半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1

摘要： 目的:探讨在腰椎间盘退变(LDD)患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平及相关性。方法:选取LDD患者40例为观察组,选取同期非退行性椎间盘病变患者43例为对照组。根据Pfirrmann分级系统,观察组又分为轻度病变组(10例)、中度病变组(16例)和重度病变组(14例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平。采用Western blot法及免疫组化染色检测Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。采用HE染色和病理学评分(HDS)对椎间盘组织的病理损伤程度进行组织学评分。比较各组患者髓核组织Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平。分析Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与Pfirrmann分级、HDS组织学评分的相关性,以及Caspase-1与IL-1βmRNA表达水平间的相关性。分析LDD患者疾病严重程度的影响因素。结果:观察组Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平高于对照组(均P<0.05);在观察组中,随着疾病程度逐渐加重,Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平均逐渐上升(均P<0.05)。免疫组化结果显示,Caspase-1、IL-1β蛋白主要分布于细胞质中,表达水平及趋势同Western blot结果。Spearman相关性分析表明,Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与Pfirrmann分级呈正相关关系(r=0.5386、0.6656,均P<0.05),与HDS评分呈正相关关系(r=0.5585、0.4899,均P<0.05);此外,Caspase-1与IL-1βmRNA表达水平间亦呈正相关关系(r=0.4441,P<0.05)。Logistic回归分析显示,髓核组织中Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与LDD患者疾病严重程度具有相关性,是LDD患者疾病严重程度的影响因素。结论:LDD患者髓核组织Caspase-1、IL-1β表达水平上升,且与疾病严重程度相关。

摘要： 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/Gasdermin D(GSDMD)信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、IRI 2 h组、IRI 6 h组、IRI 12 h组、甘草酸(GA)+Sham组和GA+IRI 12 h组(每组8只);将AML12细胞大致均匀地分为Sham组、IRI 12 h组、GA+Sham组和GA+IRI 12 h组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中IL-1β和IL-6信使核糖核酸(mRNA)水平;比较各组小鼠肝脏缺血病理学评分和细胞凋亡情况;采用免疫组织化学(免疫组化)法检测各组小鼠肝组织中HMGB1的表达情况;采用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织和AML12细胞中HMGB1、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,IRI后各组小鼠血清中ALT、AST、IL-1β、IL-6水平,以及小鼠肝组织中的IL-1β、IL-6 mRNA相对表达量均升高(均为P<0.05),且随着再灌注时间的延长呈明显的时间依赖性。与Sham组比较,IRI后各组小鼠肝脏缺血病理学评分和肝细胞凋亡率均升高(均为P<0.05)。免疫组化结果显示,IRI后HMGB1在肝组织中的表达明显增多,且在2~12 h内随着时间延长而增多。蛋白质印迹法结果显示,在体内和在体外,与Sham组比较,IRI 12 h组HMGB1、Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均升高;与IRI 12 h组比较,GA+IRI 12 h组HMGB1蛋白相对表达量升高,Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论肝细胞可能通过释放HMGB1激活Caspase-1/GSDMD通路,从而触发肝细胞发生焦亡,导致肝脏IRI,而通过GA抑制HMGB1的胞外释放可减轻肝脏IRI。

摘要： 目的探讨环状RNA(circRNA)在缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞焦亡中的作用及其机制。方法将大鼠心肌细胞H9c2分为A~F组,分别进行缺氧0、1、3、6、12、24 h处理后,再进行6 h复氧,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒及Western blot方法检测H/R处理的H9c2细胞上清液中LDH活性和焦亡相关蛋白表达水平,确定诱导H9c2细胞焦亡的最佳缺氧时间。将H9c2细胞分为对照组和实验组,对照组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,实验组H9c2细胞置于厌氧培养箱进行H/R处理,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组H9c2细胞中circRNA的表达水平。将H9c2细胞分为G~I组,G组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,H组转染对照siRNA(NC),I组转染mmu_circ_0000723特异性siRNA(siRNA-mmu_circ_0000723)。转染24 h后,采用RT-qPCR方法检测各组H9c2细胞中mmu_circ_0000723的表达水平。将H9c2细胞分为J~M组,J组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,K组H9c2细胞置于厌氧培养箱进行H/R处理,L组和M组H9c2细胞分别转染对照NC和siRNA-mmu_circ_0000723,并于转染24 h后进行H/R处理。分别采用碘化丙啶(PI)染色、LDH试剂盒和Western blot方法检测J~M组的PI阳性细胞比率、细胞上清液中LDH活性,以及焦亡相关蛋白的表达水平。结果A~F组H9c2细胞上清液中LDH活性和焦亡相关蛋白的表达水平差异有显著性(F=24.86~2153.00,P0.05)。结论mmu_circ_0000723通过调控焦亡相关蛋白的表达,在H/R诱发的H9c2细胞焦亡中发挥重要作用。

