植物单基因或多基因CRISPR激活技术的载体及构建方法、应用

摘要

本发明公开了植物单基因或多基因CRISPR激活技术的载体及构建方法、应用，所述载体为能表达sgRNA的TRV2载体；TRV2载体内包含表达sgRNA2.0的模块proPeBV‑BsaI‑BsaI‑sgRNA2.0，序列如SEQ ID NO.9所示；其中，两个BsaI位点为sgRNA插入位点，采用序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示的引物扩增SEQ ID NO.9序列，并插入到TRV2载体多克隆位点，获得表达sgRNA2.0模块的TRV2‑SG2.0。本发明所述载体只需完成一次番茄遗传转化，获得SlAct3.0line植株后，仅需针对不同的靶标基因构建含有靶向其启动子区sgRNA的TRV2载体，并侵染SlAct3.0line植株，在3周内即可快速高效的获得不同靶基因的过表达植物材料，而通过传统的遗传转化获得基因过表达植株则需要将近1年的时间，因此该方法更加快捷高效，省时省力，极大缩短了试验周期。