摘要：目的：人参皂苷单体Rb3(Ginsenoside Rb3,G-Rb3)是西洋参叶20S-原人参二醇皂苷(PQDS)的主要单体皂苷,约占40％。本室前期研究表明,PQDS具有保护心肌梗死、心肌缺血再灌注性损伤及抑制心室重构等作用,并发现G-Rb3能对抗由异丙肾上腺素引起的心肌缺血性损伤及AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖,提示其可能是PQDS保护心脏的有效成分。为开发利用此单体皂苷,本文在整体实验的基础上进一步研究G-Rb3对血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大的影响及机制。方法：原代培养乳鼠心肌细胞,加入G—Rb30、12.5、25、50、100、200、400、800、1000μg·mL-1,作用48h,观察不同浓度G-Rb3对正常心肌细胞存活率的影响。原代培养乳鼠心肌细胞,将细胞分为正常对照组、肥大模型组、G-Rb3 50μg·mL-1、100μg·mL-1、200μg·mL-1组。Ang Ⅱ 1×10-7mol/L,诱导心肌细胞肥大,同时加入药物,培养48小时后,倒置相差显微镜下记录心肌细胞表面积,然后收集细胞,BCA蛋白定量试剂盒测定各组心肌细胞总蛋白质含量;荧光分光光度计测定细胞内钙离子含量;Western Blot观察ANP、β-MHC、CaN,p-ERK1/2,ERK1/2,p-PKC,PKC蛋白表达情况。结果：①G—Rb3 800、1000μg·mL-1抑制正常心肌细胞的存活率,差异有统计学意义,其它剂量组对正常心肌细胞的存活率无影响;②与正常对照组相比,肥大模型组表面积明显增加,差异有统计学意义。与肥大模型组相比,G—Rbs 100μg·mL-1,200μg·mL-1组均能明显减小细胞表面积,差异有统计学意义;③与正常对照组相比,肥大模型组的细胞总蛋白含量明显增加,差异有统计学意义。与肥大模型组相比,G-Rb3100μg·mL-1、200μg·mL-1组均能明显降低总蛋白含量,差异有统计学意义;④与正常对照组相比,肥大模型组的细胞内钙离子含量明显加,差异有统计学意义。与肥大模型组相比,G-Rb3 100μg·mL-1、200μg·mL-1组均能明显降低钙离子含量,差异有统计学意义。⑤与正常对照组相比,肥大模型组ANP、β—MHC、CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ蛋白表达明显增强。与肥大模型组相比,G-Rb3 100μg·mL-1、200μg·mL-1组ANP、β-MHC、CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ蛋白表达减弱。结论G—Rb3能缩小心肌细胞表面积,降低心肌细胞总蛋白质含量,减少心肌细胞肥大标志物ANP、β-MHC蛋白的表达,减少CaN,p-ERK1/2,p-PKCδ信号转导通路蛋白表达。提示G-Rb3抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大可能与抑制CaN,ERK1/2,PKC等信号转导通路有关。上述结果进一步确证G-Rb3是PQDS的主要有效成分,有可能开发成防治心肌梗死后心室重构的创新药物。
