Gli1

摘要： 目的:利用体外培养的细胞研究抑制Hedgehog信号通路对恶性胸膜间皮瘤细胞增殖的影响。方法:使用浓度不同的Hedgehog通路特异性抑制剂Vismodegib,作用于恶性胸膜间皮瘤细胞;使用CCK-8法检测细胞的增殖抑制状态;RT-PCR方法检测恶性胸膜间皮瘤细胞中Gli1、VEGF、Wnt、TGF-βmRNA表达水平变化。结果:经Vismodegib浓度为25μmol/L作用48 h后,细胞形态有所改变;CCK-8检测显示经5、10、15、20、25、30μmol/L Vismodegib处理48 h后,细胞的增殖抑制率分别为10.31%、25.59%、34.53%、43.13%、60.69%、88.24%,Vismodegib能够显著抑制恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖;进一步分析20.38μmol/L浓度Vismodegib作用于恶性胸膜间皮瘤细胞6、12、24、48 h后及5、10、15、20、25μmol/L Vismodegib处理恶性胸膜间皮瘤细胞48 h后,细胞Gli1、VEGF、Wnt、TGF-βmRNA的表达均下调(P<0.05)。结论:Vismodegib可以明显抑制恶性胸膜间皮瘤细胞的增殖,Hedgehog信号通路的激活可能是维持恶性胸膜间皮瘤细胞生长所须条件,下调Hedgehog信号通路抑制下游靶基因的表达。

摘要： 目的研究Hedgehog(Hh)通路转录因子Gli1表达及6-姜烯酚介导Hh/Gli1通路对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及分子机制。方法应用慢病毒建立过表达Gli1基因MDA-MB-231稳转细胞株;qRT-PCR及Western blot实验验证Gli1过表达效率;CCK-8和EdU实验检测Gli1表达及6-姜烯酚对细胞活力的影响;细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测Hh通路相关基因蛋白表达水平。结果成功建立MDA-MB-231-Gli1过表达稳转细胞株,当Gli1基因过表达时,细胞侵袭迁移能力明显提高,MDA-MB-231细胞中Hh通路基因Gli1,EMT标志基因Vimentin及Hippo通路基因YAP、TEAD4表达升高;应用Hh/Gli通路抑制剂Gant61抑制Gli1表达时,增殖、侵袭、迁移能力降低。应用6-姜烯酚处理细胞其增殖及侵袭迁移能力减弱,且Hh通路基因Gli1、Vimentin、YAP、TEAD4蛋白表达降低。结论Gli1基因能促进MDA-MB-231细胞侵袭迁移能力;6-姜烯酚能够通过Hedgehog信号通路抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭迁移能力,转录因子Gli1可能是其作用靶点之一。

摘要： 目的:探讨胶质瘤相关癌基因同源物1 (Gli1)和超音刺猬因子(Shh)在卵巢子宫内膜异位症(EMT)在位和异位子宫内膜的表达及意义。方法:选取青岛大学附属医院2018年1月至2019年10月手术的50例EMT患者的在位子宫内膜(EMT1组)和异位子宫内膜(EMT2组),同期50例正常子宫内膜(对照组),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法和免疫组化法检测三组内膜Gli1、Shh mRNA和蛋白的表达,分析EMT组织中Gli1与Shh表达相关性,及Gli1和Shh蛋白表达与EMT患者临床分期及术后复发的关系。结果:EMT在位和异位子宫内膜Gli1、Shh mRNA和蛋白表达均高于对照组(P 0.05)。EMT组织中,Gli1与Shh mRNA、蛋白表达均呈正相关(r = 0.621;r = 0.637, P 0.05),临床分期III~IV期EMT患者Gli1和Shh蛋白高表达率高于I~II期患者(P 0.05)。手术年龄轻、Gli1高表达是EMT患者术后复发的危险因素(P 0.05)。结论:Gli1、Shh在EMT在位和异位子宫内膜表达上调,与EMT临床分期相关,Gli1、Shh可能参与了EMT的发生发展,Gli1高表达提示EMT患者术后复发风险高。

