胃癌干细胞

摘要： 背景:胃癌干细胞是近年医学领域研究的热点,能够干预胃癌的发生、转移、复发和耐药等,理论上,胃癌干细胞是未来治疗胃癌最有前途的候选靶点,因此研究胃癌干细胞的作用机制不仅能够阐明胃癌的发生发展,而且有助于寻找新的有效分子靶点,有着广阔的应用前景。目的:利用文献计量学对胃癌干细胞的研究进行可视化分析,总结研究热点和趋势,为相关领域科研工作者的研究提供参考。方法:基于Web of Science核心数据库,通过CiteSpace对2011-2021年的年度发文量、作者、国家、期刊、被引情况和关键词等进行可视化分析。结果与结论:筛选后共纳入2832篇文献,目前全球胃癌干细胞研究的文献数量呈快速增长趋势;中国和美国是发文量最多的国家。中国学者的总发文量虽然位居世界第一,但中心度和篇均被引频次较低,说明受关注程度及学术影响力不足,在发文质量上还有待提高;《Oncotarget》是国内外学者发文量最多的期刊,《Oncology Letters》是中国学者发文量最多的期刊;胃癌干细胞研究呈现出多学科交叉的发展特点;胃癌干细胞目前的研究热点主要与上皮间质转化、对胃癌细胞生物学功能的影响以及自我更新等有关;胃癌干细胞的可塑性、与脂肪酸氧化和血管内皮生长因子的关系,以及非编码RNA对胃癌干细胞的调控等可能是目前及未来的研究重点。胃癌干细胞研究目前正处于快速上升阶段,近年来胃癌干细胞的作用机制逐渐明朗,未来胃癌干细胞干预将是胃癌患者新的靶向治疗策略。

摘要： 近年来,胃癌的发病率和死亡率受到经济发展及胃镜检查普及的影响,在包括中国的全球范围内均呈现下降趋势,但目前仍处于全球肿瘤发病的前列。亚洲地区胃癌的发病率及死亡率超过全球平均水平,中国胃癌的发病率又较亚洲平均水平高,故胃癌仍是我国癌症研究和防治的重点[1~3]。与Hp感染相关的肠型胃癌,占胃癌的60%以上,是胃癌高发地区最常见的类型。随着对Hp感染诱发胃癌机制的深入研究,研究人员发现了众多与Hp感染密切相关的致癌因素,为临床胃癌的诊断治疗提供新的、有效的靶点。现就Hp致胃癌发病机制的研究进展予以综述,为胃癌防治提供更精准的靶点和更优良的疗效。

摘要： 目的:探索胃癌干细胞(GCSC)疫苗在小鼠胃癌模型中的抗肿瘤功能。方法:克隆形成实验及qPCR检测鉴定胃癌干细胞的特性;小鼠皮下移植瘤模型检测GCSC疫苗的体内抑瘤能力;流式细胞术检测经疫苗免疫小鼠的自然杀伤细胞(NK细胞)和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的细胞毒性;ELISA检测免疫小鼠血清中细胞因子IL-1β、IL-2、IL-4和IL-12的含量;免疫组化检测肿瘤组织中GzmB和Perforin的含量。结果:与普通胃癌细胞(WT cell)比较,GCSC形成更多的克隆小球(P<0.01);GCSC中肿瘤干细胞标记物CD44和Lgr5的表达量显著高于WT cell(P<0.001,P<0.01);GCSC疫苗组的肿瘤生长速度显著低于WT疫苗组(P<0.05);GCSC疫苗组小鼠NK细胞和CTL的细胞毒性显著增强(P<0.05,P<0.05),血清中细胞因子IL-2、IL-4和IL-12的含量明显高于PBS组(P<0.01,P<0.05),同时其肿瘤组织中GzmB和Perforin的含量也显著高于PBS组(P<0.0001)。结论:GCSC疫苗可以诱导小鼠的抗肿瘤免疫反应,抑制胃癌细胞生长,可能成为潜在的新的胃癌治疗手段。

