RNA干扰技术

摘要： RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是现代农作物病虫害防治中的一项具有前景的生物技术,其专一性、高效性、环境友好等特点使其成为能够替代传统依赖化石能源农药的可行性方案,也是现代农业绿色生产中重要的生物技术之一。根据双链RNA(dsRNA)的合成和递送方式的不同,可以将RNAi技术在农业上的应用形式分成3类,分别为植物宿主诱导的基因沉默(Host-induced gene silencing,HIGS)、微生物载体介导的基因沉默(Vector-mediated gene silencing,VMGS)和外源dsRNA诱导的基因沉默(Exogenous dsRNA-induced gene silencing,EdIGS)。基于RNAi技术开发的生物农药在农业病虫害防治中具有广阔的应用前景。通过综述植物RNAi机制、RNAi技术的3种应用形式,梳理其在作物保护中应用的研究进展。

摘要： 目的了解全球小核酸药物发展态势,为我国小核酸药物研发提供参考。方法通过Web of Science文献数据库和智慧芽专利数据库检索1980年1月-2021年12月发表/申请的小核酸药物相关学术文献/专利,对小核酸药物的研究热度、研发国家、研发机构和技术主题等进行分析。结果与结论共纳入文献59819篇、专利37645组。全球小核酸药物文献发表与专利申请趋势可分为3个阶段,小核酸药物的研究热度在2003-2021年不断增强。美国、中国、日本、德国是小核酸药物主要的研发国家,美国与中国的文献发表量(25703、15927篇)和专利申请量(14240、8937组)领先于其他各国,研发活跃度较强,且中国在该领域近年来文献发表量和专利申请量增速较快。文献发表量最多的研发机构是美国加利福尼亚大学(2499篇),专利申请量最多的研发机构是美国Ionis公司(1378组),中国科学院(文献发表量为1580篇)已经入围全球前10位文献产出机构;但我国在该领域的研发更多停留在基础研究上,在产业应用方面的研究稍显不足。小核酸药物领域的研究重心主要集中在核酸序列及其修饰改进和载药技术上,RNA干扰技术已逐渐成为小核酸药物的热点技术。

摘要： RNA干扰又称转录后基因沉默,是一种能有效沉默或抑制目标基因表达的新兴基因工程技术。基于RNA干扰的生物农药被认为是未来植保领域的颠覆性技术,将极大改变人类防治农业病、虫、草等有害生物的思路和策略。本文我们简单回顾了RNA干扰的基本作用机制和发展历程,全面总结了RNAi生物农药的研究水平和应用现状,深入分析了RNAi生物农药发展面临的机遇和挑战,以及未来的发展前景。以期为我国RNAi生物农药的研发提供参考。

摘要： 目的:探讨siRNA介导的eIF3b基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7侵袭和迁移能力的影响.方法:设计eIF3b基因的小分子干扰RNA(siRNA)片段,脂质体介导转染入乳腺癌细胞株MCF-7,转染分3个组:Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(转染非特异性对照组)和Ⅲ组(转染eIF3b-siRNA组).应用qRT-PCR和Western blotting免疫印迹法检测转染前后eIF3b基因mRNA和蛋白表达水平;运用Matrigel胶模型细胞迁移和侵袭实验检测MCF-7细胞迁移和侵袭能力的变化.结果:与Ⅰ组(1.09±0.19)、Ⅱ组(1.05±0.17)相比,Ⅲ组eIF3b蛋白表达水平(0.45±0.06)明显下降,差异具有统计学意义(P0.05).Ⅲ组eIF3b mRNA相对表达水平为0.54±0.08,明显低于Ⅰ组(1.12±0.16)和Ⅱ组(1.08±0.18),差异有统计学意义(P0.05).细胞迁移实验中,Ⅲ组细胞明显少于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05);细胞侵袭实验中,Ⅲ组穿过人工基底膜的细胞明显少于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05).结论:下调eIF3b表达可明显抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移.

