免疫印迹

摘要： 背景:胚胎期的神经干细胞可向神经元和神经胶质细胞分化,而实际应用中希望神经干细胞更多地分化成神经元。因此,研究神经干细胞向神经元的定向分化机制至关重要。DNA拓扑异构酶Ⅱ是一类广泛存在于生物体内的核蛋白,在DNA复制、修复、转录、重组以及染色体分离等生命活动中发挥重要作用。目的:探讨神经干细胞及其向神经元定向分化过程中DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及意义。方法:从ICR小鼠(E12.5 d)大脑皮质中分离培养神经干细胞,将神经干细胞球消化成单细胞后,以5×10^(8)L^(-1)密度接种于用Matrigel铺底的培养皿上,加入含B27、N2、10μg/L胶质细胞源性神经营养因子的成神经诱导分化条件培养液,诱导培养1,2,3 d采用免疫细胞化学、Western blot、实时定量PCR检测DNA拓扑异构酶Ⅱα和β的表达。结果与结论:①DNA拓扑异构酶Ⅱα阳性细胞在神经球内数量较多,且均匀分布,在向神经元诱导分化后阳性细胞有所减少;DNA拓扑异构酶Ⅱβ阳性细胞在神经球内数量较少,主要分布在神经球中央,在向神经元诱导分化后强表达的阳性细胞开始增多,在诱导分化2 d达到高峰,之后呈减少趋势;②在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱα蛋白和mRNA表达较高,在向神经元诱导分化后逐渐降低;在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱβ蛋白和mRNA表达较低,在向神经元诱导分化后显著增高;③通过实验得出DNA拓扑异构酶Ⅱβ参与神经干细胞向神经元的定向分化。

摘要： 背景:胚胎期的神经干细胞可向神经元和神经胶质细胞分化,而实际应用中希望神经干细胞更多地分化成神经元.因此,研究神经干细胞向神经元的定向分化机制至关重要.DNA拓扑异构酶Ⅱ是一类广泛存在于生物体内的核蛋白,在DNA复制、修复、转录、重组以及染色体分离等生命活动中发挥重要作用.目的:探讨神经干细胞及其向神经元定向分化过程中DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及意义.方法:从ICR小鼠(E12.5 d)大脑皮质中分离培养神经干细胞,将神经干细胞球消化成单细胞后,以5×108 L-1密度接种于用Matrigel铺底的培养皿上,加入含B27、N2、10 μg/L胶质细胞源性神经营养因子的成神经诱导分化条件培养液,诱导培养1,2,3 d采用免疫细胞化学、Western blot、实时定量PCR检测DNA拓扑异构酶Ⅱα和β的表达.结果与结论:①DNA拓扑异构酶Ⅱα阳性细胞在神经球内数量较多,且均匀分布,在向神经元诱导分化后阳性细胞有所减少;DNA拓扑异构酶Ⅱβ阳性细胞在神经球内数量较少,主要分布在神经球中央,在向神经元诱导分化后强表达的阳性细胞开始增多,在诱导分化2 d达到高峰,之后呈减少趋势;②在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱα蛋白和mRNA表达较高,在向神经元诱导分化后逐渐降低;在神经球中DNA拓扑异构酶Ⅱβ蛋白和mRNA表达较低,在向神经元诱导分化后显著增高;③通过实验得出DNA拓扑异构酶Ⅱβ参与神经干细胞向神经元的定向分化.

摘要： 目的:研发和制备心钠肽(ANP)的兔单克隆抗体,检测其在心窦房结、传导束的免疫特性表达及其在心脏疾病中的检测应用。方法:采用固相多肽合成法合成ANP特异性多肽,对新西兰大耳白兔进行免疫,取出兔脾细胞与兔的骨髓瘤细胞240E-W3进行融合,采用兔单克隆抗体技术制备兔单抗,运用免疫印迹、免疫组织化学法鉴定其特异性和敏感性。收集24例人心组织,其中呼吸系统疾病、心血管系统疾病、其他疾病导致死亡的比例分别占33%、54%、13%,对24例人心组织进行免疫组织化学检测ANP表达。结果:制备抗ANP的兔单克隆抗体(ab225873),经免疫印迹检测显示,ANP在人心组织中可以特异性识别大小为16 kD的条带。免疫组织化学结果显示,ANP特异性表达在成人心组织的窦房结和左心室的传导束,但心室肌以及成人的其他组织中不表达。24例人心组织中心房肌阳性率为100%,窦房结阳性率为100%,传导束阳性率为50%,心室肌阳性率为0。结论:本研究制备的抗ANP兔单克隆抗体(ab225873)在免疫印迹和免疫组织化学上均表现有良好的特异性与敏感性,能特异识别心窦房结、传导束,为研究窦房结、传导束相关疾病提供分子检测工具。

