银染

摘要： 为探究西藏纳木错湖唯一经济鱼类纳木错裸鲤Gymnocypris namensis的染色体组构成,用3尾纳木错裸鲤(体质量为276.1~682.5 g)的肾脏进行染色体标本制备,采用吉姆萨(Giemsa)、Ag-NORs和CMA_(3)/DAPI双重荧光染色等方法对其染色体数目、核型、带型和倍性进行分析。结果表明:纳木错裸鲤染色体数目为4n=92,核型公式为40m+20sm+32t,NF=152,且不同个体染色体数目相同;纳木错裸鲤肾细胞染色体间期核中,呈现出银染点数为4个,有丝分裂中期分裂相银染点数为4个,均位于亚中部着丝粒染色体短臂的端部区域(SM2);纳木错裸鲤染色体中期分裂相中CMA_(3)阳性位点为4个,均位于SM2区域。研究表明,纳木错裸鲤不同个体间染色体数目及核型一致,是含有4套染色体组的遗传四倍体,本研究结果为纳木错裸鲤染色体组成研究提供了重要的遗传学证据。

摘要： 目的 阐明网状纤维染色中银氨离子[Ag(NH3)2+]在蒸馏水中的解离规律,提高网状纤维染色的稳定性及一致性.方法 收集江门市中心医院病理科10例肝脏手术切除石蜡标本,采用改良Gordon-Sweets法进行染色,银氨液反应后置于蒸馏水中浸洗不同的时间以获得最佳的解离点,并在中山大学肿瘤防治中心146例肝癌病例中进行验证.结果 网状纤维染色中银氨液完全反应后在蒸馏水中浸洗2min时网状纤维染色强,定位准确,且背景干净,信噪比最佳,优片率达98.6％(144/146);2min后结合Ag(NH3)2+开始逐步解离,15min后基本完全解离,镜下网状纤维变成紫红色,不能满足病理诊断.结论 网状纤维染色中结合的Ag(NH3)2+在蒸馏水中浸洗2min后呈逐步解离,建议蒸馏水浸洗时间控制在1～2min,可获最佳效果,满足病理诊断.

摘要： 建立了一种快速检测3种食源性致病菌的核酸可视微阵列.分别设计与沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、志贺氏菌ipaH基因两端互补的基片探针和检测探针,设计3种基因的特异靶序列,特异靶序列或基因组DNA一端与固定在玻片上的氨基化基片探针杂交,另一端与巯基化检测探针连接形成复合体.使胶体金与检测探针结合,通过银染放大信号,检测3种食源性致病菌DNA.结果表明:通过对检测探针分别与基因组DNA、PCR产物及特异靶序列的杂交银染结果比较,3种结果都显示阳性,表明该方法可直接利用基因组DNA实现对食源性微生物的快速、高效检测,对3种食源性致病菌DNA的检测下限为1 pmol/L,在1 mmol/L～1 pmol/L浓度范围内得到肉眼可见的清晰结果.探针与基因组DNA的杂交实验结果表明,微阵列对3种食源性微生物的检测具有较好的特异性.说明该技术可快速、简便检测食源性微生物,市场前景广阔.

摘要： 本研究以12份棉花品种为材料,用三对多态性丰富的SSR引物对变性和非变性PAGE检测法进行比较分析.结果表明,两种检测方法鉴定单株个体基因型的类型一致;变性PAGE检测法检测结果清晰,但操作过程繁琐;非变性PAGE检测法操作相对简单、检测通量高,更适用于材料的高通量检测分析.%Three SSR primer pairs with high polymorphism and 12 cotton varieties were used to comparatively analyze the denatured and non-denatured PAGE detection methods.The results indicated that the type of individual genotype which was identified by the two detection methods was consistent.The testing results of denatured PAGE were more clear,but its operation process was complex.The operation process of non-denatured PAGE was simple and it had high test flux,which was more suitable for high throughput detection analysis.

摘要： 为获得河川沙塘鳢细胞遗传学数据,以河川沙塘鳢的头肾细胞为试验材料,制备染色体标本,利用Giemsa染色和Ag-NORs方法对河川沙塘鳢的染色体核型以及具有转录活性的核仁组织区在染色体上的分布位置和数量进行了研究.结果表明,河川沙塘鳢二倍体染色体数目为44,其染色体组由44条端部着丝粒染色体组成,核型2n=44t,NF=44;Ag-NORs位点位于着丝粒端.本研究结果可为研究河川沙塘鳢的遗传提供基础资料.

