多向分化

摘要： 目的观察血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)多向诱导分化以及自噬相关蛋白表达的影响;建立异位牙髓再生模型,探讨PDGF-BB对再生牙髓样组织中自噬相关蛋白表达的影响。方法体外分离鉴定大鼠BMSCs,随机分为4组,每组培养基中分别加入0、10、50、100 ng/mL PDGF-BB,通过CCK-8、Transwell、qRT-PCR及细胞免疫荧光染色技术,检测不同浓度PDGF-BB对BMSCs增殖、迁移、多向诱导分化及自噬相关蛋白表达的影响,确定PDGF-BB趋化BMSCs细胞归巢的最佳工作浓度范围。依据是否放入PDGF-BB,将试验大鼠随机分为两组:对照组(Collagen TypeⅠ),PDGF-BB诱导组(50 ng/mL PDGF-BB+Collagen TypeⅠ),将PDGF-BB联合Collagen TypeⅠ支架移植入经过根管预备后的离体牙根管内,并移植于大鼠腹部皮下。分别于术后2、4个月,采用免疫组化染色技术观察异位再生牙髓样组织的再生效果及其自噬相关蛋白ATG5和LC3的表达。结果CCK-8结果显示,BMSCs增殖活性随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);Transwell结果显示,细胞迁移数随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05);qRT-PCR结果显示,OPN、Runx2、MAP2、β-Ⅲ-tubulin mRNA表达量随PDGF-BB浓度升高递增(P<0.05),当PDGF-BB浓度达到100 ng/mL时,mRNA表达量达到最大值;细胞免疫荧光染色结果显示,ATG5和LC3阳性细胞数量随PDGF-BB浓度升高递增,50 ng/mL PDGF-BB诱导后,ATG5和LC3阳性细胞数最大;术后4个月PDGF-BB诱导组得到的再生牙髓样组织形态与天然人牙髓组织相近,其ATG5、LC3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs增殖,对BMSCs具有显著趋化作用。PDGF-BB能够促进大鼠BMSCs向成骨细胞及神经细胞分化,并促进自噬相关蛋白的表达。联合使用PDGF-BB可以有效获得内源性BMSCs迁移,促进大鼠体内牙髓样组织异位再生,及自噬相关蛋白表达。

摘要： 脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一种从脂肪组织中提取的多项潜能干细胞,ADSCs拥有着强大的分化和分泌能力.脂肪来源干细胞可以通过多种途径如促进血管化、调节炎症反应、构建细胞外基质、促进成纤维细胞活动和促进上皮化来加快慢性创面的愈合.现就ADSCs治疗慢性创面的可能机制和相关联合治疗作一综述.

摘要： 建立人脐带间充质干细胞的分离培养方法,并鉴定其生物学特性及多向分化潜能.采集健康产妇足月剖宫产中的胎儿脐带组织,通过组织块贴壁法进行原代培养,分别采用流式细胞仪和RT-PCR方法检测细胞表面标志物和多能性相关基因的表达,通过向成脂、成骨、成软骨分化,鉴定其多向分化潜能.结果显示:脐带组织贴壁培养14 d,可见组织块周围出现大量贴壁生长的梭形样细胞,获得的细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD44、CD105,低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45;同时表达多能性相关基因Oct4和Nanog,经组织染色和RT-PCR鉴定,其具有向成脂、成骨和成软骨分化的潜能.人脐带间充质干细胞可在体外扩增培养,表达多能性相关基因,并具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于组织工程.

摘要： 目的 探讨在体外培养条件下,慢病毒载体介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对骨髓间充质干细胞(MSC)增殖、表型及多向分化能力的影响.方法 分离培养大鼠源性骨髓MSC,利用过表达HO-1重组慢病毒载体(lenti-HO-1)将HO-1基因转染到MSC中,用荧光倒置显微镜及Western blot法分析评估转染效率.利用1.5μg/ml的嘌呤霉素筛选稳定过表达HO-1的MSC(MSC-HO-1).用Western blot法检测MSC与MSC-HO-1内HO-1蛋白表达情况,用细胞计数法绘制MSC与MSC-HO-1的生长曲线,流式细胞仪检测MSC与MSC-HO-1表型,成骨、成脂及成软骨细胞诱导分化检测多向分化潜能变化.结果 MOI=50的Lenti-HO-1可高效转染MSC.与MSC比较,MSC-HO-1在经过多次传代后仍能高效过表达HO-1,差异有统计学意义(P<0.05).MSC-HO-1的增殖生长趋势、表面标志表达及多向分化潜能均与未转染的MSC相似.结论 重组慢病毒载体Lenti-HO-1可成功转染MSC并高效表达转入的基因;HO-1基因修饰对MSC增殖活性、免疫表型及多向分化潜能无显著影响.