摘要： 结直肠癌是世界第三大最常见癌症[1]。其发病率和死亡率在全球范围内不断增加,仅2020年全球结直肠癌新发病例为193.16万,死亡病例93.52万,因此迫切需要降低发病率和死亡率[2]。本实验通过二维色谱质谱联用技术(LC-MS)及免疫印迹探究TOMM40在结直肠癌组织及癌旁组织的表达及意义,为结直肠癌的筛查和诊断提供一个新的方向。1材料与方法1.1一般资料本研究所选用的结直肠癌及配对癌旁组织标本经病理医师确认均为DukesB期腺癌,共16对,来源于胃肠外科手术切除,标本采集时间段为2018年1月到2020年12月,所有患者均签署了知情同意书,且保证术前没有经过任何方式治疗。

摘要： 实验旨在研究布莱凯特黑牛MYPN基因CDS区序列和表达情况,探讨MYPN基因理化性质及表达规律,为探究其与肌肉生长发育关系奠定基础。克隆结果表明:MYPN基因CDS区全长2 841 bp;进化树结果显示:布莱凯特黑牛MYPN基因与牛(100%)、绵羊(97.57%)、山羊(97.50%)同源性高;生物信息学分析表明:MYPN编码946个氨基酸,为亲水性不稳定碱性蛋白;qRT-PCR结果显示:MYPN在背最长肌中表达量最高;免疫组化显示:MYPN主要在肌浆内的肌原纤维中表达;Western Blot结果显示:MYPN蛋白在肌肉中表达量最高。综上,MYPN参与肉牛肌肉生长发育的调节,可作为肉质性状辅助标记基因。

摘要： 副溶血性弧菌外膜蛋白BamA是β-桶组装BAM复合物的核心成分,参与细胞外膜蛋白运送和安装过程,是潜在的新型靶标抗原,目前其在免疫检测抗原和疫苗中的潜在价值尚未有研究报道。本研究通过生物信息学软件SnapGene和Protean分析BamA的序列并筛选出多肽,采用PCR扩增出外膜蛋白BamA的基因片段,构建重组质粒pET-28a(+)-BamA;经大肠杆菌BL21诱导表达BamA重组蛋白(90ku);多肽与BSA偶联,制备的抗原免疫BALB/c小鼠制备了血清。采用酶联免疫分析(ELISA)和蛋白质印迹法(Westernblot)测定BamA蛋白及多肽免疫血清对24株弧菌的交叉反应。ELISA测定结果表明,免疫血清对BamA蛋白的效价在121K以上,对副溶血性弧菌等弧菌的效价较弱(0.5K);免疫印迹结果显示,BamA蛋白血清与副溶血性弧菌CICC21617、CICC21618、杀岩龙虾弧菌和非O1型霍乱弧菌等弧菌属细胞裂解物中90ku左右的蛋白可发生特异性反应,而对费氏另类弧菌、嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌等非弧菌属无交叉反应。弧菌外膜蛋白BamA具有弧菌属保守性并可以诱导产生弧菌特异性抗体,多肽在菌体表面的暴露性可能受到其他抗原的影响,这给后续弧菌诊断抗原和疫苗抗原研究提供了依据。

