产肠毒素大肠杆菌

摘要： 产肠毒素大肠杆菌(entero-toxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起猪肠道感染的重要病原,给全球的猪养殖业造成了重大的经济损失.有关产肠毒素大肠杆菌所致疾病的流行病学、诊断方法和防控方法对该病的防治具有重要意义.虽然对产肠毒素大肠杆菌的致病机制已有了较为深入的研究,但猪肠道大肠杆菌病的诊断方法必须考虑鉴别和诊断可能涉及的潜在的不同病因.在大肠杆菌的不同控制方法中,抗菌药被广泛应用,以预防疾病和治疗为目的作为预防性或后继性治疗患病猪.目前全球对抗菌药的耐药性的关注日益增加,使得在日常养殖过程中合理使用抗生素药物作为细菌性疾病的防控重点,而该问题可通过正确理解抗生素治疗疾病以及相关工作人员合理使用抗生素防治疾病等方面解决.

摘要： 构建表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)987P和K88蛋白的重组干酪乳杆菌,并对重组干酪乳杆菌免疫原性进行分析。通过PCR构建重组质粒pLA-987P-K88并电转化至干酪乳杆菌6105后进行表达,通过Western blot、间接免疫荧光和流式细胞术检测目的蛋白的表达情况。将重组干酪乳杆菌灌胃免疫BALB/c小鼠,三次免疫后用ELISA检测小鼠血清中IgG抗体和肠冲洗液中sIgA抗体水平,采用CCK-8检测淋巴细胞的增殖情况,用C83916(987P)株和C83902(K88)株进行攻毒保护性试验检测其保护率。结果显示,重组干酪乳杆菌成功表达987P-K88融合蛋白,小鼠免疫重组菌后血清中IgG抗体水平和肠冲洗液sIgA水平显著升高,细胞免疫水平明显增长,攻毒保护性试验结果显示,重组菌能同时对C83916(987P)株和C83902(K88)株具有良好的保护作用。

摘要： 奶牛养殖场犊牛培育过程中,经常出现多种原因导致的感染性腹泻,发病率高。病因复杂,病程急骤,轻者影响生长发育,重者导致死亡,是导致犊牛死亡的主要原因,会造成巨大的经济损失,阻碍养牛业的发展,成为迫切需要解决的技术难题。引起犊牛感染性腹泻的病原主要有产肠毒素大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、弯曲杆菌、坏死杆菌、产气荚膜梭菌、病毒性腹泻病毒、轮状病毒、冠状病毒、传染性鼻气管炎病毒、细小病毒、球虫、微小隐抱子虫和贾第鞭毛虫等。

摘要： 为研究噬菌体防治产肠毒素大肠杆菌(ETEC)感染小鼠的效果,本研究通过双层平板法测定噬菌体DS2的效价,并利用双层琼脂空斑试验分别检测噬菌体DS2对致仔猪腹泻大肠杆菌K88、K99及987p的体外裂解作用。结果显示,噬菌体DS2的效价为6.9×10^(9)pfu/mL,且均能裂解上述3种ETEC。进一步经小鼠试验评估噬菌体在体内防治ETEC感染的效果:将噬菌体分别以2×10^(8)pfu/只(高剂量组)、2×10^(7)pfu/只(低剂量组)经腹腔注射接种小鼠,1 h后再经腹腔注射0.2 mL剂量均为3×10^(8)cfu/只的K88、K99及987p混合菌液。分别于感染后12 h、24 h、48 h无菌采集各组小鼠的肝脏,采用平板计数法检测各组小鼠肝脏载菌量;利用双层平板法检测各组小鼠肝脏中的噬菌体含量。感染后24 h,利用ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中细胞因子IL-1β含量。感染后48 h,利用内毒素检测鲎试剂盒测定各组小鼠血浆内毒素的含量。小鼠肝脏载菌量和噬菌体含量检测结果显示:与接种LB肉汤的对照组相比,高、低剂量组小鼠的肝脏载菌量在感染后不同时间有升有降,但二者之间或者与对照组之间均无显著差异(P>0.05);随着感染时间的延长,高、低剂量组小鼠肝脏噬菌体的含量均在下降,且在感染后低剂量组小鼠肝脏噬菌体的含量极显著高于(感染后24 h)(P<0.01)或者高于(感染后48 h)高剂量组。IL-1β及内毒素检测结果显示,与对照组相比,高、低剂量组小鼠血清中IL-1β的含量显著下降(P<0.05)或者下降,但高、低剂量组小鼠血浆内毒素的含量均升高或显著升高(P<0.05)。将60只小鼠按照上述实验分组及处理,观察并记录感染后72 h内各组小鼠的发病率和死亡率,并统计感染后不同时间每组小鼠的平均体况得分。结果显示,对照组小鼠在感染接近24 h后体况计分降至25分以下,高、低剂量组小鼠在感染24 h后体况计分下降至70分及90分以上。高、低剂量组及对照组小鼠的存活率分别为65%、95%及15%。以上结果表明,DS2噬菌体可有效防治体内外ETEC的感染,且低剂量DS2噬菌体的疗效总体上要优于高剂量。本研究为防治仔猪大肠杆菌病提供了新思路。