摘要： 目的 应用3种不同方法分离兔耳软骨来源干/祖细胞(CSPCs),对比3种方法的可靠性.方法 2019年1月至2019年12月选取4个月龄健康日本大耳白兔(由中国医学科学院整形外科医院实验动物中心提供)取耳软骨,酶消化法得到软骨细胞,简单随机分为以下4组,纤维连接蛋白黏附+低密度筛选法(FN+ LD组),单纯纤连蛋白黏附法(FN组),低密度筛选法(LD组),未经筛选的软骨细胞(CC组).利用流式细胞术检测间充质干细胞标志物CD44和CD90的表达,比较细胞自我更新和多向分化能力的差异.两样本组间比较应用t检验,多组间比较采用方差分析.结果 3种筛选方法获得的CSPCs均高表达CD44和CD90;FN +LD组与FN组CD44表达率均高于LD组[(98.13±0.25)％比(95.40 ±0.43)％,t=3.521,P＜0.01;(97.77±1.33)％比(95.40±0.43)％,=4.148,P＜0.05];FN+LD组CD90表达高于LD组[(95.47±0.66)％比(92.07±1.20)％,t=9.087,P＜0.01],差异均有统计学意义.与CC组比较,FN +LD、FN、LD组克隆形成率升高[(15.80±2.68)％比(4.80±0.75)％,t=8.751,P＜0.01;(20.80±1.64)％比(4.80±0.75)％,t=19.400,P ＜0.01;(8.40±2.61)％比(4.80±0.75)％,t=2.939,P＜0.05];FN+ LD组克隆形成率高于LD组[(15.80±2.68)％比(8.40±2.61)％,t=4.422,P＜0.01],低于FN组[(15.80±2.68)％比(20.80±1.64)％,t=3.553,P＜0.01],差异均有统计学意义.成骨与成脂能力FN+LD、FN、LD组均显著高于CC组(66.84±1.72比59.42±2.20,=5.939,P＜0.01;69.46±1.95比59.42±2.20,t =7.630,P＜0.01;63.34±1.44比59.42±2.20,=3.330,P＜0.01与26.34±0.57比13.40±0.84,t=26.080,P ＜0.01;26.41±1.12比13.40 ±0.84,t=20.820,P＜0.01;26.58±0.76比13.40 ±0.84,t=26.080,P＜0.01),差异均有统计学意义;FN+ LD组成骨能力高于LD组(66.84±1.72比63.34±1.44,t=3.493,P＜0.01),低于FN组(66.84±1.72比69.46±1.95,t=2.257,P＜0.05),差异有统计学意义;3组间成脂能力差异无统计学意义(26.34±0.57比26.41±1.12比26.58±0.76,F=0.107,P＞0.05).结论 纤维连接蛋白黏附+低密度筛选法、单纯纤连蛋白黏附法和低密度筛选法均能获得CSPCs,其表面标记、自我更新和分化能力差异与筛选方法有关.

摘要： 多倍体肿瘤巨细胞(PGCCs)是一种特殊类型的癌细胞亚群,常含有单个巨大的细胞核或多个细胞核,且细胞核通常不规则。与普通二倍体肿瘤细胞相比,PGCCs细胞周期、增殖方式、分化能力、形态、大小、染色体异常、致瘤性、抵抗放化疗等方面均不相同。过去常认为PGCCs处于有丝分裂的阻滞期并且处于细胞凋亡的边缘,是无法存活的,因此不被重视。但是最近研究发现,PGCCs不仅是可生存的,而且具备胚胎干细胞样特性,通过不对称分裂产生子代细胞,进行多向分化,且在肿瘤耐药、上皮间质转化和侵袭转移中发挥重要作用。本文就PGCCs近年来的研究进展进行综述,为临床治疗提供一种新的方向和思路。

摘要： Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from mesoderm exhibit self-renewal and multiple differentiation potentials. MSCs are considerably useful in tissue repair and cell development, with the ability to differentiate into osteoblasts, chondrocytes, adipocytes, myoblasts, neurocytes and other cells. Long noncoding RNAs (lncRNAs) are differentially expressed in the differentiation of MSCs. This result indicated that lncRNAs are crucial in regulation during differentiation. To date, most reports mainly focused on microarray and bioinformatics analysis of lncRNAs. The function and regulatory mechanism of lncRNAs on the differentiation of MSCs still remain unclear. However, with the development in new research technologies, the regulatory mechanism of lncRNA in the differentiation of MSCs will be intensively elucidated.%间充质干细胞是来源于中胚层的多能干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能,目前已经证实其能够分化成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞和神经细胞等,并在组织修复中发挥重要作用.研究发现长链非编码RNA(lncRNA)在间充质干细胞多向分化过程中差异表达,表明lncRNA可能是间充质干细胞分化中的重要调控点.虽然目前关于该方面的功能及机制的探讨较少,且主要停留在基因芯片和生物信息学分析层面,但伴随着新的研究技术体系的建立,lncRNA在间充质干细胞多向分化中的机制终将得以阐明.

