β-防御素

摘要： 目的探讨血清铁蛋白(SF)、瘦素(Leptin)、β-防御素(HBD)表达水平对ICU重症老年患者肺部感染情况的评估价值及与疾病进展的关系。方法选取2017年10月至2019年12月住院治疗的122例ICU重症并发肺部感染患者为研究对象,其中重症肺部感染患者63例(重症组);轻症肺部感染患者59例(轻症组);同期选取62例健康体检老人作为对照(对照组)。采用放射免疫学方法检测血清SF、Leptin水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测受试者HBD水平;分析轻症和重症患者血清SF、Leptin及HBD水平与血清炎性因子指标相关性;分析影响ICU重症老年患者肺部感染的因素。结果重症组SF、Leptin、HBD、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)水平高于轻症组和对照组(P<0.05),轻症组高于对照组(P<0.05);轻症和重症患者血清中SF、Leptin、HBD水平与CRP、PCT、WBC、IL-6、IL-8水平均呈正相关(P均<0.05);SF、Leptin、HBD、PCT诊断ICU重症老年患者肺部感染的特异性分别为91.8%、93.4%、90.2%、90.3%,敏感度分别为60.0%、66.7%、38.3%、82.7%;SF、Leptin、HBD联合诊断的特异性为88.5%,敏感度为85.0%;SF、Leptin是影响老年重症患者ICU肺部感染的危险因素。结论SF、Leptin、HBD有作为ICU重症老年患者肺部感染情况评估指标的可能性,且与疾病进展有关。

摘要： 【目的】构建黄沙鳖β-防御素1(Hs-BD1)原核表达并分析其抗菌活性,为深入分析Hs-BD1的生理功能及开发新型黄沙鳖抗菌药物提供理论依据。【方法】构建Hs-BD1成熟肽序列的重组表达载体pCold-TF-Hs-BD1,采用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白rHs-BD1表达,以十二硫酸酯钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blotting)检测重组蛋白rHs-BD1的表达情况。采用Ni柱亲和层析法对重组蛋白rHs-BD1进行纯化,分析其对几种革兰氏阳性和阴性菌的抑菌活性、溶血性和抗氧化能力。【结果】SDS-PAGE检测结果显示,重组蛋白rHs-BD1在电泳凝胶约58.1 kDa处出现特异性条带,其分子量大小与预测值相符。经Western blotting检测,重组蛋白rHs-BD1可与Anti-6×His Tag抗体发生特异性反应,表明Hs-BD1基因在原核表达系统成功表达,经纯化的重组蛋白rHs-BD1含量为400.0μg/mL。对已纯化的重组蛋白rHs-BD1进行体外抗菌活性检测,结果显示其对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae) HPG1和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)HPN1的最小抑菌浓度(MIC)为40.00μg/mL,对大肠杆菌(Escherichia coli)YLG1、类志贺邻单胞菌(Plesiomons shigelloides)DAL1和迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)FCH1的MIC为20.00μg/mL,表明重组蛋白rHs-BD1对一些革兰氏阳性和阴性菌具有较强的抗菌活性。20.0、40.0、60.0和80.0μg/mL重组蛋白rHs-BD1对新鲜黄沙鳖血细胞的溶血率分别为1.5%、2.7%、3.3%和4.2%,20.0、40.0、80.0和120.0μg/mL重组蛋白rHs-BD1对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基的清除率分别为2.6%、5.2%、11.6%和17.0%。【结论】经原核表达获得的Hs-BD1重组蛋白rHs-BD1具有一定的广谱抗菌活性和抗氧化能力,且溶血作用较弱,对黄沙鳖机体毒副作用较低,可用于新型黄沙鳖抗菌药物开发。

