一种用于嘌呤类药物代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法和应用

摘要

本发明公开了一种用于嘌呤类药物代谢标志物的检测试剂盒及其检测方法和应用，其中，所述嘌呤类药物代谢标志物为TPMT*3C和NUDT15*3两个基因的多态性，所述试剂盒针对TPMT*3C和NUDT15*3两个基因的多态性设计扩增引物和测序引物，所述试剂盒包括如下组分：TPMT*3C扩增引物、NUDT15*3扩增引物、TPMT*3C测序引物、NUDT15*3测序引物和阳性对照。本发明通过重组酶聚合酶扩增(RPA)一管扩增TPMT*3C、NUDT15*3，通过链霉亲和素捕获目标单链DNA；产物漂洗后加入TPMT*3C测序引物与测序原料进行焦磷酸测序，最后一个碱基加入ddATP终止该测序反应；再加入NUDT15*3测序引物和相应的dNTP进行测序，一次处理先后进行两个位点的测序，减少了操作的时间和提高了测序的通量。