捻转血矛线虫

摘要： 为了解不同年份山羊源捻转血矛线虫内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)基因的遗传变异情况,提取2015年-2020年间陕西省咸阳地区44株山羊源捻转血矛线虫的核糖体DNA(rDNA),对其ITS基因进行扩增、测序与分析。结果显示,44株捻转血矛线虫的ITS-1序列长度为400 bp~404 bp,种内变异率为0~4.1%,与GenBank中英国捻转血矛线虫ITS-1参考序列LS997563的相似性为97.01%~99.75%;ITS-2序列长度为231 bp,种内变异率为0~6.3%,与GenBank中尼日利亚捻转血矛线虫ITS-2参考序列LC368048的相似性为96.97%~100%。结果表明,2015年-2020年间咸阳地区山羊源捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2基因均有不同程度的遗传变异,但未出现新的种群分化。此外,基于虫体代表性样本ITS-1、ITS-2序列构建的遗传进化树结果显示,不同国家和地区的分离株进化关系均较为接近,在ITS-1进化树中,只有捻转血矛线虫样本SX17-3与GenBank中陕西ITS-1序列(KX534100)汇于同一支上,在ITS-2进化树中,也只有SX15-8、SX17-9、SX17-113株捻转血矛线虫样本分离株与陕西ITS-1序列(KX534100)距离最近,表明捻转血矛线虫ITS基因序列的变异情况与地理条件之间无明显相关性。

摘要： 2016年8月16日,新疆温泉县某乡镇报告发生羊不明原因死亡,疑似感染捻转血矛线虫。为确定病因,控制疫情,减少损失,防止类似事件再次发生,新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心组织相关人员,采用现场访谈、实地调查、问卷调查、临床剖检等方式,开展了紧急流行病学调查。调查发现:温泉县牧区是捻转血矛线虫的老疫区,在数十年前曾暴发过放牧羊群大面积感染捻转血矛线虫而大量死亡的情况;2016年7—8月中旬以来连续的阴雨天气及合适的气温为捻转血矛线虫的大量繁殖创造了良好的外部环境,是造成此次羊捻转血矛线虫感染的外部因素;在水草丰盛且较为固定的草场放牧,未及时开展流行病学调查,未及时准确找到病因并进行针对性防控,也是导致此次羊捻转血矛线虫病暴发和传播的原因。依据调查结果,提出了科学放牧、合理用药、对羊粪便深埋处理等防治捻转血矛线虫病的建议。

摘要： 为构建捻转血矛线虫cDNA文库,进一步研究捻转血矛线虫蛋白互作机制以及为筛选捻转血矛线虫互作蛋白提供依据,本研究以捻转血矛线虫L3期幼虫为材料,利用TriZol法提取捻转血矛线虫总RNA;使用试剂盒构建捻转血矛线虫的cDNA文库,并对cDNA进行均一化处理,再将纯化后的cDNA与线性化的pGADT7-Rec重组构建的文库质粒转化至Y187酵母中,构建出酵母转录激活结构域(activationdomain,AD)文库。结果表明:本研究构建了重组率为100%,插入片段平均长度为1000 bp,工作液细胞密度大于3.5×10^(7)CFU/mL的捻转血矛线虫均一化酵母AD文库;所构建的表达文库各项指标均达标,符合酵母双杂交筛选要求。本文库为捻转血矛线虫的分子机制研究以及疫苗的开发奠定了基础。

摘要： 为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4、2E3和5B4。将这4株杂交瘤细胞分别接种小鼠腹腔,制备腹水,用层析柱纯化抗体并建立双抗体夹心ELISA方法。结果显示:筛选出的1B2、1G4、2E3和5B4细胞株产生的抗体效价高、特异性强,其抗体亚型均为Ig G1型,轻链均为kappa型,纯化的小鼠腹水的效价均可达1∶2^(22);基于抗捻转血矛线虫BLAODA的单抗1B2、5B4建立了双抗体夹心ELISA检测方法,其敏感性为90.6%,特异性为90.6%。本研究获得了捻转血矛线虫抗BLAODA单克隆抗体并建立了双抗体夹心ELISA方法,为捻转血矛线虫诊断试剂盒的开发奠定了基础。