摘要： β-防御素是鱼类天然免疫的重要组成部分,通过杆状表达系统表达大口黑鲈β-防御素,研究其具有高效、广谱的不同于抗生素的独特抗菌的能力。研究通过序列分析,发现大口黑鲈β-防御素(MSBdefe)与其他物种β-防御素具有相似的特征,都包含6个保守的半胱氨酸。将MSBdefe基因进行昆虫密码子优化合成后,克隆至穿梭载体pYBDM-IM质粒中,构建成为重组质粒MSBdefe-pYBDM-IM,重组质粒转化感受态细胞MultiBac/rSW106/asd-/inv+,阳性重组菌株MSBdefe-pYBDM-IM-Am直接用于Sf9细胞的感染,获得重组杆状病毒AV-MSBdefe。通过SDS-PAGE和Western Blot检测AV-MSBdefe感染Sf9细胞后蛋白表达,结果表明成功获得MSBdefe重组蛋白。通过对淡水鱼类最常见的病原菌嗜水气单胞菌的抑菌活性分析,结果显示当MSBdefe重组蛋白的终浓度为30μg/mL时,抑菌效率为83.00%,并随着蛋白稀释2倍、4倍后,即终浓度为15和7.5μg/mL时,抑菌效果逐渐减弱,抑菌效率分别为54.33%和33.67%,进而验证了大口黑鲈β-防御素能够抑制嗜水气单胞菌的生长,且随着蛋白浓度的降低抑制能力下降。这些结果为利用昆虫生物反应器规模化生产鱼类β-防御素奠定了基础,以期为开发能够替代或部分替代抗生素的天然抗菌剂提供良好的候选者和技术途径。

摘要： 为了探究草鱼防御素的免疫调节作用,研究通过Clustal Omega多序列比对和I-TASSER二级结构预测,发现草鱼β-防御素1(Ctenopharyngodon idellaβ-defensin 1,CiBD1)是一类具有两亲性的富含半胱氨酸的小分子阳离子肽,其结构在硬骨鱼类中高度保守;通过构建pET-32a-CiBD1原核表达载体,IPTG诱导表达后经过Ni2+亲和层析法纯化和肠激酶酶切获得CiBD1重组蛋白,通过CFU平板法验证了CiBD1的抑菌活性,当蛋白浓度达到200μg/mL时,对革兰氏阴性菌(G+)及革兰氏阳性菌(G–)都具有显著的抑制活性;趋化实验表明CiBD1在50 ng/mL时对草鱼原代白细胞趋化活性最佳;通过个体实验探究了CiBD1重组蛋白对嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫佐剂效应,发现添加CiBD1佐剂组死亡率显著低于单独疫苗组,且该组IgM和MHCⅡ转录水平及血清中补体3(C3)和溶菌酶含量都显著高于对照组。研究表明CiBD1重组蛋白在细菌抗感染免疫中发挥着重要作用,在水产养殖中具有一定的应用前景。

摘要： 为研究狐β-防御素(vBDs)在组织中的表达情况,本研究采集健康蓝狐和赤狐的气管、肠淋巴结、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、十二指肠、回肠、睾丸以及附睾10种组织,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析10种β防御素基因在不同组织中的表达情况,并利用荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)对蓝狐vBD1、vBD2组织表达特征进行分析.结果 显示,vBDs基因在狐各组织中均有不同程度的表达,其中vBD1和vBD2在肝脏和肾脏组织中稳定表达,vBD3、vBD 108和vBD 122于睾丸和附睾组织中稳定表达.蓝狐vBD1 mRNA在肾脏和肝脏中表达量均显著高于vBD2(P＜0.0001),vBD1和vBD2 mRNA在肾脏中表达量均显著高于肝脏中的表达量(P＜0.01和P＜0.0001).各β-防御素在特定组织中的稳定表达提示其不仅在抵御外界微生物感染中发挥作用,在其他生理活动中也可能发挥重要作用.

摘要： 目的 探讨化学合成肽修饰钛种植体表面的抗菌效果.方法 利用源于人类β防御素3(hBD3)的一个片段(hBD3-1)与肽TBP-1化学结合,形成合成肽TBP-1-hBD3-1.Peptide Calculator软件分析合成肽的基本性质;标准微量肉汤稀释法检测TBP-1-hBD3-1对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC),微量滴定法检测生物膜对照组和生物膜实验组光密度(OD600)值差异;共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)检测TBP-1-hBD3-1修饰在钛种植体表面的黏附、活性情况.结果 TBP-1-hBD3-1具有较好的溶解性及亲水性,并有疏水性基团,带有一定的正电荷数(4+).TBP-1-hBD3-1对P.gingivalis的MIC值和MBC值分别为400 mg/L和1000 mg/L.生物膜实验组较生物膜对照组OD600值降低(P<0.05).CLSM结果表明,被AMC标记成蓝色的TBP-1-hBD3-1能够牢固地黏附于钛样本表面.结论 合成肽TBP-1-hBD3-1能够修饰在钛样本表面并发挥抗菌和抑制细菌生物膜形成的作用.

