超高效液相色谱-串联质谱法同时测定4种复方氨基酸注射液中22个氨基酸的含量

摘要

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定4种复方氨基酸注射液中22个氨基酸的含量。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,5μm),二元洗脱系统(A相为含0.2%甲酸和0.02%七氟丁酸的水溶液;B相为甲醇)进行梯度洗脱,柱温50℃,流速0.4 mL·min^(-1);采用电喷雾电离正离子模式检测,多反应监测模式测定,运行时间为9.5 min。结果:甘氨酸(Gly)、L-丙氨酸(Ala)、L-缬氨酸(Val)、L-亮氨酸(Leu)、L-异亮氨酸(Ile)、L-赖氨酸(Lys)、L-甲硫氨酸(Met)、L-组氨酸(His)、L-苯丙氨酸(Phe)、L-精氨酸(Arg)质量浓度在0.32~8μg·mL^(-1),L-丝氨酸(Ser)、L-脯氨酸(Pro)、L-苏氨酸(Thr)、L-门冬酰胺(Asn)、L-鸟氨酸(Orn)、L-门冬氨酸(Asp)、L-谷氨酸(Glu)、N-乙酰-L-半胱氨酸(Ace)、L-色氨酸(Trp)、N-乙酰-L-酪氨酸(Aty)质量浓度在0.16~4μg·mL^(-1),L-酪氨酸(Tyr)、L-胱氨酸(Cyss)质量浓度在0.032~0.8μg·mL^(-1)的范围内线性关系良好(r均>0.99),日内精密度和日间精密度、稳定性、重复性均良好,平均加样回收率为90.0%~101.3%(RSD均≤5.9%,n=6)。应用该方法同时测定了4种复方氨基酸注射液中22个氨基酸含量,各氨基酸测定含量与标识含量的比值为86.67%~102.86%。结论:该方法操作简便,分析快速,专属性强,灵敏度高,测定结果准确,可用于复方氨基酸注射液中各氨基酸的含量测定,系统全面地进行质量控制及质量评价。