摘要： 目的 分析抑制葡萄糖转运蛋白5(Glut5)的表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响,并基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨其可能的作用机制.方法 取对数生长期的MG-63细胞分为Con组、NC组和短发夹RNA(shRNA)-Glut5组.Con组未进行基因干扰,NC组和shRNA-Glut5组则采用RNA干扰技术将杂序的shRNA、shRNA-Glut5分别转染至MG-63细胞.转染48 h后,检测3组细胞的增殖能力、细胞克隆数和迁移能力,以及细胞中Glut5、β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基质金属蛋白酶3(MMP3)的mRNA和蛋白的表达水平.结果 与其他两组比较,shRNA-Glut5组MG-63细胞的增殖和迁移能力下降,细胞克隆数减少,Glut5、β-连环蛋白、cyclinD1和MMP3的mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.05).结论 下调Glut5基因表达可以抑制骨肉瘤MG-63细胞系的增殖、克隆形成和迁移能力,Wnt/β-连环蛋白信号通路可能参与调控该过程.

摘要： 目的 探讨调控细胞分裂周期蛋白6(CDC6)对人类乳头瘤病毒(HPV)16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响.方法 检测HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞株、HPV16阳性的宫颈癌Caski细胞株和SiHa细胞株、HPV18阳性的宫颈癌HeLa细胞株中CDC6蛋白及mRNA的表达水平.将CDC6小干扰RNA(siRNA)-1、siRNA-2、siRNA-NC分别转染入宫颈癌Caski细胞(分别设为CDC6 siRNA-1组、CDC6 siRNA-2组、siRNA-NC组),并设立空白对照组,24 h和48 h后分别检测各组CDC6 mRNA和蛋白的表达水平,筛选出最佳的siRNA序列.转染后,检测最佳siRNA序列的CDC6 siRNA组、siRNA-NC组、空白对照组的细胞增殖能力、细胞周期及细胞凋亡率.结果 (1)Caski细胞、HeLa细胞、SiHa细胞、C33-A细胞的CDC6 mRNA的相对表达量依次降低;C33-A细胞CDC6蛋白的相对表达量低于其他3种细胞,Caski细胞和HeLa细胞CDC6蛋白的相对表达量均高于SiHa细胞(均P<0.05).(2)CDC6 siRNA-1组CDC6 mRNA及蛋白相对表达量低于CDC6 siRNA-2、siRNA-NC组与空白对照组(均P<0.05),故选用siRNA-1序列进行后续研究.(3)转染48 h后,与siRNA-NC组与空白对照组比较,CDC6 siRNA-1组的细胞增殖能力降低,细胞凋亡率增加,细胞G1期变长、G2期缩短(均P<0.05).结论 沉默CDC6能够有效干扰HPV16阳性宫颈癌Caski细胞的增殖,靶向抑制CDC6有望成为早期治疗宫颈癌的新途径.

摘要： 目的:探究RNA干扰技术(RNAi)沉默Engrailed-2基因(EN2)后对肝癌HepG2细胞凋亡影响以及10号染色体上缺失的磷酸酯酶和张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇激/蛋白激酶B信号通路(PTEN/PI3K/Akt)信号通路的影响.方法:将NC-siRNA、EN2-siRNA的质粒载体分别转染HepG2细胞,转染后分为空白对照组(Control组)、阴性转染组(NC-siRNA组)、EN2-siRNA组,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;平板细胞克隆形成实验检测HepG2细胞克隆形成数量;流式细胞术检测EN2沉默后细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(WB)检测PTEN/PI3K/Akt蛋白表达情况.结果:EN2-siRNA组24 h、36 h、48 h、72 h细胞增殖抑制率、凋亡率均显著高于Control组和NC-siRNA组,细胞克隆数量形成数目显著低于Control组和NC-siRNA组;EN2-siRNA组细胞G1期细胞比例显著高于Control组、NC-siRNA组,S期细胞比例显著低于Control组、NC-siRNA组(P<0.05).EN2-siRNA组细胞EN2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著低于Control组、NC-siRNA组,PTEN蛋白高于Control组、NC-siRNA组(P<0.05).结论:EN2在肝癌HepG2细胞中高表达,沉默EN2表达后,可抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡,推测其机制可能与上调PTEN蛋白表达、抑制PI3K/Akt通路有关.

