肝细胞肿瘤

摘要： 目的 通过测定比较分析肝细胞癌(HCC)患者外周血、癌组织及癌旁组织中的IL-33及ST2的含量变化,探讨IL-33/ST2轴表达与HCC的临床相关性.方法 ELISA分别测定观察组(原发性HCC患者)52例与对照组(健康成年人)50例血清中的IL-33/ST2的含量,化学发光法检测其AFP的含量,另外免疫组化法检测观察组中40例接受外科手术治疗患者癌组织与癌旁组织中的IL-33/ST2的表达;比较分析IL-33/ST2在HCC患者血清、癌组织及癌旁组织中的表达情况,以及性别、年龄、HBV、AFP、肿瘤大小等因素的临床关联性.结果 观察组血清中IL-33的含量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);观察组血清中ST2的水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义(P0.05).IL-33及ST2在癌组织中的阳性表达均低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);另外,IL-33及ST2在癌组织中的血管内皮可见表达,而癌旁组织的血管内皮处未见表达;癌组织及癌旁组织的炎性细胞聚集处可见ST2表达,未发现IL-33表达.结论 HCC患者的血清ST2高表达,IL-33/ST2在HCC癌组织及其血管内皮中的低表达,而ST2只在癌及癌旁组织的炎性细胞聚集处均有表达;由此认为,IL-33/ST2轴可能参与肝癌细胞的血管生成和微环境中的炎性反应,与HBV感染和AFP浓度无关,可进一步研究IL-33/ST2轴作用机制,寻找HCC早期筛查新的潜在标志物和治疗靶点.

摘要： 目的:探讨程序性死亡配体(PD-L1)在肝癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用.方法:转染有效的PD-L1基因siRNA干扰片段进入人肝细胞癌HepG2细胞中,下调细胞中PD-L1表达.采用荧光定量PCR法检测HepG2细胞中PD-L1基因表达情况,采用Western blotting法检测HepG2细胞中PD-L1蛋白表达情况.通过MTT实验观察其对HepG2细胞增殖能力的影响,采用细胞划痕实验检测细胞融合率,采用Transwell小室进行侵袭实验,观察其对HepG2细胞迁移及侵袭能力影响.结果:下调PD-L1后,HepG2细胞PD-L1基因表达量、PD-L1蛋白表达量和细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力均明显低于阴性对照组和空白对照组(P0.05).结论:下调PD-L1后,肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力有一定程度下降,PD-L1可能成为肝细胞肝癌免疫治疗中的一个新基因靶位.

摘要： 目的 通过对癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)公共数据库中肝细胞癌病例癌和癌旁组织RNA测序数据的分析,挖掘与肝细胞癌预后相关的长链非编码RNA (lncRNA)分子标签.方法 截至2018年2月,从TCGA数据库中获得377例肝细胞癌病例的癌及癌旁组织RNAseq数据及临床预后信息,将50对癌和癌旁组织的lncRNA表达水平进行差异t检验分析,进而采用LASSO Cox回归分析筛选肝细胞癌预后相关的lncRNA,并构建lncRNA分子标签.将所有病例按分子标签表达水平分为4组(＜P25、P25～、P50～、≥P75),采用Cox回归计算P25～、P50～、≥P75组相对于＜P25组的预后风险比,进而评估分子标签表达水平对肝细胞癌病例总体生存率的影响.结果 筛选出951个癌和癌旁组织中表达水平有统计学意义差异的lncRNA,通过LASSO Cox回归分析进一步筛选出3个lncRNA(LNCSRLR、MKLN1-AS及ZFPM2-AS1),并构建分子标签.分子标签表达水平≥P75组的死亡风险是＜P25组的1.57倍(95％CI:1.06～ 2.31,P＜0.05).结论 通过对TCGA数据库的挖掘,由LNCSRLR、MKLN1-AS及ZFPM2-AS1构建的lncRNA分子标签表达水平与肝细胞癌病例的预后有关.%Objective To explore an effective long non-coding RNA (lncRNA) signature in predicting the prognosis of hepatocellular carcinoma through the analysis on RNA sequencing data of hepatocellular carcinoma patients and peritumoral tissues in the Cancer Genome Atlas (TCGA) database.Methods The clinical characteristics and RNA sequencing data of 377 hepatocellular carcinoma patients were obtained from TCGA database by the end of February 2018.Then,differentially expressed lncRNAs between 50 pairs of tumor and peritumoral tissues were explored using student's t-test.Next,a lncRNA signature was established through LASSO Cox regression analysis.All the patients were divided into four groups (＜P25,P25-,P50-,≥P75) based on the cut-off quartiles signature.Finally,compared with the control group (＜P25),the hazard ratios (HRs) of three groups (P25-,P50-,≥P75) were calculated by using Cox regression.The survival outcomes of patients in the four groups were compared to evaluate the capacity of the lncRNA signature model.Results A total of 951 differentially expressed lncRNAs were identified between tumor and peritumoral tissues.A three-lncRNA signature,including LNCSRLR,MKLN1-AS and ZFPM2-AS1,was established to predict the prognosis of hepatocellular carcinoma patients.The outcome suggested that the death risk of the ≥P75 group was 1.57 times larger than that of the ＜P25 group (95％CI:1.06-2.31,P＜0.05).Conclusion The three-lncRNA signature,which established by LNCSRLR,MKLN1-AS and ZFPM2-AS1,was significantly associated with the prognosis of hepatocellular carcinoma patients based on TCGA database data.