摘要： 胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一。胃癌患者采用传统的手术、放射治疗、化学治疗临床获益有限,5 a生存率不甚理想。近年来,程序性死亡受体-1/程序性死亡受体配体-1抑制剂联合细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4抑制治疗胃肿瘤的研究较多且取得了重大进展,已成为胃癌治疗的一种新手段。肿瘤干细胞在胃癌的发生、发展过程中发挥着至关重要的作用,其富聚多种肿瘤特异性抗原及特异性分子标志物,靶向肿瘤干细胞,可产生有效的抗肿瘤效应。免疫治疗已在多种肿瘤的研究中取得进展,在胃癌治疗中也获得了突破,其可能是临床上治疗胃癌的一种有效策略。本研究就近年来胃癌干细胞及免疫检查点抑制剂治疗胃癌的研究进展作一综述。

摘要： 目的通过体外研究探讨^(125)I粒子平面照射对胃癌干细胞增殖与凋亡的影响,为^(125)I粒子用于胃癌的靶向干预提供理论依据。方法免疫磁珠分选法分离人胃癌细胞中的CD44(+)细胞,流式细胞术检测CD44(+)表达率。分组采用100、200、300 cGy剂量^(125)I粒子平面照射胃癌干细胞。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验检测各组细胞的生长曲线。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹以及免疫荧光染色检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、BNIP3和WNT9Ad的表达情况。流式细胞法检测各组细胞的凋亡情况。结果免疫磁珠分选后富集了79.7%CD44(+)胃癌细胞,且分选后胃癌干细胞生长状态良好。100、200、300 cGy剂量^(125)I粒子平面照射处理可以明显抑制胃癌干细胞的增殖,且抑制作用呈现剂量依赖性(P<0.05)。100、200、300 cGy剂量^(125)I粒子平面照射处理可以明显促进干细胞的凋亡,且促进作用呈现剂量依赖性(P<0.05)。结论体外研究结果显示,^(125)I粒子平面照射会抑制胃癌干细胞增殖,并促进干细胞凋亡。

摘要： 目的探讨前列腺素D2(prostaglandins D2,PGD2)对胃癌干细胞(gastric cancer stem cell,GCSC)的调控作用及其机制。方法将胃癌细胞SGC-7901通过无血清培养法富集GCSC。通过流式细胞术检测SGC-7901和无血清培养富集的GCSC中干性标志物乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)和CD44的阳性率,Western blot检测SGC-7901和无血清培养富集的GCSC中干性标志物锌指蛋白转录因子4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)和CD44的蛋白表达以验证富集的GCSC是否满足后续实验需要。将不同浓度的PGD2(2.5,5,7.5,10,15μg/ml)作用于富集的GCSC,通过CCK-8实验检测半数抑制浓度(IC 50)作为后续实验PGD2给药浓度。将富集的GCSC分为3组:空白组、DMSO组和PGD2组。通过CCK-8、平板克隆、Transwell实验检测PGD2对GCSC增殖、侵袭能力的影响,流式细胞术检测PGD2对GCSC凋亡能力的影响。通过Western blot技术检测PGD2刺激后,GCSC中侵袭相关蛋白(MMP-2、MMP-9)和凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)、肿瘤干细胞干性标志物(SALL4、CD44)的表达以及JAK2/STAT3通路相关蛋白(磷酸化JAK2、磷酸化STAT3)的调控情况。结果流式细胞术结果显示与胃癌细胞SGC-7901相比,无血清培养富集的GCSC中干性标志物ALDH1和CD44表达增加(P<0.05),Western blot结果显示无血清培养富集的GCSC中干性标志物SALL4、CD44表达上调(P<0.05),表明GCSC富集成功,满足后续实验需要。CCK-8实验结果显示PGD2对GCSC具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,PGD2的IC 50为8μg/ml,选择PGD2(8μg/ml)作为后续实验条件。CCK-8、平板克隆和Transwell实验表明,与空白组和DMSO组相比,PGD2组GCSC增殖及侵袭能力下降(P<0.01)。流式细胞术结果显示PGD2可促进GCSC凋亡(P<0.05)。另外,Western blot结果显示,与空白组和DMSO组相比,PGD2组MMP-2、MMP-9、CD44、SALL4、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05)。此外,与空白组和DMSO组相比,PGD2组磷酸化JAK2、磷酸化STAT3的蛋白水平明显降低(P<0.05),而JAK2、STAT3蛋白水平无明显变化。结论PGD2可能通过调控JAK2/STAT3通路抑制GCSC增殖、侵袭与干性,促进其凋亡。

