微囊藻毒素-LR

摘要： 以单链DNA为模板,制备了单链DNA-银纳米簇(ssDNA-Ag NCs)荧光探针,构建了一种无酶无标记检测微囊藻毒素-LR(microcystin-LR)的荧光传感分析方法.设计的ssDNA既能作为模板合成ssDNA-Ag NCs荧光探针,又能与目标分析物微囊藻毒素-LR通过高亲和性和高特异性结合.采用透射电镜(TEM)、紫外-可见光谱(UV-vis)、荧光光谱(FL)表征了ss DNA-Ag NCs的形貌和光学特性.实验结果表明,当存在微囊藻毒素-LR时,由于ssDNA与微囊藻毒素-LR之间的特异性亲合作用力强于Ag NCs,导致Ag NCs释放出来,体系荧光猝灭.在优化实验条件下,ssDNA-Ag NCs荧光探针对微囊藻毒素-LR检测的线性范围为0.05~1 000μg/L,检出限为16 ng/L(S/N=3).该荧光探针制备简单、无需任何标记、灵敏度高,为环境水体中微囊藻毒素-LR的快速和准确测定提供了一种简单、可靠、有效的方法.

摘要： 目的:探讨血清微囊藻毒素-LR(MC-LR)水平与原发性肝癌临床病理特征之间的关系,为肝癌的预防和控制提供科学依据。方法:选取2016年12月至2021年7月在广西医科大学附属肿瘤医院就诊的原发性肝癌患者405例作为肝癌组,411例同期体检的健康者作为对照组。收集研究对象的一般人口学及临床资料,采用酶联免疫吸附试验检测研究对象血清MC-LR水平。结果:肝癌组血清MC-LR水平高于对照组[(0.18±0.09)ng/mL vs(0.12±0.06)ng/mL,P<0.01]。与MC-LR低暴露组(<0.14 ng/mL)相比,MC-LR高暴露组(≥0.14 ng/mL)人群发生肝癌风险明显增加(校正OR=2.81,95%CI:1.78~4.43,P<0.001)。肿瘤直径≥5 cm、多发、BCLC分期为C~D期、低分化、出现淋巴结转移、远处转移或侵犯门静脉者,血清MC-LR水平较高(均P<0.05)。结论:MC-LR高暴露可能增加原发性肝癌发病风险,肝癌患者血清MC-LR水平与肿瘤直径及数量、分化程度、BCLC分期、淋巴结转移等临床病理特征相关。

摘要： 利用全自动固相萃取仪—高效液相色谱的分析方法,采用甲醇+缓冲盐为流动相,分别测定水样和藻细胞中微囊藻毒素-LR,相关系数(R)0.999,加标回收率70%~119%。该方法测得的水质和藻细胞中微囊藻毒素-LR的回收率均满足监测要求,其中水中的微囊藻毒素-LR无需按照《生活饮用水标准检验方法 有机物指标》(GBT 5750.8-2006)方法进行回收率折算。实际样品的监测过程中发现水样中的MC-LR基本未检出,而藻细胞中的检出率较高,因此应高度关注藻细胞中MC-LR对河流环境质量的影响。

摘要： 【目的】为探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)对草鱼肝脏脂质代谢的影响机制,对已获得的草鱼肝脏转录组数据进行了挖掘分析。【方法】草鱼经腹腔注射不同剂量(0,25,75,100μg/kg)MC-LR 96 h后,分离肝脏提取RNA,依托IlluminaHiseq-2500平台进行转录组测序分析,将筛选到的差异表达基因(DEGs)进行KEGG Pathway分析。同时利用荧光定量PCR(qRT-PCR)对随机选取的3个DEGs的表达模式进行验证。【结果】25,75,100μg/kg 3个实验组中的脂质代谢相关DEGs分别有37、363和132个。75μg/kg和100μg/kg 2个实验组中的DEGs分别富集到脂肪酸分解代谢等15个脂质代谢通路上。而25μg/kg实验组中DEGs富集到12个脂质代谢通路上,和其它2个剂量相比,脂肪酸合成通路、不饱和脂肪酸合成通路以及脂肪酸延长通路中没有DEGs。PPAR信号通路作为脂质代谢的关键调控通路,在3个MC-LR处理组中也有大量DEGs,其共同DEGs主要有PPARα、FABP、CYP7A1和LPL等7个基因。qRT-PCR结果显示PPARα、LPL和CPT1表达结果与转录组测序结果趋势一致。【结论】通过对转录组测序数据的深入挖掘,分析得到了大量草鱼肝脏脂质代谢相关通路和DEGs,表明MC-LR干扰了草鱼肝脏脂质代谢,另外,部分DEGs有望被开发为鉴定MC-LR干扰鱼类脂质代谢的分子标记。