摘要： The metaphase chromosome spreading was conducted in gills and fins cells of sailfin molly Poecilia latip-inna by colchicine-low concentration-hot film drops, and Ag-NORs were analyzed to obtain cytogenetic data of sailfin molly. The results showed that the karyotype of sailfin molly composed of 2n=46t, NF=46. Ag-NORs were found on the end of chromosome No. 2 and chromosome No. 9, and the Ag-NORs polymorphisms were individually specific, while no sex chromosome was observed in this fish. The findings will provide reference to genetic pattern of sailfin molly.%为获得玛丽鱼Poecilia latipinna细胞遗传学数据,以玛丽鱼的鳃丝和鳍条为试验材料,采用秋水仙素浸泡、低渗处理和热滴片法制备染色体标本,分析其染色体的核型和银染( Ag-NORs)。结果表明：玛丽鱼具有23对染色体,核型2n=46t, NF=46； Ag-NORs出现在t2和t9的染色体末端,其数目具有多态性,未发现性染色体。本研究结果可为研究玛丽鱼的遗传方式提供基础资料。

摘要： 为获得玛丽鱼Poecilia latipinna细胞遗传学数据，以玛丽鱼的鳃丝和鳍条为试验材料，采用秋水仙素浸泡、低渗处理和热滴片法制备染色体标本，分析其染色体的核型和银染（Ag-NORs）。结果表明：玛丽鱼具有23对染色体，核型2n=46t，NF=46；Ag-NORs出现在t2和t9的染色体末端，其数目具有多态性，未发现性染色体。本研究结果可为研究玛丽鱼的遗传方式提供基础资料。

摘要： 为研究斑石鲷雌、雄鱼染色体的形态与结构,本文采用植物血球凝集素(PHA)及秋水仙碱体内注射法,取头肾细胞采用冷滴片结合空气干燥的方法获取了斑石鲷雌、雄鱼染色体的中期分裂相,分别对其进行了常规的吉姆萨和硝酸银染色并进行核型和带型分析.结果显示:(1)雄性斑石鲷核型为2n=47、1m+2sm+44t、NF=50,雌性斑石鲷核型为2n=48、2sm+46t、NF=50.(2)斑石鲷雌、雄鱼染色体相对长度分别为(2.30±0.37)—(6.87±0.42)及(2.28±0.30)—(10.33±0.86),雄性斑石鲷具有一条体型巨大的异形中部着丝粒染色体,其相对长度达到其它染色体的2-5倍.(3)染色体经银染后,发现含有2个Ag-NORs位点的分裂相最多,位点位于一对亚中部着丝粒染色体短臂末端,呈短棒状,且具有活性异形现象.(4)本研究中雄性斑石鲷具有一条异形性染色体,可能是性染色体Y,我们推测其染色体的性别决定类型可能为X1X1X2X2/X1X2Y型.本研究为鲈形目鱼类的细胞遗传学研究提供了基础资料,并将为进一步开展斑石鲷遗传育种等研究奠定基础.

摘要： 试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5`端修饰生物素，另一条探针3`端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合，形成“生物素化探针．靶核酸一纳米金探针”复合物，该复合物通过生物素-亲和素系统，固定在固相载体上，最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观察法、分光光度法分析银染灰度，从而间接测定靶核酸的量。初步检测PPRV核酸最低浓度达10 fhlol／L，所需时间约为1.5 h。该方法灵敏度高，操作简单，为临床检测小反刍兽疫病毒核酸提供实验数据和技术支持。

摘要： 本发明公开了一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，该方法包括对经电泳分离蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶依序进行固定处理、敏化处理、水洗处理、银染处理、显色处理、终止处理和水洗处理后，实现对蛋白质的染色处理，其中，敏化处理过程中，还加入有聚乙烯吡咯烷酮、2‑氨基‑2‑甲基‑丙醇和吐温的混合液，本方案具体在敏化处理过程中加入浓度均为0.5％的聚乙烯吡咯烷酮PVP(分子量58000D)、AMP(2氨基‑2甲基‑丙醇)和吐温‑80进行同步处理，提高聚丙烯酰胺凝胶中蛋白条带的显色亮度且操作简单便利；在银染过程中，加入浓度为0.5％的二甲苯降低银染过程中的背景，使得胶块更白，提高目的片段的亮度和对比度，更方便检测仪器的扫描定量分析。

摘要： 本发明涉及一种检测聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染试剂盒，该试剂盒包括：试剂A：该试剂为水溶液，且每一升该水溶液中具有冰醋酸3～5mL、硝酸银1～3g和乙醇50～100mL；试剂B：该试剂为水溶液，且每一升该水溶液中具有氯化钠0.5～1g、亚硫酸钠0.5～2.5g、碳酰肼0.1～0.3g、碳酸钠2～10g和葡萄糖5～10g；试剂C：该试剂为水溶液，且每一升该水溶液中具有冰醋酸3～5mL。本试剂盒不仅摈弃了危害人体健康的甲醛，而且具有检测的灵敏度高的优点。

摘要： 本发明公开了一种高尔基银染神经组织的冰冻切片方法，包括以下步骤：(1)配制高尔基银染溶液；(2)将待染色的神经组织浸泡在步骤(1)所述高尔基银染溶液中；(3)将浸泡好的神经组织置于含甘油10％～20％V/V、含蔗糖15％～20％W/V的甘油‑蔗糖混合溶液中进行脱水；(4)利用冰冻切片机将脱水后的神经组织进行切片。该冰冻切片方法采用含甘油10％～20％V/V、含蔗糖15％～20％W/V的甘油‑蔗糖混合溶液对银染神经组织进行脱水处理，降低了神经组织的硬度和脆性，增强了其韧性，所制得的神经组织切片质量好，切片完整，有效减少了切片破碎和粘刀的情况，并且成本低，不影响组织显影。