摘要： 近年来,基于小干扰RNA(siRNA)的基因干扰技术从基因水平上调节与肿瘤产生多药耐药性相关的各种蛋白进而逆转化疗多药耐药性方面表现出了巨大的应用潜力.鉴于此,研究者们在RNA干扰与化疗药物的协同抗癌方面做了大量工作.但游离的siRNA在无载体的情况下不易被细胞吸收,而且会被血浆和组织中内源性的核糖核酸酶降解,因此必须将siRNA负载在载体上才能有效应用于肿瘤治疗.鉴于纳米载体的安全、高效及靶向性等优点,人们已经发展出大量能同时负载siRNA及化疗药物的纳米复合体系.本文主要评述了近年来报道的一些纳米材料在共负载siRNA及化疗药物对逆转肿瘤多药耐药性方面的应用,以及研究中经常用到的一些逆转多药耐药的作用靶点.

摘要： 为研究Cd2+胁迫下脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)甘露糖集合凝集素(MBL)在肝胰腺中表达量的变化特征,本研究利用重金属镉(Cd2+)对脊尾白虾进行96h急性毒性实验.实验共设置5组Cd2+浓度胁迫(0、0.01、0.0175、0.021和0.0278 mmol/L),分别在Cd2+胁迫后0、3、6、12、24、48、72和96 h共8个时间点取样.实时荧光定量结果显示,高浓度Cd2+(0.0175、0.021和0.0278 mmol/L)胁迫下,脊尾白虾MBL基因的表达量先呈上升趋势,在72 h达到峰值后随后下降,但各时间点表达量均与对照组存在显著性差异(P＜O.01);Cd2+浓度为0.01 mmol/L时,脊尾白虾MBL基因的表达量整体呈下降趋势.进一步采用RNA技术干扰该基因表达后,发现Cd2+胁迫后的脊尾白虾个体死亡率显著增加.本研究表明,脊尾白虾MBL在应答Cd2+胁迫过程中可对机体起到一定的保护作用.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术沉默Notchl基因表达对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株Tet21N细胞增殖的影响.方法：以NB细胞株Tet21N为细胞模型,利用该细胞为强力霉素调控MYCN表达细胞,即仅在缺乏强力霉素的情况下表达MYCN,利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰Notch1信号途径,通过CCK8法测定细胞增殖、BrdU标记法细胞周期测定研究Notch1沉默的Tet21N细胞增殖及细胞周期的改变.结果：利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰NB细胞株Tet21N的Notch1信号途径建立稳定的Notch1沉默的Tet21N细胞系,由实时荧光定量PCR及Western Blot技术在mRNA和蛋白水平证实,从而获得可分析Notch1沉默的NB细胞模型.通过CCK8法细胞增殖检测发现Notch1-Tet21N细胞较Notch1+Tet21N增殖快.通过BrdU标记法细胞周期测定发现Notch1-MYCN+Tet21N细胞较Notch1+MYCN+Tet21N细胞S期比率高(30％vs.16.3％);Notch1 MYCN-Tet21N细胞较Notch1+MYCN-Tet21N细胞S期细胞比率高(1.98％vs.10％).结论：Notch1沉默促进Tet21N细胞增殖和细胞周期的进展.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术沉默Notchl基因表达对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株Tet21N细胞增殖的影响.方法：以NB细胞株Tet21N为细胞模型,利用该细胞为强力霉素调控MYCN表达细胞,即仅在缺乏强力霉素的情况下表达MYCN,利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰Notch1信号途径,通过CCK8法测定细胞增殖、BrdU标记法细胞周期测定研究Notch1沉默的Tet21N细胞增殖及细胞周期的改变.结果：利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰NB细胞株Tet21N的Notch1信号途径建立稳定的Notch1沉默的Tet21N细胞系,由实时荧光定量PCR及Western Blot技术在mRNA和蛋白水平证实,从而获得可分析Notch1沉默的NB细胞模型.通过CCK8法细胞增殖检测发现Notch1-Tet21N细胞较Notch1+Tet21N增殖快.通过BrdU标记法细胞周期测定发现Notch1-MYCN+Tet21N细胞较Notch1+MYCN+Tet21N细胞S期比率高(30％vs.16.3％);Notch1 MYCN-Tet21N细胞较Notch1+MYCN-Tet21N细胞S期细胞比率高(1.98％vs.10％).结论：Notch1沉默促进Tet21N细胞增殖和细胞周期的进展.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术沉默Notchl基因表达对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株Tet21N细胞增殖的影响.