摘要： 目的 探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)长期低剂量暴露对肾脏的毒性作用及其潜在的分子机制。方法 构建MC-LR慢性染毒体内模型,将20只C57BL/6小鼠随机分成4组,分别给予含0、1、60、120μg/L MC-LR的饮用水染毒12月。构建MC-LR染毒体外模型,将HEK293细胞分为对照组,MC-LR染毒组,PI3K抑制剂LY294002组,LY294002+MC-LR组。在体内模型中监测小鼠体质量和肾脏质量,观察小鼠肾脏组织损伤。在体内外模型中检测小鼠肾脏和HEK293细胞的肾功能指标,炎症因子IL-6、TNF-α和IL-10的mRNA表达水平以及PI3K/AKT通路蛋白的相对表达水平。结果 体内模型中:各组小鼠体质量变化的总体趋势一致,肾脏绝对质量和肾脏指数也无明显改变。与对照组相比,60和120μg/L染毒组小鼠出现肾结构损伤,BUN和SCr水平显著上升,且差异有统计学意义(P<0.05)。促炎因子IL-6和TNF-α水平在60和120μg/L染毒组中上调,抗炎因子IL-10在所有染毒组中下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的蛋白相对表达量均在60和120μg/L染毒组上升,且差异有统计学意义(P<0.05)。体外模型中:在HEK293细胞中,BUN和Cr水平在MC-LR组呈升高趋势而在MC-LR+LY294002组中显著下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。促炎因子IL-6和TNF-α的mRNA表达水平在MC-LR组呈升高趋势而在MC-LR+LY294002组中显著下降,抗炎因子IL-10的mRNA表达水平在MC-LR组呈下降趋势而在MC-LR+LY294002组中显著升高,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的表达水平也同样在MC-LR组上调而在MC-LR+LY294002组中显著下调,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MC-LR可通过调控PI3K/AKT信号通路,激活炎症反应,诱导小鼠肾脏结构和功能损伤。

摘要： 旨在探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对体外成熟猪卵母细胞的毒性损伤及其潜在损伤机制.本研究从屠宰场所获得的猪卵巢中收集GV期卵母细胞,将其随机分为4组,在卵母细胞体外成熟培养液中分别添加0、20、40和60μg? mL-1 MC-LR,研究MC-LR对卵母细胞第一极体(Pbl)排出、纺锤体结构以及细胞内活性氧(ROS)、早期凋亡蛋白(Annexin V)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响,并采用RT-qPCR分析氧化应激和凋亡相关基因SOD1、SOD2、CA T、GSH-Px、Bax和Bcl2 mRNA的表达变化情况,试验重复3次.结果发现,MC-LR处理导致猪卵母细胞PbI排出率呈浓度依赖性下降,当MC-LR添加浓度达40 μg ?mL-1以上时,卵母细胞成熟率极显著下降(P＜0.01),且纺锤体结构异常率极显著升高(P＜0.001);进一步研究发现,MC-LR处理后卵母细胞ROS水平极显著升高(P＜0.01),而GSH-Px活性极显著降低(P＜0.01),并伴随着抗氧化相关基因SOD1、CA T及GSH-Px mRNA表达极显著下调(P＜0.01);细胞凋亡检测表明,MC-LR处理可导致卵母细胞早期凋亡率极显著增加(P＜0.01),凋亡相关基因Bax/Bcl2比值极显著升高(P＜0.001).研究结果表明,MC-LR可诱导猪卵母细胞纺锤体结构异常,并引发氧化损伤与细胞凋亡,最终导致卵母细胞成熟能力下降.

