基质细胞

摘要： 2022年1月6日,一篇发表在国际期刊《Cell》上的研究显示,加州大学旧金山分校联合多个研究团队鉴定和分类了12种不同肿瘤类型的免疫特征图谱。研究人员通过对T细胞和单核吞噬细胞亚群精细地分类和定义,从3个粗略的细胞特征(T细胞特征、髓样细胞特征和非免疫的基质细胞征)入手渐进分析,确定了10个主要免疫原型的稳定图谱,为了解肿瘤免疫以及确定广泛且常见的免疫治疗靶点提供了重要的研究框架。

摘要： 目的探究子宫内膜异位症(EM)组织中miR-532-3p的表达及其对子宫内膜异位症基质细胞(ESCs)增殖、侵袭和AKT3表达的影响机制。方法选取2019年11月至2020年3月在廊坊市人民医院行腹腔镜及刮宫术的10例EM患者的异位子宫内膜组织和10例非EM患者的正常子宫内膜组织作为研究对象。从EM患者的异位子宫内膜组织中分离出ESCs,从非EM患者的正常子宫内膜组织中分离出正常子宫内膜间质细胞(NESCs),ESCs中分别转染miR-532-3p-mimic、miR-532-3p-inhibitor及对应的阴性对照进行分组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验、Transwell实验测定细胞的增殖、侵袭能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-532-3p、AKT3的相对表达水平;采用Western blot检测AKT3的表达;采用双荧光素酶报告基因检测miR-532-3p与AKT3的关系。结果qRT-PCR结果显示,与正常子宫内膜组织及NESCs相比,异位子宫内膜组织及ESCs中miR-532-3p表达下调(P<0.05)。转染miR-532-3p-mimic的ESCs中miR-532-3p表达明显上调,转染miR-532-3p-inhibitor的ESCs中miR-532-3p表达明显下调(P<0.05)。CCK-8及Transwell实验结果显示,转染miR-532-3p-mimic的ESCs增殖、侵袭能力明显减弱,转染miR-532-3p-inhibitor的ESCs增殖、侵袭能力明显增强(P<0.05)。Starbase网站及双荧光素酶实验发现,miR-532-3p与AKT3具有靶向关系,且miR-532-3p可调控AKT3的表达。结论EM组织中miR-532-3p表达下调,上调miR-532-3p的表达可抑制ESCs的增殖和侵袭,降低AKT3的表达。miR-532-3p可能通过靶向调控AKT3的表达抑制ESCs增殖和侵袭,从而抑制EM的发展。

摘要： 铁死亡是一种以铁依赖性、脂质过氧化物累积和可调节性为特征的细胞死亡类型,可被特定诱导剂诱导发生,多种铁死亡诱导剂在临床抗癌治疗中起着重要作用。同时肿瘤微环境被认为是参与癌症发展各个阶段的关键驱动因素。肿瘤微环境中的炎症反应、免疫、基质细胞、血管生成和代谢方面对肿瘤铁死亡途径有一定的影响。本文就铁死亡的发生机制和保护机制、肿瘤微环境对铁死亡的影响以及相关潜在的抗癌策略或药物进行综述。

摘要： 目的 阐明MALAT1 通过miR-30 对骨巨细胞瘤基质细胞生长、迁移和侵袭进行调控.方法 收集临床骨巨细胞瘤及对照样本进行荧光定量PCR,检测MALAT1及miR-30表达水平;对骨巨细胞瘤进行原代细胞培养,获得纯化的骨巨细胞瘤基质细胞原代细胞系;构建MALAT1 过表达质粒,合成miR-30 mimic 类似物及inhibitor 抑制剂;在细胞系中过表达MALAT1 质粒和/或miR-30 相关片段,通过MTT 实验观察细胞生长情况,通过Transwell 实验观察细胞迁移和侵袭情况.结果 与正常组织对比,MALAT1 表达水平在骨巨细胞瘤组织中显著降低,而miR-30水平升高;生物信息学分析发现MALAT1 存在于miR-30相互作用的序列,且荧光素酶报道基因结果显示,过表达miR-30可显著抑制MALAT1 WT质粒的报道基因信号,而对MUT突变质粒无效;单独过表达MALAT1 或者miR-30 inhibitor抑制剂均可抑制基质细胞生长、迁移和侵袭;而且上下游拮抗实验表明,过表达MALAT1 可抵消miR-30 mimic 类似物引起的促进作用.结论 MALAT1、miR-30均参与骨巨细胞瘤基质细胞发展调控;MALAT1 可通过调控miR-30抑制骨巨细胞瘤细胞增殖、迁移和侵袭.