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA DQ786243(LncRNA DQ786243)促进肝细胞癌细胞增殖的作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测175例肝细胞癌癌组织及对应癌旁正常组织中LncRNA DQ786243的表达;在HepG2细胞中瞬时转染LncRNA DQ786243的小干扰RNA片段(si-DQ786243),CCK-8实验检测降低LncRNA DQ786243的表达对细胞增殖能力的影响,West-ern blot法检测降低LncRNA DQ786243表达对p18蛋白表达的影响;在HepG2细胞中瞬时共转染si-DQ786243、p18的小干扰RNA片段(si-p18),CCK-8法检测同时降低LncRNA DQ786243、p18的表达对细胞增殖能力的影响.结果 肝细胞癌组织中LncRNA DQ786243的表达增加(P<0.05);在HepG2细胞中降低LncRNA DQ786243的表达,细胞增殖减慢,p18表达增加(P均<0.05);降低p18表达可部分逆转LncRNA DQ786243表达下降导致的细胞增殖能力下降(P<0.05).结论 LncRNA DQ786243可通过下调p18的表达促进肝细胞癌细胞的增殖,进而促进肝细胞癌的发生、发展.

摘要： 消化系统肿瘤是最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展机制尚不清楚是影响肿瘤治疗的重要原因.研究表明RNA在消化系统肿瘤的转录后调控机制中发挥重要的作用,ln-cRNA、mRNA、假基因转录物、环状RNA等各类RNA分子,仅需相同的miRNA应答元件,就可竞争性结合相同的miRNA调控靶基因,从而调节各自的表达.这些RNA分子互为竞争性内源性RNA(competing endogenous RNA,ceRNA).该文着重探讨ceRNA假说及其在消化系统恶性肿瘤中的研究进展,并展望其研究前景.

摘要： 目的：对酶联免疫吸附试验（ELISA）检测壳多糖酶3样蛋白1（CHI3L1）的试剂盒性能进行评价，以及评估该指标初步用于肝细胞癌诊断的价值。方法：根据CNAS-CL02和《CLIA88》修订版的要求，对厂商提供CHI3L1的试剂盒的精密度、正确度、可报告范围、参考区间四项性能指标进行验证；选取入院且经病理学证实肝细胞癌患者，同时按性别和年龄配对选择健康体检者作为对照组，分别检测肿瘤组和健康体检者的血清CHI3L1，并比较两组之间是否存在差异。结果： CHI3L1性能验证结果如下：低浓度和高浓度水平的批内不精密度分别为3．60％和3．06％，总不精密度分别为3．95％和5．49％，均小于厂家声明的15％；通过和其他医院进行比对，正确度指标符合要求；CHI3L1为一阶线性，线性回归方程和判定系数为 Y ＝0．995X－13．217， r ＝0．998， b、 a 和 r 均符合要求，线性范围为60．35～969．98 pg／mL；20例健康人群的CHI3L1结果有19例检测结果在厂家声明参考区间范围之内，厂家给定参考区间适用于本实验室；CHI3L1结果， HCC 组显著高于健康对照组，差异有统计学意义。结论：ELISA法检测CHI3L1的验证指标均到达规定要求，能满足临床使用要求；初步临床应用结果显示，HCC 时 CHI3L1指标会升高，可以初步应用于HCC临床辅助诊断。