摘要： 为深入研究肿瘤蛋白p53诱导核蛋白1(Tumor protein 53-induced nuclear protein 1,TP53INP1)的结构及其在微囊藻毒素-LR(MC-LR)胁迫下的表达变化,以MC-LR诱导的草鱼(Ctenopharygodon idella)肝脏转录组测序获得的unigenes序列为基础,扩增获得了TP53INP1基因的cDNA序列(GenBank登录号:MG797689),其中开放阅读框(Open reading frame,ORF)为759 bp,编码252个氨基酸,属于β类型,具有4个PEST结构.氨基酸同源性分析结果表明,TP53INP1具有较高的保守性,其中与鱇浪白鱼(Anabarilius grahami)相似性最高.系统进化分析结果表明其与鱇浪白鱼(Anabarilius grahami)、斑马鱼(Danio rerio)等鱼类聚为一大支.采用荧光定量PCR分析发现TP53INP1基因在草鱼各组织中广泛分布,其中,在肝脏和血液等组织中表达丰富,显著高于在头肾组织中的表达(P<0.05).采用Western blot检测分析不同剂量(25、75和100μg MC-LR/kg BW)MC-LR染毒96h后对草鱼肝脏TP53INP1蛋白的影响,结果发现草鱼在100μg MC-LR/kg BW剂量组中染毒96h后表达显著下降(P<0.05),暗示TP53INP1可能在响应MC-LR胁迫中起着重要作用.研究为进一步了解TP53INP1的功能及为深入探讨TP53INP1在鱼类响应MC-LR胁迫后的作用机制提供了基础资料.

摘要： 浙江省农村饮用水存在安全隐患,以超滤/纳滤膜为核心建立饮用水净化工艺,考察纳滤膜对水质的提升效果.结果表明:纳滤膜对TOC、CODMn和TDS有较好的去除效果,出水CODMn质量浓度均稳定在1 mg/L以下,NF90和NF270的出水TOC质量浓度分别为1.63 mg/L和0.17 mg/L;NF90的出水TDS优于NF270,NF270的平均去除率为55.87％,NF90的平均去除率为96.97％;这两款膜对于不同分子量有机农药去除具有差异性,膜出水微囊藻毒素-LR的去除率都在90％以上,且出水质量浓度符合饮用水的标准(1μg/L).这两款纳滤膜对蛋白类物质有较好的去除效果,NF270对于分子量小于3 kDa有机物的去除存在局限性.

摘要： 目的 蓝藻水华引起的微囊藻毒素污染是世界性关注话题之一,微囊藻毒素LR(MC-LR)具有强特异性肝毒性,但其引起肝损伤的确切机制尚未完全阐明.为解决这一问题,本研究从细胞分子层面探讨MC-LR造成肝细胞线粒体功能改变的分子机制.方法 提取小鼠原代肝细胞,加入梯度剂量的MC-LR(2.5～10 nmol/L)作用48 h,以未加毒素处理组为对照,检测MC-LR对线粒体功能的影响(包括ATP水平和线粒体膜电位检测),DNA损伤(包括彗星试验和8-OHdG水平检测),并分析p53抑制剂pft-α作用下线粒体功能损伤情况.结果 MC-LR造成肝细胞线粒体功能障碍,DNA损伤且p53蛋白表达水平上调;p53特异性抑制剂pft-α减轻MC-LR造成的线粒体损伤.结论 在本试验条件下,MC-LR造成小鼠肝细胞线粒体功能异常的机制与其造成DNA损伤诱导p53上调有关.

摘要： 以新型环状DNA为模板,制备了环状DNA-银纳米簇(Circular DNA-AgNCs)荧光探针,构建了一种无酶无标记检测微囊藻毒素-LR(MC-LR)的荧光传感分析方法.设计的环状DNA由MC-LR适体链(Apt)和适体链的互补链(cDNA)杂交形成,且cDNA可作为DNA模板用于合成AgNCs.利用透射电子显微镜(TEM)、紫外-可见光谱(UV-Vis)和荧光光谱(FL)表征了AgNCs的形貌和光学特性.结果表明,当存在目标物MC-LR时,由于MC-LR与环状DNA中Apt高特异性和高亲和力结合,导致环状DNA解体,释放出的cDNA-AgNCs在610 nm处呈现强荧光.在优化实验条件下,环状DNA-AgNCs荧光探针对MC-LR检测的线性范围为0.005～500μg/L,检出限为1.7 ng/L(S/N=3).该荧光探针具有制备简单、无需任何标记和灵敏度高等特点,为环境水样中微囊藻毒素-LR的快速和准确测定提供了一种简单、可靠和有效的方法.