摘要： 旨在解析3种不同形态阴门盖捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的遗传进化差异,本研究从养殖场山羊皱胃中分离到捻转血矛线虫虫体,采用普通光学显微镜观察71条雌虫虫体阴门盖的形态结构特征,并基于捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2和nad4基因位点,采用PCR法对不同阴门盖的虫体进行扩增,通过比对多位点序列进行遗传进化分析。经显微镜观察发现,本研究分离到的捻转血矛线虫雌虫阴门盖存在舌瓣形、亚球形和舌-球混合形3种形态,所占比例分别为45.07%(32/71)、50.70%(36/71)和4.23%(3/71)。对43条雌虫全长和阴门至虫体末端长度进行测量和统计分析,结果显示,3种不同形态阴门盖的捻转血矛线虫全长统计学差异不显著(P>0.05),而3种不同形态阴门盖的捻转血矛线虫阴门至虫体末端的长度存在显著性差异(P<0.05)。基于捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2和nad4基因进行的序列分析结果显示,不同形态阴门盖虫体的9个样品在3个基因位点上存在不同程度的碱基差异,多态性位点分别为10、13和43个,核苷酸多态性分别为0.85%、1.34%和1.97%。基于ITS-1和ITS-2构建的遗传进化树显示,研究中所用样品与GenBank上H.contortus的参考序列处于同一进化支,表明本研究所分离到的虫体均属捻转血矛线虫。捻转血矛线虫雌虫的阴门盖存在形态学差异,不同形态阴门盖虫体在ITS-1、ITS-2和nad4基因位点上均存在不同程度的碱基差异,此研究结果为捻转血矛线虫的种类鉴定和遗传进化提供了参考数据。

摘要： 捻转血矛线虫病又叫捻转胃虫病,是感染反刍动物的主要胃肠道吸血线虫,可导致宿主贫血和生产性能下降,甚至死亡,给养殖业造成极大经济损失。现概述捻转血矛线虫的虫体形态、生活史、流行特点、感染症状及防控措施,为减少养殖业的经济损失提供参考。

摘要： cqvip:猪的三种线虫病,即猪捻转血矛线虫病、猪类圆线虫病和猪鞭虫病。常见的猪捻转血矛线虫有3种,即细小捻转血矛线虫、圆形螺咽线虫和六翼泡首线虫;猪类圆线虫病主要是指兰氏类圆线虫;猪鞭形线虫简称猪鞭虫。本文主要从虫体、临床表现、诊断和治疗等方面猪三类线虫病进行了阐述。1猪捻转血矛线虫病1.1虫体常见于猪的捻转血矛线虫有3种:一种是细小捻转血矛线虫,又称红色猪圆线虫;另外2种粗大捻转血矛线虫是圆形螺咽线虫和六翼泡首线虫。

摘要： 旨在比较分析捻转血矛线虫敏感虫株和耐药虫株miRNA表达谱,探讨miRNA与捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关基因之间的调控机制.运用Illumina Hiseq2000平台进行测序并进行eDNA文库的构建,利用RNAhybrid、Miranda和TargetScan对测序得到的数据进行靶基因预测,并取交集作为miRNA的靶基因预测结果,使用Bowtie、RepeatMasker、MIREAP、Rfam、miRBase和DAVID等生物信息学分析软件和权威数据库系统,筛选出差异的miRNA以及与捻转血矛线虫耐药相关的miRNA并进行靶基因预测,同时对KEGGpathway和GO功能富集到的靶基因和可能参与调控的通路进行预测分析.结果 表明,敏感虫株和耐药虫株共筛选显著差异表达的miRNA共294个,其中113个上调,181个下调.对miRNA和其靶向调节的mRNA进行关联分析,共关联到1 770个miRNA-mRNA对为负调控关系,其中涉及到274个差异的miRNA和603个差异的mRNA.显著差异表达的miRNA靶基因被注释到了1 430条GO terms和327条KEGG pathway,富集到FoxO信号通路(FoxO signaling pathway),mTOR信号通路(mTOR signaling pathway),PI3K-Akt信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)等与耐药相关的一些抗性通路.综上,通过对miRNA表达谱分析以及miRNA-mRNA靶向分析,发现捻转血矛线虫敏感虫株和耐药虫株显著差异表达的miRNA和其对应的靶基因,并对部分耐药相关通路中存在的靶基因及显著差异的靶基因所在的通路进行筛选和分析,为后续进一步通过转录组学深层次挖掘捻转血矛线虫产生耐药性的关键基因及相关调控分子提供科学依据.