摘要： 为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将elt2及其6个突变基因分别双酶切后克隆于pET-30a中构建重组大肠杆菌pET-30a-elt2/BL21、pET-30a-R5K/BL21、pET-30a-H42A/BL21、pET-30a-S59K/BL21、pET-30a-V95K/BL21、pET-30a-Y102K/BL21、pET-30a-E110K/BL21,经IPTG诱导表达了重组LT2(rLT2)及其突变重组蛋白mrLT2-R5K、mrLT2-H42A、mrLT2-S59K、mrLT2-V95K、mrLT2-Y102K、mrLT2-E110K;利用细胞毒性试验和小鼠致病性试验比较了rLT2和突变重组蛋白对小鼠肾上腺皮质瘤(Y1)细胞的毒性作用及对小鼠的致病性,并将rLT2和mrLT2-V95K作为免疫原接种小鼠检测其对小鼠的免疫原性。结果显示,突变重组蛋白对Y1细胞的毒性作用均弱于rLT2,其中mrLT2-V95K对Y1细胞的毒性作用最弱为1.145×10^(1)TCID_(50)/0.1 mL;rLT2及该突变重组蛋白对小鼠均无致病性,表明小鼠也不适合用于LT2的致病性检测。mrLT2-V95K免疫BALB/c小鼠的血清特异性IgG抗体效价和对rLT2的中和抗体效价分别为1:102 400和1:32,与rLT2的免疫原性无显著差异。本研究首次证实LT2 A亚基的aa95对LT2细胞毒性作用的影响较明显,其突变重组蛋白具有良好的免疫原性,为大肠杆菌减毒疫苗研究提供了重要科学信息。

摘要： 本试验旨在研究琥珀酸对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)K88感染小鼠肠道炎症的影响及其机制。选取40只7周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分成4组(每组10只):正常对照组(NC组)、琥珀酸组(SUC组)、大肠杆菌组(ETEC组)和琥珀酸+大肠杆菌组(SUC+ETEC组)。4组小鼠均饮用去离子水,SUC组和SUC+ETEC组小鼠在饮水中添加20 mmol/L的琥珀酸。试验第4天,ETEC组和SUC+ETEC组每天灌胃浓度1×10^(10)CFU/mL的ETEC K88菌液0.2 mL,持续3 d,恢复1 d。适应期7 d,试验期8 d。结果表明:1)与NC组相比,ETEC组造模后体重显著降低(P<0.05);与ETEC组相比,SUC+ETEC组造模后体重以及空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度显著升高(P<0.05)。2)与NC组相比,ETEC组血浆和空肠中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)浓度显著升高(P <0.05),白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-4(IL-4)浓度显著降低(P<0.05);与ETEC组相比,SUC+ETEC组血浆中IL-6浓度显著降低(P<0.05),空肠中TNF-α和IL-6浓度显著降低(P<0.05),空肠中IL-10浓度显著升高(P<0.05)。3)与NC组相比,ETEC组血浆中内毒素、二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸(D-LA)浓度显著升高(P<0.05);与ETEC组相比,SUC+ETEC组血浆中内毒素和D-LA浓度显著降低(P<0.05)。4)与NC组相比,ETEC组空肠中密封蛋白-1(Claudin-1)和咬合蛋白(Occludin)的表达水平显著降低(P<0.05);与ETEC组相比,SUC+ETEC组空肠中Claudin-1和Occludin的表达水平显著升高(P<0.05)。综上所述,饮水添加琥珀酸可增强小鼠空肠紧密连接相关蛋白表达,改善肠道通透性,调节炎症因子分泌,缓解ETEC K88感染引起的肠道炎症。

