我国狂犬病疫苗生产毒株不同代次G基因和毒力稳定性研究

摘要

目的：分别测定6代次CTN-1V、aG株及3代次PV2061株病毒糖蛋白基因序列,并研究3株病毒致病力稳定性。方法：RT-PCR方法扩增各代次病毒糖蛋白基因组序列,分别将产物克隆入pGEM-T载体中,测定并拼接序列,应用DNAStar和Mega4.0软件包中的相应软件对基因组序列进行分析,并与近期国内分离且具有地域代表性的狂犬病病毒街毒株进行基因同源性分析；分别测定5代次CTN-1V株、6代次aG株及4代次PV2061株病毒病毒滴度(FFU/ml)和细胞荧光滴度(FFU/ml),采用1g(FFU/LD50)指标来对病毒的致病力进行评价。结果：株病毒各代次糖蛋白基因序列测定结果表明,3株病毒糖蛋白均传代稳定；3株病毒致病力指标均在0.00-0.60之间；糖蛋白生物信息学分析表明,3株病毒均与我国近期分离的街毒株均具有较高同源性,其中CTN-1V株病毒与我国大部分地区街毒株高度同源。结论：CTN-1V、aG及PV2061株病毒糖蛋白传代稳定,且与国内近期分离的街毒株高度同源,3株病毒各代次糖蛋白基因组序列的测定及致病力研究,为完善毒株的质量控制提供数据支持。