方法：以NB细胞株Tet21N为细胞模型,利用该细胞为强力霉素调控MYCN表达细胞,即仅在缺乏强力霉素的情况下表达MYCN,利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰Notch1信号途径,通过CCK8法测定细胞增殖、BrdU标记法细胞周期测定研究Notch1沉默的Tet21N细胞增殖及细胞周期的改变.结果：利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰NB细胞株Tet21N的Notch1信号途径建立稳定的Notch1沉默的Tet21N细胞系,由实时荧光定量PCR及Western Blot技术在mRNA和蛋白水平证实,从而获得可分析Notch1沉默的NB细胞模型.通过CCK8法细胞增殖检测发现Notch1-Tet21N细胞较Notch1+Tet21N增殖快.通过BrdU标记法细胞周期测定发现Notch1-MYCN+Tet21N细胞较Notch1+MYCN+Tet21N细胞S期比率高(30％vs.16.3％);Notch1 MYCN-Tet21N细胞较Notch1+MYCN-Tet21N细胞S期细胞比率高(1.98％vs.10％).结论：Notch1沉默促进Tet21N细胞增殖和细胞周期的进展.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术沉默Notchl基因表达对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株Tet21N细胞增殖的影响.方法：以NB细胞株Tet21N为细胞模型,利用该细胞为强力霉素调控MYCN表达细胞,即仅在缺乏强力霉素的情况下表达MYCN,利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰Notch1信号途径,通过CCK8法测定细胞增殖、BrdU标记法细胞周期测定研究Notch1沉默的Tet21N细胞增殖及细胞周期的改变.结果：利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰NB细胞株Tet21N的Notch1信号途径建立稳定的Notch1沉默的Tet21N细胞系,由实时荧光定量PCR及Western Blot技术在mRNA和蛋白水平证实,从而获得可分析Notch1沉默的NB细胞模型.通过CCK8法细胞增殖检测发现Notch1-Tet21N细胞较Notch1+Tet21N增殖快.通过BrdU标记法细胞周期测定发现Notch1-MYCN+Tet21N细胞较Notch1+MYCN+Tet21N细胞S期比率高(30％vs.16.3％);Notch1 MYCN-Tet21N细胞较Notch1+MYCN-Tet21N细胞S期细胞比率高(1.98％vs.10％).结论：Notch1沉默促进Tet21N细胞增殖和细胞周期的进展.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术沉默Notchl基因表达对人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株Tet21N细胞增殖的影响.方法：以NB细胞株Tet21N为细胞模型,利用该细胞为强力霉素调控MYCN表达细胞,即仅在缺乏强力霉素的情况下表达MYCN,利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰Notch1信号途径,通过CCK8法测定细胞增殖、BrdU标记法细胞周期测定研究Notch1沉默的Tet21N细胞增殖及细胞周期的改变.结果：利用人Notch1shRNA pGIPZ慢病毒载体干扰NB细胞株Tet21N的Notch1信号途径建立稳定的Notch1沉默的Tet21N细胞系,由实时荧光定量PCR及Western Blot技术在mRNA和蛋白水平证实,从而获得可分析Notch1沉默的NB细胞模型.通过CCK8法细胞增殖检测发现Notch1-Tet21N细胞较Notch1+Tet21N增殖快.通过BrdU标记法细胞周期测定发现Notch1-MYCN+Tet21N细胞较Notch1+MYCN+Tet21N细胞S期比率高(30％vs.16.3％);Notch1 MYCN-Tet21N细胞较Notch1+MYCN-Tet21N细胞S期细胞比率高(1.98％vs.10％).结论：Notch1沉默促进Tet21N细胞增殖和细胞周期的进展.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术抑制ZFX基因表达对白血病REH细胞增殖和凋亡的影响.方法：通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4及K562)中ZFX蛋白的表达:通过实时定量PCR检测82例B-ALL儿童初发骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达.用RNA干扰技术抑制ZFX的表达后,Western blot方法检测ZFX蛋白、caspase-3蛋白以及PARP蛋白的表达;基因芯片技术检测相关基因表达,并用实时定量PCR确认.用CCK8试验和流式细胞术分别检测细胞增殖率和凋亡率.