摘要： 背景:S100A4是钙离子结合蛋白S100家族的一员,可以与相应的靶蛋白结合,进而对肿瘤细胞、多能干细胞的增殖与转移产生重要的影响,近年研究表明超声靶向破坏微泡技术能增强基因转染效率。目的:探讨超声靶向破坏微泡技术沉默S100A4基因对胃癌干细胞干性、上皮间质转化的影响。方法:取对数生长期的人胃癌细胞株SGC-7901,采用无血清悬浮培养法分离肿瘤干细胞球,流式细胞仪检测肿瘤干细胞表面标记EpCAM+CD44+表达。构建靶向S100A4基因的shRNA表达质粒,超声微泡介导转染至EpCAM+CD44+胃癌干细胞。转染后48 h,Western blot检测S100A4的表达;采用CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell小室检测胃癌干细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力;采用Western blot与qRT-PCR检测上皮-间质转化相关标记物的表达。结果与结论:流式细胞仪检测结果显示,在胃癌干细胞富集培养后表达EpCAM+CD44+细胞的比例明显高于富集培养前(P <0.05)。超声微泡转染S100A4-shRNA质粒48 h后S100A4的蛋白表达量明显低于未转染组(P <0.01)。转染后48 h,胃癌干细胞的增殖速度、克隆形成能力、迁移、侵袭能力明显下降,上皮标志物E-cadherin表达升高,间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin表达降低。结果表明,超声靶向破坏微泡技术沉默S100A4基因可通过调控E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达抑制胃癌干细胞的增殖及克隆形成、迁移、侵袭能力。

摘要： 背景:S100A4是钙离子结合蛋白S100家族的一员,可以与相应的靶蛋白结合,进而对肿瘤细胞、多能干细胞的增殖与转移产生重要的影响,近年研究表明超声靶向破坏微泡技术能增强基因转染效率.目的:探讨超声靶向破坏微泡技术沉默S100A4基因对胃癌干细胞干性、上皮间质转化的影响.方法:取对数生长期的人胃癌细胞株SGC-7901,采用无血清悬浮培养法分离肿瘤干细胞球,流式细胞仪检测肿瘤干细胞表面标记EpCAM+CD44+表达.构建靶向S100A4基因的shRNA表达质粒,超声微泡介导转染至EpCAM+CD44+胃癌干细胞.转染后48 h,Western blot检测S100A4的表达;采用CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell小室检测胃癌干细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力;采用Western blot与qRT-PCR检测上皮-间质转化相关标记物的表达.结果 与结论:流式细胞仪检测结果显示,在胃癌干细胞富集培养后表达EpCAM+CD44+细胞的比例明显高于富集培养前(P<0.05).超声微泡转染S100A4-shRNA质粒48 h后S100A4的蛋白表达量明显低于未转染组(P<0.01).转染后48 h,胃癌干细胞的增殖速度、克隆形成能力、迁移、侵袭能力明显下降,上皮标志物E-cadherin表达升高,间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin表达降低.结果表明,超声靶向破坏微泡技术沉默S100A4基因可通过调控E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达抑制胃癌干细胞的增殖及克隆形成、迁移、侵袭能力.