摘要： 目的 探讨原发性肝癌致阻塞性黄疸的原因及治疗方法.方法 回顾性分析2003年9月至2014年8月收治的50例原发性肝癌致阻塞性黄疸的原因及治疗效果.结果 50例患者阻塞性黄疸均系肝癌引发胆总管癌栓所致.其中,45例进行了总胆管切开取癌栓T管引流术,同时行肝肿瘤切除22例、患侧肝动脉结扎者23例;5例进行了非手术治疗.在45例行手术治疗的患者中,17例肝左叶肿瘤患者术后平均生存11个月,28例肝右叶肿瘤患者生存7个月,总平均存活时间为9个月;5例非手术治疗患者平均生存时间仅3个月;手术患者较非手术患者平均存活时间明显延长(P＜0.01).结论 外科手术明显延长阻塞性黄疸肝癌患者生存时间,改善其生活质量.

摘要： 微小RNA(miRNA)是近年来研究较多的内源性非编码小RNA,能与靶基因3'UTR进行不完全配对,通过序列特异性翻译抑制或信使RNA降解来调控靶基因表达,参与细胞发育、增殖、分化、凋亡等一系列重要生物学进程,并在肿瘤的发生和发展过程中起着重要作用.越来越多的研究证实miRNA与肝细胞癌的发生发展、侵袭转移、血管生成、术后复发等生物学行为相关;并有研究者将miRNA用于肝细胞癌的早期诊断及治疗.本文就与肝细胞癌相关的miRNA研究作一综述.

摘要： 肝血管瘤(Hepatichaemangiomas)是良性的肝细胞肿瘤,常见于女性,男女之比为1:5,为肝脏最常见的良性肿瘤,占肝占位性病变的31.3％,多发者为9％-22％,其尸检发生率为0.4％-7.3％.肝血管瘤常由于B超检查偶然发现,直径小于5cm.直径小于5cm的肝血管瘤其B超表现为:边界清楚完整,质地均匀,高回声,B超的诊断率可达80％;而较大的血管瘤(≥5),常由于瘤体内血栓形成、钙化或出血,常需要CT或MRI检查加以鉴别.