摘要： 细胞资源在药物筛选、毒性研究、细胞治疗等方面有重要价值,而干细胞是促进细胞不断再生并向特定功能细胞定向转化的原始细胞群,其不断自我更新与多向分化能力为体外高效获取多种细胞资源提供了可能性.然而,诸多类型的干细胞在体外随着继代次数的增加,干性逐渐减弱,分化潜力有限,因此,寻找能够有效促进干细胞多向诱导分化的活性成分有重大意义.已有研究表明,利用中药复方、单味中药及其活性成分可体外诱导多种类型的干细胞向不同功能的细胞分化,这对大力推动细胞资源的开发和促进中医药现代化具有重要意义.

摘要： 本研究以北京油鸡为实验材料，建立合理的实验方案，探讨鸡羊膜上皮细胞的最佳培养体系。经试验结果说明培养的鸡羊膜上皮细胞具有类胚胎干细胞特性及多向分化潜能，可为组织工程研究提供数量充足的种子细胞。

摘要： 肾藏精是中医藏象理论的重要组成部分,它与人体的生长发育和再生修复有着密切的关系.干细胞治疗是目前脏器损伤后,促进机体自我修复与再生或改善损伤组织和器官功能的重要手段.骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)属成体干细胞中的一种,具有多向分化的能力.本文拟以近期“从肾论治”法诱导BMSCs 多向分化的科研成果为依据,探讨肾藏精理论与BMSCs 定向分化之联系,希冀为中医药与BMSCs 相结合早日运用于临床提供新的理论依据与指导.

摘要： 心血管疾病严重威胁人类健康，促进心肌细胞和血管再生是治疗心肌缺血损伤、心力衰竭的重要思路，而干细胞移植成为了新的策略。骨髓来源的干细胞作为心脏修复的理想靶点尤其引人关注。骨髓间充质干细胞(MSCs)具有多向分化的潜能，可以分化为心肌细胞并且体内移植可以修复损伤的心肌组织，改善心功能，这就为心血管疾病的治疗开拓了广阔的前景。本文综述了近年来有关MSCs的表型特征、向心肌细胞分化的可塑性及在心血管领域的临床研究进展。

摘要： 本发明属于生物组织工程技术领域，公开了一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，采用胶原酶分离法获得皮下和网膜组织来源的人脂肪间充质干细胞，原代培养至80％融合，再进行传代培养，并进行脂肪间充质干细胞的鉴定。选用生长良好的第三代细胞，加入无血清诱导培养基进行成脂、成骨诱导分化，最后进行油红O染色及茜素红染色鉴定分化效果及Real‑time RCR检测成脂、成骨基因表达情况。人脂肪组织易于获得，经原代培养所得的脂肪间充质干细胞足够存活量和存活期，且可诱导分化为成熟的成脂细胞和成骨细胞，为糖尿病、肥胖、骨质疏松症等代谢性疾病细胞治疗提供理想的种子细胞，为组织工程生物化骨、生物化脂肪提供新途径，有广阔的临床应用前景。

摘要： 本发明公开一种多向气氛烧结炉及多向气氛控制工艺，涉及烧结炉及烧结工艺技术领域；该气氛烧结炉包括料箱，所述料箱的前部、后部、中部、左部和右部等均分别设置有气氛控制机构，所述气氛控制机构包括进气机构和出气机构，气体能够通过所述进气机构流入所述料箱，并通过所述出气机构流出料箱，从而形成气体在料箱内外的流动。该工艺包括，步骤一，通过料箱至少一个方向上的气氛控制机构作为进气机构向料箱内充入气体；步骤二，通过料箱除步骤一之外，其他方向上的至少一个气氛控制机构作为出气机构排出料箱内的气体。本发明通过上述多向气氛烧结炉及多向气氛控制工艺，使得料箱多个方向均能进气和出气，从而避免了气流死角和气流行程太长的问题。

摘要： 本发明公开了一种多向叉车用液压系统，包括：液压油箱、行走转向系统、工作系统、行走制动系统以及泵；行走转向系统包括带有优先阀的转向器以及转向油缸；工作系统包括第一电磁阀、多路阀、起升油缸、前移马达、倾斜油缸和调距油缸；行走制动系统包括稳压阀组、第二电磁阀以及液压制动器。本发明还公开了使用上述液压系统的多向叉车。本发明的多向叉车用液压系统，其工作系统、行走转向系统和行走制动系统三套系统共用一个动力源，整套液压系统简单，装配简单，能够很好的实现多向叉车的功能。