摘要： 目的:探讨二甲双胍通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞增殖和凋亡的影响.方法:常规培养胃癌MKN-45细胞,并分选其干细胞,采用免疫荧光法观察分选前后MKN-45细胞中CD44+表达情况,通过流式细胞术检测分选前、后MKN-45细胞中CD44+比例,并通过免疫印迹法检测悬浮MKN-45肿瘤细胞球和贴壁细胞中性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)、同源域蛋白(Nanog)的蛋白表达.采用不同剂量二甲双胍(0,1,5,10 mmol/L)处理MKN-45干细胞24～72 h,RT-qPCR检测MKN-45干细胞Wnt/β-catenin信号通路基因表达情况,CCK-8法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果:与胃癌干细胞分选前相比,分选后CD44+比例在MKN-45细胞中由5.70％富集至89.32％;悬浮MKN-45肿瘤细胞球中肿瘤干细胞标志物SOX2、OCT4、Nanog蛋白高于贴壁细胞(P<0.05),提示胃癌干细胞分离成功.随着二甲双胍剂量的增加及处理时间的延长,MKN-45干细胞增殖活性、β-连环蛋白(β-catenin)呈下调趋势,其细胞凋亡率、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)呈上调趋势(P<0.05).结论:随着二甲双胍浓度增加及作用时间延长,胃癌干细胞增殖活性增强,凋亡率降低,其作用原因可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关.

摘要： 目的:探讨大蒜活性成分二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)能否干预香烟烟雾促进的SGC-7901源胃癌干细胞干性,并探究Wnt通路在其中的作用.方法:用不同浓度(0％、0.25％和0.50％)的香烟烟雾悬液和DATS单独或联合处理SGC-7901源胃癌干细胞7 d,显微镜下观察胃癌干细胞球大小及数量的变化,实时定量PCR及蛋白质印迹检测干性基因NANOG、OCT-4、SOX2、LIN28的mRNA和蛋白表达;香烟烟雾悬液、DATS和氯化锂单独或联合处理胃癌干细胞,蛋白质印迹检测干性基因及Wnt通路相关蛋白表达的变化.结果:DATS能明显抑制香烟烟雾促进的胃癌干细胞球的形成及干性基因NANOG、OCT-4、SOX2、LIN28的mRNA和蛋白表达;蛋白质印迹结果显示,DATS能抑制香烟烟雾诱导的 β-连环蛋白、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)表达异常;氯化锂能增强NANOG和OCT-4的表达,与对照组相比,DATS和氯化锂联合处理组GSK3β蛋白表达水平下调,而β-连环蛋白表达水平上调,同时NANOG和OCT-4的蛋白表达水平上调.结论:DATS能抑制香烟烟雾促进的SGC-7901源胃癌干细胞干性,Wnt通路在其中发挥重要作用.

摘要： 建立药物富集肿瘤干细胞模型,并对其生物学特性进行研究。通过用化疗药物5-fu处理获得了稳定耐受氟尿嘧啶的SGC-7901耐药细胞,用MTT法检测细胞耐药性、细胞粘附性,无血清培养基培养法检测成球生长比率,流式细胞仪检测细胞周期.药物筛选后的细胞中含有大量具有干细胞生物学特性的细胞，成功富集了胃癌干细胞，为胃癌干细胞的筛选提供一种新方法。

摘要： 目的:运用无血清培养法富集胃癌干细胞,检测其去整合素金属蛋白酶17(ADAM17)及表皮生长因子受体(EGFR)的表达并探讨其意义.方法:运用无血清条件培养基,悬浮培养胃癌细胞系SGC-7901.将培养好的微球体细胞接种于含胶原底物及血清的培养基中诱导分化.利用流式细胞术检测微球体细胞及分化细胞中侧群(side population,SP)细胞的比例;Real-time PCR及Westernblotting检测两者ADAM17,EGFR mRNA和蛋白的表达.结果:无血清条件下成功培养出胃癌细胞系SGC-7901微球体,并能在体外连续传代;诱导分化后可重新贴壁生长.微球体细胞和分化细胞中SP比例分别为(4.43±0.34)％和(1.53±0.25)％(P＜0.05).微球体细胞与分化细胞相比,ADAM17及EGFR mRNA表达分别上调了约2.6和3.1倍(P＜0.05);蛋白表达也均显著增高.结论:无血清培养法能富集胃癌干细胞,ADAM17可能通过EGFR信号通路在胃癌的发生发展中起重要作用,有望成为胃癌新的治疗靶点.