摘要： 目的探讨免疫印迹法(immunoblot,IB)与间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)在副肿瘤性天疱疮(paraneoplastic pemphigus,PNP)自身抗体检测中的应用。方法收集2007年7月—2017年10月上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的11例PNP患者的血清和4例健康体检者血清。分别应用以鼠膀胱和猴食道为底物的IIF对患者血清进行检测;同时环切包皮分离表皮后提取表皮抗原成分,进行IB分析。结果以鼠膀胱为底物的IIF检测中,11例PNP患者血清中有6例呈阳性表达;以猴食道为底物的IIF检测中,11例结果均为阴性。IB检测中,7例检出IgG抗体,均与相对分子质量为190000 Da的蛋白多肽结合,其中5例同时与相对分子质量为210000 Da的蛋白多肽结合。两种方法合用共检出8例阳性。对照组未检出PNP相关的特异性抗体。结论以鼠膀胱为底物的IIF检测可作为PNP的过筛试验,而利用环切包皮分离表皮行IB检测可作为前者的补充。

摘要： 以羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S_(13-b)S_(13-b))为材料,提取柱头RNA,利用RT-PCR分离羽衣甘蓝柱头丝裂原活化蛋白激酶4(MAPK4)基因。结果表明:获得的Bo MAPK4 c DNA含有一个1 122 bp开放阅读框,编码373个氨基酸,具有丝氨酸/苏氨酸结构域,无信号肽和跨膜结构。羽衣甘蓝Bo MAPK4与油菜(B.napus)Bn MAPK4、芜菁(B.rapa)Br MAPK4、拟南芥(Arabidopsis thaliana)At MAPK4的氨基酸序列一致性分别为99.7%、99.5%、95.4%。将Bo MAPK4编码区的序列构建到原核表达载体p ET-14b上,并转化到BL21(DE3)大肠杆菌(Escherichia coli)中进行原核表达。SDS-PAGE结果显示,在分子量大小约45 k Da处有Bo MAPK4重组蛋白特异性表达。利用亲和层析的方法获得高纯度的重组Bo MAPK4蛋白。利用获得的重组Bo MAPK4蛋白免疫小鼠,制备Bo MAPK4的多克隆抗体。提取羽衣甘蓝萼片、花瓣、花药、柱头、花柱和子房的总蛋白,利用免疫印迹的方法进行蛋白表达检测,结果发现Bo MAPK4在花瓣、花药和子房中表达的较少,在萼片和花柱中表达的较多,在柱头中的表达量最高。这些研究为探讨Bo MAPK4的生物学功能奠定了基础。

摘要： 目的:对119例HIV初筛阳性患者其年龄、性别和结果进行剖析,进而为实验室筛查和人群防治提供参考建议。方法:收集2021年8月至2022年7月,在浙江大学邵逸夫医院下沙院区入院检查和门诊咨询检测时HIV初筛阳性的患者,119例。采用ELISA酶联免疫分析法和迈瑞化学发光法进行检测,采用Western blot确诊复检。就此分析年龄、性别与结果之间的关系。结果:119例标本中,Western blot确诊结果显示,77例“HIV抗体阳性”,青年组:18~44岁(77.9%);中年组:45~59岁(15.6%);中老年组:60~74岁(3.9%);老年组:75~89岁(2.6%)。男性阳性占比94.8%,女性阳性占比5.2%。结论:艾滋病病毒虽各个人群均易感染,但由于青年性生活比较频繁,阳性比例较高。性别上差异,男性阳性占比远高于女性。应加强青年预防HIV宣传和教育工作,增强自我防范意识。在HIV防治中,保持固定的性伴侣,正确使用安全套,进行安全的性行为。杜绝毒品,减少不必要的输血,婚前检查应尽早进行HIV咨询检查,减少HIV的传播。

摘要： 结合教材对抗原抗体检测的描述,从酶联免疫吸附试验、免疫层析技术、免疫印迹技术、化学发光免疫分析以及免疫PCR技术5个方面分析了几种常见的抗原抗体体外检测技术,提出相应的教学建议,拓宽学生的知识视野.