摘要： 捻转血矛线虫病又叫捻转胃虫病,是感染反刍动物的主要胃肠道吸血线虫,可导致宿主贫血和生产性能下降,甚至死亡,给养殖业造成极大经济损失.现概述捻转血矛线虫的虫体形态、生活史、流行特点、感染症状及防控措施,为减少养殖业的经济损失提供参考.

摘要： [目的]已有研究表明捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)Hc-hrg-2属于血红素应答基因,高浓度血红素的刺激可导致该基因的转录水平上调,但其在血红素调控中的功能尚缺乏研究.研究通过同源重组技术构建血红素合成缺陷型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)hem1敲除株,通过异源表达Hc-hrg-2对该敲除株进行表型拯救试验,以期验证Hc-hrg-2参与细胞内血红素转运的功能.[方法]以S.cerevisiae BY4741基因组为模板,设计引物,扩增获得hem1(SGD:S000002640)基因序列5'和3'侧翼区同源臂;同时以pYES2-CT质粒为模板设计引物,扩增获得筛选标记URA3序列;利用两次重叠PCR技术依次将测序正确的上游同源臂、URA3、下游同源臂序列串联成基因敲除组件,并通过醇沉法对敲除组件进行纯化.采用醋酸锂转化法将纯化的敲除组件转化至BY4741感受态细胞中,经SD/-URA(含250μmol·L-15-氨基乙酰丙酸(ALA))培养基筛选,并利用多对引物进行PCR鉴定,以验证Δhem1敲除株的正确性.同时以含有H.contortus浙江株Hc-hrg-2序列(GenBank:MK371241)及其功能域缺失序列Hc-hrg-2(Δgst-n)和Hc-hrg-2(Δgst-c)的质粒为模板,利用特异性引物分别进行PCR扩增,通过无缝克隆将扩增得到的目的片段插入酵母pESC-LEU表达载体,经PCR鉴定以及测序验证后,采用醋酸锂转化法将正确的表达载体转化至Δhem1感受态细胞中,通过SD/-URA/-LEU(含250μmol·L-1 ALA)培养基筛选以及PCR鉴定验证阳性异源表达株的正确性.通过比较Δhem1敲除株及其各异源表达株在含有或不含有250μmol·L-1 ALA的SD/-URA/-LEU液体培养基中的生长情况,进一步验证敲除株的表型同时排除表达载体对表型的影响.用2％半乳糖对含有阳性表达质粒的敲除株进行诱导,取部分菌液进行超裂破碎,收集蛋白,通过Western Blot鉴定目的蛋白的表达;剩余菌体用去离子水重悬至OD600=0.2,用去离子水进行5倍比稀释,取4μL稀释后的菌液点至含有250μmol·L-1 ALA或者不同浓度血红素的诱导平板上,28°C培养2—3 d后比较敲除株的生长情况.[结果]成功获得hem1基因敲除株 Δhem1,与野生株相比,Δhem1不能合成血红素,需外源添加ALA(250μmol·L-1)或血红素(≥10μmol·L-1)才能生长,且异源表达株和敲除株的表型一致.Western Blot结果表明2％半乳糖能诱导Hc-hrg-2及其功能域缺失基因在敲除株中成功表达,且表达Hc-hrg-2能够在低血红素浓度下(≤1μmol·L-1)促进酵母对血红素的摄取,拯救敲除株的生长缺陷,其硫氧还蛋白样结构域(GST-N)和谷胱甘肽S-转移酶C末端结构域(GST-C)的缺失会降低拯救的效果.[结论]捻转血矛线虫血红素应答基因Hc-hrg-2可促进细胞对血红素的摄取,其GST-N和GST-C功能域在该过程中发挥着重要作用,研究成果为后续深入研究捻转血矛线虫的血红素转运机制奠定基础.