摘要： 给体质量(63.84±5.91)g的革胡子鲶(Clarias garepanius)腹腔注射0.2 mL浓度为4×108 CFU/mL的维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),对照组注射同等剂量的生理盐水.注射后3 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h和96 h时,感染组和对照组各取鱼15尾,用200 mg/L的MS-222麻醉后,应用实时荧光定量PCR技术,分析感染维氏气单胞菌前后β-防御素基因在革胡子鲶脾脏、肾脏、头肾、鳃、肠道和皮肤中的表达.结果显示:β-防御素基因在健康革胡子鲶体内(对照组)上述6种组织中均有表达,在脾脏中表达量显著高于其余5种组织(P＜0.05).感染维氏气单胞菌后3～96h,6种组织中β-防御素基因的时序表达谱不同.攻菌3h头肾、皮肤和鳃中该基因表达量显著上调,高于对照组以及感染后的其他各时间点,分别为对照组的6.48倍、3.86倍和1.80倍(P＜0.05);脾脏在24 h表达量达到峰值,为对照组的2.76倍(P＜0.05);肾脏和肠道也在3 h表达量最大,但与对照组差异不显著(P＞0.05).组织间比较得出:在感染后3 h和6 h,脾脏和头肾间β-防御素基因的表达量差异不显著,但头肾和脾脏的表达量分别在3 h和6 h显著高于其余4种组织,之后各感染时间点均是脾脏的表达量最高,且在24h差异最大(P＜0.05).上述结果说明:检测的6种组织都参与革胡子鲶对维氏气单胞菌感染的免疫应答反应,但在感染早期(3 h和6 h)头肾和脾脏防御作用较强,之后脾脏在病原菌侵染中起更为重要的防御作用.

摘要： β-防御素是斑点叉尾细Ietalurus punetaus抵御病原微生物侵染的首要蛋白质免疫因子,其一级结构包含氨基端24个氨基酸组成的信号肽和羧基端43个氨基酸组成的成熟肽,该成熟肽赋予β-防御素的生物学活性.文中首次构建了产斑点叉尾鮰β-防御素的毕赤酵母Pichia pastoris重组菌株,实现了基于真核表达的斑点叉尾鮰β-防御素的生物合成.首先通过RT-PCR从斑点叉尾鮰皮肤中分离β-防御素成熟肽基因“PBD”,将其与表达载体pPICZαA连接并转入毕赤酵母X-33后,获得重组毕赤酵母菌株;经含1 000 μtg/mL博来霉素的培养基筛选,获得高拷贝重组菌株.以BMM培养基(无氨基氮源培养基)替代BMMY培养基(含氨基氮源培养基),对重组菌株的发酵培养条件进行优化,确定其产斑点叉尾鮰p-防御素的最适条件为:28°C、250 r/rmin、1.0％甲醇诱导表达96 h.重组菌株产物经镍离子亲和层析获得分子量为5.98 kDa的纯化蛋白,基于MALDI-TOF-TOF的质谱分析证明该纯化蛋白为重组IPBD.抑菌活性测定结果表明重组IPBD对革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、单增李斯特菌Listeria monocytogenes以及革兰氏阴性的铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa的抑菌率分别为69.6％、71.6％和65.8％.本研究为鱼类来源天然小分子抗菌肽的开发提供了可参考的重组DNA技术.