摘要： 本研究通过将重组质粒pET-32α-ROP2转化到表达菌E.coli BL-21中,接种到氨苄抗性的LB液体培养基中,37°C摇床培养至OD600值为0.6～0.8.加入诱导剂IPTG至终浓度为0.5mM,20°C摇床中诱导过夜.离心收集菌体,Tris-HCl缓冲液重悬细菌.超声裂菌,离心,沉淀用含有8M尿素的Tris HCI(pH8.0)缓冲液溶解其中的包涵体蛋白.用纯化的ROP2重组蛋白免疫新西兰大白兔.第一次免疫后加强免疫两次,每次间隔15天.免疫后45天,对兔实施安乐死,并采集动脉血.离心分离兔血清,亲和纯化法分离纯化IgG抗体.用ELASA的方法检测该多克隆抗体的效价,用蛋白免疫印迹法检测其特异性.利用人胶质瘤细胞(U251)制备细胞爬片,弓形虫速殖子侵染3小时后,用PBS缓冲液洗去未侵染的速殖子.用4％多聚甲醛固定细胞.透化后的细胞用10％BSA封闭1小时.加入封闭液稀释后的一抗(抗ROP2多克隆抗体1:500),37°C轻缓摇动孵育2小时.一抗结合后用PBS缓冲液洗3次,每次5分钟.加入二抗(辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔1:100),37°C条件下避光孵育lh.用PBS缓冲液洗涤3次,每次5分钟.100ng/ml DAPI37°C染色10min.PBS缓冲液洗涤3次,每次5分钟.风干后封片.在荧光显微镜下观察ROP2抗体在细胞内的定位,拍摄照片.细胞内免疫荧光显示ROP2蛋白定位在弓形虫纳虫泡膜上.

摘要： 目的：探讨人类获得性免疫缺陷病毒抗体(anti-HIV)初筛检测结果(酶联免疫吸附检测,S/CO值)、确证检测结果(免疫印迹法,WB)及HIV RNA定量检测结果的相关性.方法：用WB确证试剂及2种国产抗-HIV ELISA试剂、1种进口HIV抗原抗体诊断试剂(ELISA法)及1种核酸检测试剂对86例血液中心/血站抗-HIV初筛结果呈阳性反应性样本进行检测分析.结果：86例样本中,WB确证检测结果阳性53例(53/86,61.6％),不确定8例(8/86,9.3％),阴性25例(25/86,29.1％).与确证试验结果相比,当国产ELISA试剂检测的样本吸光度值与阳性判定值(cut off)的比值(S/CO比值)≥10时,假阳性率≤2.33％,当1≤S/CO＜ 10,假阳性率为4.65％.与确证试剂检测结果相比,当病毒栽量≥103IU/ml时,假阳性率为1.16％,当病毒载量低于103IU/ml时,假阳性率为6.98％.结论：抗-HIV ELISA S/CO值及HIV RNA定量检测结果与确证检测结果有一定相关性,S/CO比值及病毒栽量对确证检测结果的判定有一定参考意义.

摘要： 根据猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白的基因组序列，设计一对引物，采用RT-PCR方法扩增出M基因，将其克隆至原核表达载体pMXB10,构建了重组质粒pMXB-M，经测序鉴定正确后转化感受态细胞BL21(DE3)，并进行IPTG诱导表达。结果表明重组菌pMXB-M表达的融合蛋白MBP-M-CBD(rM)的分子质量约为951ku。在IPTG的浓度为0.8mmol/L，诱导时间为5h时，重组菌的表达效果最好，重组蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。Western-blot结果显示，rM能与兔抗PEDV多克隆血清及PEDVM蛋白单克隆抗体发生特异的免疫印迹反应，表明原核表达的rM蛋白具有良好的反应原性，为进一步开展关于PEDV M蛋白的研究奠定基础。

摘要： 胞外蛋白酶（ECPase）是哈维氏弧菌GYC1108-1胞外产物的主要致病因子，经鉴定其为半胱胺酸蛋白酶，分子量约55KD，能够分解脱脂奶中的酪蛋白，命名为1108-ECPase。本实验建立了胞外蛋白酶活性平板法检测1108-ECPase和YZ-ECPase的相对酶活（YZ为能够分泌目的蛋白酶的重组菌），并利用这个方法确定了细菌分泌ECPase达最高峰的培养时间为36h，粗提ECPase最适的饱和硫酸铵浓度为70%。 GYC1108-1和YZ培养上清经硫酸铵盐析，SephadexG-25凝胶过柱后，得到较为纯化的1108-ECPase和YZ-ECPase。选择白油、蜂胶和弗氏三种不同佐剂与适量抗原混匀，分别免疫3只ICR小鼠，并设不加佐剂免疫组及空白组作为对照。三次免疫后制备小鼠血清，间接ELISA测定抗体效价，除空白对照外，其它8组小鼠的免疫血清效价达1:1.6×104～1:2.56×105，免疫组的效价从高到低依次为弗氏＞白油＞蜂胶＞不加佐剂，不同佐剂的免疫效果依次为：弗氏＞白油＞蜂胶。免疫印迹实验结果表明：小鼠血清在55KD处有明显的反应条带。以上结果表明，ECP具有很好的免疫原性，这为下一步研究基因工程疫苗奠定了基础。