摘要： 为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析与干燥相关表达的基因.分别提取干燥培养和正常培养的虫体mRNA,反转录成cDNA,采用银染mRNA差异基因显示技术在干燥和正常培养的银染聚丙烯酰胺凝胶中回收了差异显示条带,并通过RT-PCR和在秀丽线虫内RNAi验证相关抗干燥基因.筛选获得58个差异表达的EST序列,生物信息学分析显示其中49个(84.48％)序列与现有的捻转血矛线虫基因组数据库有高度相似性,20个(34.48％)与已知线虫的cDNA或基因组序列有较高相似性,8个(13.79％)与其它线虫已知蛋白质氨基酸序列相似性较高.差异表达序列BF-U01A包含泛素(UBQ)家族结构域,与秀丽线虫泛素家族氨基酸相似性高达95％.差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸相似性为87％.RT-PCR显示UBQ和GST在干燥虫体中均上调,在秀丽线虫中对UBQ,GST进行RNAi后,干燥虫体生存率下降,证明筛选的GST,UBQ基因在线虫中确有抗干燥作用.UBQ主要标记需要分解的蛋白质,使其水解,在虫体干燥应激时,可能与蛋白酶体β亚基(PBS)共同作用,降解应激变性蛋白,维持虫体稳定性.GST在虫体干燥时与抗外环境毒素及抗氧化作用相关.其他差异表达序列分别与其他线虫的虾红素金属酶蛋白,转座酶和未知假定蛋白有关,在虫体抗干燥中可能都发挥一定作用.

摘要： 本项研究通过设计兼并引物扩增得到Hc-daf-2基因的EST序列,在此基础上利用RACE和GenomeWalker获得了Hc-daf-2基因的全长编码区和基因组DNA以及上游的启动子序列.生物信息学分析发现,编码区全长4215bp,5-UTR是150bp,3-UTR是676bp,上游启动子共获得4091 bp.进一步分析发现,Hc-DAF-2存在细胞外和细胞内两大功能区域,而在胞内功能区内存在典型的ATP结合(GXGXXG)位点,催化位点,Mg2+结合位点(DFG)以及高度保守的NPXY功能域.通过RT-PCP对其转录水平分析发现,Hc-daf-2基因在捻转血矛线虫的各个时期(虫卵、幼虫以及成虫)均会发生转录,并且在L3期转录水平有所上升.另外,通过异源转基因的方法对其启动子进行分析,发现其主要定位于秀丽新杆线虫的头部神经节.随后,通过异源基因救援法分析发现,捻转血矛线虫胰岛素样受体基因能够对秀丽新杆线虫CB1370突变株起到部分救援的作用.本项研究发现,Hc-daf-2基因与秀丽新杆线虫daf-2在结构上高度保守,而在功能上存在部分相似性.

摘要： 根据GenBank中捻转血矛线虫醛缩酶基因EST序列4条设计特异性引物,用5' RACE和3' RACE获得该基因的5’端未和3’端未知序列,从而拼接得到Aldolase基因的全长cDNA并提交GenBank.该基因的mRNA全长1235bp,最大开放阅读框(ORF)为1098bp,5’非翻译区(5' UTR)长27bp,3'UTR长110bp.以捻转血矛线虫Aldolase基因的全长cDNA设计一对特异性引物,通过RT-PCR技术,扩增出该酶的ORF,并将其克隆到pET-32a(+)载体中,构建了捻转血矛线虫醛缩酶原核表达载体pET-32/ALD.SDS-PAGE电泳结果表明,捻转血矛线虫醛缩酶基因获得了表达,融合蛋白分子量约为58kDa,在细菌裂解液上清和包涵体中均有表达.Western blot分析结果显示该重组蛋白能被捻转血矛线虫自然感染山羊的血清所识别,说明该酶在自然感染过程中能被宿主免疫系统所识别.酶活性测定结果表明,该重组蛋白具有一定的醛缩酶催化活性,其最适反应温度为40°C,pH值为8.0.