摘要： 目的观察柴胡疏肝散精简方对慢性疼痛抑郁共病大鼠行为学及中缝核P2X7受体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β表达的影响,探讨其抗疼痛抑郁共病的机制。方法将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组,每组10只。除空白组外,其余3组予利血平腹腔注射造模,氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组分别予氟西汀和柴胡疏肝散精简方灌胃,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃,连续14 d。测量大鼠体质量、强迫游泳不动时间、旷场实验运动行为和热缩足阈值;ELISA检测血清IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;PCR检测中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达;Westernblot检测中缝核IL-6、TNF-α蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增量明显减少,强迫游泳不动时间明显增加,旷场实验运动总距离和穿格次数明显减少,热缩足阈值明显降低(P<0.05);血清IL-6、TNF-α含量明显增加(P<0.05),中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达明显升高(P<0.05),IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,氟西汀组和柴胡疏肝散精简方组大鼠体质量增量明显增加,强迫游泳不动时间明显减少,旷场实验运动总距离和穿格次数明显增加,热缩足阈值明显升高(P<0.05);血清IL-6、TNF-α含量明显减少(P<0.05),中缝核P2X7受体、Caspase-1及IL-1βmRNA表达明显降低(P<0.05),IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论柴胡疏肝散精简方可改善慢性疼痛抑郁共病大鼠行为学及疼痛阈值,其作用机制可能与抑制中缝核P2X7受体表达,进而下调Caspase-1、IL-1β、IL-6和TNF-α表达,减轻炎症反应有关。

摘要： 目的分析大黄素调控含有pyrin结构域的蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)信号通路对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠的免疫调节作用。方法选取SPF级6~8周龄SD大鼠60只,12只作为对照组,其余48只建立EAT模型,建模成功后剔除死亡大鼠,将剩余40只大鼠随机分为模型组、大黄素低剂量组、大黄素中剂量组、大黄素高剂量组各10只。建模成功后开始灌胃,对照组、模型组给予5 mg/kg生理盐水,大黄素低剂量组给予生理盐水+15 mg/kg大黄素,大黄素中剂量组给予生理盐水+75 mg/kg大黄素,大黄素高剂量组给予生理盐水+150 mg/kg大黄素。观察每组甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NLRP3/Caspase-1信号通路蛋白表达量。结果与对照组相比,其他4组TgAb、IL-4、IFN-γ、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NLRP3、ASC、Caspase-1水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,大黄素低、中、高剂量组TgAb、IL-4、IFN-γ、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NLRP3、ASC、Caspase-1水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);大黄素中剂量组TgAbIL-4、IFN-γ、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、NLRP3、ASC、Caspase-1水平低于大黄素低、高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素可调节EAT大鼠的免疫功能,并通过抑制CD4^(+)、CD8^(+)增殖使IL-4、IFN-γ分泌减少,其作用机制可能与NLRP3/Caspase-1通路有关。

摘要： 目的探讨高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在脂多糖诱导的脓毒症心肌病小鼠心肌细胞焦亡中的作用及其机制。方法选择雄性C57BL/6小鼠40只,随机数字表法分为对照1组[9型腺相关病毒(AAV9)-对照]、对照2组(AAV9-HMGA1)、脂多糖1组(AAV9-对照+脂多糖)、脂多糖2组(AAV9-HMGA1+脂多糖),每组10只。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)免疫组织化学染色检测细胞焦亡水平,免疫荧光染色检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达,蛋白免疫印迹法检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达,RT-PCR检测白细胞介素(IL)-1β和IL-18的mRNA表达。结果免疫组织化学染色显示,脂多糖1组Caspase-1表达较对照1组明显增加;脂多糖2组Caspase-1表达较脂多糖1组明显增加。免疫荧光染色显示,脂多糖1组NLRP3表达较对照1组明显增加;脂多糖2组NLRP3表达较脂多糖1组明显增加。蛋白免疫印迹结果显示,与对照1组比较,脂多糖1组NLRP3、ASC表达明显上调,Bcl-2表达明显下调(P<0.05);与脂多糖1组比较,脂多糖2组NLRP3、ASC表达明显上调,Bcl-2表达明显下调(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与对照1组比较,脂多糖1组IL-1β、IL-18 mRNA表达明显升高(P<0.05);与脂多糖1组比较,脂多糖2组IL-1β、IL-18 mRNA表达明显升高(2.45±0.27 vs 1.81±0.15,2.54±0.24 vs 1.82±0.19,P<0.05)。结论HMGA1可以加重脂多糖诱导的脓毒症心肌病小鼠心肌细胞焦亡,通过上调Caspase-1依赖性途径加重细胞焦亡,通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2加重细胞凋亡。