摘要： 本试验旨在研究三丁酸甘油酯(TB)对产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用。试验1:选用(20±2)g的BALB/c小鼠50只,随机分为5组,每组10只。各组均饲喂基础饲粮,在第4天对照组腹腔注射0.5 mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS),试验组腹腔分别注射浓度为5.5×10^(8)、4.9×10^(7)、4.0×10^(6)、6.5×10^(5) CFU/mL的ETEC K88悬液0.5 mL,连续观察3 d临床症状,统计腹泻率和死亡率,剖检、观察肠道病理变化,确定ETEC K88最佳造模剂量。试验2:选择(20±2)g的BALB/c小鼠105只,随机分为7组,每组3个重复,每个重复5只。空白组、阴性对照组饲喂基础饲粮,阳性对照组饲喂添加0.16%金霉素的饲粮,试验1、2、3、4组分别饲喂添加0.05%、0.10%、0.20%、0.30%TB的饲粮。连续饲喂14 d,在第15天空白组小鼠腹腔注射0.5 mL无菌PBS,阴性对照组、阳性对照组和试验组小鼠按照试验1中确定的最佳造模剂量腹腔注射ETEC K88悬液0.5 mL,继续观察3 d,采血、剖检,检测血清中二胺氧化酶(DAO)活性与内毒素(ET)、C-反应蛋白(CRP)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量,制作空肠组织切片,观察肠道组织形态变化。结果显示:小鼠腹腔注射不同浓度ETEC K88悬液后出现不同程度的腹泻和死亡情况,根据腹泻率和死亡率,确定4.9×10^(7) CFU/mL为ETEC K88建立小鼠腹泻模型的最佳剂量。阳性对照组和试验3、4组的平均日增重与空白对照组差异不显著(P0.05)。小鼠的腹泻率表现为阴性对照组(53.33%)>试验1组(33.33%)>阳性对照组(26.67%)=试验2组(26.67%)>试验3组(20.00%)=试验4组(20.00%)>空白对照组(无腹泻发生)。肠道损伤程度:阴性对照组>试验1组>阳性对照组>试验2组>空白对照组>试验4组>试验3组。与阴性对照组相比,各试验组以及阳性对照组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,以试验3组降低幅度最大,其次为试验4组。与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,但差异不显著(P>0.05)。与阴性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了169.00%(P<0.05)、114.33%(P<0.05)。与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了72.81%(P<0.05)和37.69%(P<0.05)。由此得出,在小鼠基础饲粮中添加0.20%或0.30%的TB可以对抗大肠杆菌感染,缓解ETEC K88诱导的肠道损伤,且效果与添加0.16%的金霉素相当。