摘要： 肝细胞癌(HCC)是世界上第五种最常见的癌症.医学界就迫切需要一种早期HCC诊断的有效方法.本文利用用于HCC监测的标志物及各种血清标志物，对肝癌的诊断进行综合分析。介绍了甲胎蛋白异质体(AFP-L3)亲和吸附纯化方法的建立；高尔基蛋白73(GP73)原核表达系统的构建、抗体制备及检测方法的建立；基于BP神经网络的原发性肝癌诊断模型的建立及评价。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是世界上第五种最常见的癌症.医学界就迫切需要一种早期HCC诊断的有效方法.本文利用用于HCC监测的标志物及各种血清标志物，对肝癌的诊断进行综合分析。介绍了甲胎蛋白异质体(AFP-L3)亲和吸附纯化方法的建立；高尔基蛋白73(GP73)原核表达系统的构建、抗体制备及检测方法的建立；基于BP神经网络的原发性肝癌诊断模型的建立及评价。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是世界上第五种最常见的癌症.医学界就迫切需要一种早期HCC诊断的有效方法.本文利用用于HCC监测的标志物及各种血清标志物，对肝癌的诊断进行综合分析。介绍了甲胎蛋白异质体(AFP-L3)亲和吸附纯化方法的建立；高尔基蛋白73(GP73)原核表达系统的构建、抗体制备及检测方法的建立；基于BP神经网络的原发性肝癌诊断模型的建立及评价。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是世界上第五种最常见的癌症.医学界就迫切需要一种早期HCC诊断的有效方法.本文利用用于HCC监测的标志物及各种血清标志物，对肝癌的诊断进行综合分析。介绍了甲胎蛋白异质体(AFP-L3)亲和吸附纯化方法的建立；高尔基蛋白73(GP73)原核表达系统的构建、抗体制备及检测方法的建立；基于BP神经网络的原发性肝癌诊断模型的建立及评价。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是病死率很高的常见恶性肿瘤。半个世纪以来，新的理念和方法不断地应用于HCC的治疗，形成了包括手术治疗(肝切除术和肝移植)、经皮肿瘤消融治疗(PEI、RFA和MA)、经肝动脉治疗(栓塞、灌注化疗和栓塞化疗)、体外能量源治疗(放疗和HIFU)、全身化疗(生物靶向药物、细胞毒药物和激素)等多元化治疗的格局。近20年来，随着对HCC自然病程和生物学特性认识的深化、各种治疗方法的优化及联合应用、优质临床研究证据的积累，HCC的治疗理念正在发生着转变。本文从由经验选择向循证决策的转变、由粗放医疗向精准医疗的转变、由单一治疗向整合治疗的转变等不同角度，就肝细胞癌治疗理念与策略的转变进行浅谈。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是病死率很高的常见恶性肿瘤。半个世纪以来，新的理念和方法不断地应用于HCC的治疗，形成了包括手术治疗(肝切除术和肝移植)、经皮肿瘤消融治疗(PEI、RFA和MA)、经肝动脉治疗(栓塞、灌注化疗和栓塞化疗)、体外能量源治疗(放疗和HIFU)、全身化疗(生物靶向药物、细胞毒药物和激素)等多元化治疗的格局。近20年来，随着对HCC自然病程和生物学特性认识的深化、各种治疗方法的优化及联合应用、优质临床研究证据的积累，HCC的治疗理念正在发生着转变。本文从由经验选择向循证决策的转变、由粗放医疗向精准医疗的转变、由单一治疗向整合治疗的转变等不同角度，就肝细胞癌治疗理念与策略的转变进行浅谈。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是病死率很高的常见恶性肿瘤。半个世纪以来，新的理念和方法不断地应用于HCC的治疗，形成了包括手术治疗(肝切除术和肝移植)、经皮肿瘤消融治疗(PEI、RFA和MA)、经肝动脉治疗(栓塞、灌注化疗和栓塞化疗)、体外能量源治疗(放疗和HIFU)、全身化疗(生物靶向药物、细胞毒药物和激素)等多元化治疗的格局。近20年来，随着对HCC自然病程和生物学特性认识的深化、各种治疗方法的优化及联合应用、优质临床研究证据的积累，HCC的治疗理念正在发生着转变。本文从由经验选择向循证决策的转变、由粗放医疗向精准医疗的转变、由单一治疗向整合治疗的转变等不同角度，就肝细胞癌治疗理念与策略的转变进行浅谈。

摘要： 肝细胞癌(HCC)是病死率很高的常见恶性肿瘤。半个世纪以来，新的理念和方法不断地应用于HCC的治疗，形成了包括手术治疗(肝切除术和肝移植)、经皮肿瘤消融治疗(PEI、RFA和MA)、经肝动脉治疗(栓塞、灌注化疗和栓塞化疗)、体外能量源治疗(放疗和HIFU)、全身化疗(生物靶向药物、细胞毒药物和激素)等多元化治疗的格局。近20年来，随着对HCC自然病程和生物学特性认识的深化、各种治疗方法的优化及联合应用、优质临床研究证据的积累，HCC的治疗理念正在发生着转变。本文从由经验选择向循证决策的转变、由粗放医疗向精准医疗的转变、由单一治疗向整合治疗的转变等不同角度，就肝细胞癌治疗理念与策略的转变进行浅谈。

