重金属铜化学发光酶联免疫快速检测方法的建立

摘要

目的:用自制重金属铜单抗和合成铜完全抗原,建立检测重金属铜离子的间接竞争化学发光酶联免疫(CLEIA)法,为植物中草药和土壤环境中铜的快速定量测定提供简便、可靠的方法.方法:使用本实验室前期制备并鉴定合格的优质铜单抗和合成铜抗原,建立铜间接竞争CLEIA法,并对其准确度、精密度、特异性和稳定性进行评价;采集植物中草药和土壤样品共31份,通过微波消解联合沉淀法进行前处理并制备待测样,由间接竞争CLEIA法进行铜含量测定,以ICP-AES仪器法所测结果为对照评价其可靠性.结果:该方法检测灵敏度为17.9 ng/ml,检测限为1.9 ng/ml,线性范围为3.0～200 ng/ml;准确度试验回收率为98.8％ ～105.5％,精密度试验RSD≤5.0％;特异性试验仅与Mg2+、Zn2+有13.3％、3.3％的交叉反应;酶标板置-20℃避光保存6周内其检测结果准确性未出现明显改变.对植物中草药和土壤样品进行前处理并制样检测,对比ICP-AES法检测结果,相关系数分别为0.972和0.989,两种方法具有较好相关性,表明间接竞争CLEIA法可应用于一般环境样品中铜的简便快速定量测定.结论:成功建立铜间接竞争CLEIA检测法,其灵敏度及各参数均符合国家法定相关样品铜离子检测技术指标的要求,可应用于一般环境样品中铜含量的快速测定.