摘要： 结合肿瘤干细胞理论和实践,从病因上初步探讨了中医学对胃癌干细胞认识,发现胃癌干细胞和中医"痰"在本质上有较大联系.此外,结合目前中西医对胃癌的认识,进一步发现胃癌干细胞的生物学特性更适合中医"无形之痰"的概念.联系目前中医药抗胃癌临床实践,探讨了中医从痰论治胃癌的优势与不足并认为胃癌干细胞很可能是中医药从痰论治胃癌的一个新靶点,值得深入研究.

摘要： 本发明涉及利用植物干细胞和植物去分化干细胞(愈伤组织)的提取物通过重新编程分化的成人细胞来诱导定制亚全能干细胞的方法；利用该方法制得的亚全能干细胞以及包含所述亚全能干细胞的细胞治疗剂。根据本发明，可克服伦理问题，因为没有使用卵来制备具有与胚胎干细胞类似功能的亚全能干细胞，并且可制备确保安全性的亚全能干细胞，因为利用尤其已经证实对身体无害的植物干细胞提取物，并且还可利用本发明来开发适合不同个体的免疫相兼容的细胞治疗剂。此外，预计本发明可在阐明病因以及研究通过诱导亚全能干细胞治疗疾病个体的医学病症的方法时具有很大优势。

摘要： 本发明提供一种胃癌肿瘤细胞和胃癌肿瘤干细胞治疗药物及其应用，本发明的药物BF4（0.0625μM至50μM）、BF4‑2（0.0625μM至10μM）、BF4‑3（5μM至10μM）、BF4‑4（1μM至10μM）、BF4‑5（0.25μM至10μM）可以阻滞胃癌细胞系和胃癌病人来源的肿瘤干细胞的增殖，促进凋亡，并且具有明显的浓度依赖性,并且BF4作用的靶蛋白为CPT2。

摘要： 本发明涉及一种用于直接分化胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂，根据一方面的培养基组合物和方法，不仅可以在短时间内以高产率制备间充质干细胞，而且由于没有胚状体形状的步骤，因此制备工艺简单，并且可以获得具有均质性的细胞，从而具有可以在比现有方法更短的时间内提供细胞治疗剂的效果。

摘要： 本发明涉及利用植物干细胞和植物去分化干细胞(愈伤组织)的提取物通过重新编程分化的成人细胞来诱导定制亚全能干细胞的方法；利用该方法制得的亚全能干细胞以及包含所述亚全能干细胞的细胞治疗剂。根据本发明，可克服伦理问题，因为没有使用卵来制备具有与胚胎干细胞类似功能的亚全能干细胞，并且可制备确保安全性的亚全能干细胞，因为利用尤其已经证实对身体无害的植物干细胞提取物，并且还可利用本发明来开发适合不同个体的免疫相兼容的细胞治疗剂。此外，预计本发明可在阐明病因以及研究通过诱导亚全能干细胞治疗疾病个体的医学病症的方法时具有很大优势。

摘要： 本发明的目的在于，提供包含治疗效果好的MSC的细胞制剂。提供一种活化的MSC的制造方法，包括使用具有由纤维构成的三维结构的细胞培养载体在含有哺乳动物胎儿附属物来源的活化剂的培养基中培养MSC的工序。此外，还提供选自由p16

摘要： 本发明提供了一种胃癌干细胞培养基，它由基础培养基及添加物组成，其中，基础培养基为DME/F12，添加物及在基础培养基中的添加量分别为：B27 50‑150倍稀释、ITS 100倍稀释、Glutamax 2mM、非必需氨基酸0.1mM、表皮生长因子20‑40ng/ml、碱性成纤维生长因子10‑20ng/ml、β巯基乙醇0.1mM、葡萄糖3mg/ml、丙酮酸钠1mM、碳酸氢钠1mg/ml、乙酰半胱氨酸1mM、肝素4ug/ml。本发明还提供了所述培养基的用途及一种胃癌干细胞分离培养方法，本发明提供的培养基及分离培养方法，可以从胃癌细胞系中有效分离培养出胃癌干细胞，为全面研究胃癌的发病机制及侵袭转移打下良好的理论基础。

