组(n=11).连续14 d对补饲组进行包被叶酸(每天120 mg/500 kg)饲喂,对照组不做任何处理.对收集到的DHI数据(包括体细胞数、日产奶量等)进行分析.随后,每组随机挑选4个个体,采集分离血液白细胞提取RN A并进行转录组测序,通过DESeq2进行基因差异表达分析.运用KOBAS3.0-KEGG通路数据库对鉴别出的差异表达基因进行功能富集分析.结果发现,补饲包被叶酸后,奶牛的体细胞数显著降低(P1),包括105个显著上调的基因和172个显著下调的基因.这些基因主要富集在包括炎症反应、免疫反应、细胞因子生成调控、细胞分化、白细胞趋化和迁移、调节免疫系统过程等免疫相关的功能GO条目,以及先天免疫和细胞免疫应答相关的重要通路.综上,奶牛补饲叶酸对其免疫相关性状等有重要影响,且显著影响免疫相关通路的基因表达,为叶酸补饲的推广应用提供了一定的科学理论基础.

摘要： 40头中国荷斯坦牛被分为2组,试验组饲喂甜高粱青贮料+配合精料,对照组饲喂玉米秸秆青贮料+配合精料,经80d饲喂,结果表明试验组头日均比对照组多产奶5.25kg,产奶量提高12.16％,头日均节省精饲料2kg,差异极显著(P＜0.01),试验组头日均增收4.54元,经济效益明显.

摘要： 40头中国荷斯坦牛被分为2组,试验组饲喂甜高粱青贮料+配合精料,对照组饲喂玉米秸秆青贮料+配合精料,经80d饲喂,结果表明试验组头日均比对照组多产奶5.25kg,产奶量提高12.16％,头日均节省精饲料2kg,差异极显著(P＜0.01),试验组头日均增收4.54元,经济效益明显.

摘要： 40头中国荷斯坦牛被分为2组,试验组饲喂甜高粱青贮料+配合精料,对照组饲喂玉米秸秆青贮料+配合精料,经80d饲喂,结果表明试验组头日均比对照组多产奶5.25kg,产奶量提高12.16％,头日均节省精饲料2kg,差异极显著(P＜0.01),试验组头日均增收4.54元,经济效益明显.

摘要： 40头中国荷斯坦牛被分为2组,试验组饲喂甜高粱青贮料+配合精料,对照组饲喂玉米秸秆青贮料+配合精料,经80d饲喂,结果表明试验组头日均比对照组多产奶5.25kg,产奶量提高12.16％,头日均节省精饲料2kg,差异极显著(P＜0.01),试验组头日均增收4.54元,经济效益明显.

摘要： 40头中国荷斯坦牛被分为2组,试验组饲喂甜高粱青贮料+配合精料,对照组饲喂玉米秸秆青贮料+配合精料,经80d饲喂,结果表明试验组头日均比对照组多产奶5.25kg,产奶量提高12.16％,头日均节省精饲料2kg,差异极显著(P＜0.01),试验组头日均增收4.54元,经济效益明显.

摘要： 本发明提供了与中国荷斯坦奶牛繁殖性状相关的SNP标记及其应用，属于分子育种技术领域。本发明从牛PPARG基因中扩增一特异片段，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，其中在序列表SEQ ID NO.1的第118bp处有G→T的单碱基突变。此SNP标记位点上碱基为G的中国荷斯坦奶牛产后第一次配种天数、空怀天数和受胎指数显著低于碱基为T的中国荷斯坦奶牛。本发明还提供了用于检测上述SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒。本发明还提供了所述SNP标记在鉴定高繁殖性能的中国荷斯坦奶牛优势品种中的应用以及在中国荷斯坦奶牛分子标记辅助育种中的应用，具有操作简单，灵敏度高，准确性强，检测成本低的优点。

摘要： 本发明涉及一种与中国荷斯坦奶牛金葡菌乳房炎抗性相关的SNP分子标记及其应用。所述分子标记来自奶牛TRAPPC9基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，第165bp位点处的碱基为T或C。此处碱基为C的中国荷斯坦奶牛的金葡菌乳房炎抗性显著高于此处碱基为T的中国荷斯坦奶牛，而体细胞数前者显著低于后者。本发明还提供了用于检测所述SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒。本发明还提供了所述SNP标记在鉴定金葡菌乳房炎抗性高的中国荷斯坦奶牛优势品系中的应用。本发明还提供了所述SNP标记在中国荷斯坦奶牛分子标记辅助育种中的应用。本发明的SNP标记为中国荷斯坦奶牛金葡菌乳房炎抗性的标记辅助选择提供了科学依据。

摘要： 本发明提供一种中国荷斯坦奶牛抗苗勒管激素检测技术。其原理是在体外通过抗原抗体反应，进行特异性检测，检测奶牛血液样品中的抗苗勒管激素水平。本发明采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为AMH已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井，和AMH目前任何被绑定的固定抗体。生物素共轭的抗体特异性AMH除去任何未结合的物质后，加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后，加入到孔中。经过洗涤，以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂，底物溶液加入到孔中，并显色的比例AMH量的初始步骤中的约束。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。本发明特征在于实现中国荷斯坦奶牛AMH水平的检测，作为中国荷斯坦奶牛人工授精和胚胎移植受体繁殖能力的辅助判断工具，着重提高中国荷斯坦奶牛奶牛养殖企业的繁殖效率，同时可提高中国荷斯坦奶牛卵巢储备功能、奶牛人工授精与配牛和胚胎移植受体牛的评估工作。