摘要： 由蓝藻产生的微囊藻毒素-LR(MC-LR)是毒性最大且分布最广的MC异构体.生物降解是目前去除MC-LR具有成本低廉且安全高效等特点的方法之一.本研究旨在从一株新型土著细菌Sphingopyxis sp.YF1中获得一种重要的MC降解酶microcystinase,探讨该酶对MC的降解特性及机制.结果显示,microcystinase的分子量约为40kda,在20μg/mL MC-LR、pH7和400μg/mL microcysti-nase的最适条件下,microcystinase去除MC-LR的速率可达1.0μg/mL/min.降解过程中出现了MC降解产物线性化MC-LR(m/z1011.55255,C49H76N10O13),其抑制蛋白磷酸酶2A活性的能力弱于MC-LR.该研究首次表明了该酶对MC的降解速率受不同MC-LR浓度、pH值和蛋白质浓度的影响,并且能在碱性条件下降解MC-LR.耐碱microcystinase对MC-LR具有一定的解毒作用,因此对MC污染水体具有良好的生物修复潜力.

摘要： 由蓝藻产生的微囊藻毒素-LR(MC-LR)是毒性最大且分布最广的MC异构体.生物降解是目前去除MC-LR具有成本低廉且安全高效等特点的方法之一.本研究旨在从一株新型土著细菌Sphingopyxis sp.YF1中获得一种重要的MC降解酶microcystinase,探讨该酶对MC的降解特性及机制.结果显示,microcystinase的分子量约为40kda,在20μg/mL MC-LR、pH7和400μg/mL microcysti-nase的最适条件下,microcystinase去除MC-LR的速率可达1.0μg/mL/min.降解过程中出现了MC降解产物线性化MC-LR(m/z1011.55255,C49H76N10O13),其抑制蛋白磷酸酶2A活性的能力弱于MC-LR.该研究首次表明了该酶对MC的降解速率受不同MC-LR浓度、pH值和蛋白质浓度的影响,并且能在碱性条件下降解MC-LR.耐碱microcystinase对MC-LR具有一定的解毒作用,因此对MC污染水体具有良好的生物修复潜力.

摘要： 由蓝藻产生的微囊藻毒素-LR(MC-LR)是毒性最大且分布最广的MC异构体.生物降解是目前去除MC-LR具有成本低廉且安全高效等特点的方法之一.本研究旨在从一株新型土著细菌Sphingopyxis sp.YF1中获得一种重要的MC降解酶microcystinase,探讨该酶对MC的降解特性及机制.结果显示,microcystinase的分子量约为40kda,在20μg/mL MC-LR、pH7和400μg/mL microcysti-nase的最适条件下,microcystinase去除MC-LR的速率可达1.0μg/mL/min.降解过程中出现了MC降解产物线性化MC-LR(m/z1011.55255,C49H76N10O13),其抑制蛋白磷酸酶2A活性的能力弱于MC-LR.该研究首次表明了该酶对MC的降解速率受不同MC-LR浓度、pH值和蛋白质浓度的影响,并且能在碱性条件下降解MC-LR.耐碱microcystinase对MC-LR具有一定的解毒作用,因此对MC污染水体具有良好的生物修复潜力.

摘要： 由蓝藻产生的微囊藻毒素-LR(MC-LR)是毒性最大且分布最广的MC异构体.生物降解是目前去除MC-LR具有成本低廉且安全高效等特点的方法之一.本研究旨在从一株新型土著细菌Sphingopyxis sp.YF1中获得一种重要的MC降解酶microcystinase,探讨该酶对MC的降解特性及机制.结果显示,microcystinase的分子量约为40kda,在20μg/mL MC-LR、pH7和400μg/mL microcysti-nase的最适条件下,microcystinase去除MC-LR的速率可达1.0μg/mL/min.降解过程中出现了MC降解产物线性化MC-LR(m/z1011.55255,C49H76N10O13),其抑制蛋白磷酸酶2A活性的能力弱于MC-LR.该研究首次表明了该酶对MC的降解速率受不同MC-LR浓度、pH值和蛋白质浓度的影响,并且能在碱性条件下降解MC-LR.耐碱microcystinase对MC-LR具有一定的解毒作用,因此对MC污染水体具有良好的生物修复潜力.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 目的：研究选用人胃腺癌细胞系SGC-7901暴露不同浓度的微囊藻毒素-LR,探讨PI3K/AKT和MAPK信号通路在其中的中介效应. 方法：选取人胃腺癌细胞系SGC-7901,采用不同浓度(1nm/L,10nm/L,100nm/L,1um/L和10um/L)的MC-LR对细胞进行24h染毒处理.运用transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪进行细胞凋亡分析.采用Western Blot检测蛋白表达水平变化.采用bootstrap法进行中介效应分析. 结果：transwell实验结果显示,MC-LR可以增强肿瘤细胞的侵袭迁移能力,且呈现出一定的剂量反应关系(p＜0.05).流式细胞术检测发现MC-LR可以促进细胞的凋亡(p＜0.05).简单中介效应分析结果显示,p-JNK蛋白在MC-LR促进细胞凋亡中的中介效应值为0.5465(0.3560,0.7369),属于部分中介效应;p-AKT蛋白在MC-LR增强细胞侵袭迁移能力中的中介效应值分别为3.3205(2.0800,4.5554)、2.4510(1.4130,3.6625),属于完全中介效应.(p值均＜0.05).多重中介效应分析结果显示,在对细胞凋亡影响中,p-JNK和p-AKT蛋白起到中介作用;在对细胞侵袭迁移能力影响中,p-JNK和p-ERK蛋白起到中介作用. 结论：MC-LR暴露可以增强SGC-7901细胞的侵袭迁移能力,影响细胞凋亡.PI3K/AKT和MAPK信号通路在MC-LR对人胃腺癌细胞株SGC-7901的生物学影响中发挥了中介作用.

