食源性致病菌的核酸可视微阵列检测技术

摘要

建立了一种快速检测3种食源性致病菌的核酸可视微阵列.分别设计与沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、志贺氏菌ipaH基因两端互补的基片探针和检测探针,设计3种基因的特异靶序列,特异靶序列或基因组DNA一端与固定在玻片上的氨基化基片探针杂交,另一端与巯基化检测探针连接形成复合体.使胶体金与检测探针结合,通过银染放大信号,检测3种食源性致病菌DNA.结果表明:通过对检测探针分别与基因组DNA、PCR产物及特异靶序列的杂交银染结果比较,3种结果都显示阳性,表明该方法可直接利用基因组DNA实现对食源性微生物的快速、高效检测,对3种食源性致病菌DNA的检测下限为1 pmol/L,在1 mmol/L～1 pmol/L浓度范围内得到肉眼可见的清晰结果.探针与基因组DNA的杂交实验结果表明,微阵列对3种食源性微生物的检测具有较好的特异性.说明该技术可快速、简便检测食源性微生物,市场前景广阔.