摘要： 炎症性肠病(inflammatory bowel disease)是一种发病率持续上升的慢性自身免疫性疾病,它可以累及全消化道,它的疾病表现形式多种多样(如腹痛、腹泻、梗阻等).炎症性肠病的发病机制尚未完全清楚,所以对于它的治疗暂未有突破性的进展.但可以明确的是肠道免疫在IBD的发病过程发挥着必不可少的作用,近年来诸多研究表明多种基质细胞能与人体的免疫细胞相互影响,从而促进或者抑制IBD的炎症发展.本文就基质细胞在IBD的肠道免疫中的作用进行综述.

摘要： 基质细胞蛋白是调节细胞外基质和细胞间相互作用的一种细胞外基质蛋白质的亚类,是细胞与基质之间的连接桥梁,在对外部刺激做出响应并维持微环境的稳态中发挥重要作用。不同于结构性的基质蛋白,基质细胞蛋白并不直接参与调控细胞形态和组织结构,而是在组织细胞受到损伤后发挥细胞-细胞、细胞-基质间的调节作用[1]。为了突出这种细胞外蛋白在调节细胞功能中的作用,Bornstein[2]引入了“基质细胞蛋白”这一概念,强调细胞外基质网络组成成分的改变将会直接影响细胞的表型。

摘要： 目的 探索肿瘤微环境(TME)中与基质细胞含量和免疫细胞浸润程度相关的影响胃癌预后的关键因素.方法 基于高通量基因表达(GEO)数据库中7个基因表达谱芯片联合数据集,评估胃癌的TME中基质细胞含量和免疫细胞浸润程度,筛选影响胃癌预后的重要因素,分析这些因素可能参与的信号通路,并通过免疫组化验证关键分子HLA-DRA对胃癌预后的影响.结果 C3和HLA-DRA(均P<0.05)为独立预后因素.HLA-DRA低表达与胃癌复发显著相关.免疫组化分析证实HLA-DRA高表达的胃癌患者总体生存期显著延长(P=0.008).结论 HLA-DRA是胃癌预后的独立保护性因素,有望在免疫治疗中成为改善胃癌预后的新方向.

摘要： 恶性肿瘤的发生、发展是一个复杂的动态过程,包括起始、进展和转移3个阶段.肿瘤发生、发展过程中所处的局部生物环境即肿瘤微环境(TME)与肿瘤发生、进展和转移的关系密切.TME主要由细胞外基质、基质细胞、血管和淋巴管网络组成,其中基质细胞的类型和比例关系到TME的性质,若TME中存在大量具有抑瘤作用的基质细胞浸润,这些基质细胞能够通过直接杀伤肿瘤细胞、促进免疫激活、抑制肿瘤血管生成等作用形成相对健康的TME,从而对肿瘤的起始、进展和转移起到抑制作用;反之若TME中存在大量的具有促瘤作用的基质细胞浸润,这些基质细胞具有促进肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和免疫抑制等促瘤作用,从而形成不健康的TME,对肿瘤的起始、进展和转移起到促进作用.因此TME中基质细胞的类型和比例关系着TME所起的是促瘤作用还是抑瘤作用.通过调节基质细胞的类型和比例,使促瘤的TME转变为抑瘤的TME,减少免疫抑制,有利于肿瘤的治疗,对肿瘤患者的预后具有积极影响.本文对不同类型基质细胞在TME中的促瘤、抑瘤或双向调节作用进行了综述.