摘要： 目的：研究组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在马兜铃酸肾病(AAN)中的表达,探讨在马兜铃酸肾病中发生、发展中作用。方法：应用免疫组织化学和免疫印迹法检测在AAN中和正常对照组中HDAC1的表达情况。结果：HDAC1阳性着色主要分布在细胞核上,且在4、8、16mg/kg/day的表达强度(2.60±1.45,3.78±1.98,4.23±1.60)明显高于正常对照组(1.65±1.78)。免疫印迹检测提示,HDAC1在4、8、16 mg/kg/day的相对表达量分别为(0.38±0.12,0.49±0.20,0.67±0.42),显著高于对照组(0.30±0.12)。结论：HDAC1在AAN肾脏组织中的高表达,可能在AAN的发生、发展中起重要作用。

摘要： 目的：流感神经氨酸酶激发的免疫反应对流感有保护作用。然而，流感疫苗中神经氨酸酶的含量并未规定。因此，建立简单的神经氨酸酶含量测定的方法是必要的。由于流感病毒的高突变率，根据毒株的变化制备相应的抗体显然费时费力。本研究试图建立针对甲型流感病毒神经氨酸酶的通用抗体，一劳永逸的解决抗体问题。方法：通过生物信息学方法对流感病毒数据库中神经氨酸酶基因进行序列分析，寻找保守序列并合成多肽。将多肽与载体蛋白匙孔蓝蛋白（KLH）偶联，多次皮下免疫家兔后取脾制备单克隆抗体。结果：序列分析发现神经氨酸酶N端12个氨基酸与头部9个氨基酸高度保守，偶联多肽经四次免疫后效价达1：80,000，成功制备杂交瘤细胞与单克隆通用抗体。以免疫印迹方法证明两通用抗体均能与流感病毒N1～N9亚型神经氨酸酶特异性反应。结论：通过寻找保守蛋白序列并偶联到载体上，免疫家兔获得了针对甲型流感病毒神经氨酸酶的通用抗体。

摘要： 目的:建立流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。方法：采用免疫印迹，糖蛋白染色，edman N端测序方法确定甲流H1N1疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，Lowry蛋白定量与SDS-PAGE密度扫描的方法确定神经氨酸酶含量。结果：确定甲流疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，并且测定了其含量。结论：成功建立了流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。

摘要： 本研究以人胱抑素C(Cystatin C)作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化鸡卵黄IgY抗体,经蛋白质定量、SDS-PAGE、Western Blot和ELISA方法对IgY抗体进行分析和鉴定.结果显示免疫后14天即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素C的特异性抗体,抗体效价在28天达到最高峰1∶32000,并可维持2个月以上；收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体IgY,还原性SDS-PAGE显示抗体IgY为两条带(分子量为65kDa和21kDa),抗体纯度可达92％,得率为36.5mg/个鸡蛋,抗体检出敏感度为15.63ng/ml; Western Blot结果证明该抗体具有高度的特异性.

摘要： 本研究以人胱抑素C(Cystatin C)作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化鸡卵黄IgY抗体,经蛋白质定量、SDS-PAGE、Western Blot和ELISA方法对IgY抗体进行分析和鉴定.结果显示免疫后14天即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素C的特异性抗体,抗体效价在28天达到最高峰1∶32000,并可维持2个月以上；收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体IgY,还原性SDS-PAGE显示抗体IgY为两条带(分子量为65kDa和21kDa),抗体纯度可达92％,得率为36.5mg/个鸡蛋,抗体检出敏感度为15.63ng/ml; Western Blot结果证明该抗体具有高度的特异性.