摘要： 本发明公开了水体中微囊藻毒素MC‑LR浓度的反演方法，包括：以水样中铜绿微囊藻胞外有机物归一化的特征荧光峰强度作为自变量，水样中归一化的微囊藻毒素MC‑LR浓度为因变量构建一元线性反演方程，其中，特征荧光峰强度和微囊藻毒素MC‑LR浓度均以水样中叶绿素a浓度进行归一化处理；取待检测的水样，测量水样中铜绿微囊藻胞外有机物的三维激发发射矩阵荧光光谱，获得铜绿微囊藻胞外有机物的特征荧光峰强度，然后代入一元线性反演方程中，获得微囊藻毒素MC‑LR的浓度。本方法无需样品前处理，可实现微囊藻毒素MC‑LR浓度的快速在线监测，以铜绿微囊藻胞外有机物特征荧光峰强度作为构建方程的变量，为反演方法提供了新的思路。

摘要： 本发明公开了一种基于AuNPs的比率型比色核酸适配体传感器检测微囊藻毒素MC‑LR的方法，属于微囊藻毒素检测领域。通过单链适配体的碱基与AuNPs表面的负电荷发生静电作用而直接附着在AuNPs的表面，形成AuNPs/适配体，当MC‑LR存在时，适配体与MC‑LR特异性结合而失去对AuNPs的保护作用，AuNPs进行聚集生长，利用增敏剂NH3OH·HCl和HAuCl4对AuNPs的还原作用，诱导AuNPs的颜色变化，实现MC‑LR的高灵敏检测。本发明方法操作简单、用时短、灵敏方便，不需要依赖大型的设备仪器，对检测环境和时间要求不严格，能够特异性检测MC‑LR，不受其他毒素和离子的干扰。

摘要： 本发明涉及一种铜绿微囊藻生长周期内微囊藻毒素MC‑LR快速定量方法，采用高效液相色谱仪测定刚接种后的铜绿微囊藻生长周期96h内MC‑LR浓度，同时分别在显微镜下利用血球计数板计算藻细胞数量，用紫外分光光度计对铜绿微囊藻进行680nm吸光度测定，分别建立藻毒素，吸光度及藻细胞数的正比例线性关系；在随后的藻毒素毒理实验中，通过测定生长周期96h内铜绿微囊藻的吸光度或藻细胞数量，便可定量得出同时期藻毒素MC‑LR浓度；本发明同现有技术相比，具有快速、低成本、样品损耗小和无毒害等优点，能够解决传统的铜绿微囊藻藻毒素MC‑LR定量方法中存在的效率低、成本高、样品损耗多和操作人员安全性等技术问题。

摘要： 一种藻细胞内微囊藻毒素MC‑LR提取方法，首先通过冷冻离心得到藻细胞，并用超纯水清洗；之后加提取液震荡后转入刻度试管中并用提取液清洗离心管3次；然后沸水浴25min提取MC‑LR，若时间水浴时间达到25min后提取液未挥发完全可适当延长时间，但总提取时间不能超过30min；提取完成后冷却至室温，加入50％甲醇振荡溶解，经0.22μm有机相滤头过滤后经高效液相色谱装置测定；本发明能够以较少简单的设备通过较少的实验步骤得到较高的细胞内微囊藻毒MC‑LR提取效率，是一种简单易行的细胞内微囊藻毒素MC‑LR的提取方法。