摘要： 本发明涉及一种与中国荷斯坦奶牛产奶性状及体细胞评分相关的SNP标记及其应用。所述SNP标记的位点位于中国荷斯坦奶牛HAL基因如SEQ ID NO.1所示序列的197bp位点处，此处位点的碱基为G或A，此处碱基为G的中国荷斯坦奶牛的乳蛋白含量显著高于此处碱基为A的中国荷斯坦奶牛，而体细胞评分前者显著低于后者。本发明还提供了用于检测所述SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒。本发明还提供了所述SNP标记在鉴定乳蛋白量高、体细胞评分低的中国荷斯坦奶牛优势品种中的应用。本发明还提供了所述SNP标记在中国荷斯坦奶牛分子标记辅助育种中的应用。本发明的SNP标记为中国荷斯坦奶牛产奶性状及体细胞评分的标记辅助选择提供了科学依据。

摘要： 本发明公开了一种检测和/或评估中国荷斯坦奶牛乳品质性状的方法，该方法给予发明发现SERPINE2基因在中国荷斯坦奶牛中存在4个与乳糖、校正奶、蛋白等乳品质性状显著相关的SNPs位点。本发明为提供了可以用于中国荷斯坦奶牛育种的分子标记，以获得高产奶性能的中国荷斯坦奶牛。为中国荷斯坦奶牛早期的选种育种和乳品质改良提供了相关分子理论基础。

摘要： 本发明提供了一种与中国荷斯坦奶牛血清胰岛素浓度相关的SNP分子标记，属于分子育种技术领域。本发明在对中国荷斯坦奶牛进行全基因组扫描后，在其中显著关联的SNP位点中发现一项未公开发表的SP位点，位于奶牛20号染色体DOCK2基因中，在其序列的第14406bp处发生A/G突变。利用全基因组关联分析（GWAS）与高通量测序技术，可以更高效的揭示奶牛胰岛素分泌的遗传机制。

摘要： 本发明提供了一种与中国荷斯坦奶牛血清镁离子浓度相关的SNP分子标记，属于分子育种技术领域。本发明在对中国荷斯坦奶牛进行全基因组扫描后，在其中显著关联的SNP位点中发现一项未公开发表的SNP位点，位于奶牛3号染色体KCNA2基因附近，距离28874bp处发生T/C突变。利用全基因组关联分析（GWAS）与高通量测序技术，可以更高效的揭示奶牛血清中离子浓度变化的遗传机制。

摘要： 本发明提供了与中国荷斯坦奶牛繁殖性状相关的SNP标记及其应用，属于分子育种技术领域。本发明从牛PPARG基因中扩增一特异片段，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，其中在序列表SEQ ID NO.1的第118bp处有G→T的单碱基突变。此SNP标记位点上碱基为G的中国荷斯坦奶牛产后第一次配种天数、空怀天数和受胎指数显著低于碱基为T的中国荷斯坦奶牛。本发明还提供了用于检测上述SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒。本发明还提供了所述SNP标记在鉴定高繁殖性能的中国荷斯坦奶牛优势品种中的应用以及在中国荷斯坦奶牛分子标记辅助育种中的应用，具有操作简单，灵敏度高，准确性强，检测成本低的优点。

摘要： 本发明公开了一种亚热带地区的中国荷斯坦奶牛饲料。该饲料是由以下原料组成：玉米青贮，全棉籽，苜蓿草，燕麦草，甜菜渣，啤酒渣，糖蜜，水，菠萝渣，菜籽粕，玉米，缓释尿素，磷酸氢钙，玉米酒糟粕，食盐，益生酵母，碳酸氢钠，氧化镁，豆粕，豆皮颗粒，过瘤胃脂肪粉和预混料添加剂。本发明提供一种科学合理的饲料配方，按照一定比例的优质干草、矿物质添加剂、微量元素、维生素、工业副产品等进行优化配制，能保证中国荷斯坦奶牛的瘤胃健康、减少热应激、增加奶产，提高饲养中国荷斯坦奶牛的经济效益。

摘要： 本发明涉及一种与中国荷斯坦奶牛金葡菌乳房炎抗性相关的SNP分子标记及其应用。所述分子标记来自奶牛TRAPPC9基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，第165bp位点处的碱基为T或C。此处碱基为C的中国荷斯坦奶牛的金葡菌乳房炎抗性显著高于此处碱基为T的中国荷斯坦奶牛，而体细胞数前者显著低于后者。本发明还提供了用于检测所述SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒。本发明还提供了所述SNP标记在鉴定金葡菌乳房炎抗性高的中国荷斯坦奶牛优势品系中的应用。本发明还提供了所述SNP标记在中国荷斯坦奶牛分子标记辅助育种中的应用。本发明的SNP标记为中国荷斯坦奶牛金葡菌乳房炎抗性的标记辅助选择提供了科学依据。