结果：ZFX蛋白在白血病细胞株中有广泛表达.初发ALL组骨髓中ZFX表达高于对照组(P＜0.01);ALL缓解组ZFX基因表达明显低于ALL初发组(P＜0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX基因的表达高于预后好的患儿(P＜0.05).ZFX表达抑制导致REH细胞增殖降低和凋亡增加;REH细胞凋亡部分与caspase3和PARP断裂活化以及LEPR表达下调有关.结论：ZFX在儿童B系ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义.ZFX在白血病发病中发挥作用,它可能在靶向治疗中作为靶点治疗白血病.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术抑制ZFX基因表达对白血病REH细胞增殖和凋亡的影响.方法：通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4及K562)中ZFX蛋白的表达:通过实时定量PCR检测82例B-ALL儿童初发骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达.用RNA干扰技术抑制ZFX的表达后,Western blot方法检测ZFX蛋白、caspase-3蛋白以及PARP蛋白的表达;基因芯片技术检测相关基因表达,并用实时定量PCR确认.用CCK8试验和流式细胞术分别检测细胞增殖率和凋亡率.结果：ZFX蛋白在白血病细胞株中有广泛表达.初发ALL组骨髓中ZFX表达高于对照组(P＜0.01);ALL缓解组ZFX基因表达明显低于ALL初发组(P＜0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX基因的表达高于预后好的患儿(P＜0.05).ZFX表达抑制导致REH细胞增殖降低和凋亡增加;REH细胞凋亡部分与caspase3和PARP断裂活化以及LEPR表达下调有关.结论：ZFX在儿童B系ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义.ZFX在白血病发病中发挥作用,它可能在靶向治疗中作为靶点治疗白血病.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术抑制ZFX基因表达对白血病REH细胞增殖和凋亡的影响.方法：通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4及K562)中ZFX蛋白的表达:通过实时定量PCR检测82例B-ALL儿童初发骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达.用RNA干扰技术抑制ZFX的表达后,Western blot方法检测ZFX蛋白、caspase-3蛋白以及PARP蛋白的表达;基因芯片技术检测相关基因表达,并用实时定量PCR确认.用CCK8试验和流式细胞术分别检测细胞增殖率和凋亡率.结果：ZFX蛋白在白血病细胞株中有广泛表达.初发ALL组骨髓中ZFX表达高于对照组(P＜0.01);ALL缓解组ZFX基因表达明显低于ALL初发组(P＜0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX基因的表达高于预后好的患儿(P＜0.05).ZFX表达抑制导致REH细胞增殖降低和凋亡增加;REH细胞凋亡部分与caspase3和PARP断裂活化以及LEPR表达下调有关.结论：ZFX在儿童B系ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义.ZFX在白血病发病中发挥作用,它可能在靶向治疗中作为靶点治疗白血病.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术抑制ZFX基因表达对白血病REH细胞增殖和凋亡的影响.方法：通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4及K562)中ZFX蛋白的表达:通过实时定量PCR检测82例B-ALL儿童初发骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达.用RNA干扰技术抑制ZFX的表达后,Western blot方法检测ZFX蛋白、caspase-3蛋白以及PARP蛋白的表达;基因芯片技术检测相关基因表达,并用实时定量PCR确认.用CCK8试验和流式细胞术分别检测细胞增殖率和凋亡率.结果：ZFX蛋白在白血病细胞株中有广泛表达.初发ALL组骨髓中ZFX表达高于对照组(P＜0.01);ALL缓解组ZFX基因表达明显低于ALL初发组(P＜0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX基因的表达高于预后好的患儿(P＜0.05).ZFX表达抑制导致REH细胞增殖降低和凋亡增加;REH细胞凋亡部分与caspase3和PARP断裂活化以及LEPR表达下调有关.结论：ZFX在儿童B系ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义.ZFX在白血病发病中发挥作用,它可能在靶向治疗中作为靶点治疗白血病.