摘要： 本实验旨在研究Hc-rps30基因的结构和功能,分析其在捻转血矛线虫滞育过程中的作用机制.按照Gibbs(1971)的方法获得滞育虫体,Real-time检测正常虫体与滞育虫体中Hc-rps30基因的转录水平;RACE、Genome walking等技术获得全基因序列及完整cDNA序列；饲喂法RNAi和显微注射分析秀丽隐杆线虫中rps30基因沉默及过表达对虫体表型的影响；显微注射及脂质体转染分析Hc-rps30基因启动子区在C.elegans和HEK293细胞系中的活性.结果提示,Hc-rps30基因对H.Contortus的生长发育有重要的作用,可能从类泛素化或蛋白质合成的方面调节滞育的形成.

摘要： 本研究以捻转血矛线虫为研究对象,以秀丽隐杆线虫为模式生物,通过mRNA差异显示技术获得捻转血矛线虫滞育阶段表达差异性基因片段,利用RACE技术和基因步移技术获得滞育相关基因Hc-daf-22基因全序列,并采用RNA干扰技术和拯救技术确定该基因对线虫滞育的影响.研究利用差异显示技术共获得了74个差异片段,比对后以获得的A382(541 bp)为模板,通过5’和3'RACE技术获得了该EST的全序列.证明了捻转血矛线虫daf-22基因对秀丽隐杆线虫daf-22基因突变株进行了部分拯救.将该基因包含功能域的845 bp转化细菌通过饲喂对秀丽隐杆线虫进行RNAi,发现饲喂捻转血矛线虫daf-22基因的虫体,脂肪沉积明显增多,且具有比正常株及阴性对照组大的脂肪颗粒,证明该基因对秀丽隐杆线虫起到了明显的干扰作用.

摘要： 本研究首次通过核糖体ITS-2基因和线粒体had4基因对中国地区捻转血矛线虫的遗传多样性进行了分析.采集随州、宜都、云南、广西、陕西、辽宁和黑龙江7个地区共152条捻转血矛线虫,经分析发现ITS-2有18个基因型,核苷酸变化为2.6％;nad4有142个单倍型,核苷酸变化为2.7％.系统进化和种群遗传分析显示92.4％的遗传变异来自种群内部.中性检验分析表明种群内部没有出现瓶颈效应.和其他6个地区相比,云南地区的遗传变化相对大,FST变化为0.08～0.20.中国地区捻转血矛线虫没有存在明显的遗传差异,各种群间存在着很高的基因流.这些发现能够为分子流行病学和抗蠕虫药抗药性的传播提供理论依据.

摘要： 捻转血矛线虫是反刍动物的一种主要的寄生虫,在世界范围内的造成了巨大的经济损失.现在控制方式是药物驱虫,但这引起了抗药性而且避免不了重复感染及,有效的疫苗防治迫在眉睫。现在的研究隐蔽抗原表现出了巨大的潜力,比如说H11,不过寄生虫的培养,蛋白的分离纯化过程复杂,生产成果昂贵,生产重组疫苗是重要手段。捻转血矛线虫H11基因在大肠杆菌,酵母等常规表达系统中不能产生天然蛋白的免疫保护力。秀丽隐杆线虫和捻转血矛线虫在进化上比较接近,有相近的转录翻译及翻译后修饰方式。本论题就是要寻找合适的可高效稳定表达的转基因调控序列,利用秀丽隐杆线虫表达捻转血矛线虫基因H11,提纯重组蛋白,验证糖链结构,检测其免疫保护效果。