摘要： 本发明提供一种用于检测样品溶液中的微囊藻毒素LR的方法，所述方法包括以下步骤：将能够特异性结合微囊藻毒素LR的核酸适配体固定在微悬臂梁阵列上；使固定有所述核酸适配体的微悬臂梁阵列与样品溶液接触；检测固定有所述核酸适配体的微悬臂梁阵列在与所述样品溶液接触后产生的弯曲变形。本发明还提供用于检测样品溶液中的微囊藻毒素LR的微悬臂梁阵列和系统。

摘要： 本发明属于生物传感器及环境监测领域，公开了用于检测微囊藻毒素‑LR的试纸检测方法。该试纸检测方法包括：构建磁珠‑DNA探针；将磁珠‑DNA探针与待检测水样混合；磁分离Blocker链；构建CRISPR‑Cas12a系统；采用试纸检测。当MC‑LR存在时，磁珠‑DNA探针上的DNA双链Probe中的Blocker链与MC‑LR竞争结合Aptamer，进而释放Blocker链，释放的Blocker链与Cas12a‑crRNA结合，可激活CRISPR‑Cas12a系统的核酸酶活性，从而非特异性切断信号链Reporter链，断裂的Reporter链可让试纸的T线显色。该试纸检测方法对MC‑LR具有高特异性和灵敏性，并且成本低廉，可用于真实环境水样的检测。

摘要： 本发明公开了一种基于AuNPs的比率型比色核酸适配体传感器检测微囊藻毒素MC‑LR的方法，属于微囊藻毒素检测领域。通过单链适配体的碱基与AuNPs表面的负电荷发生静电作用而直接附着在AuNPs的表面，形成AuNPs/适配体，当MC‑LR存在时，适配体与MC‑LR特异性结合而失去对AuNPs的保护作用，AuNPs进行聚集生长，利用增敏剂NH3OH·HCl和HAuCl4对AuNPs的还原作用，诱导AuNPs的颜色变化，实现MC‑LR的高灵敏检测。本发明方法操作简单、用时短、灵敏方便，不需要依赖大型的设备仪器，对检测环境和时间要求不严格，能够特异性检测MC‑LR，不受其他毒素和离子的干扰。

摘要： 本发明涉及一种SERS‑FET双模生物传感器及其在检测微囊藻毒素‑LR中的应用。本发明通过在石墨烯表面自组装AuNPs，开发了一种新颖、简单、无标记的SERS‑FET双模传感器，以实现对MC‑LR的高灵敏度和特异性检测。基于SERS传感模式，通过MC‑LR适配体与MC‑LR的具体结合，得到了基于SERS传感模式的MC‑LR的拉曼指纹光谱，说明SERS传感器可以用于MC‑LR的定性检测。采用FET传感模式，G‑FET生物传感器在PBS和人血清中的检测限非常低，提高了灵敏度，实现了对MC‑LR的定量检测。此外，通过分析真实样品中的MC‑LR，验证了G‑FET传感器的可行性。因此，SERS‑FET的结合为MC‑LR检测提供了更多的选择，促进了水环境的安全监测。

摘要： 本发明涉及一种用于检测微囊藻毒素LR的电致发光传感器的制备方法。以原位生长在氟掺杂的二氧化锡导电玻璃上的二氧化钛‑氧化亚铜复合阵列同时作为传感基底共反应促进剂，以具有良好生物相容性的金纳米团簇和新型自增强电致发光体锰金属有机框架组成的复合物为二抗标记物构建了夹心型电致发光传感器，该实现了对检测微囊藻毒素LR的灵敏检测，其检测范围为50 fg/mL~0.10µg/mL，检测限为27 fg/mL。

摘要： 本发明涉及一种用于检测微囊藻毒素LR的光电化学传感器的制备方法，并将其应用于湖水中微囊藻毒素LR的检测。本发明采用Ti3C2Tx负载的TiO2纳米阵列作为光敏基底材料，TiO2性能稳定，价格低廉，而Ti3C2Tx具有类似于金属的性质，具有优异的导电性与较强的表面等离子体共振，能够有效改善TiO2的电子空穴复合并提升其可见光响应。本发明所采用的材料复合方案保留了TiO2纳米阵列的微观结构，使其能够作为良好的传感载体保证信号输出的稳定性，通过离子束溅射引入金纳米离子，为适配体的固定提供了更多活性位点，而微囊藻毒素LR更是作为一种天然的电子供体实现了由自身浓度到可视化光电流信号的传感转换。