摘要： 近年来，以手术为主的综合治疗显著提高了肝细胞癌(简称肝癌)的疗效。对严格选择的患者，根治性的肝癌切除及肝脏移植术后5年生存率可达70％左右。但即使如此，术后超过70％的患者将发生肿瘤复发或远处转移，高达90％以上的死亡因素可以与肿瘤转移复发有关。由此可见，肝癌的复发转移是阻碍获得远期生存的重要因素，深入探讨复发转移的机制并寻找干预策略是肝癌诊疗领域的重要课题。本文就肿瘤的生物学特征及肿瘤微环境对肝细胞癌复发转移的影响进行浅谈。

摘要： 本发明公开了一种原代肝细胞冻存液、肝细胞冻存的方法及肝细胞复苏的方法，属于原代肝细胞冻存与复苏领域。所述原代肝细胞冻存液，由如下体积百分数的组分组成：45％溶液A、10％‑45％胎牛血清、10％二甲基亚砜和0％‑35％水，所述溶液A由如下组分组成：D‑葡萄糖、羟乙基淀粉、乳糖酸、聚乙烯吡咯烷酮、五水D‑棉子糖、氢氧化钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁、腺苷、还原性谷胱甘肽、别嘌醇、牛磺熊去氧胆酸和甘草酸二氨。本发明还公开了一种肝细胞冻存的方法及肝细胞复苏的方法。本发明的原代肝细胞冻存液可以降低原代肝细胞在冻存过程中的损伤、提高解冻后原代肝细胞活力与贴壁效率，可广泛用于肝脏基础研究与新药研发过程中。

摘要： 本发明公开了一种白细胞介素2(IL‑2)调节肿瘤巨噬细胞生成的外泌体分泌成分抑制肝细胞癌的生长和转移方法，探索来自TAM的外泌体与IL‑2处理后对肝癌发展的影响。TAM从肝癌组织中收集和培养。用IL‑2(ExoIL2‑TAM)或未用(ExoTAM)处理的TAM的外泌体，并用于治疗肝癌。在体和离体检测肝癌细胞增殖、凋亡和转移。在体内和体外，与ExoTAM相比，ExoIL2‑TAM治疗观察到细胞增殖和转移的减少以及细胞凋亡的增加。IL‑2可以调节来自TAM的外泌体成分以改善肝细胞癌的发展一种方法。本发明为IL‑2抑制肝细胞癌的机制提供了新的视角和方法，并暗示TAMs释放的外泌体成分的潜在临床价值。

摘要： 已发现白细胞衍生趋化因子2(LECT2)与HCC病患的血管侵入程度的抑制调控有关。亦发现LECT2通过抑制MET及其他在HGF/MET路径中下游目标的磷酸化，而强烈地减少HCC细胞的生长、迁移及侵入。发现LECT2的HXXXD基序对于其肿瘤抑制机制是重要的。除了HCC以外，LECT2于其他癌症中减少Met酪氨酸磷酸化及肿瘤细胞侵入，例如肺癌、乳癌、及胃癌。基于上述新发现的LECT2的肿瘤抑制特性，描述用于预防、治疗或诊断肿瘤(例如HCC)的方法及组合物。

摘要： 本申请公开了一种包含特异性结合人脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的小分子配体的聚合物，以及利用ASGPR结合剂，例如所述聚合物从生物体液样品中富集或分离肝组织特异性细胞外囊泡，尤其是外泌体以及肝特异性来源循环肿瘤细胞的方法。本申请还公开了ASGPR结合剂，例如所述聚合物的用途以及包含ASGPR结合剂，例如所述聚合物的试剂盒。