摘要： Discoidin Domain Receptor 2(DDR2)is a collagen-activated receptor kinase that,together with integrins,is required for cells to respond to the extracellular matrix.Ddr2 loss-of-function mutations in humans and mice cause severe defects in skeletal growth and development.However,the cellular functions of Ddr2 in bone are not understood.Expression and lineage analysis showed selective expression of Ddr2 at early stages of bone formation in the resting zone and proliferating chondrocytes and periosteum.Consistent with these findings,Ddr2^(+)cells could differentiate into hypertrophic chondrocytes,osteoblasts,and osteocytes and showed a high degree of colocalization with the skeletal progenitor marker,Gli1.A conditional deletion approach showed a requirement for Ddr2 in Gli1-positive skeletal progenitors and chondrocytes but not mature osteoblasts.Furthermore,Ddr2 knockout in limb bud chondroprogenitors or purified marrow-derived skeletal progenitors inhibited chondrogenic or osteogenic differentiation,respectively.This work establishes a cell-autonomous function for Ddr2 in skeletal progenitors and cartilage and emphasizes the critical role of this collagen receptor in bone development.

摘要： 目的:探讨血清胶质瘤相关癌基因1(Gli1)和血管内皮生长因子(VEGF)水平与前列腺癌转移的相关性。方法:选取2015年1月至2020年12月于我院确诊为前列腺癌的患者174例,检测血清Gli1和VEGF水平,以中位数为分界点,分别比较低Gli1组和高Gli1组、低VEGF组和高VEGF组患者病理特征分布差异,比较转移和未转移组Gli1和VEGF水平差异,分析二者相关性以及二者是否为转移的危险因素,采用ROC曲线评估二者单独以及联合检测对前列腺癌转移的诊断价值。结果:高Gli1组的Gleason分级≥8分、T3/T4期、前列腺癌转移的比例显著高于低Gli1组,高VEGF组上述指标的比例显著高于低VEGF组(均P<0.05)。前列腺癌转移患者血清Gli1和VEGF水平显著高于未转移者(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,前列腺癌患者血清Gli1和VEGF水平显著正相关(r=0.811,P=0.000)。二元多因素Logistic回归分析结果显示,血清Gli1和VEGF水平是前列腺癌是否转移的独立危险因素(OR=1.011,P=0.036;OR=1.931,P=0.001)。ROC曲线分析结果显示,二者联合检测诊断前列腺癌转移的曲线下面积(AUC)为0.932,灵敏度和特异度分别为88.6%和84.6%。结论:血清Gli1和VEGF水平与前列腺癌转移存在相关性,二者联合检测对前列腺癌转移具有一定的诊断价值。

摘要： 目的 探讨大鼠脑梗死后Sonic Hedgehog (Shh)信号通路对血-脑脊液屏障(bloodcerebrospinal fluid barrier,BCFB)的影响及可能机制。方法 采用线栓法建立大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型。Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为3组:假手术组、溶剂对照组和特异性阻断剂环巴胺组(10mg·kg^(-1))。术后24h分别采用免疫组织化学方法、Western blot及RT-PCR观察缺血周围区glioma-associated oncogene homolog 1 (Gli1)和Claudin-5的表达水平,干湿重法测定脑组织含水量,TTC染色法测定脑梗死范围,评估损伤程度。结果 免疫组织化学、Western blot及RT-PCR显示脑缺血24 h后与Vehicle组比较,环巴胺组脑梗死大鼠大脑皮质的Gli1和Claudin-5表达水平下降,脑含水量增加,脑梗死范围增大。结论 抑制Shh信号通路加重了BCFB完整性的破坏。Shh信号通路在BCFB结构水平上对脑组织有保护作用,该机制可能是通过调节Claudin-5的表达水平来完成。