摘要： 目的 研究骨肉瘤中上皮间质转化(EMT)相关基因的来源及与患者生存预后的关系.方法 从Gene Expression Omnibus数据库中获得3个独立的微阵列数据集(GSE36001、GSE39055和GSE16091).GSE39055和GSE16091用于探讨骨肉瘤EMT、免疫活性、基质活性和肿瘤纯度间的相关性;GSE39055的总生存率和无病生存率数据用于生存分析.通过GSE36001和该院5例骨肉瘤标本、5例基质标本验证骨肉瘤中EMT相关基因表达的关键来源.结果 GSE39055和GSE16091中,EMT评分与免疫评分、基质评分均呈正相关(P<0.05),与肿瘤纯度均呈负相关(P<0.05);肿瘤纯度与免疫评分、基质评分均呈负相关(P<0.05).GSE39055中,高EMT评分是骨肉瘤患者总生存率、无病生存率下降的危险因素(HR=4.977,P=0.003;HR=4.308,P=0.010).GSE36001中,骨肉瘤标本EMT相关基因表达水平高于基质细胞基因(P<0.05);骨肉瘤标本和基质标本之间EMT相关基因的倍数变化(FC)高于基质细胞基因(P<0.05).该院5例骨肉瘤标本中EMT相关基因表达水平高于基质细胞基因(P<0.05);5例基质标本中基质细胞基因表达水平高于EMT相关基因(P<0.05);骨肉瘤标本和基质标本之间EMT相关基因的FC高于基质细胞基因(P<0.05).结论 骨肉瘤中EMT、免疫活性、基质活性和肿瘤纯度之间存在相关性;EMT相关基因的表达与骨肉瘤患者的生存预后密切相关;基质细胞是骨肉瘤中EMT相关基因表达的关键来源.

摘要： 比较17D 213-77黄热病病毒株(17D)在不同基质细胞中的培养,观察病毒增殖的情况,探索一种替代目前黄热病疫苗生产的方法.以17D在经典的全鸡胚卵黄囊中传代培养作为对照方法,分别研究其在鸡胚成纤维细胞(DF-1细胞)和Vero细胞上传代培养条件,优化病毒感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)和培养时间;将17D在DF-1细胞上连续传代,观察子代病毒的滴度变化;同时将17D在原代鸡胚细胞(Primary ChickenEmbryonic Fibroblasts,CEF)上传代培养.17D在DF-1细胞传代培养最适MOI为0.000 1,最佳培养时间为3d,且连续传代后可以保持稳定的病毒滴度(＞8 Lg PFU/mL);17D在Veto细胞传代培养最适MOI为0.01,最佳培养时间为4 d;4种方式传代17D在接种量、培养时间和收获病毒量上有一定区别.DF-1细胞在培养17D上存在一定优势,有成为生产17D黄热病疫苗的基质细胞的可能.

摘要： 体外分离培养、纯化获得原代蜕膜基质细胞，并经过免疫荧光标记的方法鉴定，蜕膜基质细胞PRL以及vimentin阳性表达，CK-7以及Ⅷ因子为阴性表达，其纯度达到95%；在梯度浓度的IFN-r影响下，蜕膜基质细胞上骨桥蛋白表达受到抑制，并且呈剂量依赖性关系；在原代培养的蜕膜基质细胞中，IFN-γ对骨桥蛋白启动子活性影响不显著；NK细胞迁入实验发现IFN-γ作用后蜕膜基质细胞对NK细胞的募集能力下降；骨桥蛋白的抗体阻断实验发现抗人骨桥蛋白抗体可以抑制蜕膜基质细胞对NK细胞的募集。