摘要： 本研究以人胱抑素C(Cystatin C)作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化鸡卵黄IgY抗体,经蛋白质定量、SDS-PAGE、Western Blot和ELISA方法对IgY抗体进行分析和鉴定.结果显示免疫后14天即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素C的特异性抗体,抗体效价在28天达到最高峰1∶32000,并可维持2个月以上；收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体IgY,还原性SDS-PAGE显示抗体IgY为两条带(分子量为65kDa和21kDa),抗体纯度可达92％,得率为36.5mg/个鸡蛋,抗体检出敏感度为15.63ng/ml; Western Blot结果证明该抗体具有高度的特异性.

摘要： 检测自身免疫性疾病抗体的免疫印迹试剂盒及其制备方法，涉及一种检测多种自身免疫性疾病相关抗体的免疫印迹试剂盒，解决目前尚无用于多种自身免疫性疾病体检筛查的免疫印迹产品的技术不足；在所述的硝酸纤维素膜或尼龙膜上含有：分别由dsDNA、Sm/RNP、CCP、SSA、SSB、GAD、ICA、IA-2A、TG、AMA-M2共10种中的至少两种天然或重组抗原包被而成的两条以上平行的检测线，1条高浓度质控带，1条中浓度质控带，及1条低浓度质控带。克服单一自身抗体检测灵敏度和特异性不足、数种疾病相关自身抗体逐一单独检测在操作上的繁琐，大大提高检测效率和结果判断的准确度。

摘要： 本发明涉及抗体检测技术领域，特别涉及一种风疹病毒IgM抗体检测免疫印迹膜条及免疫印迹试剂盒。该膜条的制备方法包括如下步骤：将风疹病毒用抗原稀释液进行稀释，在95～105°C条件下处理4～6min；抗原稀释液的组成为：Tris‑HCl 8vt％～12vt％，SDS 3w/v％～5w/v％，甘油15vt％～25vt％，溴酚蓝0.01w/v％～0.02w/v％，水补足；抗原稀释液不包括还原剂；对抗原进行电泳分离，将风疹病毒蛋白转印至硝酸纤维膜，封闭。本发明将纯化后的风疹病毒经凝胶电泳对目的蛋白进行再次纯化，减少因目的蛋白中杂蛋白引起的非特异性反应，提升检测的灵敏度和特异性。

摘要： 本发明公开了一种检测水稻条纹花叶病毒(RSMV)的基于免疫胶体金的斑点免疫印迹方法及其应用。利用抗水稻条纹花叶病毒单克隆抗体1D4建立成快速灵敏、简单方便、准确高效地检测水稻和传毒介体电光叶蝉体内RSMV的基于免疫胶体金的斑点免疫印迹血清学检测技术，并开发成快速检测试剂盒。该斑点免疫印迹检测技术检测感染RSMV水稻病叶和携带RSMV电光叶蝉的灵敏度分别达到1:40960(w/v,g/mL)和1:5120倍稀释(单头/μL)。此简单快速、灵敏特异、准确高效的RSMV检测技术及其检测试剂盒为水稻条纹花叶病的快速诊断、抗病育种、预测预警及科学防控提供技术和物质支撑。

摘要： 本发明涉及一种检测自身免疫性肾病相关抗体的免疫印迹试剂盒及其制备方法，属于生物医学领域；包括：反应膜条、酶结合物、显色底物、洗涤液、样本稀释液和终止液，所述的反应膜条由载体和固定在载体上的硝酸纤维素膜或尼龙膜所组成，在所述的硝酸纤维素膜或尼龙膜上含有：分别由C1q、MPO、PR3、GBM、Nucleosome、dsDNA、PLA2R和YHSD7A八种抗原中4～8种天然或重组抗原包被而成特定组合的平行的检测线，1条高浓度为30~50μL/mL判断指示带，1条中浓度15~25μL/mL判断指示带，1条低浓度1~10μL/mL判断指示带；本发明克服单一自身抗体检测灵敏度和特异性不足、数种疾病相关自身抗体逐一单独检测在操作上的繁琐，大大提高检测效率和结果判断的准确度。