摘要： 目的 探讨SOX2-OT在肺鳞癌细胞H520迁移能力调控中的作用并阐明其机制。方法 选用肺癌细胞株中SOX2-OT高表达的肺鳞癌细胞H520,敲低其SOX2-OT转录水平,通过细胞划痕实验和穿膜实验对细胞迁移能力进行检测,qRT-PCR和免疫印迹方法检测上皮间质转化(EMT)相关因子的表达。通过过表达Gli1进一步分析SOX2-OT的作用机制;用miR-200c抑制剂或类似物转染细胞,分析SOX2-OT对Gli的正向调控机制。结果 敲低SOX2-OT抑制了H520细胞的侵袭和迁移能力,同时伴随着细胞EMT表型的变化。SOX2-OT能够正向调控转录因子Gli1,Gli1过表达可逆转SOX2-OT敲低对细胞迁移能力的抑制作用。miR-200c抑制剂可有效逆转SOX2-OT敲低导致的SOX2下调。结论 SOX2-OT/SOX2轴通过Gli1介导的EMT过程来调控肺鳞癌细胞H520的迁移和侵袭能力。

摘要： 目的 观察大脑皮质Shh信号通路的转录因子Gli1、Ptch1与SOD1的动态表达,并探讨白藜芦醇苷脑保护作用及其对Gli1、Ptch1、Nrf2及SOD1的调节作用.方法 采用线栓法建立大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型.实验(一):SD大鼠随机分为7组:正常对照组以及建立局灶性缺血模型成功后3h、6 h、12 h、24h、48 h、72h共7个观察组,采用免疫组织化学方法、Western blot及RT-PCR观察缺血周围区Gli1,Ptch1和SOD1表达的变化.实验(二):SD大鼠随机分为4组:假手术组、溶剂对照组、和给药组(白藜芦醇苷25mg,50mg·kg-1).术后24h和72 h分别采用免疫组织化学方法、Western blot及RT-PCR观察缺血周围区Gli1,Ptch1,Nrf2和SOD1表达的变化.结果 免疫组织化学、Western blot及RT-PCR显示脑缺血6h后Gli1、Ptch1以及SOD1的表达开始升高,并于24 h达高峰,72 h后开始降低.白藜芦醇苷50mg·kg-1能改善大鼠缺血后神经功能评分、减少梗死体积,显著升高缺血后Gli1、Ptch1、Nrf2和SOD1表达量的升高.结论 大剂量白藜芦醇苷对局灶性脑缺血具有神经保护的作用.其保护作用可能与上调Gli1、Ptch1、Nrf2及SOD1的表达有关.

摘要： 目的 研究卡介苗多糖核酸联合液氮冷冻疗法对女性尖锐湿疣的治疗效果,以及对患者Patched-1、Gli-1和Smo蛋白水平的影响.方法 选择2016年3月至2019年10月青岛市第八人民医院诊治的120例女性外阴尖锐湿疣患者作为研究对象.按照随机数字法将患者分为观察组和对照组,每组60例.对照组采用液氮冷冻疗法,观察组在对照组的基础上加用卡介苗多糖核酸肌内注射.对两组治疗前后的炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]水平进行检测;对两组治疗前后的皮肤受损面积、治疗效果以及6个月的复发率和不良反应进行检查记录;对两组皮肤组织液中Patched-1、Gli-1和Smo蛋白水平进行检测.结果 观察组的治疗总有效率为85.00％,明显高于对照组的65.00％,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组的患处面积小于对照组,观察组的IL-6、IL-18和hs-CRP水平低于对照组,观察组的Patched-1、Gli-1和Smo蛋白水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 应用液氮冷冻疗法联合卡介苗多糖核酸肌内注射治疗女性尖锐湿疣的效果显著,能够有效降低患者Patched-1、Gli-1和Smo蛋白水平.