摘要： 本发明公开了基于金标银染信号放大技术的食源性致病菌免疫传感器的制备方法及其应用，特点是包括载玻片的硅烷化步骤；将氮化碳材料羧基化后与胶体金溶液搅拌混合得到多功能化氮化碳溶液的步骤；将多功能化氮化碳溶液结合食源性致病菌一抗得到食源性致病菌一抗探针的步骤；在硅烷化载玻片上依次滴上偶联试剂，食源性致病菌二抗、食源性致病菌抗原和食源性致病菌一抗探针，即得到基于金标银染信号放大技术的食源性致病菌免疫传感器，通过添加银染试剂进行定量检测分析，优点是特异性好、灵敏度高、结果准确可靠、成本低、简单快速。

摘要： 本发明公开了一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，该方法包括对经电泳分离蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶依序进行固定处理、敏化处理、水洗处理、银染处理、显色处理、终止处理和水洗处理后，实现对蛋白质的染色处理，其中，敏化处理过程中，还加入有聚乙烯吡咯烷酮、2‑氨基‑2‑甲基‑丙醇和吐温的混合液，本方案具体在敏化处理过程中加入浓度均为0.5％的聚乙烯吡咯烷酮PVP(分子量58000D)、AMP(2氨基‑2甲基‑丙醇)和吐温‑80进行同步处理，提高聚丙烯酰胺凝胶中蛋白条带的显色亮度且操作简单便利；在银染过程中，加入浓度为0.5％的二甲苯降低银染过程中的背景，使得胶块更白，提高目的片段的亮度和对比度，更方便检测仪器的扫描定量分析。

摘要： 本发明公开了一种育种改进的玉米SSR标记快速银染检测方法。涉及玉米育种技术领域。包括玉米种子；玉米种子为28个不同育种单位提供。本发明通过快速银染法将固定和染色两步合二为一，染色后不经洗脱直接显影，显影较快，一般不超过2min即可获得清晰的带型，整个过程不超过10min，且染色背景随着时间的延长有一定程度的加深，长时间的显影不会影响读取的结果。

摘要： 本发明公开了一种基于银染增强的纳米金技术检测核酸的方法。首先通过设计指示探针RP和捕获探针CP分别与目标物DNA‑7a两端互补，磁珠标记捕获探针形成MB‑CP结构，金纳米标记识别探针形成Au‑RP结构。在目标物核酸的存在情况下，磁珠上修饰的捕获探针以及金纳米修饰的识别探针分别与目标物的两端完全互补，形成“三明治”复合物结构，利用金纳米良好的催化作用，用银染增强的方式实现信号的放大，经磁性分离，硝酸消解沉积在金纳米上面的银后，再通过差分脉冲溶出伏安法检测其信号，从而定量检测目标物。该方法选择性好、灵敏度高、仪器简单，在遗传疾病的临床诊断中有着重大的实际意义和应用价值。

摘要： 本实用新型涉及银染技术领域，且公开了一种对聚丙烯酰胺凝胶进行银染用的便捷漂洗盒，包括盒体，所述盒体上表面通过合页转动连接有顶盖，所述盒体内部设有沥液板，所述沥液板左右两侧均固定有侧板，两个所述侧板之间位于所述沥液板上方固定有连杆，所述沥液板内部贯穿开设有若干沥液孔，本实用新型通过设置盒体、顶盖、沥液板、沥液孔、侧板、连杆，装置由环保耐腐蚀且耐摔的塑料制作而成，漂洗盒呈白色，既能适度避光，又能及时快捷的区分差异的银染条带，沥液板和盒体内部均经光滑处理，以防撕裂凝胶。通过使用沥液板，可以轻松的取出凝胶，减少凝胶污染可能，方便银染实验顺利进行。

摘要： 本实用新型公开了一种简易银染染色盒，包括盒体和盒盖，所述盒体包括上盒和底盒，所述上盒下端与底盒上端滑动连接，所述上盒后侧板上端铰接有盒盖，所述上盒下端面左侧设有进液口，所述上盒左侧面下端设有排液塞口，所述排液塞口与上盒连通，所述底盒左侧面下端设有排液口，所述排液口与底盒连通。本实用新型的优点在于：换液方便、可有效减少污染。

摘要： 本实用新型公开了一种聚丙烯酰胺凝胶银染装置，包括染缸单元、银染液循环利用单元、显色液循环利用单元和漂洗单元，染缸单元包括带盖的外染缸和无盖的内染缸；所述内染缸设置在外染缸中，内染缸的底部设置有过滤孔；所述外染缸的侧壁上设置有染色液进口、漂洗液进口和显色液进口，外染缸的底部上设置有染色液出口、漂洗液出口和显色液出口。本实用新型聚丙烯酰胺凝胶银染装置，能方便的将染色液、漂洗液和显色液加入染缸，并能彻底的排出染色液、漂洗液和显色液，排液是不用倾斜内染缸，实验成功率高；并且染色液和显色液能回收利用，降低了实验成本，并能避免染色液和显色液排放污染。