摘要： 为研究全局调控因子富马酸盐和硝酸盐减少调控蛋白(FNR)对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)生物学特性的影响,本研究通过Red同源重组方法构建了ETEC MD724-020菌株fnr基因的缺失株Δfnr及回补株Δfnr(pfnr),分别将ETEC野生株(WT)、Δfnr以及Δfnr(pfnr)同时接种于TSB液体培养基培养,测定fnr基因缺失前后ETEC的生长曲线,结果显示,与野生株相比,缺失fnr基因后其生长速率无明显变化。将3株菌分别接种于TSB固体培养基,通过测定游走直径比较分析野生株、缺失株和回补株的运动性,结果显示,与野生株相比,缺失株Δfnr的运动能力显著降低(P<0.05)。采用结晶紫法检测3株菌生物被膜(BF)形成能力,结果显示,相比WT和Δfnr(pfnr)株,缺失株Δfnr BF形成能力极显著下降(P<0.001)。将3株菌分别于含10%绵羊血的TSA平板上划线培养,进行溶血性试验,结果显示,相比WT和Δfnr(pfnr)株,Δfnr株溶血圈较野生株显著缩小。将3株菌分别与猪小肠上皮细胞IPEC-J2互作2 h后,通过平板计数法分析各菌株对该细胞的黏附能力,结果显示,与野生株相比,缺失株Δfnr对IPEC-J2细胞的黏附能力显著减弱(P<0.05)。提取上述互作后未黏附细菌的RNA,通过荧光定量PCR检测fnr基因缺失后对致病性ETEC相关毒力基因转录水平的影响,结果显示,与野生株相比,Δfnr株中eaeH、eltA和hlyA基因的转录水平均极显著下降(P<0.001)。本研究首次对全局调控因子FNR影响ETEC的运动性、溶血性、BF形成能力等生物学特性进行了研究,为进一步开展ETEC致病机理的研究提供了参考依据。

摘要： 为探究Toll样受体2/4(TLR2/4)、核苷酸结合寡聚结构域样受体1/2(NOD1/2)在产肠毒素大肠杆菌(ETEC)诱导的猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)炎症反应中的作用,本研究以不同MOI(0.1、0.02、0.01)的ETEC感染IPEC-J2,2 h后,采用MTT法检测IPEC-J2的细胞活力,以筛选ETEC感染IPEC-J2的最适MOI。结果显示,经MOI 0.01的ETEC感染后IPEC-J2的细胞活力极显著低于对照组(P<0.001)。因此,采用最适MOI 0.01的ETEC感染IPEC-J2,分别培养不同时间后,采用荧光定量PCR(qPCR)检测ETEC感染IPEC-J2中的TLR2/4、NOD1/2及促炎性细胞因子IL-6、IL-8、肿瘤细胞坏死因子(TNF-α)mRNA的转录水平;利用TLR2/4混合抑制剂AMG9810及NOD1/2混合抑制剂NOD-IN-1分别与IPEC-J2共作用6 h,再经ETEC感染2 h后经qPCR检测TLR2/4、NOD1/2及下游促炎性细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α m RNA的转录水平。q PCR结果显示,与对照组相比,ETEC感染的IPEC-J2中TLR2 m RNA转录水平(感染后30 min及120 min)及TLR4 m RNA转录水平(感染后105 min及120 min)均极显著升高(P<0.01、P<0.001),其余时间段与对照组无显著差异;IPEC-J2 NOD1 mRNA转录水平(感染60 min及以后)、NOD2 mRNA转录水平(感染后30 min~120 min)均极显著高于对照组(P<0.01、P<0.001),且IL-6、IL-8(感染后30 min除外)、TNF-α mRNA的转录水平随感染时间延长均极显著升高(P<0.01)。与不加抑制剂的感染组相比,经两种受体抑制剂作用后再感染ETEC的IPEC-J2中TLR2/4、NOD1/2 mRNA的转录水平均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降;且其中的IL-6、IL-8、TNF-α mRNA的转录水平均极显著降低(P<0.01)。上述结果首次表明,ETEC感染可通过激活IPEC-J2受体TLR2/4、NOD1/2进而诱导下游促炎性细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α mRNA转录水平的升高。本研究为阐释ETEC诱导猪肠道炎症反应的致病机制提供了参考依据。