摘要： 本实用新型属于开关技术领域，公开了一种多向开关按键、多向开关及智能锅具手柄。多向开关按键包括按压部和连接部，连接部设置插接腔，手柄内部的摇杆开关与插接腔插接固定，按压按压部时能够通过连接部带动摇杆开关动作，且连接部的外侧圆周面上开设有与插接腔连通的通孔，以使摇杆开关在插入插接腔中时，插接腔内的空气能够通过通孔排出，以使摇杆开关装配方便。该多向开关按键通过在连接部上开设与插接腔连通的通孔，以使摇杆开关与连接部装配更加容易，且能够保证摇杆开关插接到位。

摘要： 本实用新型公开了一种具有多向连接功能的多向联轴器，包括基座，所述基座的顶端固定连接有立柱和角度滑轨，所述立柱设在角度滑轨的左侧，立柱的顶部嵌设有主动轴，立柱与主动轴之间是转动连接，角度滑轨上滑动连接有滑座，滑座上嵌设有从动轴，滑座与从动轴之间是转动连接，所述从动轴通过转动关节转动连接主动轴；本实用新型中主动轴远离转动关节的一端固定连接输出轴，从动轴远离转动关节的一端固定连接输入轴，且通过滑座在角度滑轨上自由的滑动，可以自由的调整从动轴与主动轴之间的夹角，使得整个装置能够满足多种角度的连接传动需求，且整个调整结构十分简单，便于快速调节，调节灵活，能大幅提升整个装置操作便利性。

摘要： 本发明提供一种从儿童包皮培养获得具备多向分化潜能和免疫调节功能间充质干细胞的方法，包括如下步骤：将经过包皮环切术切割下来的包皮用无菌PBS清洗后，放置于培养皿中；对上述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将该真皮切成小块形成组织匀浆；将该组织匀浆均匀接种于培养瓶中，平置培养瓶使组织块尽量均匀分布于整个底面，加入培养基进行原代培养；最后传代培养至第3代建立间充质干细胞库。该培养方法速度高、产率高、原料来源丰富，且培养得到的间充质干细胞纯度高、具备多向分化潜能和免疫调控功能、能够表达更多的免疫抑制相关基因和趋化基因，可以用于抑制炎症反应各种类型脓毒症(感染性(细菌和病毒)和免疫性)的治疗。

摘要： 本发明涉及用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其采用以下步骤获得：真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；对上述所得的单克隆细胞进行成脂肪、成骨及成神经体外诱导，并鉴定其分化能力；分别对双向克隆细胞和三向克隆细胞分离提纯，获得相应的膜蛋白组分；通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；进行LTQ质谱分析，获得匹配的蛋白质；通过Western-Blot检测，找出标志膜蛋白。本发明还涉及所述的标志膜蛋白的用途，经上述方法初步筛选出的随着分化能力的变化而出现较明显上调或下调的标志膜蛋白，可用于具有多向分化潜能细胞的分选纯化。

摘要： 本发明提供一种从儿童包皮培养获得具备多向分化潜能和免疫调节功能间充质干细胞的方法，包括如下步骤：将经过包皮环切术切割下来的包皮用无菌PBS清洗后，放置于培养皿中；对上述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将该真皮切成小块形成组织匀浆；将该组织匀浆均匀接种于培养瓶中，平置培养瓶使组织块尽量均匀分布于整个底面，加入培养基进行原代培养；最后传代培养至第3代建立间充质干细胞库。该培养方法速度高、产率高、原料来源丰富，且培养得到的间充质干细胞纯度高、具备多向分化潜能和免疫调控功能、能够表达更多的免疫抑制相关基因和趋化基因，可以用于抑制炎症反应各种类型脓毒症(感染性(细菌和病毒)和免疫性)的治疗。

摘要： 本发明公开了一种梓醇用于体外高效扩增脐带间充质干细胞的用途、维持其多向分化潜能的培养基。在本发明的具体实施例中，研究数据显示，梓醇可以有效促进人脐带间充质干细胞的增殖，并且呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性，且梓醇干预培养不会影响人脐带间充质干细胞的多向分化能力，因此可以在人脐带间充质干细胞培养基中添加有效浓度的梓醇制成提高人脐带间充质干细胞增殖效率的培养基。

摘要： 本发明涉及用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其采用以下步骤获得：真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；对上述所得的单克隆细胞进行成脂肪、成骨及成神经体外诱导，并鉴定其分化能力；分别对双向克隆细胞和三向克隆细胞分离提纯，获得相应的膜蛋白组分；通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；进行LTQ质谱分析，获得匹配的蛋白质；通过Western-Blot检测，找出标志膜蛋白。本发明还涉及所述的标志膜蛋白的用途，经上述方法初步筛选出的随着分化能力的变化而出现较明显上调或下调的标志膜蛋白，可用于具有多向分化潜能细胞的分选纯化。