PHB1表达下调介导HMGB1促肺动脉内皮细胞损伤

摘要

目的:高迁移率族蛋白B1(high-mobility group protein 1,HMGB1)在肺动脉高压患者血浆中水平显著升高,但其生物学意义尚不明确.抗增殖蛋白1(prohibitin 1,PHB1)是维持血管细胞稳态的重要蛋白质.本研究旨在探讨HMGB1对肺动脉内皮细胞的影响以及PHB在其中的作用和机制.方法:体内实验:构建野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压大鼠模型,采用右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)以及右心室与左心室加室间隔重量和之比评判造模是否成功,ELISA检测动物血浆中HMGB1水平,蛋白质印迹法检测动物肺组织中PHB1水平,CD31免疫荧光检测肺血管内皮的完整性.体外实验:以HMGB1孵育肺动脉内皮细胞观察HMGB1对PAEC损伤的影响,分别过表达和沉默PHB1,通过检测活性氧水平、细胞色素c(cytochrome c,cyto-c)含量和caspase-3的活化研究PHB1在其中的作用.结果:与对照组相比,肺动脉高压大鼠血浆中HMGB1水平显著升高(P<0.05),肺组织中PHB1表达下降同时伴有肺动脉内皮细胞减少(P<0.05);HMGB1干预可损伤肺动脉内皮细胞,并导致PHB1表达降低(P<0.05);而过表达PHB1能减轻HMGB1诱导的肺动脉内皮细胞损伤和氧化应激(P<0.05).PHB1通过抑制氧化应激减少HMGB1诱导的cyto-c的表达以及caspase-3的剪切(P<0.05).结论:PHB1表达下调介导了HMGB1诱导的肺动脉内皮细胞损伤,其机制与诱导氧化应激、增加cyto-c释放以及促进caspase-3剪切有关.