摘要： 目的:探讨不同剂量的神经节苷脂(GM1)对人脂肪组织来源的基质细胞(ADSCs)分化为神经细胞的影响.方法:分离培养人ADSCs,采用神经诱导培养基(NIM)加不同剂量的GM1对其进行诱导培养,倒置相差显微镜下连续观察细胞生长情况和形态变化,免疫组化法鉴定各组神经前体细胞的特异性标志神经巢蛋白(Nestin),神经细胞的特异性标志神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管联合蛋白-2(MAP2)及神经胶质细胞的特异性标志胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果:(1)经NIM加不同剂量的GM1诱导后,ADSCs可分化为神经细胞,在一定的时间内,分化的神经细胞数逐渐增加,且以ENIM+400uMGM1)组更明显.(2)Nestin的表达随时间逐渐增强,1天时表达最高,5天时表达减弱,除1小时外,其余各时间点E组表达最高,且与A、B、C、D组比较均有显著统计学意义(p＜0.05).(3)NSE和MAP2的表达随时间逐渐增强,5天时表达最高,同一时间点内E组表达最高,且与A、B、C、D组比较均有显著统计学意义(p＜0.05).(4)GFAP的表达随时间逐渐增强,5天时表达最高,但同一时间点内E组表达最低,并与A、B、C、D组比较均有显著统计学意义(p＜0.05).结论:GM1可促进人ADSCs向神经细胞分化,且与GM1呈剂量依赖性.

摘要： 本文介绍了骨髓基质细胞多能性的研究进展，研究了骨髓基质细胞的基本特征、分离与培养，介绍了骨髓基质细胞多能性以及细胞多能性产生的机制，讨论了骨髓基质细胞的应用及其前景展望。

摘要： 目的:探讨建立原代骨髓基质细胞层的方法并观察基质接触对造血干祖细胞基因转移的影响. 方法:ficoll-hypaque分离成人骨髓单个核细胞(MNC)，用基质细胞培养液培养，传代4次以建立原代骨髓基质细胞层.将经细胞因子预刺激的造血干/祖细胞接种到经辐照处理的基质细胞层上，进行逆转录病毒介导的多药耐药基因(MDR1)转移，以半固体集落培养和聚合酶链反应法(PCR)检测长春新碱(VCR)抗性集落数和MDR1基因扩增片段以测定转导效率. 结果:原代骨髓基质细胞培养传代4～ 6周形成混合贴壁细胞层，主要由成纤维细胞组成.集落法和PCR法检测显示基质接触能提高人HSC/HPC基因转导效率1.3～ 3.3倍，对骨髓HSC/HPC的基因转导的支持效应明显. 结论:基质细胞接触联合细胞因子作用可提高逆转录病毒介导的造血干祖细胞基因转导效率.

摘要： 目的:研究凋膜止崩方对子宫内膜非典型性增生症的影响并探讨其可能的作用机制. 方法:分离子宫内膜非典型性增生患者的子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞,用不同剂量的凋膜止崩方(12.5μg·mL-1、25μg·mL-1、50μg·mL-1)分别处理48h,MTT实验检测细胞相对存活率;提取细胞总RNA和总蛋白,实时定量PCR检测STAT3与FHIT的mRNA水平,Western blot法检测STAT3与FHIT蛋白水平. 结果:凋膜止崩方能显著抑制子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞的增殖,降低STAT3的mRNA和蛋白水平,提高FHIT的mRNA和蛋白水平. 结论:凋膜止崩方可能通过抑制STAT3、促进FHIT的表达抑制子宫内膜细胞增殖,治疗子宫内膜增生症.本研究为子宫内膜增生症的治疗提供了新的思路,也为凋膜止崩方在子宫内膜增生症中的研究和应用提供了实验依据.