摘要： 选用不同浓度的丁酸钠对体外培养的IPEC-J2进行刺激试验,利用实时荧光定量PCR从mRNA水平分别研究不同浓度丁酸钠刺激猪小肠上皮细胞后pBD1、pBD2、pBD3基因表达水平的差异,以期研究丁酸钠对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)β-防御素(pBD)表达的调节作用.试验结果表明,丁酸钠对pBD1、pBD2、pBD3基因调控作用存在差异,丁酸钠对pBD3基因调控最为显著,不同浓度丁酸钠均能上调pBD3 mRNA的表达,并呈现一定的剂量依赖性.

摘要： 禽β防御素是禽类先天免疫防御系统的重要组成部分, 对病原微生物具有良好的抑制效果,并且AVBD在鸡体内广泛分布,不同的研究者研究的结果也不完全相同,可能受到品种和其他因素的影响.进一步准确探索禽β防御素的组织分布及其定位和对病原微生物作用研究是必要的.首先通过克隆表达获得需要的蛋白,将AVBD6基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行表达.通过SDS-PAGE电泳表明,重组鸡AVBD6融合蛋白分子量约32kd.并用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒进行纯化并得到纯净的蛋白,免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体.通过原核表达载体pGEX-6p-1获的AVBD6重组蛋白，只在包涵体中见其大量表达，在上清中未见其表达，尿素溶解包涵体蛋白其量可达4500μg/ml。GST标签蛋白表达在上清中通过GST柱子就能获的较纯目的蛋白，GST柱子只能挂住有结构的GST标签蛋白，但表达在包涵体中GST标签蛋白纯化就非常的困难。最后采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒进行纯化，但这样纯化目的蛋白大量丢失，纯化后蛋白量只有1000μg/ml。所以在进行目的蛋白表达时，尽量还是采用His标签进行融合表达，利于后来目的蛋白的纯化。

摘要： β-防御素作为抗菌肽的一种,具有广谱抗微生物活性的富含精氨酸阳离子多肽,是机体抵御外界微生物侵袭的第一道化学屏障,也是鸡肠道上皮细胞表达的一类最重要的抗菌肽.研究发现,当空肠弯曲杆菌感染人肠道上皮细胞后,其β-防御素GAL-1、2和3的表达量增加,表明人β-防御素在抵抗空肠弯曲杆菌感染的过程中具有重要作用.到目前为止,关于鸡β-防御素GAL-1、2和3在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制还未见报道.本研究通过空肠弯曲杆菌感染SPF鸡胚肠上皮细胞,使用相对荧光定量PCR技术检测感染后鸡β-防御素GAL-1、2和3mRNA转录水平的变化,探讨β-防御素在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制.

摘要： β-防御素作为抗菌肽的一种,具有广谱抗微生物活性的富含精氨酸阳离子多肽,是机体抵御外界微生物侵袭的第一道化学屏障,也是鸡肠道上皮细胞表达的一类最重要的抗菌肽.研究发现,当空肠弯曲杆菌感染人肠道上皮细胞后,其β-防御素GAL-1、2和3的表达量增加,表明人β-防御素在抵抗空肠弯曲杆菌感染的过程中具有重要作用.到目前为止,关于鸡β-防御素GAL-1、2和3在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制还未见报道.本研究通过空肠弯曲杆菌感染SPF鸡胚肠上皮细胞,使用相对荧光定量PCR技术检测感染后鸡β-防御素GAL-1、2和3mRNA转录水平的变化,探讨β-防御素在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制.

摘要： β-防御素作为抗菌肽的一种,具有广谱抗微生物活性的富含精氨酸阳离子多肽,是机体抵御外界微生物侵袭的第一道化学屏障,也是鸡肠道上皮细胞表达的一类最重要的抗菌肽.研究发现,当空肠弯曲杆菌感染人肠道上皮细胞后,其β-防御素GAL-1、2和3的表达量增加,表明人β-防御素在抵抗空肠弯曲杆菌感染的过程中具有重要作用.到目前为止,关于鸡β-防御素GAL-1、2和3在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制还未见报道.本研究通过空肠弯曲杆菌感染SPF鸡胚肠上皮细胞,使用相对荧光定量PCR技术检测感染后鸡β-防御素GAL-1、2和3mRNA转录水平的变化,探讨β-防御素在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制.