摘要： 通过粪便检测法和幼虫培养法,对北京地区五个郊区(县)的5个不同规模的羊场(423只羊)进行了捻转血矛线虫的感染情况调查。结果显示:检测230只羊的粪样,感染40只,捻转血矛线虫的感染率为17.4％,其中通县感染率为100％。其它四个郊区(县)均无感染。这对该地区制定有效的防治措施提供了科学的依据。

摘要： 参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortus ZJ株的总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,成功扩增出H11基因.将PCR产物与pUCm-T载体连接后,转化DH5-α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序.序列分析表明,其核苷核序列与国外报道的H11基因的同源性为99.5﹪.表达产物具有氨基肽酶的活性,可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡.

摘要： 将捻转血矛线虫H11基因亚克隆到酵母表达载体pPICZαB后,氯化锂法转化毕赤酵母菌株X-33,获得表达H11的酵母基因工程菌.甲醇诱导后,通过RT-PCR和Western Blot方法检测,结果表明捻转血矛线虫H11在毕赤酵母中实现了表达,但其表达水平有待提高.

摘要： 本发明涉及一种用于早期诊断捻转血矛线虫感染的抗原及其应用。本发明鉴定出一种可用作该寄生虫感染的诊断用抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫14天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能在排出虫卵前4‑6天进行确诊，避免了虫卵对环境和牧场的污染，这对捻转血矛线虫病的防控具有重要意义。本发明利用该抗原建立了间接ELISA检测方法，具有敏感性高、特异性好、操作简单、诊断速度快、在进行大规模检测中具有经济方便等优点，在牛、羊、鹿、骆驼等反刍动物捻转血矛线虫病的诊断和防治中具有良好的应用前景。

摘要： 本发明提供一种捻转血矛线虫体外培养方法。所述方法包括：采集捻转血矛线虫虫卵，经无菌处理后，将虫卵置于捻转血矛线虫幼虫培养液中培养至感染性三期幼虫。其中，所述捻转血矛线虫幼虫培养液中含有NCTC‑109培养基、OP50大肠杆菌和水溶性两性霉素B。本发明提供的捻转血矛线虫体外培养方法，通过选择最适培养基并降低培养液中培养基的含量，并向培养液中加入大肠杆菌和水溶性两性霉素B，使得捻转血矛线虫可在无杂菌污染的环境下更好地发育到感染性三期幼虫。本发明为捻转血矛线虫的体外培养研究，捻转血矛线虫发育生物学，新兽药筛选与耐药性检测，功能基因和致病机制研究奠定了坚实的基础。

摘要： 本发明提供了一种捻转血矛线虫虫卵的鉴别方法及其应用，涉及线虫鉴别领域。本发明的捻转血矛线虫虫卵的鉴别方法，包括以下步骤：收集线虫虫卵，所述线虫虫卵包括：捻转血矛线虫虫卵、奥斯特线虫虫卵、夏伯特线虫虫卵和食道口线虫虫卵；通过观察培养后的各个线虫虫卵中含幼虫虫卵的数量、线虫虫卵的气室及外观形态和线虫虫卵能否与花生凝集素相结合，以将捻转血矛线虫虫卵与奥斯特线虫虫卵、夏伯特线虫虫卵和食道口线虫虫卵区分开来。该方法操作简单，成本低，能够准确高效地将捻转血矛线虫虫卵与其他三种线虫区分开来，能够缓解动物体内捻转血矛线虫检测困难，检测成本高、操作复杂和捻转血矛线虫虫卵与其他线虫虫卵不易区分的技术问题。