摘要： 目的：检测核因子kappaBp65(NF-KBp65)蛋白及ENA-78在内异症患者在位内膜、异位内膜和正常子宫内膜中的表达情况，探讨其与内异症发病的关系。rn 方法：体外传代培养至第3代的在位、异位及正常内膜基质细胞分别给予不同浓度的IL-Iβ及IL-Iβ+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)进行干预。用ELISA检测三组子宫内膜培养上清液ENA-78浓度及IL-Iβ、IL-Iβ+PDTC对各组内膜基质细胞分泌ENA-78浓度的影响。用免疫细胞化学方法检测三组子宫内膜基质细胞NF-KBp65蛋白的活化程度及IL-Iβ、IL-Iβ+PDTC干预下各组内膜基质细胞NF-KBp65蛋白的活化程度的改变。rn 结果：⑴在位及异位子宫内膜基质细胞培养上清液中ENA-78浓度明显高于正常子宫内膜基质细胞，差异有显著统计学意义(P＜0.01);在位及异位子宫内膜基质细胞之间比较，异位子宫内膜基质细胞培养上清液中的ENA-78浓度高于在位子宫内膜基质细胞，差异有显著统计学意义(P＜0.01)，在分别给予IL-Iβ、IL-Iβ+PDTC干预后，正常子宫内膜基质细胞上清液中的ENA-78浓度无明显变化，差异无统计学意义(P＞0.05);而在在位及异位内膜基质细胞的上清液中，ENA-78浓度在IL-Iβ组最高，明显高于对照组及IL-Iβ+PDTC组，差异有显著统计学意义(P＜0.01)。⑵在正常子宫内膜基质细胞、在位及异位子宫内膜基质细胞这三组中，在位及异位内膜基质细胞的NF-KBp65蛋白的活化程度显著高于正常子宫内膜基质细胞，差异有统计学意义(P＜0.05);在位及异位子宫内膜基质细胞NF-KBp65蛋白的活化程度IL-Iβ组最高，显著高于对照组及IL-Iβ+PDTC组，差异有统计学意义。rn 结论：IL-Iβ可诱导在位及异位子宫内膜基质细胞NF-KBp65活化，使ENA-78的表达增高。PDTC可抑制此作用。说明NF-KBp65做为关键性的调控因子，可能在内异症的发病过程中起到“闸门”的作用，对ENA-78以及其它细胞因子起到重要调控作用。

摘要： 骨缺损的修复是骨科的研究热点之一，自体骨移植被认为是修复骨缺损的金标准，方法多采用块状或条状骨移植。颗粒骨移植近年来正逐渐受到重视，广泛应用于关节翻修手术中。微小颗粒骨有利于骨折愈合也有报告。本文通过微小颗粒骨复合骨髓基质细胞移植修复大鼠颅骨缺损，观察骨愈合情况及在此过程中移植细胞存活情况，探索修复骨缺损的有效方法。

摘要： 本发明提供了一种通过导入Notch基因将骨髓间质细胞诱导/分化神经细胞和骨骼肌细胞的方法。即，本发明提供了一种通过导入Notch基因将骨髓间质细胞体外诱导分化为神经细胞或骨骼肌细胞的方法，所述方法包括将Notch基因和/或Notch信号传导相关基因导入所述细胞，其中所得分化/诱导的细胞是导入了Notch基因和/或Notch信号传导相关基因的骨髓间质细胞的细胞分裂子代。本发明还提供了将分化/诱导的神经细胞进一步诱导/分化为多巴胺能神经元或乙酰胆碱能神经元。本发明还还涉及用本发明的方法所获得的神经前体细胞、神经细胞或骨骼肌细胞治疗神经退化性疾病或肌退化性疾病的方法。

摘要： 本发明提供了一种通过导入Notch基因将骨髓间质细胞诱导/分化神经细胞和骨骼肌细胞的方法。即，本发明提供了一种通过导入Notch基因将骨髓间质细胞体外诱导分化为神经细胞或骨骼肌细胞的方法，所述方法包括将Notch基因和/或Notch信号传导相关基因导入所述细胞，其中所得分化/诱导的细胞是导入了Notch基因和/或Notch信号传导相关基因的骨髓间质细胞的细胞分裂子代。本发明还提供了将分化/诱导的神经细胞进一步诱导/分化为多巴胺能神经元或乙酰胆碱能神经元。本发明还还涉及用本发明的方法所获得的神经前体细胞、神经细胞或骨骼肌细胞治疗神经退化性疾病或肌退化性疾病的方法。