摘要： β-防御素作为抗菌肽的一种,具有广谱抗微生物活性的富含精氨酸阳离子多肽,是机体抵御外界微生物侵袭的第一道化学屏障,也是鸡肠道上皮细胞表达的一类最重要的抗菌肽.研究发现,当空肠弯曲杆菌感染人肠道上皮细胞后,其β-防御素GAL-1、2和3的表达量增加,表明人β-防御素在抵抗空肠弯曲杆菌感染的过程中具有重要作用.到目前为止,关于鸡β-防御素GAL-1、2和3在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制还未见报道.本研究通过空肠弯曲杆菌感染SPF鸡胚肠上皮细胞,使用相对荧光定量PCR技术检测感染后鸡β-防御素GAL-1、2和3mRNA转录水平的变化,探讨β-防御素在空肠弯曲杆菌感染中的作用机制.

摘要： 研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制.在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件.在LPS刺激牛肾细胞24h后,再加入丹参酮ⅡA作用24h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA的表达.结果显示,LPS处理牛肾细胞24h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组.丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比显著上升,且β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA表达水平与炎症组相比显著下降.丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用.

摘要： 研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制.在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件.在LPS刺激牛肾细胞24h后,再加入丹参酮ⅡA作用24h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA的表达.结果显示,LPS处理牛肾细胞24h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组.丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比显著上升,且β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA表达水平与炎症组相比显著下降.丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用.

摘要： 研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制.在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件.在LPS刺激牛肾细胞24h后,再加入丹参酮ⅡA作用24h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA的表达.结果显示,LPS处理牛肾细胞24h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组.丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比显著上升,且β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA表达水平与炎症组相比显著下降.丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用.

摘要： 研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制.在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件.在LPS刺激牛肾细胞24h后,再加入丹参酮ⅡA作用24h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA的表达.结果显示,LPS处理牛肾细胞24h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组.丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比显著上升,且β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA表达水平与炎症组相比显著下降.丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用.

摘要： 研究丹参酮ⅡA对LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因表达的影响,揭示丹参酮ⅡA抗炎的作用机制.在细胞体外培养的条件下,采用MTT法筛选丹参酮ⅡA对牛肾细胞的安全剂量和LPS诱导牛肾细胞炎症的最佳条件.在LPS刺激牛肾细胞24h后,再加入丹参酮ⅡA作用24h,用MTT法检测细胞的活性,用RT-PCR法检测β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA的表达.结果显示,LPS处理牛肾细胞24h后,TLR4和TNF-α的mRNA表达水平显著高于对照组.丹参酮ⅡA干预牛肾细胞炎症模型24h后,牛肾细胞的活性与炎症组相比显著上升,且β-防御素、TLR4、TNF-αmRNA表达水平与炎症组相比显著下降.丹参酮ⅡA可抑制由LPS诱导的牛肾细胞β-防御素、TLR4、TNF-α基因的表达,对体外培养的牛肾细胞起抗炎作用.

摘要： 一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其中重组鸭β-防御素-2基因参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列，同时根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造，然后利用基因合成方法合成，含该基因的重组质粒重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程；（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程；（3）重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建；重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法包括（1）重组质粒的制备和线性化、（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备、（3）毕赤酵母的电击转化；重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法包括（1）阳性酵母转化子的诱导表达。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。

摘要： 本发明公开了一种编码重组猪β-防御素-1的基因，并设计引物扩增猪β-防御素-1的前体基因序列；还公开了重组猪β-防御素-1的制备方法，包括（1）重组质粒pGM-T-PBD-1的构建；（2）猪β-防御素-1成熟肽基因表达载体的构建；（3）重组猪β-防御素-1的体外诱导表达。本发明采用原核表达，蛋白表达量高，步骤简单，操作简便，蛋白易于纯化，成本低，重组猪β-防御素-1具有较强的抗菌活性。

摘要： 一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其中重组鸭β-防御素-2基因参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列，同时根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造，然后利用基因合成方法合成，含该基因的重组质粒重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程；（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程；（3）重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建；重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法包括（1）重组质粒的制备和线性化、（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备、（3）毕赤酵母的电击转化；重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法包括（1）阳性酵母转化子的诱导表达。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。

