基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法

摘要

通过菌体免疫小鼠获得高灵敏的高特异性单克隆抗体,并以此为基础建立一种快速、灵敏的单克隆抗体双抗体夹心法检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartill subsp.Stewartii).通过小鼠脾脏融合实验获得3株单克隆抗体(12B4、10B1、11C2),并通过双抗体夹心法筛选配对细胞株,建立双抗体夹心法.最低检测限(LOD)为1.5x104 cfu/mL,线性范围在4.57×105～1.11×108 cfu/mL.该方法对玉米细菌性枯萎病菌具有很好的特异性,对玉米种子添加回收实验回收率为85.6％～90.2％,相对标准偏差低于5.0％.