摘要： 检测自身免疫性疾病抗体的免疫印迹试剂盒及其制备方法，涉及一种检测多种自身免疫性疾病相关抗体的免疫印迹试剂盒，解决目前尚无用于多种自身免疫性疾病体检筛查的免疫印迹产品的技术不足；在所述的硝酸纤维素膜或尼龙膜上含有：分别由dsDNA、Sm/RNP、CCP、SSA、SSB、GAD、ICA、IA-2A、TG、AMA-M2共10种中的至少两种天然或重组抗原包被而成的两条以上平行的检测线，1条高浓度质控带，1条中浓度质控带，及1条低浓度质控带。克服单一自身抗体检测灵敏度和特异性不足、数种疾病相关自身抗体逐一单独检测在操作上的繁琐，大大提高检测效率和结果判断的准确度。

摘要： 本发明提供一种免疫化学和生物化学分析方法，特别适用于婴儿、采血困难和不愿采血者快速检测尿液中人类免疫缺陷病毒-I型(HIV-1)抗体的垂直流免疫印迹法。本发明是通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电转，将HIV-1抗原包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上，然后将膜粘合于自制反应槽的底部，并与真空抽滤系统结合构成垂直流免疫印迹法检测方法。该方法使尿液样本在可控时间内垂直通过硝酸纤维素膜，加速抗原抗体反应，增加抗原抗体的结合度，从而提高检测灵敏度。通过本发明可快速检测尿液中的HIV-1抗体，确认HIV-1感染状况。可用于实验室诊断确认、药物治疗效果评价等，适宜基层普及使用，具有较大的推广应用价值。

摘要： 本发明公开了一种免疫印迹用膜条及其制作方法，利用定位工装对衬底进行固定，利用定位工装上的限位槽对待贴附于衬底上的各长条NC膜进行限位，无需另外进行测量，且确保了贴附精度，制备后的膜条上的各抗体线之间相互平行，确保了膜条的检测精度，同时制备流程简单，大大降低了操作人员的操作强度。

摘要： 本实用新型提供一种免疫印迹膜的载持结构及免疫印迹仪。免疫印迹膜的载持结构包括附板和防水胶带，所述附板竖直设置，免疫印迹膜背面靠于所述附板表面，所述防水胶带粘接于免疫印迹膜和所述附板之间。采用本实用新型技术方案，附板给免疫印迹膜提供附着平面，确保在移载过程中，免疫印迹膜的位置保持稳定；直接通过防水胶带来固定免疫印迹膜顶部，方便快捷，提高了实验效率；防水胶带对免疫印迹膜在试剂或清洗液中浮动的规制作用较小，有助于印迹膜与试剂或清洗液充分反应，提高实验结果准确度。

摘要： 本实用新型提供一种蛋白免疫印迹孵育盒及蛋白免疫印迹孵育装置，属于实验器材技术领域，包括盒体，所述盒体具有容纳空间，所述容纳空间被挡板分隔为多个小格；与所述盒体配合的盒盖；以及，至少一块隔板，每块所述隔板沿大致平行于所述盒体底壁的方向可拆卸安装于一个所述小格内，并将所述小格分隔为靠近所述盒体底壁的第一容纳空间以及远离所述盒体底壁的第二容纳空间；所述隔板上设置有连通所述第一容纳空间与第二容纳空间的孔。本实用新型通过在盒体小格内设置隔板，将两张膜隔开，避免了振摇时膜的重叠。成功的用一个格子的液体封闭两张膜，从而大大节省了抗体的使用量且对实验结果没有影响。

摘要： 检测自身免疫性疾病抗体的免疫印迹试剂盒，涉及一种检测多种自身免疫性疾病相关抗体的免疫印迹试剂盒，解决目前尚无用于多种自身免疫性疾病体检筛查的免疫印迹产品的技术不足；在所述的硝酸纤维素膜或尼龙膜上含有：分别由dsDNA、Sm/RNP、CCP、SSA、SSB、GAD、ICA、IA-2A、TG、AMA-M2共10种中的至少两种天然或重组抗原包被而成的两条以上平行的检测线，1条高浓度质控带，1条中浓度质控带，及1条低浓度质控带。克服单一自身抗体检测灵敏度和特异性不足、数种疾病相关自身抗体逐一单独检测在操作上的繁琐，大大提高检测效率和结果判断的准确度。