摘要： 目的 分析环靶明对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长作用及其在Hedgehog信号通路中的影响机制.方法 于裸鼠右侧肩胛背部皮下注射Ishikawa肿瘤细胞悬液建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型.将30只无特定病原体级雌性BALB/c裸鼠,4～5周龄,体重16～20 g,成模裸鼠随机分为实验组、抑制组和对照组,每组各10只,实验组裸鼠每日腹腔注射0.2 mL环靶明(20 mg/mL),抑制组裸鼠每日腹腔注射0.2 mL GANT61(20 mg/mL),对照组裸鼠每日腹腔注射0.2 mL 0.9％氯化钠溶液,连续给药21 d.于规定时间对小鼠的成瘤情况、体重、移植瘤体积、移植瘤组织中Son-ic Hedgehog(Shh)和Gli1 mRNA表达及Shh和Gli1蛋白表达、肿瘤细胞坏死程度、凋亡及增殖相关分子进行检测.结果 造模14 d后,裸鼠成瘤率为100％.与对照组相比,实验组和抑制组裸鼠体重增加幅度均较大,移植瘤体积增加幅度均较小,移植瘤组织中Shh和Gli1 mRNA表达及Shh、Gli1、Bcl-2、FOX M1、cyclin D1和Ki-67蛋白表达量均显著降低,坏死细胞个数明显较多,Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计意义(P<0.05);与抑制组相比,实验组裸鼠体重、移植瘤体积增加幅度均较小,移植瘤组织中Shh和Gli1 mRNA表达量及Shh、Gli1、Bcl-2、FOX M1、cyclin D1和Ki-67蛋白表达量均显著降低,坏死细胞个数明显较多,Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计意义(P<0.05).结论 环靶明可通过下调Hedgehog信号通路重要转录因子Gli1的表达,上调凋亡相关因子Bax的表达,下调Bcl-2蛋白的表达,促进裸鼠移植瘤细胞凋亡;通过下调Gli1的表达,下调细胞增殖相关分子FOX M1、cyclin D1和Ki-67蛋白的表达,降低细胞的增殖活性,抑制裸鼠移植瘤生长.

摘要： 本发明涉及用作药物的式I的前列腺素和其类似物以及包含这些化合物的药物组合物，特别是用作含锌指结构域的蛋白GLI2(即神经胶质瘤相关的癌基因‑2)的抑制剂，以及用于治疗、预防或减轻受试者中的肿瘤(尤其是肿瘤抗性)或GLI2参与的信号传导通路失调导致的神经变性疾病或发育综合征和畸形。本发明还提供了抑制GLI2的化合物的筛选方法。

摘要： 本公开涉及由小分子靶向人癌症中的GLI蛋白。本公开提供用于诊断和治疗表达GLI多肽的癌症的组合物、药物制剂和方法。所公开的组合物和药物制剂可包含一种或多种含有吡唑基的化合物、或其类似物或衍生物。

摘要： 本发明提供了一种基于改进GLI指数和深度学习的极地植被提取方法，包括以下步骤：S1、获取遥感影像，进行预处理，并生成暗通道影像；S2、改进并计算GLI指数；S3、合成假色彩影像，用以突出植被特征；S4、对假色彩影像进行切片制作数据集，并对数据集进行处理；S5、对数据集中的极地植被区域进行标记；S6、将切分和标记后的数据集导入到Mask RCNN模型进行训练，使用Mask RCNN模型提取植被区域。对比传统的计算机视觉方法，本发明仅需配合人工经验进行少量的标注，可以有效地提高无人机影像植被检测精度和效率。

摘要： 本发明涉及用作药物的式I的前列腺素和其类似物以及包含这些化合物的药物组合物，特别是用作含锌指结构域的蛋白GLI2(即神经胶质瘤相关的癌基因‑2)的抑制剂，以及用于治疗、预防或减轻受试者中的肿瘤(尤其是肿瘤抗性)或GLI2参与的信号传导通路失调导致的神经变性疾病或发育综合征和畸形。本发明还提供了抑制GLI2的化合物的筛选方法。