摘要： 为建立一种能同时快速、灵敏、准确检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的多重PCR检测方法,根据GenBank中ETEC K88(F4)、K99(F5)、987P(F6)、F41和etp A黏附素基因的保守序列设计并合成了5对特异性引物,通过多重PCR反应条件优化,建立了一种能快速检测5种黏附素基因的多重PCR方法。结果表明,该方法可同时特异性扩增出大肠杆菌K88、K99、987P、F41和etp A基因片段,对鼠伤寒沙门菌、猪链球菌、金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、猪霍乱沙门菌、单增李斯特菌均无特异性扩增。敏感性试验结果显示,用该多重PCR能检测到K88、K99、etp A、F41和987P基因的最小活菌数分别为1.1×10^(6)、1.2×10^(6)、6.3×10^(5)、1.2×10^(5)和6.2×10~4CFU/m L。K88、K99、987P、etp A和F41的基因组DNA的检测下限分别为1.17×10^(-3)、0.1、1.88×10^(-3)、2.55×10^(-3)和1.0×10^(-5)ng/μL,表明其敏感性较高。人工模拟污染粪便样品试验结果表明,人工污染粪便样品中K88、K99、F41、987P和etpA的检测限分别为2.5×10^(8)、2.5×10^(8)、2.5×10^(3)、1.9×10^(7)和1.75×10^(3)CFU/g,进一步验证了非预增菌下该多重PCR方法的临床可行性。并利用所建立的多重PCR方法对80株大肠杆菌临床分离株进行检测,K88的阳性率为12.5%(10/80),K99的阳性率为1.25%(1/80)。研究表明:建立的产肠毒素大肠杆菌黏附素基因多重PCR分型方法具有很好的特异性、敏感性,可用于临床上大肠杆菌分离菌株黏附素基因的快速鉴定。

摘要： 目的:建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)耐热型肠毒素STa和STb的纳米PCR方法.方法:根据ETEC耐热型肠毒素STa和STb的基因序列,用Primer5.0软件设计2对特异性引物,优化得到最佳反应条件,并进行灵敏度和特异性的测试.结果:所建立的体系均能扩增到目的条带,灵敏度为47.5cfu/mL,且特异性良好.结论:建立了快速灵敏的检测ETEC中耐热肠毒素基因的纳米PCR方法，为人类感染ETEC的诊断和进出口食品的检验检疫提供了有效的技术支持.

摘要： 产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4ac造成的断奶前仔猪腹泻病是养猪生产中的常见病，给世界养猪业造成了巨大经济损失。本研究面对这一现状，通过全基因组连锁定位分析、目的区域的重组断点事件分析和远缘群体高通量SNP标记的关联性分析等严谨的遗传学分析手段，确定了决定仔猪ETEC F4ac腹泻易感性的基因为MUC13基因，并发现了能准确鉴别易感个体和抗性个体的分子标记(准确率>97％)，相关研究论文已分别发表于相关国际专业学术期刊，由此首次在国际上创建了高精准度的断奶前仔猪腹泻抗病育种新技术，并利用所创建的分子育种新技术进行大面积推广应用，实现了中国种猪遗传改良研究的重要自主创新。

摘要： 2011年吉林省发生一起雏鸡饲料中毒事件，经分离鉴定和动物致病性试验，确定病原为鲍曼不动杆菌和产肠毒素大肠杆菌。

摘要： @@在世界范围内，产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia colic ETEC)感染是引起人畜腹泻最重要的因素之一。它是发展中国家腹泻发病和婴儿死亡的主要原因，也是旅行者腹泻与国家士兵腹泻的最常见病原菌。因此，一个安全有效的抵抗ETEC腹泻的疫苗对公众健康是非常重要的。

摘要： @@产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪、犊牛等幼畜发生腹泻的重要病原。菌毛和肠毒素是ETEC的两个主要致病因子，菌毛的作用是使细菌定植于小肠，从而ETEC能够大量繁殖，产生肠毒素引起小肠生理功能紊乱，分泌大量液体并最终导致腹泻的发生。