摘要： 目的：探讨RNA干扰技术抑制ZFX基因表达对白血病REH细胞增殖和凋亡的影响.方法：通过Western blot方法检测白血病细胞株(REH、HL-60、NB4及K562)中ZFX蛋白的表达:通过实时定量PCR检测82例B-ALL儿童初发骨髓样本,24例B-ALL缓解期样本,以及64例骨折或先天性心脏病手术患儿样本(对照组)ZFX的表达.用RNA干扰技术抑制ZFX的表达后,Western blot方法检测ZFX蛋白、caspase-3蛋白以及PARP蛋白的表达;基因芯片技术检测相关基因表达,并用实时定量PCR确认.用CCK8试验和流式细胞术分别检测细胞增殖率和凋亡率.结果：ZFX蛋白在白血病细胞株中有广泛表达.初发ALL组骨髓中ZFX表达高于对照组(P＜0.01);ALL缓解组ZFX基因表达明显低于ALL初发组(P＜0.01);预后差的ALL患儿初发骨髓中ZFX基因的表达高于预后好的患儿(P＜0.05).ZFX表达抑制导致REH细胞增殖降低和凋亡增加;REH细胞凋亡部分与caspase3和PARP断裂活化以及LEPR表达下调有关.结论：ZFX在儿童B系ALL中高表达,且预后差组表达相对较高,提示它可能在B-ALL预后判断中有重要意义.ZFX在白血病发病中发挥作用,它可能在靶向治疗中作为靶点治疗白血病.