摘要： 周围神经髓鞘蛋白22作为胃癌干细胞及耐药细胞标志物的用途，涉及细胞标志物。在裸鼠荷瘤模型中通过顺铂连续化疗方案成功富集胃癌耐药细胞和胃癌干细胞，用高通量蛋白芯片检测差异表达蛋白，筛选出细胞表面蛋白PMP22在化疗组肿瘤标本中表达显著上升。在胃癌细胞中证实，PMP22可作为胃癌干细胞的标志物，通过流式细胞仪分选PMP22表达阳性胃癌细胞可实现胃癌干细胞的富集。在胃癌细胞中改变PMP22的表达可影响胃癌细胞的自我更新、耐药和成瘤能力等肿瘤干细胞特性；胃癌临床标本检测结果显示，PMP22在胃癌患者肿瘤组织中表达上调与患者接受常规化疗后2年复发率正相关，提示PMP22表达水平可用于胃癌化疗的预后评估。

摘要： 本发明提供了一种胃癌干细胞培养基，它由基础培养基及添加物组成，其中，基础培养基为DME/F12，添加物及在基础培养基中的添加量分别为：B27 50‑150倍稀释、ITS 100倍稀释、Glutamax 2mM、非必需氨基酸0.1mM、表皮生长因子20‑40ng/ml、碱性成纤维生长因子10‑20ng/ml、β巯基乙醇0.1mM、葡萄糖3mg/ml、丙酮酸钠1mM、碳酸氢钠1mg/ml、乙酰半胱氨酸1mM、肝素4ug/ml。本发明还提供了所述培养基的用途及一种胃癌干细胞分离培养方法，本发明提供的培养基及分离培养方法，可以从胃癌细胞系中有效分离培养出胃癌干细胞，为全面研究胃癌的发病机制及侵袭转移打下良好的理论基础。

摘要： 本发明公开了一种识别胃癌干细胞的标志物LGSN作为胃癌诊断和治疗靶标的应用，涉及生物医药技术领域。发明人发现了一种新的胃癌干细胞标志物LGSN，其在胃癌组织和胃癌干细胞中均显著高表达，并且与胃癌病人不良预后生存时间有关。一方面，本发明提供一种检测LGSN基因和/或其编码的蛋白表达水平的试剂在制备胃癌的诊断试剂或诊断试剂盒中的应用。另一方面，本发明提供一种降低或抑制LGSN基因和/或其编码的蛋白表达的试剂在制备治疗胃癌的药物组合物中的应用。抑制LGSN表达能够触发焦亡，并导致胃癌干细胞生长抑制及体内成瘤，进而增加化疗药物敏感性，本发明提供了一个全新胃癌干细胞分子靶点治疗药物和化疗药物联用的胃癌治疗策略。

摘要： 周围神经髓鞘蛋白22作为胃癌干细胞及耐药细胞标志物的用途，涉及细胞标志物。在裸鼠荷瘤模型中通过顺铂连续化疗方案成功富集胃癌耐药细胞和胃癌干细胞，用高通量蛋白芯片检测差异表达蛋白，筛选出细胞表面蛋白PMP22在化疗组肿瘤标本中表达显著上升。在胃癌细胞中证实，PMP22可作为胃癌干细胞的标志物，通过流式细胞仪分选PMP22表达阳性胃癌细胞可实现胃癌干细胞的富集。在胃癌细胞中改变PMP22的表达可影响胃癌细胞的自我更新、耐药和成瘤能力等肿瘤干细胞特性；胃癌临床标本检测结果显示，PMP22在胃癌患者肿瘤组织中表达上调与患者接受常规化疗后2年复发率正相关，提示PMP22表达水平可用于胃癌化疗的预后评估。