摘要： 目的揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。[方法]O血清型采用常规的凝集试验进行测定，毒力基因采用PCR方法检测。[结果]通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定，结果显示除50株未定型、17株自凝外，测定出233个分离株的血清型，这些分离株覆盖了45个血清型，其中以0149、0107、0139、093和091为主，共133株，占定型菌株的57.1％；拥有estl、estlL、elt、stx2e和eneA基因的菌株分别为102(34.0％)、190(63.3％)、81(27.0％)、57(19.0％)和54(18.0％)株；分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％)，75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％)，在K88菌株中，0149血清型与estll或estII+elt密切相关，在F18菌株中，0107血清型与estl或estII,0139血清型与str．2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC／STEC、AEEC／ETEC和AEEC/ETEC/STEC，分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株，占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性：猪源ETEC以0149、0107、093和098等血清型为主，0149：K88菌株主要与estII或estlI+elt肠毒素相关，0107：F18菌株主要与eall相关，093和098血清型菌株主要与estll肠毒素相关；STEC菌株以0139：F18血清型为主，拥有stx3e；AEEC菌株拥有紧密素，无明显优势血清型；ETEC／STEC菌株以0107：F18和0116：F18血清型为主，主要与estl+stx2e或estII+stx2e密切相关，ETEC／AEEC菌株以091和0107血清型为主，全部拥有肠毒素estl和紧密素基因。结论我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌，其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原，同时其病原型日益复杂。

摘要： 目的揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。[方法]O血清型采用常规的凝集试验进行测定，毒力基因采用PCR方法检测。[结果]通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定，结果显示除50株未定型、17株自凝外，测定出233个分离株的血清型，这些分离株覆盖了45个血清型，其中以0149、0107、0139、093和091为主，共133株，占定型菌株的57.1％；拥有estl、estlL、elt、stx2e和eneA基因的菌株分别为102(34.0％)、190(63.3％)、81(27.0％)、57(19.0％)和54(18.0％)株；分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％)，75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％)，在K88菌株中，0149血清型与estll或estII+elt密切相关，在F18菌株中，0107血清型与estl或estII,0139血清型与str．2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC／STEC、AEEC／ETEC和AEEC/ETEC/STEC，分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株，占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性：猪源ETEC以0149、0107、093和098等血清型为主，0149：K88菌株主要与estII或estlI+elt肠毒素相关，0107：F18菌株主要与eall相关，093和098血清型菌株主要与estll肠毒素相关；STEC菌株以0139：F18血清型为主，拥有stx3e；AEEC菌株拥有紧密素，无明显优势血清型；ETEC／STEC菌株以0107：F18和0116：F18血清型为主，主要与estl+stx2e或estII+stx2e密切相关，ETEC／AEEC菌株以091和0107血清型为主，全部拥有肠毒素estl和紧密素基因。结论我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌，其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原，同时其病原型日益复杂。

摘要： 目的揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。[方法]O血清型采用常规的凝集试验进行测定，毒力基因采用PCR方法检测。[结果]通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定，结果显示除50株未定型、17株自凝外，测定出233个分离株的血清型，这些分离株覆盖了45个血清型，其中以0149、0107、0139、093和091为主，共133株，占定型菌株的57.1％；拥有estl、estlL、elt、stx2e和eneA基因的菌株分别为102(34.0％)、190(63.3％)、81(27.0％)、57(19.0％)和54(18.0％)株；分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％)，75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％)，在K88菌株中，0149血清型与estll或estII+elt密切相关，在F18菌株中，0107血清型与estl或estII,0139血清型与str．2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC／STEC、AEEC／ETEC和AEEC/ETEC/STEC，分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株，占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性：猪源ETEC以0149、0107、093和098等血清型为主，0149：K88菌株主要与estII或estlI+elt肠毒素相关，0107：F18菌株主要与eall相关，093和098血清型菌株主要与estll肠毒素相关；STEC菌株以0139：F18血清型为主，拥有stx3e；AEEC菌株拥有紧密素，无明显优势血清型；ETEC／STEC菌株以0107：F18和0116：F18血清型为主，主要与estl+stx2e或estII+stx2e密切相关，ETEC／AEEC菌株以091和0107血清型为主，全部拥有肠毒素estl和紧密素基因。结论我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌，其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原，同时其病原型日益复杂。