摘要： 本发明公开了死亡素和斑点叉尾鮰β‑防御素基因重组毕赤酵母的构建及抗菌活性研究。试验将死亡素和防御素经酵母偏好密码子优化后构建共表达TD基因至载体pPICZαA上，PCR、双酶切和测序筛选后经Sac I线性化，电转化至酵母表达菌株GS115中，Zeocin抗性、PCR筛选获得重组高抗阳性转化工程菌株GS115‑pPICZαA‑TD（Mut+），用0.5%甲醇诱导目的蛋白的表达，96 h后收集培养基上清冻干浓缩并纯化，进行体外抑菌试验、溶血性试验及细胞毒性试验。结果表明，本试验成功获得重组毕赤酵母且表达出广谱高效抑菌、安全性高的重组抗菌蛋白，为临床预防和治疗细菌性疾病提供治疗思路和实验依据。

摘要： 本发明提出了一种制备海洋生物防御素复合纤维素纤维的方法，包括如下步骤：纤维清洗、丙烯酰胺预处理、防御素抗菌剂乳化分散、水浴共聚反应、脱去均聚物、离心脱水、烘干、制成商品抗菌纤维。通过上述方式，本发明在纤维表面进行过渡层预处理，使得海洋生物防御素渗入共聚过渡层，使天然纤维表面不规则形状改性填充成抗菌层，解决了现有天然抗菌纤维功能材料与纤维相互间作用力弱、功能不持久的问题。

摘要： 在从检测器50接收到攻击信息的情况下，当根据攻击信息指定受攻击的服务器20－1时，防御设备10根据路由表确定中继器30－1作为关于所指定的服务器20－1的下一中继目的地，并且从与防御设备10相邻的中继器30－1和30－2中除去中继器30－1，选择中继器30－2作为通知目的地。防御设备10随后将用于使恶意分组经由自身装置进行路由的路由信息通知给选定中继器30－2，以便对从基于所通知的路由信息更改了路由表的中继器30－2路由到自身装置的恶意分组的通过进行控制。

摘要： 本发明公开了一种黄颡鱼β防御素基因及其β防御素抗菌肽及其应用；本发明使用体外重组表达技术成功表达了黄颡鱼β防御素重组蛋白PET‑32a‑Pf_ΒD，且抑菌活性鉴定结果显示其对革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌，革兰氏阴性菌中的大肠杆菌，嗜水气单胞菌，鮰爱德华氏菌和柱状黄杆菌均具有一定的抑菌作用。这为防御素类重组蛋白作为一种广谱抗菌药物在水产养殖中的应用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种黄颡鱼β防御素基因及其β防御素抗菌肽及其应用；本发明使用体外重组表达技术成功表达了黄颡鱼β防御素重组蛋白PET‑32a‑Pf_ΒD，且抑菌活性鉴定结果显示其对革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌，革兰氏阴性菌中的大肠杆菌，嗜水气单胞菌，鮰爱德华氏菌和柱状黄杆菌均具有一定的抑菌作用。这为防御素类重组蛋白作为一种广谱抗菌药物在水产养殖中的应用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种优化的猪β防御素基因，以及利用该基因制备具有生物活性的猪β防御素蛋白的制备方法。本发明用分子生物学技术，优化了猪β防御素基因，并直接合成了基因用于构建猪β防御素大肠杆菌原核高效表达载体，诱导表达后获得可溶性融合蛋白，并且该融合蛋白可利用Ni柱进行纯化，纯化的猪β防御素蛋白在体外对常见的病原菌具有较强的抗菌活性。本发明操作难度小，可控性强，成本低，为防御素的免疫学研究及工业批量生产奠定了基础。

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体公开一种猪β防御素2与猪α干扰素融合蛋白及其编码基因和应用。所述猪β防御素2与猪α干扰素融合蛋白具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。同时本发明还提供了所述融合蛋白的编码基因、重组表达载体和表达其的宿主细胞。本发明提供的融合蛋白的细胞毒性小，兼具猪β防御素2和猪α干扰素双重生物学活性，且该融合蛋白的抗病毒活性和抑菌活性较高。