ADAM17、EGFR在胃癌干细胞中的表达及意义

摘要

目的:运用无血清培养法富集胃癌干细胞,检测其去整合素金属蛋白酶17(ADAM17)及表皮生长因子受体(EGFR)的表达并探讨其意义.方法:运用无血清条件培养基,悬浮培养胃癌细胞系SGC-7901.将培养好的微球体细胞接种于含胶原底物及血清的培养基中诱导分化.利用流式细胞术检测微球体细胞及分化细胞中侧群(side population,SP)细胞的比例;Real-time PCR及Westernblotting检测两者ADAM17,EGFR mRNA和蛋白的表达.结果:无血清条件下成功培养出胃癌细胞系SGC-7901微球体,并能在体外连续传代;诱导分化后可重新贴壁生长.微球体细胞和分化细胞中SP比例分别为(4.43±0.34)％和(1.53±0.25)％(P＜0.05).微球体细胞与分化细胞相比,ADAM17及EGFR mRNA表达分别上调了约2.6和3.1倍(P＜0.05);蛋白表达也均显著增高.结论:无血清培养法能富集胃癌干细胞,ADAM17可能通过EGFR信号通路在胃癌的发生发展中起重要作用,有望成为胃癌新的治疗靶点.