摘要： 目的揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。[方法]O血清型采用常规的凝集试验进行测定，毒力基因采用PCR方法检测。[结果]通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定，结果显示除50株未定型、17株自凝外，测定出233个分离株的血清型，这些分离株覆盖了45个血清型，其中以0149、0107、0139、093和091为主，共133株，占定型菌株的57.1％；拥有estl、estlL、elt、stx2e和eneA基因的菌株分别为102(34.0％)、190(63.3％)、81(27.0％)、57(19.0％)和54(18.0％)株；分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％)，75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％)，在K88菌株中，0149血清型与estll或estII+elt密切相关，在F18菌株中，0107血清型与estl或estII,0139血清型与str．2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC／STEC、AEEC／ETEC和AEEC/ETEC/STEC，分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株，占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性：猪源ETEC以0149、0107、093和098等血清型为主，0149：K88菌株主要与estII或estlI+elt肠毒素相关，0107：F18菌株主要与eall相关，093和098血清型菌株主要与estll肠毒素相关；STEC菌株以0139：F18血清型为主，拥有stx3e；AEEC菌株拥有紧密素，无明显优势血清型；ETEC／STEC菌株以0107：F18和0116：F18血清型为主，主要与estl+stx2e或estII+stx2e密切相关，ETEC／AEEC菌株以091和0107血清型为主，全部拥有肠毒素estl和紧密素基因。结论我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌，其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原，同时其病原型日益复杂。

摘要： 目的揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。[方法]O血清型采用常规的凝集试验进行测定，毒力基因采用PCR方法检测。[结果]通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定，结果显示除50株未定型、17株自凝外，测定出233个分离株的血清型，这些分离株覆盖了45个血清型，其中以0149、0107、0139、093和091为主，共133株，占定型菌株的57.1％；拥有estl、estlL、elt、stx2e和eneA基因的菌株分别为102(34.0％)、190(63.3％)、81(27.0％)、57(19.0％)和54(18.0％)株；分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100％)，75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7％)，在K88菌株中，0149血清型与estll或estII+elt密切相关，在F18菌株中，0107血清型与estl或estII,0139血清型与str．2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型：ETEC、STEC、AEEC、ETEC／STEC、AEEC／ETEC和AEEC/ETEC/STEC，分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株，占分离株的63.3％、8.0％、12.0％、10.7％、5.7％和0.3％。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性：猪源ETEC以0149、0107、093和098等血清型为主，0149：K88菌株主要与estII或estlI+elt肠毒素相关，0107：F18菌株主要与eall相关，093和098血清型菌株主要与estll肠毒素相关；STEC菌株以0139：F18血清型为主，拥有stx3e；AEEC菌株拥有紧密素，无明显优势血清型；ETEC／STEC菌株以0107：F18和0116：F18血清型为主，主要与estl+stx2e或estII+stx2e密切相关，ETEC／AEEC菌株以091和0107血清型为主，全部拥有肠毒素estl和紧密素基因。结论我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌，其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原，同时其病原型日益复杂。

摘要： 本发明涉及从自然界分离的并可以特异性地杀死产志贺毒素F18型大肠杆菌菌株的肌尾噬菌体科噬菌体Esc‑COP‑1，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12662BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗产志贺毒素F18型大肠杆菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了一种产肠毒素性大肠杆菌耐热肠毒素基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒，涉及试剂盒技术领域。本发明包括40μL特异性引物、250μL荧光定量PCR反应混合液(Premix Ex Taq)、20μL ROX Reference Dye、20μL阴性对照、20μL阳性对照、500μL超纯水；根据GenBank中猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)耐热肠毒素(STⅡ)基因序列，设计1对特异性引物，进行试验，试验方法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL，重复性好，将PCR产物测序结果与GenBank中的ST基因序列比对，相似度为98.2％～100％。本发明试剂盒具有检测速度快、检出率高的特点。