摘要： 一种附着于基质的贴壁细胞的冻存方法以及鉴定一种或多种胞外基质(ECM)组分和/或基质细胞蛋白的方法，所述胞外基质组分和基质细胞蛋白提高冻存细胞在基质上的活力和滞留。冻存方法包括：用至少一种ECM组分处理基质，和/或向基质或细胞培养基中加入至少一种基质细胞蛋白，将细胞接种于处理的基质，以及冻存细胞。提高细胞活力和滞留的一种或多种ECM组分和/或基质细胞蛋白可通过评估已从冻存温度下解冻的细胞鉴定，以确定细胞活力和滞留。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种以自身脐带间充质干细胞作为基质细胞扩增人类脐带血造血干细胞的方法。本发明提供了一种体外大量扩增CB‑HSCs的方法，即利用来自自身的脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymalstem cells，UCMSC)作为基质细胞与CB‑HSCs共培养，从而模拟CB‑HSCs在体内的生长微环境，用此方法可有效扩增CB‑HSCs，而且扩增后的细胞克服了细胞因子扩增法的易于损伤、崩解等缺陷。

摘要： 本发明涉及间充质基质细胞以及从脐带分离间充质基质细胞的有益方法。具体地，可通过下述方法获得所述细胞：所述方法包括从脐带分离基质华通氏胶或其级分，并使所述基质华通氏胶或其级分进行酶处理，由此从所述华通氏胶或其级分释放至少一种细胞。优选地，在允许扩增所述细胞群的条件下进行细胞的繁殖。根据本发明所述的细胞群具有增殖特性并且具有用于多种目的的工业意义。

摘要： 公开了骨髓基质细胞衍生的细胞外基质蛋白提取物，其可用于间充质干细胞的扩增和增殖以及用于各种治疗应用。

摘要： 一种附着于基质的贴壁细胞的冻存方法以及鉴定一种或多种胞外基质(ECM)组分和/或基质细胞蛋白的方法，所述胞外基质组分和基质细胞蛋白提高冻存细胞在基质上的活力和滞留。冻存方法包括：用至少一种ECM组分处理基质，和/或向基质或细胞培养基中加入至少一种基质细胞蛋白，将细胞接种于处理的基质，以及冻存细胞。提高细胞活力和滞留的一种或多种ECM组分和/或基质细胞蛋白可通过评估已从冻存温度下解冻的细胞鉴定，以确定细胞活力和滞留。

摘要： 本发明公开了一种纯化子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞和基质细胞的制备方法及其应用，该制备方法通过两种不同的细胞消化液对样品依次进行消化处理得到高纯度的子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞和基质细胞。本发明中的制备方法克服了现有的技术问题，能高效制备高纯度的完全分离的子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞以及基质细胞，而且所需的试剂仅包括消化酶，而且制备得到的细胞均为活细胞，可进一步应用于下游多种分子生物学和细胞生物学的研究。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种以自身脐带间充质干细胞作为基质细胞扩增人类脐带血造血干细胞的方法。本发明提供了一种体外大量扩增CB‑HSCs的方法，即利用来自自身的脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymalstem cells，UCMSC)作为基质细胞与CB‑HSCs共培养，从而模拟CB‑HSCs在体内的生长微环境，用此方法可有效扩增CB‑HSCs，而且扩增后的细胞克服了细胞因子扩增法的易于损伤、崩解等缺陷。

摘要： 本发明涉及小鼠胚胎肝基质细胞KM3作为人胚胎干细胞饲养层细胞的用途。具体是KM3细胞经过10μg/ml的丝裂霉素C处理2h后，在液氮中冻存60d，复苏后细胞可作为人胚胎干细胞传代培养的饲养层细胞，支持人胚胎干细胞稳定传代。