摘要： 目的初步探索痤疮丙酸杆菌(P.acnes)低毒性感染对大鼠髓核细胞(NPCs)退变的作用效应与Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)信号通路之间的关系。方法离体培养大鼠NPCs。将实验细胞分为空白组(0.9%氯化钠溶液预处理)、P.acnes组(2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理)、si-NC+P.acnes组(si-NC质粒转染+2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理)和si-NLRP3+P.acnes组(si-NLRP3质粒转染+2×10^(7)CFU/ml P.acnes预处理),各组细胞培养48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定4组细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测4组细胞NLRP3、caspase-1、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)的mRNA及蛋白表达情况。结果P.acnes组IL-1β、IL-18的表达水平较空白组显著上升(均P<0.05);si-NLRP3+P.acnes组IL-1β、IL-18的表达水平较si-NC+P.acnes组显著下降(均P<0.05)。P.acnes组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达水平较空白组显著上升,Aggrecan的mRNA与蛋白表达水平较空白组显著下降(均P<0.05);si-NLRP3+P.acnes组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达水平较si-NC+P.acnes组显著下降,Aggrecan的mRNA与蛋白表达水平较si-NC+P.acnes组显著上升(均P<0.05)。结论P.acnes低毒性感染可以激活NLRP3/caspase-1信号通路,诱发细胞炎症反应和细胞外基质(ECM)降解重构,对NPCs退变具有促进效应;而阻断NLRP3炎性小体可减轻由P.acnes感染诱导的NPCs退变。

摘要： 目的研究孕妇血清、胎盘组织中γ干扰素诱导蛋白16(IFI16)表达水平与胎膜早破(PROM)的关系,为感染性PROM的早期诊断提供参考。方法选取2019年9月—2020年9月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院收治的PROM手术终止妊娠孕妇60例作为研究组。依据孕周将研究组分为足月PROM组[(38.16±1.47)周]和未足月PROM组[(34.87±2.05)周],各30例。选取同期该院足月正常剖宫产的产妇30例作为对照组。对比3组胎盘组织IFI16表达情况,IFI16 mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平及孕妇血清IFI16、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β]水平。结果足月PROM组、未足月PROM组IFI16蛋白阳性率高于对照组(P0.05)。未足月PROM组、足月PROM组胎盘组织IFI16 mRNA、Caspase-1 mRNA相对表达量较对照组高(P<0.05)。未足月PROM组、足月PROM组血清IFI16、IL-6、IL-1β水平较对照组高(P<0.05)。结论IFI16在孕妇血清及胎盘组织中升高可能与PROM孕妇的炎症反应有关,IFI16水平升高对PROM炎症反应可能有预测意义。

摘要： 细胞焦亡是一种主要依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1的促炎程序性细胞死亡,特征是快速的膜破裂和促炎细胞内容物的释放.炎症性肠病(IBD)是一种病因不明的慢性消化道炎症,可能与肠道的上皮屏障功能、共生微生物群、饮食和免疫系统的改变等有关.目前很多研究证明细胞凋亡、细胞自噬在IBD中的作用,而区别于前两者但有与之具有千丝万缕联系的细胞焦亡也逐渐被发现,并证实可能存在于IBD的病程之中.本文将针对细胞焦亡与IBD的联系进行综述.