摘要： 本发明公开了一种烟粉虱致死基因及其应用、RNA干扰剂及RNA干扰剂的制备方法和应用。烟粉虱致死基因为Alpha‑glucosidase。RNA干扰剂为包含根据Alpha‑glucosidase基因片段合成的dsRNA。其制备方法包括引物设计、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳分离、dsRNA合成等步骤。本发明的烟粉虱致死基因与α‑葡萄糖苷酶的活性相关，根据烟粉虱致死基因设计的RNA干扰剂可抑制α‑葡萄糖苷酶的活性，从而降低烟粉虱水解葡萄糖的能力，最终导致烟粉虱死亡，且同时能对其传播的病毒病进行有效控制。应用于农业中对烟粉虱的去除，及降低病毒病的发生，具有特异性，对哺乳动物以及天敌昆虫无害，见效快、致死率高、对环境无污染等优势。

摘要： 本发明公开了一种用调控植物结瘤固氮能力的RNA干扰载体，包括骨架载体和发夹结构，所述发夹结构利用SEQ ID NO：2所示的基因片段构建，将基因片段插入到pTCK303载体的限制性内切酶KpnI/Spe I和BamH I/Sac I酶切识别位点之间，得到重组RNA干扰载体。使所得RNA干扰载体转化受体植物，沉默受体植物中的对应基因，使受体植物的根组织具有增强的结瘤固氮能力。利用本发明构建的RNA干扰载体转化受体大豆植株获得转基因植物，能够显著提高大豆的结瘤固氮能力，对提高大豆产量具有重大的意义。

摘要： 本发明涉及靶向CCP22(complement control protein 22，CCP22)的干扰性RNA(interfering RNA)、含有该干扰性RNA的药物组合物及其医药用途。

摘要： 本发明提供了靶向HPIP基因的干扰性RNA、含有该干扰性RNA的药物组合物及其应用。

摘要： 本发明公开了一种人黑色素瘤细胞相关的长非编码RNA的RNA干扰靶点RNA及用途，具体提供了人黑色素瘤细胞相关的长非编码RNA的RNA干扰靶点RNA(RNA interference，RNAi)，干扰靶点的短发夹RNA(short-hairpin RNA，shRNA)、shRNA编码的小分子干扰RNA(small interference RNA，siRNA)、编码shRNA的正义链DNA及反义链DNA、编码shRNA的重组质粒，以及它们在制备治疗黑色素瘤疾病药物中的用途。

摘要： 本发明公开了一种烟粉虱致死基因及其应用、RNA干扰剂及RNA干扰剂的制备方法和应用。烟粉虱致死基因为Alpha‑glucosidase。RNA干扰剂为包含根据Alpha‑glucosidase基因片段合成的dsRNA。其制备方法包括引物设计、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳分离、dsRNA合成等步骤。本发明的烟粉虱致死基因与α‑葡萄糖苷酶的活性相关，根据烟粉虱致死基因设计的RNA干扰剂可抑制α‑葡萄糖苷酶的活性，从而降低烟粉虱水解葡萄糖的能力，最终导致烟粉虱死亡，且同时能对其传播的病毒病进行有效控制。应用于农业中对烟粉虱的去除，及降低病毒病的发生，具有特异性，对哺乳动物以及天敌昆虫无害，见效快、致死率高、对环境无污染等优势。

摘要： 制备小干扰RNA(siRNA)表达系统文库，以生产通过诱导靶基因RNA表达产物降解来沉默靶基因的siRNA的方法，包括：(i)从细胞群中分离一种或多种靶基因的RNA；(ii)从分离的RNA产生RNA片段；(iii)将RNA片段转化为dsDNA片段；和(iv)将dsDNA片段克隆到载体中以形成克隆的载体，每个载体包含一个或多个启动子和能够接受至少一个dsDNA片段插入的至少一个限制性酶位点，使得可以产生siRNA。也提供了从siRNA表达系统产生siRNA的方法以及通过使用从siRNA表达系统产生的siRNA识别用于治疗的功能性靶基因和识别RNAi治疗剂的方法。

摘要： 本发明公开了一种用调控植物结瘤固氮能力的RNA干扰载体，包括骨架载体和发夹结构，所述发夹结构利用SEQ ID NO：2所示的基因片段构建，将基因片段插入到pTCK303载体的限制性内切酶KpnI/Spe I和BamH I/Sac I酶切识别位点之间，得到重组RNA干扰载体。使所得RNA干扰载体转化受体植物，沉默受体植物中的对应基因，使受体植物的根组织具有增强的结瘤固氮能力。利用本发明构建的RNA干扰载体转化受体大豆植株获得转基因植物，能够显著提高大豆的结瘤固氮能力，对提高大豆产量具有重大的意义。

摘要： 本发明涉及靶向CCP22(complement control protein 22，CCP22)的干扰性RNA(interfering RNA)、含有该干扰性RNA的药物组合物及其医药用途。

摘要： 本发明提供了靶向HPIP基因的干扰性RNA、含有该干扰性RNA的药物组合物及其应用。