摘要： 本发明提供了一种Gli1和EpCAM基因共同标记的肝祖细胞群及其应用。本发明揭示了一种全新分离的细胞群，其为Gli1+细胞群，较佳地其为EpCAM+/Gli1+细胞群。所述细胞具有肝干/祖细胞特性，具有分化/转分化形成肝细胞的功能、肝脏损伤修复作用，以及能够形成肝脏类器官。本发明还提供了分选所述细胞的方法，利用所述细胞来制备肝脏类器官的方法等。本发明为肝损伤修复机理提供了新支持，为肝脏再生的研究和临床应用提供了新途径。

摘要： 本发明涉及一种靶向降解Gli1蛋白的降解剂及其制备方法和应用，该靶向降解Gli1蛋白的降解剂包括Gli1降解剂化合物或其药学上可接受的盐、异构体、外消旋体、水合物或前体药物；Gli1降解剂化合物由式(I)所示结构与降解招募子通过共价连接得到，降解招募子为可招募泛素化的分子。本发明制备的靶向降解Gli1蛋白的降解剂不但能够一定程度上解决已有的Hh通路中SMO拮抗剂耐药性问题，还能够开发出新型Hh/Gli1调节剂，研究Gli1蛋白被化学敲低所带来的生理学效应，为治疗Hh/Gli1介导的癌症提供新的方法。

摘要： 本发明公开一种miR‑370调控GLI1表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以miR‑370为研究对象，采用了分子和细胞生物学方法研究其在猪卵巢颗粒细胞中的应用，结果表明，miR‑370可下调GLI1表达，抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究miR‑370在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁以及卵泡发育等机制具有很好的应用价值。本发明技术方案设计周详，结果可靠。为证实miR‑370对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡以及E2分泌的影响，本发明从多层次、多角度验证，在相关信号通路基因及mRNA水平验证，最后在卵巢颗粒细胞的表型上验证。

摘要： 本发明公开了一种人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体的制备方法，包括如下步骤：(1)确定人GLI1Ser937蛋白磷酸化位点；(2)根据GLI1靶点序列及已知的磷酸化位点Ser937，设计需要合成的磷酸化及非磷酸化多肽序列；(3)合成氨基酸序列的抗原合成肽，将该多肽与载体蛋白偶联用作抗原；(4)将步骤(3)合成的抗原合成肽免疫动物并收集抗血清；(5)将步骤(4)收集的抗血清进行纯化和鉴定，得到人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体。本发明制备得到的高特异性的人GLI1蛋白Ser937位点磷酸化抗体可用Western blot实验检测正常细胞、肿瘤细胞的表达差异，有助于研究GLI1蛋白的磷酸化修饰在肿瘤疾病发生发展过程中的作用，为临床肿瘤疾病的诊断或治疗提供潜在的作用靶点。

摘要： 本发明提供了一种基于改进GLI指数和深度学习的极地植被提取方法，包括以下步骤：S1、获取遥感影像，进行预处理，并生成暗通道影像；S2、改进并计算GLI指数；S3、合成假色彩影像，用以突出植被特征；S4、对假色彩影像进行切片制作数据集，并对数据集进行处理；S5、对数据集中的极地植被区域进行标记；S6、将切分和标记后的数据集导入到Mask RCNN模型进行训练，使用Mask RCNN模型提取植被区域。对比传统的计算机视觉方法，本发明仅需配合人工经验进行少量的标注，可以有效地提高无人机影像植被检测精度和效率。

摘要： 本发明公开了一种GLI蛋白抑制剂及其应用，该GLI蛋白抑制剂是由GLI1/3抗体蛋白制成的抑制剂。该GLI蛋白抑制剂及其应用，明确GLI1/3在肝细胞癌中对CD90+细胞的促进作用和肿瘤微环境中癌症的启动作用，提出并阐明IL‑6以全新的作用方式调节肝细胞癌微环境中JAK/STAT3通路的观点，以及评价肿瘤微环境中CD90细胞作为肿瘤进程标志及治疗靶点的理论基础，从而明确GLI1/3对肿瘤中CD90干细胞样细胞诱导，且CD90在肿瘤微环境中的作用及能通过与IL‑6的互作实现。