摘要： 目的 探讨小鼠肝脏缺血再灌注损伤(LIRI)过程中干扰素调节因子-1(IRF-1)对焦亡的影响.方法(1)24只C57BL/6正常雄性小鼠按照随机数字表法分为假手术(Sham)组与缺血再灌注(IR)2 h、6 h和12 h组,每组6只.Sham组不进行IR处理,其他3组采用血管夹夹闭肝中叶、左叶脉管(门静脉、动脉与胆道)60 min后分别再灌注2、6、12 h建立LIRI模型.全自动生化仪检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST);酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)水平;HE染色观察肝脏病理改变;免疫组织化学染色检测IRF-1表达情况;TUNEL染色检测肝脏细胞凋亡和焦亡情况;Western blot检测IRF-1、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Cleaved-Caspase-1及gasdermin D(GSDMD)蛋白水平;透射电镜检测肝组织细胞形态变化.(2)将小鼠正常肝脏AML12细胞分别进行过表达和沉默IRF-1表达后进行模拟IR处理,分为过表达IRF-1+IR组、空载体+IR组、IRF-1 siRNA+IR组及其对照组(NC+IR组).Western blot检测4组细胞IRF-1、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1和GSDMD蛋白水平;透射电镜检测细胞形态变化;流式细胞术检测细胞焦亡情况;酶标仪检测细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)释放量.结果(1)体内实验结果显示,与Sham组比较,IR6 h组和12 h组血清ALT、AST和IL-1β水平均有明显升高(P<0.05),IRF-1、Caspase-1和GSDMD蛋白表达升高(P<0.05);同时肝细胞出现肿胀、排列紊乱、空泡、片状坏死和红细胞淤积并伴有核膜损伤和线粒体肿胀.(2)体外AML12细胞过表达IRF-1后Cleaved-Caspase-1和GSDMD的表达增加,而敲低IRF-1表达后Caspase-1和GSDMD表达随之减少(P<0.05).沉默IRF-1表达后,与NC+IR组相比,IRF-1 siRNA+IR组细胞质膜和核膜的破坏减轻,细胞焦亡率下降,LDH释放量减少约20％(P<0.05).结论 IRF-1可通过调节Caspase-1和GSDMD的表达以及IL-1β的释放导致小鼠LIRI.

摘要： 本发明提供式(I)化合物：

摘要： 本发明提供式I化合物，其中R

摘要： 本发明提供式(I)化合物：

摘要： 本发明涉及用于体内显像的诊断显像剂。此类显像剂包含用显像部分标记的合成半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3抑制剂，所述显像部分适合体内诊断显像。本发明还提供包含所述显像剂的药物组合物和放射性药物组合物，以及用于制备放射性药物组合物的药盒。本发明还提供半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3抑制剂的螯合剂缀合物，它们适合用于制备包含放射性金属离子或顺磁性金属离子的显像剂。在涉及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的各种疾病状态中，本发明显像剂可用于其体内的诊断显像和/或治疗监测。

摘要： 公开了4-芳基氨基-喹唑啉及其类似物，它们是有效的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的活化剂和细胞程序死亡的诱导剂。本发明化合物可用于治疗各种其中发生异常细胞的失控生长和扩散的临床病症。

摘要： 本发明提供式(I)化合物，其中R

摘要： 本公开涉及一种药物递送系统，包含神经营养剂、凋亡信号传导片段抑制剂(FAS)或FAS配体(FASL)抑制剂、肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)或TNF受体(TNFR)抑制剂、线粒体肽、寡核苷酸、趋化因子抑制剂、半胱氨酸‑天冬氨酸蛋白酶抑制剂，包括这些化合物的任何组合；以及任选的持续递送组分。这种类型的药物递送系统可用于治疗医学病症，例如遗传性或与年龄相关的脉络膜、视网膜、视神经疾患或视神经变性；耳部疾病；神经系统或CNS疾患；或相关病症；或与血管或血液循环的闭塞或阻塞有关的病症，例如中风、心肌或肾梗死。还描述了药物、制造药物的方法、试剂盒和其他相关产品或方法。

摘要： 本公开涉及一种药物递送系统，所述药物递送系统包含神经营养剂、凋亡信号传导片段抑制剂(FAS)或FAS配体(FASL)抑制剂、肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)或TNF受体(TNFR)抑制剂、线粒体肽、寡核苷酸、趋化因子抑制剂、或半胱氨酸‑天冬氨酸蛋白酶，包括这些化合物的任何组合；以及任选的持续递送组分。这种类型的药物递送系统可用于治疗医学病症，例如遗传性或与年龄相关的脉络膜、视网膜、视神经疾患或视神经变性；耳部疾病；神经系统或CNS疾患；或相关病症；或与血管或血液循环的闭塞或阻塞有关的病症，例如卒中、心肌或肾梗死。还描述了药物、制造药物的方法、试剂盒和其他相关产品或方法。

摘要： 本发明公开了一种新型半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂及其制备方法和用途。该抑制剂具有式I所示结构的化合物或其光学异构体。本发明的化合物与临床药物IDN-6556相比有更低的IC50，并且比动物实验药物Q-VD-OPH更好的IC50，因此本发明的化合物很有希望应用于制备治疗乙型肝炎药物。

摘要： 本发明提供式(I)化合物：