摘要： 本发明公开了抗捻转血矛线虫H11蛋白的IgG抗体，本发明还公开了该抗体的制备方法与应用，属于动物寄生虫病防治领域。本发明制备的IgG抗体通过静脉注射进入动物血液，然后被以血液为食的捻转血矛线虫摄取并在虫体内抑制该虫肠道消化酶活性，从而发挥杀虫作用。本发明能够使感染捻转血矛线虫的动物产卵量和成虫负荷量显著减少，可用于预防和治疗反刍动物捻转血矛线虫的感染，针对广泛流行的捻转血矛线虫病具有较高的应用价值。

摘要： 本发明涉及一种检测捻转血矛线虫感染的复合抗原与其应用。一种复合型可用作该寄生虫早期感染诊断抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫7天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能在宿主排出虫卵2周前进行诊断。本发明利用该抗原建立了胶体金试纸条检测方法，具有敏感性好、特异性强、操作简便、用时短等优点，在牛、羊、鹿、骆驼等反刍动物捻转血矛线虫病的防控中具有较好的应用前景。

摘要： 本发明公开了用于检测捻转血矛线虫对伊维菌素敏感性的基因及应用，属于寄生虫分子检测技术领域。利用该基因制备检测试剂盒进行捻转血矛线虫伊维菌素敏感性的检测，特异性强，使用方便，可为兽医临床用药提供指导。

摘要： 本发明公开了一种捻转血矛线虫Hc‑H11‑2重组蛋白的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明利用基因工程技术对候选抗原H11‑2基因进行了改造，在去跨膜区的基础上连接利于蛋白分泌表达的IgK信号肽；首次利用无血清悬浮的CHO细胞重组表达系统，成功分泌表达捻转血矛线虫Hc‑H11‑2抗原蛋白。在动物免疫实验中，被该抗原免疫的山羊粪便排卵量和体内成虫负荷量显著降低，该疫苗能够对山羊物种提供更有效的免疫保护，具备成为预防反刍动物捻转血矛线虫病的基因工程疫苗的潜力。

摘要： 本发明公开了一种捻转血矛线虫重组ARF1蛋白纳米亚单位疫苗及其应用。一种捻转血矛线虫纳米材料亚单位疫苗，由重组ARF1蛋白经PLGA纳米材料包裹而成。本实验室用ARF1蛋白构建的rARF1‑PLGA纳米亚单位疫苗作用于小鼠体内能够诱导的小鼠的免疫应答效应，在山羊体内试验也证实rARF1‑PLGA纳米疫苗对机体具有免疫保护作用。本发明将重组ARF1蛋白用PLGA纳米材料进行包裹形成纳米亚单位疫苗，以其为羊的捻转血矛线虫感染的预防应用提供参考。

摘要： 本发明公开了一种捻转血矛线虫纳米材料亚单位疫苗及其应用。一种捻转血矛线虫纳米材料亚单位疫苗，该疫苗由捻转血矛线虫重组蛋白HCA59经纳米材料PLGA包裹而制成的亚单位疫苗；所述的重组HCA59蛋白具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。该亚单位疫苗可以用于预防羊的捻转血矛线虫感染。本纳米亚单位疫苗粒径为75‑402nm；具有较好的生物相容性和独特的理化性质，具有靶向性、缓释性、安全性及高效性等优点，其在动物体内可分解并被代谢；疫苗具有刺激树突状细胞的刺激性抗原作用，能够促使单核细胞向树突状细胞转化的能力，具有较强的免疫保护能力，临床上能够使感染捻转血矛线虫的山羊虫卵排出率和成虫减少率显著下降。

摘要： 本发明涉及一种用于捻转血矛线虫感染的早期诊断抗原及其应用。本发明鉴定出一种可用作该寄生虫感染的诊断性抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。该抗原可以对感染捻转血矛线虫7天后的宿主血清中的抗体进行特异性识别，能在排出虫卵前11‑13天进行诊断，对确诊动物及时驱虫可有效避免虫卵对环境和牧场的污染，从而减少动物感染。本发明利用该抗原建立了间接ELISA检测方法，具有敏感性高、特异性强、稳定性好、操作简便等优点，在牛、羊、鹿、骆驼等反刍动物捻转血矛线虫病的防控中具有较好的应用前景。