摘要： 本发明涉及从自然界分离的并可以特异性地杀死产志贺毒素F18型大肠杆菌菌株的肌尾噬菌体科噬菌体Esc‑COP‑1，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12662BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗产志贺毒素F18型大肠杆菌感染的方法。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的构建方法，包括如下步骤：步骤1：准备产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞；步骤2：取仔猪空肠前段组织进行处理得到肠隐窝；步骤3：用稀释后的基质胶重悬肠隐窝，将产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞、肠隐窝接种于提前温育的孔板上，于孔板中加入类器官生长培养基，培养。本发明的培养基针对于猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的生长特点，选用了多种生长因子成份进行调和、优化了孔板中大肠杆菌和巨噬细胞的浓度，经过不断优化培养基中生长因子的配比，使猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌、巨噬细胞能够有效地进行接触性共培养。

摘要： 本发明公开了一种抑制产肠毒素大肠杆菌生长的解淀粉芽孢杆菌胞外多糖，属于生物工程技术领域。所述的胞外多糖的分子量为8005Da，由果糖和葡萄糖组成，是一种具有特殊结构的左聚糖，其分子结构具有7个特定的重复单元，重复单元含7个果糖基，以6个β‑(2,6)‑果糖基为骨架，1个β‑(1,2)‑果糖基为支链。本发明公开了解淀粉芽孢杆菌胞外多糖EPS‑JN4具有抑制产肠毒素大肠杆菌生长的作用，最低抑制浓度为5×10‑7mg多糖/CFU大肠杆菌，替代抗生素治疗大肠杆菌导致的腹泻疾病具有很好的潜力。

摘要： 本发明涉及分泌表达猪源性抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，属于基因工程技术领域。所述重组乳酸乳球菌携带分泌表达抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的融合序列，所述融合序列具有如SEQ ID No.1所示序列与如SEQ ID No.2所示的单链抗体序列，其中，如SEQ ID No.1所示序列为含有分泌信号肽USP45、分泌增强信号肽LEISSTCDA和硫氧还蛋白基因的序列。获得的分泌的抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛的单链抗体分子量约为45kDa，能特异性的识别产肠毒素大肠杆菌，阻断细菌的感染，以及对仔猪产肠毒素大肠杆菌病提供保护作用。

摘要： 本发明公开了一种抑制产肠毒素大肠杆菌生长的解淀粉芽孢杆菌胞外多糖，属于生物工程技术领域。所述的胞外多糖的分子量为8005Da，由果糖和葡萄糖组成，是一种具有特殊结构的左聚糖，其分子结构具有7个特定的重复单元，重复单元含7个果糖基，以6个β‑(2,6)‑果糖基为骨架，1个β‑(1,2)‑果糖基为支链。本发明公开了解淀粉芽孢杆菌胞外多糖EPS‑JN4具有抑制产肠毒素大肠杆菌生长的作用，最低抑制浓度为5×10‑7mg多糖/CFU大肠杆菌，替代抗生素治疗大肠杆菌导致的腹泻疾病具有很好的潜力。

摘要： 本发明公开了一种仔猪产肠毒素大肠杆菌及其应用。所述猪产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli)已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.23598。所述的仔猪产肠毒素性大肠杆菌CGMCC No.23598可以用于仔猪腹泻疾病的防治研究，用于制备用于预防仔猪腹泻疾病的生物制品以及用于制备用于治疗仔猪腹泻疾病的生物制品。

摘要： 本发明公开了一种同时检测产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的引物组、试剂盒及应用，涉及病原菌检测技术领域。同时检测产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的引物组、试剂盒包括用于检测产肠毒素大肠杆菌ST基因、LT基因和用于检测沙门氏菌invA基因的引物和探针。利用本发明可同时实现产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌毒力基因的检测，检测灵敏度高、特异性强、重复性好，适于推广应用。

摘要： 本发明属于肠道细菌感染医药技术领域，公开了一种石榴皮鞣质在制备治疗产肠毒素大肠杆菌性肠道疾病药物中的应用。石榴皮鞣质可以显著改善产肠毒素大肠杆菌感染后导致的肠道炎症，修复受损的肠屏障功能，维持肠道稳态，提高石榴皮的药用价值，也可作为一种绿色安全的抗生素治疗产肠毒素大肠杆菌诱导的肠道损伤的替代方案。