摘要： 本发明提供了一种检测肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞C‑MET基因突变的试剂盒及检测方法，所述的试剂盒包括稀释液、脱色液、染色液A、染色液B、兔抗人C‑MET一抗、生物素标记的鼠抗兔二抗、0.1%Triton X‑100、0.3%H2O2、试剂A；检测方法为利用膜过滤装置分离获取外周血循环肿瘤细胞CTC，并运用免疫组化技术检测外周血CTC的C‑MET表达情况。利用本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者C‑MET表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测；采用本发明中分离装置及稀释液，循环肿瘤细胞分离好，避免血细胞的干扰，避免染色过程中可能产生的边缘效应导致的假阳性结果，稳定性好，降低细胞的损失，提高检测的准确性。

摘要： 本发明提供了一种检测肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞E‑Cadherin表达的试剂盒及检测方法，所述的试剂盒包括稀释液、脱色液、染色液A、染色液B、鼠抗人E‑Cadherin一抗、连接有辣根过氧化物酶的兔抗鼠二抗、0.1%Triton X‑100、0.3%H2O2、试剂A；检测方法为利用膜过滤装置分离获取外周血循环肿瘤细胞CTC，并运用免疫组化技术检测外周血CTC的E‑Cadherin表达情况。利用本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者E‑Cadherin表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测；采用本发明中分离装置及稀释液，循环肿瘤细胞分离好，避免血细胞的干扰，避免染色过程中可能产生的边缘效应导致的假阳性结果，稳定性好，降低细胞的损失，提高检测的准确性。

摘要： 本发明公开了一种肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞上E‑Cadherin表达的免疫荧光检测方法包括8%PFA，0.4%PFA，0.3%TritonX‑100，10%山羊血清，兔抗人E‑Cadherin、大鼠抗CD45组成的一抗混悬液100μl，荧光标记的羊抗兔、荧光标记的羊抗大鼠组成的二抗混悬液100μL，DAPI封片剂；检测方法包括外周血采集、外周血样预处理、样本分离、甲醇固定、贴膜、组化笔画圈、细胞固定、细胞穿透、封闭、一抗孵育、二抗孵育及核染色、封片及检测。本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者E‑Cadherin表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测。

摘要： 本发明公开了一种肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞上C‑MET表达的免疫荧光检测方法包括8%PFA，0.4% PFA，0.3% TritonX‑100，10%山羊血清，兔抗人C‑MET、大鼠抗CD45组成的一抗混悬液100μl，荧光标记的羊抗兔、荧光标记的羊抗大鼠组成的二抗混悬液100μL，DAPI封片剂；检测方法包括外周血采集、外周血样预处理、样本分离、甲醇固定、贴膜、组化笔画圈、细胞固定、细胞穿透、封闭、一抗孵育、二抗孵育及核染色、封片及检测。本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者C‑MET表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测。

摘要： 本发明公开了一种肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞上PD‑L1表达的免疫荧光检测方法包括8%PFA，0.4%PFA，0.3%TritonX‑100，10%山羊血清，抗人PD‑L1、大鼠抗CD45组成的一抗混悬液100μl，荧光标记的羊抗兔、荧光标记的羊抗大鼠组成的二抗混悬液100μL，DAPI封片剂；检测方法包括外周血采集、外周血样预处理、样本分离、甲醇固定、贴膜、组化笔画圈、细胞固定、细胞穿透、封闭、一抗孵育、二抗孵育及核染色、封片及检测。本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者PD‑L1表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测。

摘要： 本发明提供了一种检测肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞PD‑L1表达的试剂盒及检测方法，所述的试剂盒包括稀释液、脱色液、染色液A、染色液B、抗人PD‑L1一抗、酶标羊抗人二抗1、0.1%Triton X‑100、0.3%H2O2、试剂A；检测方法为利用膜过滤装置分离获取外周血循环肿瘤细胞CTC，并运用免疫组化技术检测外周血CTC的PD‑L1表达情况。利用本发明提供的检测方法，不用穿刺活检获取组织标本即可检测到晚期或复发肝细胞癌患者PD‑L1表达情况，利用微创技术，能够实现实时动态检测；采用本发明中分离装置及稀释液，循环肿瘤细胞分离好，避免血细胞的干扰，避免染色过程中可能产生的边缘效应导致的假阳性结果，稳定性好，降低细胞的损失，提高检测的准确性。